1
BAB I. PENDAHULUAN I.1. Latar Belakang Kanker ovarium adalah salah satu keganasan ginekologis yang paling mematikan dan masih menjadi permasalahan kesehatan di seluruh dunia termasuk Indonesia. Kanker ovarium ditemukan pada alat reproduksi wanita dan menempati urutan kedua paling banyak ditemukan setelah kanker serviks. Dari seluruh keganasan ginekologis pada wanita, ternyata kanker ovarium mempunyai permasalahan yang paling besar dan angka kematiannya hampir separuh dari angka kematian seluruh keganasan ginekologis. Pada tahun 2010, kanker ovarium merupakan kanker yang berada di urutan ke-6 paling banyak diderita dan berada di urutan ke-7 penyebab kematian terbanyak akibat kanker di seluruh dunia (Ahmedin et al., 2010). Pada tahun 2012, prevelansi kanker ovarium menduduki peringkat ke-7 pada wanita di seluruh dunia, dan menjadi penyebab kematian terbesar akibat kanker pada wanita. Sekitar 239.000 kasus baru ditemukan pada tahun 2012. Angka tersebut menunjukkan 4% kasus kanker baru pada wanita dan 2% dari keseluruhan kanker di seluruh dunia. Kanker ini bersifat fatal, dan menjadi penyebab ke-8 kematian terbesar akibat kanker pada wanita di seluruh dunia pada tahun 2012 (Ferlay et al., 2012). Di Indonesia, kanker ovarium juga menjadi salah satu masalah kesehatan yang serius. Berdasarkan data Riskesdas 2013 disebutkan bahwa prevalensi kanker ovarium di Indonesia adalah 1,4 /mil. Insidensi kanker ovarium pada tahun
2
2012 mencapai 10.283 kasus baru dengan tingkat mortalitas 7.075 kasus. Pada tahun 2015 insidensinya meningkat sebanyak 3,6 % menjadi 10.662 kasus baru dan angka kematiannya meningkat sebanyak 4,3% menjadi 7.382 (GLOBOCAN, 2015). Tingkat mortalitas yang tinggi di Indonesia diindikasikan disebabkan oleh banyaknya pasien yang terdiagnosis sudah dalam keadaan stadium lanjut, dan lebih dari 50% pasien dengan tingkat keganasan stadium lanjut akan berakhir pada kematian. Saat ini penyakit kanker ovarium masih menjadi masalah serius dalam kaitannya dengan manajemen klinik. Belum adanya metode deteksi dini yang memuaskan sehingga menjadi sulit dalam mendiagnosis dini. Sekitar 70-80% kanker ovarium diperkirakan baru terdiagnosis pada stadium lanjut dan telah bermetastasis jauh, hal tersebut membuat kanker ovarium menjadi keganasan ginekologis yang mematikan (Liu et al., 2012). Pasien yang didiagnosis pada stadium lanjut (stadium FIGO III dan IV) kurang dari 45% yang memiliki harapan hidup 5 tahun (American Cancer Society, 2011; Nguyen et al., 2013). Kanker ovarium tidak memiliki gejala klinis yang spesifik dan sampai saat ini belum didapatkan pengobatan yang tepat. Oleh karena itu diperlukan penemuan suatu metode baru untuk dapat mendeteksi secara dini kanker ovarium secara sensitif, spesifik, dan non invasive serta metode untuk prediksi yang dapat mengatasi masalah tersebut sehingga dapat meningkatkan keberhasilan deteksi dini dan manajemen klinik terapi kanker ovarium.
3
Microenvironment dari kanker merupakan pengatur utama dalam membentuk progresi dari keganasan, dan pada beberapa kasus faktor genetik dan epigenetik
penting
dalam
mempengaruhi
perkembangan
kanker.
Microenvironment kanker ditandai dengan pH yang rendah, penurunan nutrien, dan hipoksia. Sel kanker mampu survive pada kondisi microenvironment yang buruk (Ruan et al., 2009). Hipoksia adalah penyebab tumor memperoleh karakteristik menjadi agresif dan berpotensi meningkatkan metastasis, penurunan sensitivitas obat, penurunan apoptosis terkait p53 dan peningkatan instabilitas genetik dan laju mutasi (Babar et al., 2011). Hipoksia menyebabkan karakteristik yang secara independent dan secara signifikan berkorelasi dengan penurunan survival pada pasien kanker. Salah satu efektor utama dari hipoksia adalah transcription factor HIF1A yang bertanggung jawab untuk meregulasi survival dan angiogenesis dari jalur selular. Regulasi HIF1A dalam mengendalikan hipoksia ternyata dapat diinduksi oleh mikroRNA (Babar et al., 2011). MikroRNA adalah molekul RNA kecil dengan panjang 19-24 nukleotida dan tidak berfungsi mengkode protein (Wang dan Chen, 2010). MikroRNA mengatur ekspresi gen pada tingkat posttranskripsi, dengan cara menyebabkan degradasi mRNA target atau dengan menekan translasi target gen, dapat pula menurunkan regulasi mRNA target. Semakin banyak bukti bahwa satu mikroRNA tertentu sering mengatur beberapa gen target dan satu gen dapat dipengaruhi oleh berbagai mikroRNA (Jackson et al., 2003). MikroRNA sekarang dianggap sebagai salah satu regulator gen penting untuk perkembangan
4
dan proses karsinogenesis. Hasil penelitian terakhir menunjukkan bahwa terdapat hubungan antara hipoksia, kanker, dan mikroRNA. Sejumlah mikroRNA pada kondisi hipoksia membuat sel kanker mengalami peningkatan kemampuan adaptasi dan survive. Salah satu mikroRNA yang terlibat dalam regulasi kanker pada kondisi hipoksia adalah Hsa-miR-155-5p (Babar et al., 2011). Disregulasi Hsa-miR-155-5p terbukti terjadi pada berbagai sel karsinoma (Du et al., 2011). Hsa-miR-155-5p merupakan salah satu objek studi utama dari berbagai penelitian keganasan, pada kanker ovarium ekspresi Hsa-miR-155-5p dilaporkan mengalami downregulasi (Dahiya et al., 2008; Resnick et al., 2009). Salah satu target gen Hsa-miR-155-5p adalah mRNA HIF1A. HIF1A adalah regulator kunci dari transkripsional respon terhadap kondisi hipoksia. HIF1A didegradasi selama normoksia terutama seluruhnya melalui proteasome dependent setelah dihidroksilasi dari dua residu prolin oleh polyl hidroksilase (PHDs). Selama hipoksia PHD dihambat dan menyebabkan akumulasi HIF1A, dimerisasi dengan HIF1B menyebabkan ekspresi dari target gen HIF. Target gen HIF1A diantaranya erythropoietin, transferrin, endothelin-1, inducible nitric oxide synthetase, heme oxygenase 1, VEGF, insulin-like growth factor-2, insulin-like growth factor binding proteins 2 dan 3, glucose transporter dan beberapa enzim glikolitik (Birner, 2001). Gen-gen tersebut terlibat dalam progresi tumor, survival sel, proliferasi, adhesi, angiogenesis, motilitas, angiogenesis, metastase, metabolisme energi dan pengalihan jalur metabolisme energi menjadi glikolisis (Warburg effect) (Laura et al., 2011; Conde et al., 2012).
5
I.2. Perumusan Masalah Berdasarkan
latar
belakang
yang
telah
disampaikan,
dapat
diidentifikasikan masalah sebagai berikut: 1. Apakah terdapat perbedaan ekspresi Hsa-miR-155-5p pada plasma darah pasien kanker ovarium stadium lanjut dengan stadium awal? 2. Apakah terdapat perbedaan ekspresi mRNA HIF1A pada plasma darah pasien kanker ovarium stadium lanjut dengan stadium awal? 3. Apakah terdapat hubungan antara ekspresi Hsa-miR-155-5p dengan ekspresi mRNA HIF1A pada plasma pasien kanker ovarium stadium lanjut dan stadium awal?
I.3. Tujuan Penelitian Tujuan dari penelitian ini adalah sebagai berikut: 1. Untuk mengetahui perbedaan ekspresi Hsa-miR-155-5p pada plasma darah pasien kanker ovarium stadium lanjut dengan stadium awal. 2. Untuk mengetahui perbedaan ekspresi mRNA HIF1A pada plasma darah pasien kanker ovarium stadium lanjut dengan stadium awal. 3. Untuk mengetahui hubungan antara ekspresi Hsa-miR-155-5p dengan ekspresi mRNA HIF1A pada plasma pasien kanker stadium lanjut dan ovarium stadium awal.
6
I.4. Keaslian Penelitian Terdapat beberapa penelitian sebelumnya tentang ekspresi Hsa-miR-155-5p pada kanker ovarium, yaitu: 1. Penelitian Dahiya et al. (2008) dengan judul MicroRNA expression and identification of putative mikroRNA targets in ovarian cancer. Penelitian ini menggunakan sampel sel line kanker ovarium BG-1, UCI-101, HEY, OVCA420, OVCA432, OVCA433, OVCAR2, OVCAR3, OVCAR5, OV90 dan jaringan primer kanker ovarium dibandingkan dengan sel kontrol HOSE-B. Penelitian ini bertujuan mengetahui ekspresi miR-155 dan target gen miR-155 antara lain: BACH1, ZNF652, RAB11FIP2, ZNF537, BACH1 variant 2, pada sel line kanker ovarium menggunakan metode miRNA microarray 2. Penelitian Resnick et al. (2009) dengan judul The detection of differentially expressed microRNAs from the serum of ovarian cancer patients using a novel real-time PCR platform. Penelitian ini menggunakan sampel serum darah kontrol sehat dan serum darah pasien kanker ovarium epitel. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui profil mikroRNA pada serum darah pasen kanker ovarium epitel dan membandingkannya dengan kontrol sehat. Penelitian ini menggunakan metode real-time PCR platform. 3. Penelitian Qin et al, (2013) dengan judul MicroRNA-155 is a novel suppressor of ovarian cancer-initiating cells that targets CLDN1. Penelitian ini menggunakan sampel sel kanker dari pasien yang terdiagnosa ovarian cancer
7
initiating cell (OCIC). Penelitian ini mengevaluasi ekspresi miR155 dan target gen CLDN1 pada OCIC menggunakan metode luciferase reporter assay dan quantitative real-time PCR. Beberapa penelitian yang telah dipublikasikan tentang kaitan ekspresi HIF1A dengan Hsa-miR-155-5p serta ekspresi HIF1A dengan kanker ovarium, antara lain: 1. Penelitian Birner et al. (2001) dengan judul Expression of hypoksia-inducible factor 1a in epithelial ovarian tumors: its impact on prognosis and on response to chemotherapy. Penelitian ini menggunakan sampel blok parafin dari 102 pasien kanker ovarium epitel, 50 pasien tumor borderline dan 20 pasien tumor jinak.
Penelitian
ini
membandingkan
ekspresi
protein
HIF-1a
dan
mengkorelasiakannya dengan ekspresi protein p53, p21, dan bcl-2, microvessel density (MVD) sebagai faktor prognosis. Penelitian ini menggunakan metode immunohistokimia. 2. Penelitian Daponte et al. (2008) dengan judul Prognostic significance of Hypoxia-Inducible Factor 1 alpha (HIF-1alpha) expression in serous ovarian cancer: an immunohistochemical study. Penelitian ini menggunakan sampel blok parafin dari 100 pasien kanker ovarium, 22 pasien borderline serous adenocarcinoma, 23 pasien dengan stadium I, 55 pasien dengan stadium III dan 20 pasien tumor jinak sebagai kontrol. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
ekspresi
protein
HIF-1a
menggunakan metode immunohistokimia.
pada
masing-masing
kelompok
8
3. Penelitian Babar et al. (2011) dengan judul Inhibition of hypoxia-induced miR155 radiosensitizes hypoxic lung cancer cells. Penelitian ini menggunakan sampel sel line A549, MCF7 dan H460. Sampel dikondisikan hipoksia dengan dibedakan lamanya kodisi hipoksia disetiap kelompok. Penelitian ini bertujuan untuk melihat ekspresi miR-155 menggunakan metode quantitative real-time PCR dan ekspresi protein HIF1A menggunakan metode protein gel blotting. 4. Penelitian Bruning et al. (2011) dengan judul MicroRNA-155 promotes resolution of Hypoxia-Inducible Factor 1α activity during prolonged hypoxia. Penelitian ini menggunakan sel line Caco-2, MEF, HepG2, dan HeLa yang dikondisiskan hipoksia dengan variasi lama waktu hipoksia. Penelitian ini bertujuan untuk melihat ekspresi miR-155 menggunakan metode microarray dan ekpresi mRNA HIF-1α dan HIF-2α menggunakan metode mRNA realtime PCR. Dari beberapa penelitian yang telah disebutkan sebelumnya, belum ada penelitian yang membahas tentang ekspresi Hsa-miR-155-5p dan target gen mRNA HIF1A pada kanker ovarium stadium awal dan stadium lanjut. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbandingan ekspresi Hsa-miR-155-5p dan mRNA HIF1A pada plasma pasien kanker ovarium stadium awal dan stadium lanjut.
9
I.5. Manfaat Penelitian Penelitian ini diharapkan dapat meningkatkan skill peneliti dalam bidang penelitian molekular. Selain itu juga diharapkan dapat digunakan sebagai salah satu referensi dalam pengembangan penelitian mikroRNA pada umumnya, serta sebagai referensi terkait perbedaan ekspresi Hsa-miR-155-5p dan mRNA HIF1A plasma darah pasien kanker ovarium stadium awal dan stadium lanjut.
84
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN V.1. Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa: 1. Ekspresi Hsa-miR-155-5p lebih rendah 2,18 kali pada plasma darah pasien kanker ovarium stadium lanjut dibandingkan dengan stadium awal. 2. Ekspresi mRNA HIF1A lebih tinggi 2,46 kali pada plasma darah pasien kanker ovarium stadium lanjut dibandingkan dengan stadium awal. 3. Tidak terdapat hubungan antara ekpresi relatif Hsa-miR-155-5p dan mRNA HIF1A. V.2. Saran Saran yang dapat diberikan dari penelitian ini yaitu: 1. Dilakukan analisis kuantifikasi ekspressi protein HIF1A pada jaringan kanker ovarium stadium awal dan stadium lanjut menggunakan metode western blot atau immunohistochemistry. 2. Dilakukan penelitian untuk mengetahui perbandingan antara ekspresi miR155 dan mRNA HIF1A pada plasma dengan ekspressi miR-155 dan mRNA HIF1A pada jaringan kanker ovarium stadium awal dan stadium lanjut. 3. Dilakukan penelitian untuk mengetahui hubungan antara ekspressi miR155 dan mRNA HIF1A plasma dengan ekspressi protein HIF1A pada jaringan kanker ovarium.
85
4. Dilakukan penelitian cohort terhadap pasien untuk mengetahui prognosis dan survival rate pasien serta untuk mengetahui apakah miR-155 bisa digunakan sebagai biomarker prognosis kanker ovarium.
86
DAFTAR PUSTAKA Ahmedin, J. Siegel, R. Xu, J. and Ward, E. 2010. Cancer Statistics. CA Cancer Clin. 60:277–300. American Cancer Society. Global Cancer Fact & Figures (2nd Edition). 2011. American Cancer Society. Atlanta GA. USA. Arany, Z. Huang, L.E. Eckner, R. Bhattacharya, S. Jiang, C. Goldberg M.A. Bunn, H.F. and Livingston, D.M. 1996. An essential role for p300/CBP in the cellular response to hypoxia. Proc Natl Acad Sci. USA. 93:1296912973. Aziz, F.M. 2009. Gynecological Cancer in Indonesia. J Gynecol Oncol. 20(1):pp.8-10. Babar, I.A.J. Czocor, A. Steinmetz, J. B. Weidhaas, P.M. Glazer, and Slack, F.J. 2011. Inhibition of hypoxia-induced miR-155 radiosensitizes hypoxic lung cancer cells. Cancer Biology & Therapy. USA. 12(10):908–914. Becker, C. A. Hammerle-Fickinger, I. Riedmaier, M.W. Pfaffl. 2010. mRNA and microRNA quality control for RT-qPCR analysis. Methods 50: 237-243. Behm-Ansmant, I. Rehwinkel, J. Doerks, T. Stark, A. Bork, P. and Izaurralde, E. 2006. mRNA degradation by mikroRNAs and gw182 Requires Both ccr4: not deadenylase and dcp1: Dcp2 decapping complexes.Genes Dev. 20: 1885-1898. Bell, E.L. Emerling, B.M. Ricoult, S.J. and Guarente, L. 2011. SirT3 suppresses hypoxia inducible factor 1 alpha and tumor growth by inhibiting mitochondrial ROS production. Oncogene. 30:2986-2996. Bhattacharya, S. Michels, C.L. Leung, M.K. Arany, Z.P. Kung, A.L. and Livingston, D.M. 1999. Functional role of p35srj, a novel p300/CBP binding protein, during transactivation by HIF-1. Genes Dev. 13: 64–75. Birner, P. Schindl, M. Obermair, A. and Breitenecker, G. 2001. Expression of hypoxia inducible factor 1α in epithelial ovarian tumors its impact on prognosis and on response to chemotherapy. Clin Cancer Res. 7(6):16611668. Birner, P. Schindl, M. Obermair, A. Breitenecker, G. and Oberhuber, G. 2001. Expression of Hypoxia-inducible Factor 1a in Epithelial Ovarian Tumors: Its Impact on Prognosis and on Response to Chemotherapy1. Clin Cancer Res. (7):1661–1668.
87
Brahimi-Horn, C. Mazure, N. and Pouyssegur, J. 2005. Signalling via the hypoxia inducible factor-1alpha requires multiple posttranslational modifications. Cell Signal. (17):1–9. Brennecke, J. Stark, A. Russell, R.B. and Cohen, S.M. 2005. Principles of microRNA-Target Recognition. PLoS Biol. 3:85. Brizel, D.M. Dodge, R.K. Clough, R.W. and Dewhirst, M.W. 1999. Oxygenation of head and neck cancer: changes during radiotherapy and impact on treatment outcome. Radiother Oncol. 53: 113–117. Brown, J.M. and Wilson, W.R. 2004. Exploiting tumour hypoxia in cancer treatment. Nat Rev Cancer. 4:437-47. Bruning, U. Cerone, L. Neufeld, Z. and Fitzpatrick, S.F. 2011. MicroRNA-155 promotes resolution of hypoxia-inducible factor 1 activity during prolonged hypoxia. Mol and Cell Bio. 31(19):4087–4096. Calore, F. and M. Fabbri. 2011. MicroRNAs and Cancer. Atlas of Genetics and Cytogenetics in Oncology and Haematology. 1-20. Carbia-Nagashima, A. Gerez, J. Perez-Castro, C. Paez-Pereda, M. Silberstein, S. Stalla, G.K. Holsboer, F. and Arzt, E. 2007. RSUME, a small RWDcontaining protein, enhances SUMO conjugation and stabilizes HIF-1alpha during hypoxia. Cell. 131:309-323. Cheng, G. 2015. Circulating miRNAs: Roles in cancer diagnosis, prognosis and therapy. Adv Drug Del Rev. (81):75–93. Cheng, J. Kang, X. Zhang, S. and Yeh, E.T. 2007. SUMO-specific protease 1 is essential for stabilization of HIF1alpha during hypoxia. Cell. 131: 584– 595. Cheng, L.L. Hui, N. Ming, W. Li, P.S. Jian, Fang, L. Ying, Y. Y. Min, Y. Qin, L. Q. Zheng, G. Z. and Bing, Y. L. 2012. microRNA-155 is downregulated in gastric cancer cells and involved in cell metastasis. Oncol Rep. 27: 19601966. Chinen, T. Komai, K. and Muto, G. 2011. Prostaglandin E2 and HIF1A have a role in intestinal immune tolerance. Nature Commun. 2:190. Christofk, H.R. Vander-Heiden, M.G. Harris, M.H. Ramanathan, A. Gerszten, R.E. Wei, R. Fleming, M.D. Schreiber, S.L. and Cantley, L.C. 2008. The M2 splice isoform of pyruvate kinase is important for cancer metabolism and tumour growth. Nature. 452: 230–233.
88
Conde, E. Laura, A. Ignacio, B.S. David, S.M. Elia, A.F. Bele´n, P. Edurne, R. Ana, S. Carlos, J. Angel, O. Manuel, L.C. Luis-del, P. Manuel, O. de, L. Fernando, L. Rafael, S. Jose, A.S. Tomero, and Marı´a L.G.B. 2012. Hypoxia inducible factor 1-alpha (HIF-1 Alpha) is induced during reperfusion after renal ischemia and is critical for proximal tubule cell survival. Plos One. 7(3):33258. Crews, S.T. 1998. Control of cell lineage-specific development and transcription by bHLH-PAS proteins. Genes Dev. 12:607-620. Cui, J.J. B. Eldredge, Y. Xu, and D. Puett. 2011. MicroRNA Expression and Regulation in Human Ovarian Carcinoma Cells by Luteinizing Hormone. PLoS ONE. 6(7): 1-10. D’urso, P.I. Oscar, F.D. Carlo, S. Massimo, M. Cosimo, D.G. Antonio, M. Antonia, C. Caliandro, P. and Santo, M. 2012. miR-155 is up-regulated in primary and secondary glioblastoma and promotes tumour growth by inhibiting GABA receptors. Onco. 41: 228-234. Dahiya, N. Sherman-Baust, C.A. Wang, T.L. and Davidson, B. 2008. MicroRNA expression and identification of putative miRNA targets in ovarian cancer Jörg Hoheisel (ed.). PLoS ONE. 3(6):e2436. Daponte, A. Ioannou, M. Mylonis, I. and Simos, G. 2008. Prognostic significance of hypoxia-inducible factor 1 alpha (HIF-1alpha) expression in serous ovarian cancer: an immunohistochemical study. BMC Cancer. 8(1):335. Davis, B.N., Hilyard, A.C., Lagna, G., Hata, A., 2008. SMAD proteins control DROSHA-mediated microRNA maturation. Nature. 454:56-61. Dioum, E.M. Chen, R. Alexander, M.S. Zhang, Q. Hogg, R.T. Gerard, R.D. and Garcia, J.A. 2009. Regulation of hypoxia-inducible factor 2 alpha signaling by the stress-responsive deacetylase sirtuin 1. Science. 324: 1289–1293. Du, Z.M. Hu, L.F. Wang, H.Y. Yan, L.X. Zeng, Y.X. Shao, J.Y. and Ernberg, I. 2011. Upregulation of miR-155 in nasopharyngeal carcinoma is partly driven by LMP1 and LMP2A and downregulates a negative prognostic marker JMJD1A. PLoS One. 6(4): e19137. Ema, M. Hirota, K. Mimura, J. Abe, H. Yodoi, J. Sogawa, K. Poellinger, L. and Fujii-Kuriyama, Y. 1999. Molecular mechanisms of transcription activation by HLF and HIF1 alpha in response to hypoxia: their stabilization and redox signal-induced interaction with CBP/ p300. EMBO. 18: 1905–1914.
89
Epstein, A.C. Gleadle, J.M. McNeill, L.A. Hewitson, K.S. O’Rourke, J. Mole, D.R. Mukherji, M. Metzen, E. Wilson, M.I. Dhanda, A. Tian, Y.M. Masson, N. Hamilton, D.L. Jaakkola, P. Barstead, R. Hodgkin, J. Maxwell, P.H. Pugh, C.W. Schofield, C.J. and Ratcliffe, P.J. 2001. C. elegans EGL9 and mammalian homologs define a family of dioxygenases that regulate HIF by prolyl hydroxylation. Cell. 107:43–54. Fabian, M.R. Sonenberg, N. and Filipowicz, W. 2010. Regulation of mRNA Translation and Stability by microRNAs. Annu Rev Biochem. 79:351–379. Falcone, G. Felsani, A. and D’Agnano, I. 2015. Signaling by exosomal microRNAs in cancer. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 34(32):1-10. Ferlay, J. Soerjomataram, I. Ervik, M. Dikshit, R. Eser, S.C. Mathers, M. Rebelo, M. Parkin, D.M. Forman, D. and Bray, F. 2012. Estimated cancer incidence, mortality and prevalence worldwide in 2012. Globocan. ARC Cancer Base. Diakses dari http://www.iarc.fr/en/publications/eresources /cancerbases/. Gao, F. Chang, J. Wang, H. and Zhang, G. 2014. Potential diagnostic value of miR-155 in serum from lung adenocarcinoma patients. Oncol Rep. 31(1):351. George, G.P. and Mittal, R.D. 2010. microRNAs: Potential biomarker in cancer. Clin Biochem. 1:4-14. GLOBOCAN, 2012. Estimated cancer incidence, mortality, and prevalence worldwide in 2012. Diakses dari http://globocan.iarc.fr/Pages/online.aspx Goff, B.A. L. Mandel, H.G. Muntz, and C. H. Melancon. 2000. Ovarian Carcinoma Diagnosis Results of a National Ovarian Cancer Survey. American Cancer Society. 89 (10):1-8. Goldberg, M.A. Dunning, S.P. and Bunn, H.F. 1988. Regulation of the erythropoietin gene: evidence that the oxygen sensor is a heme protein. Science. 242:1412-1415. Gu, Y.Z. Moran, S.M. Hogenesch, J.B. Wartman, L. and Bradfield, C.A. 1998. Molecular characterization and chromosomal localization of a third alpha class hypoxia inducible factor subunit, HIF3 alpha. Gene Expr. 7:205-213. Hara, S. Hamada, J. Kobayashi, C. Kondo, Y. and Imura, N. 2001. Expression and characterization of hypoxia-inducible factor (HIF)-3 alpha in human kidney: suppression of HIF-mediated gene expression by HIF-3 alpha. Biochem Biophys Res Commun. 287:808–813.
90
Hitosugi, T. Kang, S. Vander, H.M.G. Chung, T.W. Elf, S. Lythgoe, K. Dong, S. Lonial, S. Wang, X. Chen, G.Z. Xie, J. Gu, T.L. Polakiewicz, R.D. Roesel, J.L. Boggon, T.J. Khuri, F.R. Gilliland, D.G. Cantley, L.C. Kaufman, J. and Chen, J. 2009. Tyrosine phosphorylation inhibits PKM2 to promote the Warburg effect and tumor growth. Science. 1-8. Huang, C. Han, Y. Wang, Y. Sun, X. Yan, S. Yeh, E.T. Chen, Y. Cang, H. Li, H. Shi, G. Cheng, J. Tang, X. and Yi, J. 2009. SENP3 is responsible for HIF1 transactivation under mild oxidative stress via p300 de-SUMOylation. EMBO. 28:2748-2762. Huang, L.E. Arany, Z. Livingston, D.M. and Bunn, H.F. 1996. Activation of hypoxia inducible transcription factor depends primarily upon redoxsensitive stabilization of its alpha subunit. Biol Chem. 271:32253-32259. Huang, L.E. Gu, J. Schau, M. and Bunn, H.F. 1998. Regulation of hypoxia inducible factor 1alpha is mediated by an O2-dependent degradation domain via the ubiquitin-proteasome pathway. Proc Natl Acad Sci. USA. 95:7987-7992. Huang. 2013. Regulation of miR-155 affects pancreatic cancer cell invasiveness and migration by modulating the STAT3 signaling pathway through HIF1A.1(9). Ivan, M. Kondo, K. Yang, H. Kim, W. Valiando, J. Ohh, M. Salic, A. Asara, J.M. Lane, W.S. Kaelin, and Jr, W.G. 2001. HIF alpha targeted for VHL mediated destruction by proline hydroxylation: implications for O2 sensing. Science. 292:464-468. Jaakkola, P. Mole, D.R. Tian, Y.M. Wilson, M.I. Gielbert, J. Gaskell, S.J. Kriegsheim, A. Hebestreit, H.F. Mukherji, M. and Schofield, C.J. 2001. Targeting of HIF-alpha to the von Hippel-Lindau ubiquitylation complex by O2-regulated prolyl hydroxylation. Science. 292:468-472. Jackson, A.L. Bartz, S.R. and Schelter, J. 2003. Expression profiling reveals offtarget gene regulation by RNAi. Nat Biotechnol. 21:635. Jansson, M.D. and Lund, A.H. 2012. MicroRNA and cancer. Mol Oncol. 590e6 10. Jansson, M.D. and A. H. Lund. 2012. MicroRNA and cancer. Molecular Oncology 6: 590-610. Jelovac, D. and Armstrong, D.K. 2011. Recent Progress in the Diagnosis and treatment of Ovarian Cancer. Ca Cancer J Clin. 61: pp.183–203.
91
Ji, W. Zhang, X. Sun, X. and Wang, X. 2014. miRNA-155 modulates the malignant biological characteristics of NK/T-cell lymphoma cells by targeting FOXO3a gene. Medical Sciences. 34(6):882-888. Kaelin, J.W.G. and Ratcliffe, P.J. 2008. Oxygen sensing by metazoans: the central role of the HIF hydroxylase pathway. Mol Cell. 30:393-402. Kaku, T. Ogawa, S. Kawano, Y. Ohishi, Y. Kobayashi, H. Hirakawa, T. and Nakano, H. 2003. Histological classification of ovarian cancer. Med Electron Microsc. (36):9–17. Kallio, P.J. Pongratz, I. Gradin, K. McGuire, J. and Poellinger, L. 1997. Activation of hypoxia-inducible factor 1 alpha: posttranscriptional regulation and conformational change by recruitment of the Arnt transcription factor. Proc Natl Acad Sci. USA. 94:5667-5672. Katz, B. Claes G. Trope, R. Reich, and B. Davidson. 2015. MicroRNAs in Ovarian Cancer. Human Pathology. Xx:1-12. Ke, Q. and Costa, M. 2006. Hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1). Mol Phar. 70(5):1469-1480. Kinose, Y. Sawada, K. Nakamura, K. and Kimura, T. 2014. The Role of MicroRNAs in Ovarian Cancer. BioMed Research Intern. 1-11. Krol, J. Loedige, I. and Filipowicz, W. 2010. The widespread regulation of microRNA biogenesis, function and decay. Nat Rev Genet. 11(9):597-610. Kumar, M.S., Lu, J., Mercer, K.L., Golub, T.R., Jacks, T. 2007. Impaired microRNA processing enhances cellular. Lando, D. Peet, D.J. Gorman, J.J. Whelan, D.A. Whitelaw, M.L. and Bruick, R.K. 2002a. FIH-1 is an asparaginyl hydroxylase enzyme that regulates the transcriptional activity of hypoxia -inducible factor. Genes Dev. 16:14661471. Lando, D. Peet, D.J. Whelan, D.A. Gorman, J.J. and Whitelaw, M.L. 2002b. Asparagine hydroxylation of the HIF transactivation domain a hypoxic switch. Science. 295:858-861. Lao, G. Liu, P. Wu, Q. and Zhang, W. 2014. Mir-155 promotes cervical cancer cell proliferation through suppression of its target gene LKB1. Tum Bio. 35(12):11933-11938. Laura, M.S. Seeber, A. Horrée, N.A. Marc, A.G.G. Vooijs, A. Peter, M. Heintz,
92
Wall, E.V. D. René, H.M. Verheijen, P. J. and Diest, V. 2011. The role of hypoxia inducible factor-1alpha in gynecological cancer. Critical Rev in Oncol/Hematol. (78):173-184. Leitner, A. 2009. MicroRNA Target Prediction: Institute of Genomic and Bioinformatics. Graz University of Technology. Li, C. Nie, H. Wang, M. Sui, L. Li, J. Yui, Y. Yan, M. Qu, Q. Zhu, Z. and Liu, B. 2012. microRNA-155 is downregulated in gastric cancer cells and involved in cell metastasis. Oncol Rep 27:1960-1966. Li, T. Yang, J. Lv, X. and Liu, K. 2014. miR-155 regulates the proliferation and cell cycle of colorectal carcinoma cells by targeting E2F2. Biotech Lett. 36 (9):1743-1752. Lingel, A. Simon, B. Izaurralde, E. and Sattler, M. 2003. Structure and nucleicacid binding of the Drosophila argonaute 2 PAZ domain. Nature. 426: 465469. Liu, B.Y. 2012a. microRNA-155 is downregulated in gastric cancer cells and involved in cell metastasis. Oncol Rep. 1-6. Liu, Michelle, X. Chan, David, W. Ngan, and Hextan, Y.S. 2012. Mechanisms of chemoresistance in human ovarian cancer at a glance. Gyne Obstet. 2:3. Liu, Z. 2012b. miR-155 and miR-31 are differentially expressed in breast cancer patients and are correlated with the estrogen receptor and progesterone receptor status. Oncol Lett. 1-7. Lodes, M.J. Caraballo, M. Suciu, D. Munro, S. Kumar, A. and Anderson, B. 2009. Detection of cancer with serum mikroRNAs on an oligonucleotide Microarray. PloS One. 4:e6229. Lombard, D.B. Alt, F.W. Cheng, H.L. Bunkenborg, J. Streeper, R.S. Mostoslavsky, R. Kim, J. Yancopoulos, G. Valenzuela, D. Murphy, A. Yang, Y. Chen, Y. Hirschey, M.D. Bronson, R.T. Haigis, M. Guarente, L.P. Farese, J.R.V. Weissman, S. Verdin, E. and Schwer, B. 2007. Mammalian Sir2 homolog SIRT3 regulates global mitochondrial lysine acetylation. Mol Cell Biol. 27:8807-8814. Luo, W. Hu, H. Chang, R. Zhong, J. Knabel, M. O’Meally, R. Cole, R.N. Pandey, A. and Semenza, G.L. 2011. Pyruvate kinase M2 is a PHD3- stimulated coactivator for hypoxia-inducible factor 1. Cell. 145:732-744. Lv, Z. Fan, Y. Chen, H. and Zhao, D. 2015. Investigation of microRNA-155 as a serum diagnostic and prognostic biomarker for colorectal cancer. Tum Bio.
93
36(3):1619-1625. Makino, Y. Kanopka, A. Wilson, W.J. Tanaka, H. and Poellinger, L. 2002. Inhibitory PAS domain protein (IPAS) is a hypoxia-inducible splicing variant of the hypoxia-inducible factor-3 alpha locus. Biol Chem. 277:32405-32408. Masson, N. Singleton, R.S. Sekirnik, R. Trudgian, D.C. Ambrose, L.J. Miranda, M.X. Tian, Y.M. Kessler, B.M. Schofield, C.J. and Ratcliffe, P.J. 2012. The FIH hydroxylase is a cellular peroxide sensor that modulates HIF transcriptional activity. EMBO Rep. 13:251-257. Masson, N. Willam, C. Maxwell, P.H. Pugh, C.W. and Ratcliffe, P.J. 2001. Independent function of two destruction domains in hypoxia inducible factor-alpha chains activated by prolyl hydroxylation. EMBO. 20:51975206. Maxwell, P.H. Wiesener, M.S. Chang, G.W. Clifford, S.C. Vaux, E.C. Cockman, M.E. Wykoff, C.C. Pugh, C.W. Maher, E.R. and Ratcliffe, P.J. 1999. The tumour suppressor protein VHL targets hypoxia inducible factors for oxygen-dependent proteolysis. Nature. 399:271-275. Maynard, M.A. Qi, H. Chung, J. Lee, E.H. Kondo, Y. Hara, S. Conaway, R.C. Conaway, J.W. and Ohh, M. 2003. Multiple splice variants of the human HIF-3 alpha locus are targets of the von Hippel-Lindau E3 ubiquitin ligase complex. Biol Chem. 278:11032-11040. Melo, S.A., Moutinho, C., Ropero, S., Calin, G.A., Rossi, S., Spizzo, R., Fernandez, A.F., Davalos, V., Villanueva, A., Montoya, G., Yamamoto, H., Schwartz Jr., S., Esteller, M., 2010. A genetic defect in exportin-5 traps precursor microRNAs in the nucleus of cancer cells. Cancer Cell. 18:303315. Melo, S.A., Ropero, S., Moutinho, C., Aaltonen, L.A., Yamamoto, H., Calin, G.A., Rossi, S., Fernandez, A.F., Carneiro, F., Oliveira, C., Ferreira, B., Liu, C.G., Villanueva, A., Capella, G., Schwartz Jr., S., Shiekhattar, R., Esteller, M., 2009. A TARBP2 mutation in human cancer mpairs microRNA processing and DICER1 function. Nat. Genet. 41: 365-370. Menor, M., Ching, T., Zhu, X., Garmire, D., and Garmire, LX. 2014. mirMark: a site-level and UTR-level classifier for miRNA target prediction. Genome Biology. 15: pp.500. Nakamura, K. Sawada, K. Yoshimura, A. Kinose, Y. Nakatsuka, E. and Kimura, T. 2016. Clinical relevance of circulating cell-free microRNAs in ovarian cancer. Molecular Cancer. 15(48):1-10.
94
Nakamura, M. 2013. High expression of microRNA-155 is associated with the aggressive malignant behavior of gallbladder carcinoma. Onco Reps. 2-9. Newman, M.A., Hammond, S.M., 2010. Emerging paradigms of regulated microRNA processing. Genes Dev. 24: 1086-1092. Nguyen, L. Cardenas, G. Segundo, J. Gordon, P. Curtin, C. Momeni, M. Chuang, L. and Fishman, D. 2013. Biomarkers for early detection of ovarian cancer. Women’s Health. 9(2):171-187. Polytarchou, Christos, Iliopoulos, D. Hatziapostolou, M. Kottakis, F. Maroulakou, I. Struhl, K. and Tsichlis, P.N. 2011. Akt2 regulates all Akt isoforms and promotes resistance to hypoxia through induction of miR-21 upon oxygen deprivation. Cancer Res.71(13): 4720–4731. Prat, J. 2012. New insights into ovarian cancer pathology. Annals of Oncol 23 (Supp 10):x111–x117. Pugh, C.W. O’Rourke, J.F. Nagao, M. Gleadle, J.M. and Ratcliffe, P.J. 1997. Activation of hypoxia-inducible factor-1; definition of regulatory domains within the alpha subunit. Biol Chem. 272:11205-11214. Qin, W. Ren, Q. Liu, T. and Huang, Y. 2013. MicroRNA-155 is a novel suppressor of ovarian cancer-initiating cells that targets CLDN1. FEBS Letters. 587(9):1434-1439. Ren, Y. Gao, J. Liu, J.Q. Wang, X.W. Gu, J. Huang, H. Gong, Y. and Li, Z. 2012. Differential signature of fecal microRNAs in patients with pancreatic cancer. Resnick, K.E. Alder, H. Hagan, J.P. and Richardson, D.L. 2009. The detection of differentially expressed microRNAs from the serum of ovarian cancer patients using a novel real-time PCR platform. Gyne Onco. 112(1):55-59. Robert, F.O. 2002. Recurrent ovarian cancer: evidence-based treatment. Clin Onco. 20(5):1161-1163. Rothschild, S.I. 2014. microRNA therapies in cancer. Mol and Cel Ther. 2(1):7. Ruan, K. Song, G. and Ouyang, G. 2009. Role of hypoxia in the hallmarks of human cancer. Cell Biochem. 107:1053-62. Rusnita, T. dan Prijono, I. Ekspresi P53, Bcl-2 dan Nm23-H1 pada Karsinoma Ovarium Tipe Serosum dan Musinosum serta Hubungannya dengan Stadium dan Derajat Histologi. Majalah Patologi. 23(2): 13-19.
95
Salceda, S. and Caro, J. 1997. Hypoxia-inducible factor 1α (HIF-1α) protein is rapidly degraded by the ubiquitin-proteasome system under normoxic conditions. Its stabilization by hipoksia depends on redox-induced changes. Biol Chem. 272:22642-22647. Semenza, G.L. 1998. Hypoxia-inducible factor 1: master regulator of O2 homeostasis. Curr Opin Genet Dev. 8:588-594. Semenza, G.L. 2010. HIF-1: upstream and downstream of cancer metabolism. Curr Opin Genet Dev. 20(1): 51. Semenza, G.L. Nejfelt, M.K. Chi, S.M. and Antonarakis, S.E. 1991. Hypoxiainducible nuclear factors bind to an enhancer element located 3 to the human erythropoietin gene. Proc Natl Acad Sci. USA. 88: 5680-5684. Shibuya, H. Iinuma, H. Shimada, R. Horiuchi, A. and Watanabe, T. 2010. Clinicopathological and prognostic value of microRNA-21 and microRNA-155 in colorectal cancer. Onco. 79(3-4):313-20. Soslow, A.and Robert. 2008. Histologic Subtypes of Ovarian Carcinoma: An Overview. International Journal of Gynecological Pathology. 27: 161– 174. Srinivas, V. Zhang, L.P. Zhu, X.H. and Caro, J. 1999. Characterization of an oxygen/ redox-dependent degradation domain of hypoxia-inducible factor alpha (HIFalpha) proteins. Biochem Biophys Res Commun. 260:557-561. Suzuki, H., Maruyama, R., Yamamoto, E., and Kai, M. 2012. DNA methylation and microRNA dysregulation in cancer. Molecular oncology. 6: 567-578. Tan, Z.Q. Liu, F.X. Tang, H.L. and Su, Q. 2010. Expression and its clinical significance of hsa-miR-155 in serum of endometrial cancer. 45(10):772. Textoris, J. Beaufils, N. Quintana, G. and Lassoud, A.B. 2012. Hypoxia-inducible factor (HIF1a) gene expression in human shock states. In: Intensive care medicine. Springer 233 Spring ST. 10013 USA. Pp: 88. Tinelli, A. Vergara, D. Martignago, R. Leo, G. Pisanò, M. and Malvasi, A. 2009. An Outlook on Ovarian Cancer and Borderline Ovarian Tumors: Focus on Genomic and Proteomic Findings. Current Genomics. (10):240-249. Valadi, H. Ekstrom, K. Bossios, A. Sjostrand, M. Lee, J.J. and Lotvall, J.O. 2007. Exosome mediated transfer of mRNAs and microRNAs is a novel mechanism of genetic exchange between cells. Nat Cell Biol. 9:654-659.
96
Wang and Chen. 2014. Circulating miRNAs in cancer: from detection to Therapy. Journal of Hematology & Oncology. 7:86. Wang, G. Chen, H.W. Oktay, Y. Zhang, J. Allen, E.L. Smith, G.M. Fan, K.C. Hong, J.S. French, S.W. McCaffery, J.M. Lightowlers, R.N. Morse, H.C. Koehler, C.M. and Teitell, M.A. 2010. PNPASE regulates RNA import into mitochondria. Cell. 142:456-467. Wang, G.L. Jiang, B.H. Rue, E.A. and Semenza, G.L. 1995. Hypoxia-inducible factor 1 is a basic-helix-loop-helix-PAS heterodimer regulated by cellular O2 tension. Proc Natl Acad Sci. USA. 92:5510-5514. Warner, D.R., Bhattacherjee, V., Yin, X., Singh, S., Mukhopadhyay, P., Pisano, M.M., Greene, R.M., 2004. Functional interaction between Smad, CREB binding protein, and p68 RNA helicase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 324: 70-76. Wenger, R.H. Stiehl, D.P. and Camenisch, G. 2005. Integration of oxygen signaling at the consensus HRE. Sci STKE rev.12. Wiesener, M.S. Turley, H. Allen, W.E. Willam, C. Eckardt, K.U. Talks, K.L. Wood, S.M. Gatter, K.C. Harris, A.L. and Pugh, C.W. 1998. Induction of endothelial PAS domain protein-1 by hipoksia: characterization and comparison with hipoksia-inducible factor-1alpha. Blood. 92:2260-2268. Xenaki, G. Ontikatze, T. Rajendran, R. Stratford, I.J. Dive, C. Krstic-Demonacos, M. and Demonacos, C. 2008. PCAF is an HIF-1alpha cofactor that regulates p53 transcriptional activity in hipoksia. Oncogene. 27:57855796. Yang, W. Xia, Y. Ji, H. Zheng, Y. Liang, J. Huang, W. Gao, X. Aldape, K. and Lu, Z. 2011. Nuclear PKM2 regulates beta-catenin transactivation upon EGFR activation. Nature. 480:118-122. Yap, T.A. Carden, C.P. and Kaye, S.B. 2009. Beyond chemotherapy: targeted therapies in ovarian cancer. Nat Rev Cancer. 9:167-181. Zhang, H.T. 2013. microRNA-155 regulates cell proliferation and invasion by targeting FOXO3a in glioma. Onco Rep. 3-6. Zhang, J. Khvorostov, I. Hong, J.S. Oktay, Y. Vergnes, L. Nuebel, E. Wahjudi, P.N. Setoguchi, K. Wang, G. Do, A. Jung, H.J. McCaffery, J.M. Kurland, I.J. Reue, K. Lee, W.N. Koehler, C.M. and Teitell, M.A. 2011. UCP2 regulates energy metabolism and differentiation potential of human pluripotent stem cells. EMBO. 30:4860-4873.
97
Zhao, X. 2012. microRNA-155 silencing inhibits proliferation and migration and induces apoptosis by upregulating BACH1 in renal cancer cells. Mol Med Rep. 3-8. Zheng, S.R. Gui, L.G. Wei, Z. Guan, L.H. Xiao, Q. Jin, Z. Qi, D.H. Jie, Y. and Xiao, H.Z. 2012. Clinical significance of miR-155 expression in breast cancer and effects of miR-155 ASO on cell viability and apoptosis. Oncol Rep. 27:1149-1155. Ziello, J.E. Jovin, I.S. and Huang, Y. 2007. Hypoxia-Inducible Factor (HIF)-1 Regulatory Pathway and its Potential for Therapeutic Intervention in Malignancy and Ischemia. JOURNAL OF BIOLOGY AND MEDICINE. 80. pp.51-60.
