BiochemNet – Vytvoření sítě pro podporu spolupráce biomedicínských pracovišť a zvýšení uplatnitelnosti absolventů biochemických oborů v praxi
Praxe na Farmaceutické fakultě VFU Brno
Mgr. Jan Muselík, Ph.D.
VETERINÁRNÍ A FARMACEUTICKÁ UNIVERZITA BRNO Fakulta veterinárního lékařství Fakulta veterinární hygieny a ekologie Farmaceutická fakulta • Ústav chemických léčiv • Ústav přírodních léčiv • Ústav humánní farmakologie a toxikologie • Ústav technologie léků • Ústav aplikované farmacie
Ověření přípravy vnitřně užívaného léku s úzkým terapeutickým indexem Vedoucí: PharmDr. PharmDr Aleš Franc, Franc Ph.D. Ph D Obecné požadavky • Léčivo z úzkým terapeutickým indexem (NTI) • Kolísání dávky a zdravotní rizika • Požadavkyy pro p reprodukovatelnou p obsahovou stejnoměrnost j • Statistické ověření pro registrační autority (FDA, EMEA) Náplň Ná lň experimentální i tál í práce á • Příprava vysoce homogenní směsi s obsahem NTI léčiva • Příprava pevné lékové formy (tablet) z dané směsi • Hodnocení kritických parametrů výroby směsí a tablet • Ověření výsledků v souladu s požadavky registračních autorit (FDA, EMEA)) • Sepsání závěrečné zprávy
Hodnocení farmakokinetiky léčiva metodou in vitro Vedoucí: Mgr. Jan Muselík, Ph.D. Obecné p požadavky y • Řízené uvolňování léčiv • Farmakokinetika metabolicky aktivních léčiv • Metoda disoluce in vitro • Srovnání „In vivo“ vs. „In vitro“
Náplň p experimentální p práce p • Nalezení optimálních podmínek pro měření disoluce • Disoluce pelet s obsahem sacharidu s řízeným uvolňováním • Hodnocení závislosti mezi složením a uvolňováním • Sepsání závěrečné zprávy
Příprava mukoadhezivních filmů s řízeným uvolňováním léčiva Vedoucí: Doc. PharmDr. David Vetchý, Ph.D. Cíle a důvody experimentální práce • Formulace, vývoj a hodnocení bukálních flexibilních filmů připravených metodou impregnace vstupního materiálu inovativním mukoadhezivním polymerem Výhody bukálních mukoadhezivních filmů • Snadná příprava a vysoká flexibilita designu lékové formy • Na sliznici dutiny ústní setrvávají až po dobu několika hodin bez omezování pacienta • V Vzhledem k nízké enzymatické y aktivitě,, snadné p prostupnosti p a vysokému stupni prokrvení je sliznice dutiny ústní výhodná i pro systémové podání léčiv, která jsou v nižších partiích trávicího traktu g , nejsou j vstřebávána nebo u nichž jje p potřeba zajistit j degradována, rychlý nástup účinku.
Příprava mukoadhezivních filmů s řízeným uvolňováním léčiva
Náplň experimentální práce • Vybrané léčivo začlenit do struktury flexibilního filmu, u něhož by se následně hodnotily fyzikálně-mechanické a mukoadhezivní vlastnosti pomocí moderního texture analyzeru a dalších zařízení Texture analyzer pyknometr
Viskozimetr
Héliový
Možnosti zapracování léčiva v kapalné fázi do pevné lékové formy Vedoucí: PharmDr. Jan Gajdziok, Ph.D. Cíle a důvody experimentální práce • • •
•
Hypolipidemika H li id ik ze skupiny k i statinů t ti ů patří tří kvůli k ůli svéé špatné š t é rozpustnosti t ti ve vodě mezi léčiva s nízkou biologickou dostupností Možností zvýšení jejich vstřebávání do organismu je formulace tzv. li i lid systémů liquisolid é ů Léčivo se rozpustí do podoby roztoku ve vhodném rozpouštědle (propylenglykol, polyethylenglykol, oleje) a následně se ve fluidním zařízení nastříkne na specifický nosič s vysokou sorpční kapacitou Tento nosič ze skupiny magnesium alumino-metasilikátů (Neusilin®) je schopen pojmout víc než 100 % w/w kapaliny při zachování vlastností vhodných pro zpracování do podoby tablety
Možnosti zapracování léčiva v kapalné fázi do pevné lékové formy
Náplň experimentální práce • Optimalizovat proces nástřiku roztoku statinu na vysokosorpční nosič ve fluidním zařízení z hlediska množství a typu použité kapalné fáze •
Testování fyzikálně ý vlastností mechanických směsí (tokové vlastnosti, hustota, optická analýza)
•
PPříprava tablet bl přímým lisováním u nichž bude sledována schopnost při simulaci uvolňovat léčivo p trávicího traktu člověka (zkouška disoluce)
Metoda pro stanovení monosacharidů pomocí h d fil í interakční hydrofilní i t kč í chromatografie h t fi (HILIC) s detektorem ELSD Vedoucí: Doc. RNDr. Jiří Pazourek, Ph.D. Anotace • Aplikace HPLC v módu hydrofilní interakční chromatografie g (HILIC) ( ) • Kolona DIOL (glycidylpropyl), Speciální detektor
Metoda pro stanovení monosacharidů pomocí hydrofilní interakční chromatografie h fi (HILIC) s detektorem d k ELSD
Náplň experimentální práce • Stanovení potravinářských sacharidů v nápojích • Příprava vzorku • Kalibrace standardů • Stanovení ve vzorku
trehalosa laktosa cellobiosa maltosa sacharosa inositol dulcit galaktosa glukosa mannosa fruktosa sorbosa adonit arabinosa xylosa rhamnosa ribosa
manitol
Využití moderních instrumentálních technik ve farmaceutické technologii Vedoucí: PharmDr. Petr Doležel Anotace • Seznámení s procesem výroby pevné lékové formy (tablet) s obsahem těžce rozpustného léčiva • Cílená příprava konkrétní polymorfní formy léčiva • Instrumentální analýza zaměřená na NIR a DSC
Využití moderních instrumentálních technik ve farmaceutické t h l ii technologii
Náplň experimentální práce • Homogenizace • Impregnace léčiva na pomocné látky • Tabletování • Analýza meziproduktů výroby • Analýza produktů výroby
Ověřování stability přírodních látek pomocí HPLC V d í PharmDr. Vedoucí: Ph D Zuzana Z Hanáková H ák á Cíle a důvody experimentální práce • Cílem bude seznámení studenta s HPLC, aby byl schopen samostatně s přístrojem pracovat, připravovat vzorky a vyhodnocovat výsledky • Při testování biologické aktivity se přírodní látky mohou vlivem různých chemikálií a teplot chemicky měnit – zkreslení měřené b l biologické ké aktivity k
O ěř á í stability Ověřování t bilit přírodních ří d í h lát látekk pomocíí HPLC
Náplň experimentální práce • Ověření čistoty a detekce rozkladných produktů pomocí vysokoúčinné k k kapalinové l chromatografie h f (HPLC) • Experiment bude prováděn s látkami izolovanými z rostlin Paulownia tomentosa a Morus alba
Phyllanthus amarus jako potenciální zdroj biologicky aktivních látek Vedoucí: PharmDr. Alice Navrátilová Cíle a důvody experimentální práce • Phyllanthus amarus se běžně používá v tradiční medicíně při problémech žaludku, jater, sleziny a urogenitálního systému. Má ale i celou řadu jiných biologických aktivit (např. antivirové, antibakteriální, protizánětlivé, protinádorové, antidiabetické, nefroprotektivní a diuretické vlastnosti). •
Cílem projektu je podílet se na izolaci obsahových látek z vybraných frakcí, přičemž k separaci látek (frakcí) budou využity metody TLC, preparativní TLC, sloupcové chromatografie a HPLC.
Ph ll h amarus jako Phyllanthus j k potenciální iál í zdroj d j biologicky bi l i k aktivních k i í h látek lá k
Náplň experimentální práce • TLC – výběr vhodné mobilní fáze pro kolonovou chromatografii
•
Kolonová chromatografie – sběr frakcí
•
HPLC – analýzy získaných frakcí/látek DAD1 A, Sig=254,4 Ref=900,100 (AJKA\PHYLETAC120312S 2012-03-12 16-34-30\PHYL12031202.D)
*DAD1, 14.333 (1876 mAU,Apx) Ref=14.186 & 14.666 of PHYL
1 4 .3 2 9
Norm. 1750
m AU 1750
1500
1500 1250
1250 1000
750
750
500
500
250
250
21.0. 84795
9 .3 3 5
1 6 .0 6 8
1000
0
0 0
5
10
15
20
25
30
35
min
200
250
300
350
400
450
500
550
nm
HPLC analýza methanolických extraktů vybraných b ý h druhů d hů rodu d Agrimonia A i i a Plectranthus Pl t th a jejich antityrosinasová aktivita Vedoucí: PharmDr. Renata Kubínová, Ph.D Cíle a důvody y experimentální p práce p • Výzkum v oblasti biologické aktivity přírodních látek je v současnosti zaměřen na testování modulační aktivity nově i l izolovaných ý h derivátů d i átů na různé ů é enzymy, které kt é se podílejí díl jí na fyziologických pochodech v organismu • Jedním z těchto enzymů je také tyrosinasa, která se podílí na tvorbě hnědých pigmentů v pokožce (melaninů) • Hyperpigmentací je pak doprovázena celá řada onemocnění (melasma stařecké pigmentové skvrny). (melasma, skvrny) Inhibitory tyrosinasy mohou přispět k terapii těchto stavů
HPLC analýza methanolických extraktů vybraných druhů rodu Agrimonia a Plectranthus a jejich antityrosinasová aktivita
Náplň experimentální práce • Příprava p methanolických ý extraktů jjednotlivých ý druhů • HPLC-DAD/MS analýza extraktů • Testování antityrosinasové aktivity jednotlivých extraktů • Výběr nejúčinnějšího extraktu pro další izolace obsahových látek
Metody hodnocení toxicity In vitro V d í PharmDr. Vedoucí: Ph D Peter P Kollár, K llá Ph.D. Ph D Cíle a důvody experimentální práce • Praxe bude zaměřena na hodnocení cytotoxicity nových potenciálních léčiv ze skupiny protinádorových látek a antibiotik Náplň experimentální práce • Stanovení viability buněk - pomocí barvení buněk vitálními barvivy, která pronikají jen do mrtvých buněk.
M t d hodnocení Metody h d í toxicity t i it In I vitro it
Náplň experimentální práce • WST-1 test cytotoxicity y y - čím více buněk,, tím větší aktivita mitochondriálních dehydrogenáz
Děkuji za pozornost
Mgr. Jan Muselík, Ph.D.
e‐mail:
[email protected]
