BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian
Jenis penelitian yang digunakan adalah deskriptif. .
B. Tempat dan Waktu Penelitian
1. Tempat Tempat pengambilan sampel dan pemeriksaan sampel di Laboratorium Patologi Klinik FIKKES Universitas Muhammadiyah Semarang. 2. Waktu Pelaksanaan penelitian dilakukan pada bulan Desember 2007 sampai Juni 2008
C. Populasi dan Sampel
1. Populasi Populasi adalah dari seluruh mahasiswa semester V Prodi DIII Analis Kesehatan FIKKES UNIMUS. 2. Sampel Sampel yang diambil dari darah vena sewaktu pada mahasiswa DIII Analis Kesehatan semester V yang akan diperiksa kadar glukosa darah dengan metode tes strip dan GOD-PAP masing-masing sampel dilakukan 10x pemeriksaan.
18
19
D. Alat dan bahan Alat yang digunakan adalah jarum, spuit, torniquet, kapas, tabung reaksi, centrifuge, photometer 4010. Bahan yang digunakan adalah serum, alkohol, reagen untuk pemeriksaan glukosa darah dengan reagen human nomor katalog 10260 dan dibaca pada photometer 4010.
E. Prosedur penelitian
1. Pengambilan Darah Vena
Lokasi
: vena mediana cubiti.
Prosedur : Pada pengambilan darah vena dilakukan dalam vena cubiti. Caranya yaitu dengan membersihkan tempat yang akan diambil darahnya dengan kapas alkohol, dibiarkan kering kemudian dipasang torniquit pada lengan atas dan tangan dikepalkan. Pembendungan sebaiknya jangan terlalu erat, kemudian kulit di tusuk dengan jarum sampai masuk ke dalam lumen vena. Selanjutnya penghisap ditarik perlahan-lahan sampai jumlah darah yang diinginkan, pembendungan dilepaskan dan kapas diletakkan di atas jarum kemudian jarum dicabut bekas tusukan ditekan dengan kapas, setelah itu jarum dilepaskan dari spuit dan darah dialirkan ke dalam tabung reaksi lewat dinding.
20
2. Pemeriksaan Glukosa Darah
a. Metode : Tes strip b. Prinsip
: Tes strip menggunakan enzim glukosa dan didasarkan pada teknologi biosensor yang spesifik untuk pengukuran glukosa, tes strip mempunyai bagian yang dapat menarik darah utuh dari lokasi pengambilan / tetesan darah ke dalam zona reaksi. Glukosa ossidase dalam zona reaksi kemudian mengoksidasi glukosa di dalam darah. Intensitas arus elektron terukur oleh alat dan terbaca sebagai konsentrasi glukosa di dalam sampel darah.
c. Bahan
: Darah vena dengan EDTA 10 %
d. Alat
: Glukose plus : Touch-in blood glukose test strips
e. Prosedur : . 1. Satu strip yang baru dikeluarkan dari tempatnya. 2. Strip tes dimasukkan ke alat glukosure plus dengan area untuk tetesan darah meghadap ke atas. Alat akan hidup secara otomatis. 3. Layar akan menunjukkan nomor kode dan tanda tetesan darah. 4. Kode yang tertera pada layar dipastikan sesuai dengan kode yang tertera pada tempat strip tes. 5. Darah diteteskan pada zona reaksi strip tes dari arah samping secara perlahan sampai seluruh zona terisi penuh. 6. Hasil akan muncul pada layar dalam waktu 10 detik 7. Hasil yang muncul kemudian dicatat dan tes strip dilepaskan dari alat.
21
3. Pemeriksaan Glukosa Darah
a. Metode
: GOD-PAP (spektrofotometri)
b. Prinsip
: suatu enzim bakteri yang merangsang oksidase glukosa dengan menghasilkan H2O2. Dengan adanya enzim peroksidase oksigen dari peroksid ini dialihkan ke accepto tertentu menghasilkan suatu ikatan berwarna.
c. Reaksi
GOD
: Glukosa + O2 + H2O
Asam glukonik + H2O2
2 H2O2 + 4 – amino phenazone + phenol
quinomine + 4
H2O d. Cara Kerja : Dipipet dalam tabung
Blanko
Standar
Sampel
Serum
-
-
10 ul
Standar
-
10 ul
-
Reagen
1000 ul
1000 ul
1000 ul
Dicampur, inkubasi selama 5 menit pada suhu 37° C. Diukur absorban sampel dan standar, dibaca terhadap reagen blanko dalam waktu kurang dari 60 menit. Dengan panjang gelombang 546 nm, faktor 100 dan program C/ST.
4. Jenis dan Cara Pengumpulan Data
Data yang dikumpulkan adalah data primer yang diperoleh dari hasil pemeriksaan kadar glukosa darah metode test strip dan GOD-PAP.
22
5. Pengolahan dan Analisis Data Analisis data yang digunakan adalah untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan hasil kadar glukosa antara darah vena dengan metode test strip dan GOD-PAP disajikan dalam bentuk tabel dan grafik dan dilakukan analisa statistik dengan uji student t test. 1. Nilai rata-rata (mean) Rumus : M =
∑x N
2. Standar deviasi1
∑ (x
1
Rumus : SD =
− x)
n −1
3. Student t test Rumus : t = [M 1 − M 2 ] =
(SD1 )2 N1
+
4. Koefisien variasi Rumus : KV =
SD.100 x
5. Derajat bebas (db) Rumus : db = n-1
(SD2 )2 N2
23
6. Hipotesa Penelitian
Menolak Ho berarti ada perbedaan hasil pemeriksaan kadar glukosa menggunakan darah vena pada metode tes strip dan GOD-PAP.
7. Definisi Operasional
a. Glukosa Darah adalah salah satu metabolisme karbohidrat dalam darah yang digunakan sebagai sumber tenaga yang diukur kadarnya dengan metode tes strip dan GOD-PAP. b. Metode Tes Strip adalah salah satu dari pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan tes strip yang berisi enzim glukosa oksidase. c. Metode GOD-PAP adalah pemeriksaan kadar gula darah vena dengan reagen human nomor katalog 10260 dan dibaca pada photometer 4010 yang dinilai normalnya 80-110 mg %. d. Darah vena adalah darah yang diperoleh dari pengambilan pada vena mediana cubiti dan diperiksa kadar glukosanya menggunakan anti koagulan EDTA 10 %. e. Perbedaan hasil pemeriksaan kadar glukosa antara metode tes strip dan GODPAP pada darah vena adalah hasil pengukuran dengan uji t test.
