Analitikai vizsgálatok a méhpusztulások okának feltárása érdekében Szemánné Dobrik Henriett NÉBIH NTAI Miskolci Növényvédőszermaradék-analitikai Laboratórium
Hungalimentaria 2015
Méhtetemek vizsgálata • Évről-évre visszatérő probléma • Cél: okok feltárása o Betegség? o Mérgezés? Szándékos? Nem előírásszerű növényvédelmi tevékenység?
• Több szakterület együttműködésére van szükség o Szakmai tapasztalatok összegzése o Közös munka megkönnyítése eljárásrend kialakításával és alkalmazásával
Méhtetemek vizsgálata • Ez évig 2 labor vizsgált akkreditáltan növényvédőszerre: o Miskolci Növényvédőszermaradék-analitikai Laboratórium (Kelet-Mo.) o Velencei Növényvédőszer-analitikai Laboratórium (NyugatMo.)
• Összetett feladat több lépcsőben: o a növ. szermaradékok (különösen a méhekre veszélyesek) jelenlétének igazolása méhekben o a növ. szermaradékok (különösen a méhekre veszélyesek) jelenlétének igazolása a kapcsolódó növényi mintában o Méhtetem és növényi mintá(k) közti kapcsolat alátámasztása vagy elvetése vizsgálatokkal
Törvények, rendeletek • Betegségek megelőzéséről szólók • Méhekre veszélyes növényvédelmi tevékenységek megakadályozásáról szólók Ok: méhekre mérsékelten vagy kifejezetten veszélyes növényvédőszerek vannak/voltak forgalomban (piretroidok, neonikotinoidok) Cél: a növényvédőszerek kijuttatása a közeli méhállomány károsítása nélkül
Laboratóriumi elvárások • Minél több információ szolgáltatására alkalmas, megbízható vizsgálati módszer alkalmazása • Módszerfejlesztés
• Vizsgálati eredmények minél rövidebb idő alatt • Az eredményekből megállapítható legyen, mi okozta a pusztulást: o Szándékosság? o Gondatlanság? o Tiltott v. szennyezett szer alkalmazása?
Veszélyes hatóanyagok Mért paraméter
Méhveszélyességi besorolás
abamektin
kifejezetten veszélyes
bifentrin
kifejezetten veszélyes
ciflutrin (béta-ciflutrin)
kifejezetten veszélyes
cipermetrin (izomerek összesen)
kifejezetten veszélyes
deltametrin
kifejezetten veszélyes
dimetoát + ometoát
kifejezetten veszélyes
etofenprox
kifejezetten veszélyes
fenitrotion
kifejezetten veszélyes
fipronil + fipronil-szulfon
kifejezetten veszélyes
foszmet + foszmet-oxon
kifejezetten veszélyes
imidakloprid
kifejezetten veszélyes
klórantraniliprol
kifejezetten veszélyes
klórpirifosz
kifejezetten veszélyes
klórpirifosz-metil
kifejezetten veszélyes
lambda-cihalotrin
kifejezetten veszélyes
malation + malaoxon
kifejezetten veszélyes
metilparation + paraoxon-metil
kifejezetten veszélyes
metomil + tiodikarb
kifejezetten veszélyes
pirimifosz-metil
kifejezetten veszélyes
spirodiklofen
kifejezetten veszélyes
tiametoxam + klotianidin
kifejezetten veszélyes
triflumuron
kifejezetten veszélyes
tritikonazol
kifejezetten veszélyes
Mért paraméter bromoxinil diklórfosz eszfenvalerát + fenvalerát (RR+SS izomerek) eszfenvalerát + fenvalerát (RS+SR izomerek) fluorkloridon foszalon indoxakarb lufenuron prokloráz acetamiprid diazinon metoxifenozid pirimikarb + dezmetil-pirimikarb tau-fluvalinát teflutrin tiakloprid
Méhveszélyességi besorolás mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes mérsékelten veszélyes
Vizsgálati módszer MSZ EN 15662:2009 (QuEChERS) 5 g minta 10 ml víz rázás
rázatás 10 ml AcN
Extrakciós sókeverék Kifagyasztás rázatás centrifugálás
dSPE tisztítás PSA-val rázatás centrifugálás
Stabilizálás
Problémák • • • •
Bonyolult mátrix (magas zsírtartalom) Rengeteg zavaró hatás Nincs két egyforma méh Kolonnákat rongálja, gyakran kell karbantartani
GC-ECD Problémák Piretroidok tartománya
GC-MS full scan
GC-MS/MS
Zavaró hatás kiküszöbölésének lehetőségei 5 g minta 10 ml víz rázás
rázatás 10 ml AcN
Hosszabb ideig? Csodaszerek?
Extrakciós sókeverék
Kifagyasztás rázatás centrifugálás
dSPE tisztítás PSA-val rázatás centrifugálás
Stabilizálás
További tisztítás?
Vizsgálódási irányok • Szabvány alternatív javaslata: o hosszabb kifagyasztási idő o tisztító keverék: PSA + MgSO4 + C18
• További tisztítási lépésként Al2O3 alkalmazása • Zsíroknál hatásosan alkalmazott kirázásos módszer (n-Hex: AcN elegyével) • Újonnan megjelenő Z-Sep+ adszorbens alkalmazása a tisztításnál o SiO2 felületén megkötött ZrO és C18 o ˃15 % zsírtartalomnál javasolt
Különböző méh mátrixokon tett próbák
MR 416 (zsírokra)
PSA+MgSO4 és Al2O3 tiszt.
PSA+MgSO4+500 mg Z-Sep+
PSA+MgSO4+150 mg Z-Sep+ kifagyasztva
PSA+MgSO4+150 mg Z-Sep+
Kiindulási méh minta módszer módosítások előtt
Kiindulási méh mintán végzett vizsgálatok Vizsgálati módszer PSA+MgSO4+150 mg Z-Sep+ PSA+MgSO4+150 mg Z-Sep+ kifagyasztva
500 mg Z-Sep+
500 mg Z-Sep+ kifagyasztva
Vizsgálati módszer
PSA+MgSO4+150 mg Z-Sep+ 500 mg Z-Sep+
PSA+MgSO4
Visszanyerési eredmények 140 120 100
R%
80 60 40 20 0
500 mg Z-Sep+ PSA + 150 mg Z-Sep+ 150 mg Z-Sep+
Kísértő mátrix hatások
? Lambda-cihalotrin gyanú
Alapminta spektruma
St. addicionált minta spektruma
Lambda-cihalotrin Konfirmálás gyanú
Pozitív minták
Diazinon
GC-MS/MS
Pozitív minták Terbutilazin és metolaklór Kontrol minta GC-MS/MS Méhhulla
Hozzáadásos kontrol minta
Pozitív minták
Boszkalid, fipronil és szulfonja
GC-ECD
Pozitív minták
Dimetoát LC-MS/MS
Előző évek eredményei A minták 83 %-a volt pozitív (218 db) 4 év alatt. Pozitív minták száma évente
2013 42
2014 118
2012 48
2011 10
2009 1
kifejezetten mérsékelten figyelemre méltó
tiakloprid
teflutrin
tau-fluvalinát
metoxifenozid
diazinon
acetamiprid
proquinazid
prokloráz
lufenuron
indoxakarb
foszalon
fluorkloridon
tiametoxam
lambda-cihalotrin
klotianidin
klórpirifosz-metil
klórpirifosz
fipronil-szulfon
fipronil
dimetoát és ometoát össz.
cipermetrin
Előző évek eredményei
Mért szermaradékok gyakorisága veszélyesség alapján
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
amitráz kumafosz boszkalid ciprodinil ciprokonazol difenokonazol diflubenzuron dimoxistrobin ditianon famoxadon fenazaquin fenhexamid fenpropimorf fluquinkonazol fluzilazol folpet kaptán karbendazim mandipropamid MCPA meptil-dinokap metolaklór metribuzin DEET novaluron pendimetalin penkonazol permetrin (izomerek ) pikoxistrobin piperonilbutoxid piraklostrobin pirimetanil protiokonazol-deztio spiroxamin tebufenpirad tebukonazol terbutilazin tetrametrin tiofanát-metil trifloxistrobin
Előző évek eredményei
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
egyéb
2009 2011 2012 2013
tiametoxam
teflutrin
tau-fluvalinát
prokloráz
pendimetalin
metolaklór
klotianidin
karbendazim
fipronil-szulfon
famoxadon
dimetoát és ometoát össz.
difenokonazol
cipermetrin
alfa-cipermetrin (alfametrin)
tebukonazol
prokloráz
lambda-cihalotrin
klórpirifosz
kaptán
foszalon
dimetoát és ometoát össz.
ciprodinil
klotianidin
karbendazim
ciprodinil
fipronil
Előző évek eredményei Mért szermaradékok évente
25
20
15
10
5
0
2014
tiametoxam
tetrametrin
tebukonazol
tau-fluvalinát
proquinazid
pirimetanil
piperonilbutoxid
pendimetalin
DEET
metolaklór
MCPA
kumafosz
klórpirifosz-metil
karbendazim
indoxakarb
fluquinkonazol
fipronil-szulfon
fenpropimorf
fenazaquin
dimoxistrobin
diflubenzuron
diazinon
ciprodinil
boszkalid
acetamiprid
Előző évek eredményei Mért szermaradékok évente
80 70 60 50 40 30 20 10 0
Előző évek eredményei Minták számának megoszlása megyék szerinti bontásban Zala Veszprém Vas Tolna Szabolcs-Szatmár-Bereg Somogy Pest Nógrád Komárom-Esztergom Hajdú-Bihar Győr-Moson-Sopron Fejér Csongrád Borsod-Abaúj-Zemplén Békés Baranya Bács-Kiskun 0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Pozitív esetek száma
50
55
60
65
70
75
80
Előző évek eredményei Mintákban talált hatóanyagok száma 50 45 40 30 25 20 15 10 5 0 1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Talált hatóanyagok száma egy mintában
11
12
13
14
Gyakoriság
35
Köszönöm szíves figyelmüket!
