AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BINTARO (Cerbera manghas) TERHADAP MORTALITAS NYAMUK AEDES AEGYPTI KARYA TULIS ILMIAH
OLEH ASTRID TRI PRAHASTUTY NIM 13.010
AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN PUTRA INDONESIA MALANG
PERNYATAAN ORIGINALITAS KARYA TULIS ILMIAH
Saya menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa sepanjang pengetahuan saya, Nama : Astrid Tri Prahastuty NIM
: 13.010
Di dalam Naskah Karya Tulis Ilmiah ini tidak terdapat karya ilmiah yang pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar akademik di suatu Perguruan Tinggi dan tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain dan disebutkan dalam sumber kutipan dan pustaka.
Apabila terdapat di dalam naskah KTI ini dapat dibuktikan terdapat unsurunsur PLAGIASI, saya bersedia KTI ini digugurkan dan gelar akademik yang telah saya peroleh (A.Md, Si) dibatalkan, serta diproses sesuai dengan peraturan perundang-undangan yang berlaku (UU No. 20 tahun 2003, Pasal 25 ayat 2 dan pasal 70).
Malang, july 2016
Astrid Tri Prahastuty
DAFTAR ISI
ABSTRAKSI.................................................................................................................... .................i KATA PENGANTAR............................................................................................................... .......ii DAFTAR ISI................................................................................................................... ................iii
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1 1.1Latar Belakang ............................................................................................................... 1 1.2Rumusan Masalah .......................................................................................................... 4 1.3Tujuan Penelitian ........................................................................................................... 4 1.4Ruang lingkup dan ketrbatasan masalah ........................................................................ 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA....................................................................................... 7
2.1 Tumbuhan Bintaro (Cerbera manghas). ........................................................... 7 2.1.1 Morfologi Tumbuhan. ........................................................................................ 7 2.2 Manfaat Bagian Tumbuhan Bintaro .............................................................................. 8 2.3 Metabolit sekunder........................................................................................................ 9 a.Terpenoid ............................................................................................................... 10 b.Flavonoid ............................................................................................................... 11 c.Alkaloid .................................................................................................................. 13 d.Saponin .................................................................................................................. 14 2.4 Nyamuk ....................................................................................................................... 15 A. Taksonomi / Klasifikasi ....................................................................................... 15 B. Morfologi Nyamuk ............................................................................................... 16 C. Siklus Hidup Nyamuk. ......................................................................................... 18 D. Jenis Nyamuk ....................................................................................................... 19 2.2.1 Cara kerja repellent menolak nyamuk ................................................................. 24 2.2.2 DEET.................................................................................................................... 25 2.5.1 Tujuan Ekstraksi ...................................................................................................... 29 2.6 Maserasi ...................................................................................................................... 30 2.7 Kerangka konsep ......................................................................................................... 31
2.8 Hipotesis.......................................................................................................... 31 BAB III METODE PENELITIAN .................................................................... 32 3.1 Rancangan Penelitian .................................................................................................. 32 3.2 Populasi dan Sampel Penelitian .................................................................................. 32 i
3.3 Tempat dan Waktu Penelitian ..................................................................................... 32 3.5 Instrumen Penelitian ................................................................................................... 34 3.6 Pengumpulan Data ...................................................................................................... 35 3.6.1 Determinasi Tanaman ...................................................................................... 35 3.6.2 Persiapan Bahan ............................................................................................... 35 3.6.3Pengekstrakan dengan Maserasi ....................................................................... 35 3.6.4Skrining Fitokimia ............................................................................................ 35 3.6.5Analisis KLT ..................................................................................................... 37 3.6.6 Pembuatan reagen semprot .............................................................................. 37 3.6.6Uji Mortalitas nyamuk metode eksperimentals................................................ 39 3.7Analisa Data ............................................................................................................... 39
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ..................................... 40 4.1 Hasil pengamatan ekstraksi dan skrining fitokimia .................................................... 41 4.1.1 Hasil skrining foitomikia ......................................................................................... 41 4.3 Hasil uji mortalitas ekstrak daun bintaro terhadap nyamuk aedes aegpthy ................ 45 4.4 Analisa data..................................................................Error! Bookmark not defined.
BAB V PENUTUP ............................................................................................... 50 5.1 Kesimpulan ................................................................................................................. 50 5.2 Saran ........................................................................................................................... 50
DAFTAR RUJUKAN ......................................................................................... 51 LAMPIRAN-LAMPIRAN ................................................................................. 52
ii
KATA PENGANTAR
Puji syukur ke hadirat ALLAH SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah yang berjudul “keefektifan ekstrak etanol daun bintaro (cerbera manghas) terhadap nyamuk aedes aegypti ” ini tepat pada waktunya. Tujuan penulis Karya Tulis Ilmiah ini sebagai persyaratan untuk menyelesaikan D-3 di Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang. Sehubungan dengan terselesaikannya penulisan Karya Tulis Ilmiah ini, saya mengucapkan terima kasih kepada pihak-pihak sebagai berikut: 1. Ibu Dra. Wigang Soelandjari, M.Si., selaku Direktur Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang. 2. IbuAyu Ristamaya Yusuf, Amd.,ST. selaku Dosen Pembimbing. 3. IbuMisgiati, M.pd. selaku Dosen Penguji. 4. Ibu Dra. Wigang Soelandjari, M.Si.,selaku Dosen penguji. 5. Bapak dan Ibu Dosen Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang beserta staf. 6. Orang tua tercinta yang telah memberikan dorongan secara spiritual maupun materil serta restunya dalam menuntut ilmu. 7. Rekan-rekan mahasiswa dan semua pihak yang langsung/ tak langsung telah memberikan bimbingan, bantuan, serta arahan kepada penulis. Penulis menyadari bahwa dalam penulisan Karya Tulis Ilmiah ini mempunyai beberapa kekurangan. Oleh karena itu, saran-saran akan sangat diharapkan. Semoga Karya Tulis Ilmiah ini bermanfaat.
Malang, Juli 2016
Penulis
iii
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Musim hujan merupakan kondisi yang tepat bagi nyamuk untuk mudah berkembang biak.Setelah hujan banyak ditemui genangan air.Genangan air merupakan habitat yang disukai oleh nyamuk.Oleh karenanya banyak orang terserang gigitan nyamuk.Gigitan nyamuk memberikan efek antara lain rasa gatal,iritasi bahkan penyakit yang lebih berbahaya misalnya demam berdarah. Rasa gatal disebabkan ketika nyamuk hinggap pada tubuh mangsanya, ia akan segera menempelkan proboscis-nya pada kulit. Proboscis adalah alat yang berfungsi untuk menghisap darah mangsanya. Proboscis ini mirip jarum, sangat halus dan berukuran lebih panjang dari ukuran kepalanya. Pada proboscis ini terdapat alat tajam seperti pisau yang dapat merobek kulit maju-mundur hingga menemukan pembuluh darah.Ketika nyamuk menghisap darah manusia dengan proboscis-nya, pada saat yang sama nyamuk juga menyuntikkan air liurnya. Air liur ini mengandung zat-zat yang berfungsi sebagai zat antikoagulan (zat anti pembekuan darah), sehingga nyamuk bisa menghisap darah dengan cepat, karena darah tetap encer.(sumber:healthcarediseases.com) Dalam menanggulangi gigitan nyamuk masyarakat biasanya menggunakan cara tradisional seperti penggunaan kelambu di tempat tidur.penggunaan kelambu memiliki manfaat dalam melindungi dari gigitan nyamuk karena ukuran lubang
1
2
dalam kain kelambu sangat kecil sehingga nyamuk tidak dapat masuk dan tidak memiliki efek samping untuk kesehatan.Namun penggunaan kelambu tidak efisien dalam penggunaan misalnya
sebelum memasang kelambu harus
memastikan nyamuk tidak ada yang terperangkap didalamnya,dan tidak bisa diaplikasikan dimanapun. saat ini sudah banyak cara modern dan efisien untuk menghindari gigitan nyamuk seperti penggunaan antinyamuk semprot dengan berbagai macam aroma serta keefisienannya yang mampu mengusir nyamuk dengan cepat.Namun Penggunaan yang secara terus menerus dapat menyebabkan terakumulasinya bahan aktif DEET(diethyltoluamide). Akumulasi bahan aktif ini dapat menyebabkan gangguan pernapasan seperti sesaf nafas, dan alergi pada kulit untuk menghindari efek negatif dari senyawa DEET yang terdapat dalam antinyamuk semprot banyak penelitian yang telah dilakukan terhadap bahanbahan alam yang berpotensi sebagai antinyamuk.Beberapa tanaman yang diketahui memiliki kemampuan untuk mengusir nyamuk antara lain daun legundi,bunga lavender,serai,daun sambiloto dan bintaro.
Daun legundi
mengandung champene, pinene, alkaloid, terpenoid, saponin, dan sineol yang mempunyai aktivitas antinyamuk pada konsentrasi 41,423% (Maia:2011).Pada tanaman lavender kandungan zat linalool dan lynalyl acetate pada lavender dan serai yang tidak disukai nyamuk sehingga mampu sebagai antinyamuk (Bian Rahmadi Medikanto, dkk:2011). Namun minyak atsiri yang terkandung tanaman diatas ini hanya sampai batas pengusir nyamuk, sehingga dibutuhkan penggaanti senyawa DEET secara alami agar tidak memiliki efek samping bagi kesehatan.
3
Salah satu tumbuhan yang diduga memiliki senyawa aktif yang bersifat beracun adalah tumbuhan bintaro. Bintaro (Cerbera manghas). C. manghasatau yang biasa dikenal oleh masyarakat dengan sebutan Bintaro saat ini banyak digunakan untuk penghijauan atau sekaligus sebagai penghias kota, sehingga C. manghasmasih belum banyak dimanfaatkan dan nilai ekonomis dari C. manghasmasih rendah. Namun sudah ada beberapa penelitian tentang tanaman dari genus Cerbera. Menurut penelitian (Yan, dkk: 2011) menyatakan bahwa tanaman dari genus Cerbera berpotensi sebagai
antifungi
,insektisida,
antioksidatif,
dan
antitumor.
Cerbera
manghasdapat memberi efek signifikan terhadap mortalitas rayap tanah (Coptotermes sp.) dengan konsentrasi ekstrak sebesar 10%. (Tarmadi, D., AH. Prianto, dkk:2007). Ekstraksi biji bintaro memiliki kandungan senyawa cenberin sebagi larvasida pada larva nyamuk aedes aegypti
yang didapatkan pada
konsentrasi 2% ekstrak mampu membunuh larva nyamuk aedes aegypti.(yoga eka prayuda: 2014) . Pada penelitian yang lain juga menyatakan bahawa konsentrasi ekstrak daun Bintaro (Cerbera manghas) yang ditambahkan pada pakan (daun cabai rawit) yang dapat menghambat pertumbuhan dan perkembangan S. litura F(ulat gryak)
yang paling efektif adalah konsentrasi 2% (Nur Alindatus
Sa’diyah:2013).Namun belum ada penelitian yang menggunakan ekstrak daun bintaro sebagai antinyamuk. Daun bintaro selama ini belum dimanfaatkan oleh masyarakat selain sebagai tumbuhan perdu di tepi jalan, dari bagian tumbuhan yang banyak jumlahnya adalah pada bagian daun,sehigga diharapkan nanti jika penelitian ini mampu membuktikan bahwa daun bintaro dapat membunuh nyamuk aedes aegpty
4
masyarakat dapat dengan mudah mengolah daun binatro tanpa harus menunggu berbuah karena sebagian besar tumbuhan jumlah yang paling banyak adalah pada bagian daun. Berdasarkan latar belakang diatas peneliti bermaksud melakukan pengujian terhadap keefektifan ekstrak etanol daun bintaro sebagai antinyamuk pada berbagai konsentrasiyaitu 0,289 gram/100ml, 0,57292 gram/100ml, dan 1,1584 gram/100ml terhadap mortalitas nyamuk.
1.2 Rumusan Masalah 1.2.1
Apakah terdapat pengaruh ekstrak etanol daun bintaro terhadapmortalitas nyamuk ?
1.2.2 berapakah LC50dari ekstrak etanol daun bintaro dalam mematikan nyamuk aedes aegpty dalam waktu 24 jam? 1.3 Tujuan Penelitian 1.3.1
Untuk mengkaji ekstrak etanol dari daun bintaro sebagai alternatif antinyamuk alami.
1.3.2
Untuk mengkaji keefektifan ekstrak etanol daun bintaro dari berbagai konsentrasi
1.4 Ruang lingkup dan ketrbatasan masalah Ruang lingkup dalam penelitian ini,yaitu:ekstraksi dan menggunakan pelarut etanol dengan metode maserasi.uji efektifitas ekstrak menggunakan hewan uji nyamuk.pengumpulan daun bintaro dari daerah sekitar kota
5
malang.Daun bintaro yang diperoleh kemudian dengan cara di ekstraksi metode maserasi menggunakan penyari etanol,selanjutnya ekstrak di pekatkan menggunakan rotary evaporator untuk mendapat ekstrak kental. dengan mengamati mortalitas(kematian) nyamuk pada konsentrasi 0,289 gram/100ml, 0,57292 gram/100ml, dan 1,1584 gram/100ml.Dan dilakukan uji skrining fitokimia . keterbatasan dalam penelitian ini,meliputi:daun bintaro diambil di kawasan jalanan kota malang,daun yang digunakan tidak memperhitungkan umur tumbuhan
dan
waktu
panen,sampel
yang
digunakan
untuk
uji
aktivitasmortalitas adalah ekstrak kental yang di encerkan pada konsentrasi 0,289 gram/100ml, 0,57292 gram/100ml, dan 1,1584 gram/100ml, nyamuk yang digunakan berumur 3-4 hari setelah menjadi nyamuk dewasa.Tidak dilakukan isolasi senyawa yang terdapat pada ekstrak.
6
1.5 Defenisi istilah dan singkatan 1.uji keefektifan terhadapmortalitas nyamukadalah metode yang digunakan untuk mengukur kematian nyamuk aedes segyptidalam waktu yang di tentukan karena adanya senyawa toksik. 2. Bintaro (Cerbera manghas) Bintaro merupakan bagian dari ekosistem hutan mangrove. Tanaman bintaro banyak terdapat disekitar wilayah pesisir pantai. Bintaro termasuk dalam suku Apocynaceae yakni berkerabat dengan kamboja, cirinya jika dilukai pasti banyak mengeluarkan getah susu. Nama lainnya adalah Pong-pong tree atau Indian sucide tree termasuk tumbuhan berbahaya karena mengandung racun.. 3.LC50 (Median
Lethal
Concentration) yaitu konsentrasi
yang menyebabkan
kematiansebanyak 50% dari organisme uji yang dapat diestimasi dengan grafik dan perhitungan, padasuatu waktu pengamatan tertentu. 4.Mortalitas adalah kematian suatu nyamuk pada suatu populasi yang ditandai tidak adanya aktivitas nyamuk selama hitungan waktu yang lama.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tumbuhan Bintaro (Cerbera manghas). 2.1.1 Morfologi Tumbuhan. Bintaro adalah tumbuhan (pohon) bernama latin Cerbera manghas, merupakan bagian dari ekosistem hutan mangrove. Tanaman bintaro banyak terdapat disekitar wilayah pesisir pantai. Bintaro termasuk dalam suku Apocynaceae yakni berkerabat dengan kamboja, cirinya jika dilukai pasti banyak mengeluarkan getah susu. Nama lainnya adalah Pong-pong tree atau Indian sucide tree termasuk tumbuhan berbahaya karena mengandung racun.Bintaro dikenal sebagai salah satu tanaman tahunan yang banyak digunakan untuk penghijauan, penghias kota, pestisida nabati, dan sekaligus sebagai bahan baku kerajinan bunga kering. Seluruh bagian tanaman bintaro beracun karena mengandung senyawa golongan alkaloid yang bersifat repellent dan antefeedan. Buah Bintaro mengandung racun cerberrin yang sangat bersifat mematikan. Cerberrin juga bersifat racun kuat, jika tertelan menyebabkan denyut jantung berhenti. Buah bintaro berbentuk bulat, berwarna hijau ketika masih muda dan berwarna merah ketika sudah masak. Buah bintaro terdiri dari tiga lapis yakni bagian terluar adalah lapisan kulit, lapisan kedua merupakan daging buah yang berbentuk seperti sabut kelapa, dan bagian paling dalamnya adalah biji yang ukurannya cukup besar sebesar biji buah mangga. Buah bintaro terdiri atas 8% biji
7
8
dan 92% daging buah. Bijinya sendiri terbagi dalam cangkang 14% dan daging biji 86%. Daunnya berbentuk bulat telur, berwarna hijau tua, yang tersusun berselingan. Daun dari buah bintaro ini tumbuh memanjang ke atas, penampakan tumbuhan buah bintaro sangat indah dan menarik. Pohon bintaro memiliki bunga yang tumbuh pada ujung pedikal simosa dengan warna kuning pada bagian korola yang berbentuk tabung dan berpetal lima.
gambar 2.3 Tumbuhan Bintaro(cenbera manghas) 2.2 Manfaat Bagian Tumbuhan Bintaro Bintaro memiliki manfaat sebagai berikut: a) Akar Akar tanaman bintaro digunakan sebgai obat pencahar b) Kulit batang Kulit pohon yang tua untuk pencahar.kandungan kimia pada kulit batang bintaro adalah flavonoid dan steroid. c) Getah
9
jika cabang-cabangnya dirusak,keluarlah getah yang berlimpah.Getah dari cabang ini digunakan sebagai pencahar dan untuk mengobati sengatan ikan swanggi. d) Daun Daun bintaro mengandung flavonoid,steroid, dan saponin. Daun muda oleh suku Ambon dimasak sebagai sayur, karena memiliki khasiat pencahar yang lunak.Ekstrak methanol daun bintaro mengandung 17Hneriifolin, yang dapat melawan sel kanker payudara dan ovarium, sehingga berpotensi untuk dikembangkan lebih lanjut. e) Biji Biji bintaro merupakan satu-satunya bagian dari bintaro yang paling beracun, berbahaya bagi manusia . oleh suku maluku beranggapan bahwa biji bintaro dapat menyebabkan sesak nafas yang berat karena mengandung lukosida/alkaloid.
2.3 Metabolit sekunder. Istilah bahan alam menurut Cannell (2008:1-2) merupakan suatupenamaan yang kurang tepat. Secara langsung, semua molekul biologi adalahsuatu bahan alam, tetapi dalam konteks bahan alam ini hanyalah senyawametabolit sekunder saja. Senyawa metabolit sekunder merupakan molekul kecilyang dihasilkan oleh suatu organisme tetapi tidak secara langsung dibutuhkandalam mempertahankan hidupnya, tidak seperti protein, asam nukleat, danpolisakarida yang merupakan komponen dasar untuk proses kehidupan.
10
Metabolitsekunder merupakan kelompok metabolit yang sangat luas, dengan perbedaanyang tidak terlalu terlihat, dan dikelompokkan dengan berbagai macam definisi.Isolasi bahan alam berbeda dengan cara isolasi makromolekul biologi yang umumkarena lebih kecil dan secara kimia lebih beragam daripada protein, asam nukleat, dan polisakarida yang relatif homogen. Sehingga teknik isolasi harus benar-benardiperhatikan. Kelompok senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam daun bintaro diantaranya adalahflavonoid, steroid, dan saponin. a. Terpenoid Terpenoid merupakan komponen yang biasa ditemukan dalam minyakatsiri. Sebagian besar terpenoid mengandung atom karbon yang jumlahnyamerupakan kelipatan lima. Terpenoid mempunyai kerangka karbon yang terdiridari dua atau lebih unit C5 yang disebut unit isopren (Sjamsul, 1986: 3).Berdasarkan jumlah atom C yang terdapat pada kerangkanya, terpenoid dapatdibagi menjadi hemiterpen dengan 5 atom C, monoterpen dengan 10 atom C,seskuiterpen dengan 15 atom C, diterpen dengan 20 atom C, triterpen dengan 30atom C, dan seterusnya sampai dengan politerpen dengan atom C lebih dari 40. Beberapa contoh senyawaterpenoid diberikan pada Gambar
11
Biosintesis
dari
terpenoid
pada
tumbuhan
mengikuti
jalur
asam
asetatmevalonat.Asam asetat yang diaktifkan dengan koenzimA membentuk asetilCoA dan melakukan reaksi kondensasi dengan asetilCoA yang lain sehingga terbentuk asetoasetilCoA. AsetosetilCoA yang terbentuk juga berkondensasi dengan unit asetilCoA yang lain, sehingga terbentuk tiga unit gabungan dari asetilCoA yang selanjutnya diprotonasi membentuk asam mevalonat. Dengan adanya pirofosfat pada asam mevalonat dapat terjadi pelepasan komponen CO2 (dekarboksilasi) dan pelepasan OPP- membentuk isopentenil pirofosfat (IPP) dengan isomernya dimetilalil pirofosfat (DMAPP) (Sjamsul, 1986: 7; Dewick, 2009: 40 & 188). b.Flavonoid Flavonoid merupakan salah satu kelompok senyawa bahan alam yang banyak ditemukan pada tumbuhan. Flavonoid pada umumnya mempunyai kerangka flavon C6-C3-C6, dengan tiga atom karbon sebagai jembatan antara gugus fenil yang biasanya juga terdapat atom oksigen. Berdasarkan pada tingkat ketidakjenuhan dan oksidasi dari segmen karbon, flavonoid selanjutnya dibagi menjadi beberapa kelas seperti pada Gambar 6. Senyawa ini biasanya terdapat sebagai pigmen tumbuhan untuk menarik pollinators, atau sebagai bahan pertahanan bagi tumbuhan untuk melawan serangga dan mikroorganisme (Rosa:2010: 132)
12
Isoflavon :
gambar 2.4 struktur isoflavon. Senyawa isoflavon merupakan senyawa metabolit sekunder yang banyak disintesa oleh tanaman. Namun, tidak sebagai layaknya senyawa metabolit sekunder karena senyawa
ini
tidak
disintesa
oleh
mikroorganisme.
Dengan
demikian,
mikroorganisme tidak mempunyai kandungan senyawa ini. Oleh karena itu, tanaman merupakan sumber utama senyawa isoflavon di alam. Di berbagai antara tanaman, Isoflavon merupakan senyawa tidak berwarna yang terdapat dalam spesies dari familia Leguminoceae. Senyawa ini diproduksi oleh transposisi 1,2 cincin aromatik B dari intermediet flavonoid.Isoflavon termasuk dalam golongan
13
flavonoid (1,2-diarilpropan) dan merupakan bagian kelompok yang terbesar dalam golongan tersebut. c.Alkaloid Alkaloid juga banyak terdapat dalam tumbuhan, khususnya padaAngiospermae (lebih dari 20% dari semua spesies menghasilkan alkaloid).Alkaloid umumnya hanya sedikit terdapat pada tumbuhan Gymnospermae,lycopodium, Equisetum, jamur, dan alga. Alkaloid juga dapat ditemukan pada16bakteri, jamur, binatang laut, antropoda, amphibi, pada sejumlah burung, danmamalia. Alkaloid sangat penting bagi organisme yang memproduksinya. Satufungsi utamanya adalah sebagai pelindung dan untuk melawan herbivora maupunpredator. Beberapa alkaloid bersifat sebagai antibakteri, antijamur, dan antiviral;dan konstituennya mungkin saja menyebabkan keracunan bagi hewan (Fattorusso, dkk:2008).Alkaloid
biasanya
dikelompokkan
berdasarkan
bentuk
cincin
heterosikliknitrogen yang terdapat di dalamnya (Gambar 8), sebagai contoh pirolidin,piperidin, quinolin, isoquinolin, indol (Syamsul:1986). Atom nitrogen padaalkaloid berasal dari asam amino, dan pada umumnya struktur kerangka karbonpada asam amino prekusor akan bertahan ketika dalam bentuk alkaloid. Prekusorasam amino yang berhubungan dengan biosintesis alkaloid antara lain adalahornitin, lisin, asam nikotinoat, tirosin, triptopan, asam antranilat, dan histidin(Dewick, 2009: 311).
14
Gambar jenis-jenis alkaloid
gambar 2.3 senyawa cerberin Merupakan senyawa monoasetil golongan alkaloid atau glikosida yang dianggat dapat berperan terhadap kematian larva.
d.Saponin
15
Saponin adalah suatu glikosida alamiah yang terikat dengan steroid atau triterpena. Saponin mempunyai aktifitas farmakologi yang cukup luas diantaranya meliputi: immunomodulator, anti tumor, anti inflamasi, antivirus, anti jamur, dapat membunuh kerang-kerangan, hipoglikemik, dan efek hypokholesterol. Saponin juga mempunyai sifat bermacam-macam, misalnya: terasa manis, ada yang pahit, dapat berbentuk buih, dapat menstabilkan emulsi, dapat menyebabkan hemolisis. Dalam pemakaiannya saponin bisa dipakai untuk banyak keperluan, misalnya dipakai untuk membuat minuman beralkohol, dalam industri pakaian, kosmetik, membuat obat-obatan, dan dipakai sebagai obat tradisional. Biarpun saponin bisa diisolasi dari binatang tingkat rendah, sebenarnya saponin ditemukan terutama dalam tumbuh-tumbuhan. Namanya diambil dari Genus suatu tumbuhan yaitu Saponaria, akar dari famili Caryophyllaceae dapat dibuat sabun. Saponin juga bisa didapatkan dalam beberapa famili tumbuhan yang lain.
gambar 2.3.2 struktur saponin. 2.4Nyamuk A. Taksonomi / Klasifikasi 1. Klasifikasi Kingdom : Animalia Philum : Anthrophoda Sub Philum : Mandibulata
16
Kelas : Insecta Ordo : Diptera Sub ordo : Nematocera Familia : cilicidae Ordo diptera ini mempunyai 2 sayap (di=dua, ptera=sayap), yang terdapat pada mesothorax dan terdapat juga sayap yang rudimenter berfungsi sebagai alat keseimbangan (haltera). Metamorfosis lengkap : telur – larva – pupa – dewasa. B. Morfologi Nyamuk Nyamuk dapat berperan sebagai vektor penyakit pada manusia dan binatang. Pada nyamuk betina, bagian mulutnya membentuk probosis panjang untuk menembus kulit manusia maupun binatang untuk menghisap darah. Nyamuk betina menghisap darah untuk mendapatkan protein untuk pembentukan telur yang diperlukan. Nyamuk jantan berbeda dengan nyamuk7betina, dengan bagian mulut yang tidak sesuai untuk menghisap darah. (Spielman:2001) Pada stadium dewasa nyamuk dapat dibedakan jenisnya misalkan nyamuk kulicini betina palpinya lebih pendek daripada probosisnya. Sedangkan pada nyamuk kulicini jantan palpinya melebihi panjang probosisnya. Sisik sayapnya ada yang lebar dan asimetris (mansonia) ada pula yang sempit dan panjang (Aedes, Culex) . Kadang-kadang sisip sayap membentuk bercak-bercak berwarna putih dan kuning atau putih dan cokelat, juga putih hitam (speckled). Ujung abdomen Aedes lancip (pointed) sedangkan ujung abdomen Mansonia seperti (truncated).
tumpul
dan terpancung
17
Gambar 2.1 : Morfologi Nyamuk.
C.Nyamuk Sebagai Vektor Nyamuk termasuk jenis serangga dalam ordo diptera, dari kelas insecta. Nyamuk mempunyai dua sayap bersisik, tubuh yang langsing dan enam kaki panjang. Antar spesies berbeda-beda tetapi jarang sekali panjangnya melebihi 15 mm. (Levine:1994) Nyamuk mengalami empat tahap dalam siklus hidup yaitu telur, larva, pupa dan dewasa. Nyamuk menghisap darah bukan untuk mendapatkan makanan melainkan untuk mendapatkan protein yang terdapat dalam darah sebagai nutrisi telurnya. Nyamuk jantan dan betina hanya memakan cairan nektar bunga, sedangkan nyamuk menghisap darah demi kelangsungan spesiesnya (Spielman:2001). Seekor nyamuk jantan telah cukup dewasa untuk kawin akan menggunakan antenanya (organ pendengar) untuk menemukan nyamuk betina. Fungsi antena nyamuk jantan berbeda dengan nyamuk betina. Bulu tipis di ujung antenanya sangat peka terhadap suara yang dipancarkan nyamuk betina. Tepat di sebelah organ seksual nyamuk jantan, terdapat anggota tubuh yang membantunya mencengkram nyamuk betina ketika mereka melakukan perkawinan di udara. Nyamuk jantan terbang berkelompok, sehingga terlihat seperti awan. Ketika seekor betina memasuki kelompok tersebut, nyamukjantan berhasil mencengkram nyamuk betina dan akan melakukan perkawinandenganya selama
18
penerbangan. Perkawinan tidak berlangsung lama dan nyamuk jantan akan kembali ke kelompoknya setelah melakukan perkawinan. Sejak saat itu, nyamuk betina memerlukan darah untuk perkembangan telurnya. D. Siklus Hidup Nyamuk. Fase perkembangan nyamuk dari telur hingga dewasa sangat menakjubkan. Telur nyamuk biasanya diletakan di atas daun lembab atau kolam kering selama musim panas atau musim gugur. Sebelumnya si induk memeriksa permukaan tanah secara menyeluruh dengan reseptor halus dibawah perutnya reseptor ini berfungsi sebagai sensor suhu dan kelembaban. Setelah menemukan tempat yang cocok nyamuk mulai bertelur. Telur-telur tersebut panjangnya kurang dari 1mm,tersusun dalam satu baris secara berkelompok atau satu-satu. Beberapa spesies nyamuk meletakan telurnya saling bergabung membentuk suatu rakit yang bisa terdiri dari 300 telur. Telur berwarna putih dan tersusun rapi segera menjadi gelapwarnanya, lalu menghitam dalam beberapa jam. Warna hitam ini memberikan perlindungan bagi larva agar tidak terlihat oleh burung atau serangga lain. Selain telur warna kulit sebagian larva juga berubah sesuai dengan lingkungan sehingga mereka lebih terlindungi. Setelah masa inkubasi, (musim dingin) larva mulai keluar dari telur secara hampir bersamaan. Larva yang terus menerus makan, tumbuh dengan cepat. Kulit mereka menjadi sempit, sehingga tidak bisa tumbuh menjadi lebih besar lagi, lalu melakukan pergantian kulit yang pertama. Pada tahap ini kulit yang keras dan rapuh mudah pecah. Larva nyamuk berganti kulit dua kali sampai selesai berkembang. Larva membuat pusaran kecil di dalam air dengan menggunakan dua anggota badan yang berbulu dan mirip kipas angin. Pusaran ini membuat bakteri atau
19
mikroorganisme mengalir ke mulut. Sambil bergantung di dalam air,larva bernafas melalui pipa udara yang mirip “snorkel” yang digunakan para penyelam. Tubuhnya mengeluarkan cairan kental yang mencegah masuknya air ke lubang yang digunakan untukbernafas. Jika tidak memiliki pipa udara, ia tidak akan mampu bertahan hidup.Pergantian yang terakhir agak berbeda dengan sebelumnya. Pada tahap ini larva memasuki tahap pendewasaan yaitu kepompong, kepompong menjadi sangat sempit sehingga saatnya larva keluar dari kepompong. Selama tahap terakhir larva menghadapi bahaya terputusnya pernafasan, sebab lubang pernafasannya yang mencapai permukaan air melalui pipa air akan tertutup. Sejak tahap ini pernafasan tidak lagi menggunakan lubang melainkan melalui dua pipa yang baru saja muncul pada bagian depan tubuhnya. Oleh Karena itu pipa-pipa tersembul dipermukakan air sebelum pergantian kulit. Nyamuk dalam kepompong menjadi dewasa. Siap terbang lengkap dengan semua organ dan organelnya, seperti antena, tubuh, kaki, dada,sayap, perut, dan matanya. Waktu yang diperlukan nyamuk untuk pertumbuhan dari telur sampai menjadi dewasa lebih pendek (1-2 minggu) tempat perindukan nyamuk dapat di air jernih dan air keruh. Ada beberapa ntyamuk yang mempunyai kebiasaanmenggigit pada malam hari saja (culex) ada yang pada siang hari (Aedes) dan ada yang pada siang dan malam hari (Mansonia). Umur nyamuk dapat bertahan selama lebih dari dua minggu. (Gandahusada,2001) E. Jenis Nyamuk Berdasarkan klasifikasinya nyamuk dapat dibedakan jenisnya dilihat dari perbedaan bentuk morfologi nyamuk dewasa, diantaranya :
20
1. Aedes aegypti Nyamuk Aedes aegypti dapat menularkan penyakit demam berdarah dengue (DBD) melalui tusukanya. Nyamuk ini berwarna gelap yang dapat diketahui dari adanya garis putih keperakan dengan bentuk lyre pada toraknya dan mempunyai gelang putih pada bagian pangkal kaki,proboscis bersisik hitam. (Suroso Thomas,1998). a. Klasifikasi : Pylum : Arthropoda Kelas : Aceloterata Class : Insekta Ordo : Diptera Genus : Aedes b. Ciri-ciri nyamuk Aedes aegypti : 1) Bentuk tubuh kecil dan dibagian abdomen terdapat bintik-bintik serta berwarna hitam. 2) Pada sayap aedes memiliki sisik sempit panjang dengan ujung yang runcing 3) Aedes dewasa memiliki abdomen dengan ujung lancip, warna hitam dengan belang putih pada abdomen dan kaki. 4) Tidak membentuk sudut 90º 5) Penyebaran penyakitnya yaitu pagi atau sore 6) Hidup di air bersih serta ditempat-tempat lain yaitu kaleng-kaleng bekas yang bisa menampung air hujan7) Penularan penyakit dengan cara membagi diri.
21
8) Menyebabkan penyakit DBD.
2. Culex Nyamuk dewasa dapat berukuran 4 – 10 mm (0,16 – 0,4 inci). Dan dalam morfologinya nyamuk memiliki tiga bagian tubuh umum: kepala, dada, dan perut. Nyamuk Culex yang banyak di temukan di Indonesia yaitu jenis Culex quinquefasciatus. a. Klasifikasi Phylum : Arthropoda Class : Insecta Ordo : Diptera Family : Culicidae, Genus : Culex; b. Ciri-ciri Culex : 1) Culex betina memiliki antena berambut jarang (pilose) palpus lebih pendek daripada probocsis. 2) Culex jantan memiliki antena berambut lebat (plumose), palpus sama atau melebihi panjang proboscis. 3) Palpi lebih pendek dari pada probocis. 4) Bentuk sayap simetris. 5) Berkembang biak di tempat kotor atau di rawa-rawa. 6) Penularan penyakit dengan cara membesarkan tubuhnya. 7) Menyebabkan penyakit filariasis8) Warna tubuhnya coklat kehitaman
22
3. Mansonia Nyamuk dewasa berwarna coklat kekuning-kuningan dan belang-belang putih Ada gambaran dua garis atau bundaran yang bewarna putih. a. Klasifikasi Phylum : Arthropoda Kelas : Insecta Ordo : Diptera Genus : Mansonia b. Ciri-ciri nyamuk Mansonia 1) Pada saat hinggap tidak membentuk sudut 90º 2) Bentuk tubuh besar dan panjang 3) Bentuk sayap asimetris. 4) Menyebabkan penyakit filariasis 5) Penularan penyakit dengan cara membesarkan tubuhnya. 6) Warna tubuhnya coklat kehitaman.
4. Anopheles Hewan yang termasuk dalam kelas Hexapoda (insektor) mempunyai satu pasang antena dan tiga pasang kaki. Dalam daur hidupnya terjadi beberapa perubahan yaitu perubahan bentuk,perubahan sifat hidup dan perubahan struktur bagian dalam insekta atau juga metamorfosis. a. Klasifikasi Pylum : Arthropoda Kelas : Hexapoda
23
Ordo : Diptera Genus : Anopheles b. Ciri-ciri nyamuk Anopheles 1) Kepala anophelni jantan memiliki antena yang berambut lebat (plumose), palpus terdiri atas probosis dengan ujung agak bulat. 2) Kepala betina memiliki venasi sayap kosta dan subkosta. 3) Bentuk tubuh kecil dan pendek 4) Antara palpi dan proboscis sama panjang 5) Menyebabkan penyakit malaria 6) Pada saat hinggap membentu sudut 90º 7) Warna tubunya coklat kehitaman 8) Bentuk sayap simetris,bercak dan sisik gelap terang. 9) Berkembang biak di air kotor atau tumpukan sampah Banyak cara yang dilakukan masyarakat untuk mengusir serangan nyamuk mulai cara alami seperti penggunaan kelambu nyamuk, penanaman tumbuhan yang dipercaya mampu mengusir nyamuk seperti bunga lavender,sereh, dll hingga cara yang
paling
ampuh
dengan
menggunakan
antinyamuk
bakar
hingga
semprot.Namun penggunaan antinyamuk berbahan pestisida dapat menimbulkan efek negatif bagi kesehatan dalam jangka waktu panjang.
2.2Antinyamuk Dan Bahayanya. Banyak sekali jenis produk pestisida rumah tangga atau lebih dikenal sebagai obat nyamuk, seperti produk pengusir nyamuk dalam bentuk semprotan, bakar, elektrik. Prinsip utama yang harus diingat dalam menyikapi penggunaan pestisida
24
rumah tangga adalah semua pestisida merupakan racun dan semua racun pasti berbahaya. DEET (Diethyltoluamide) merupakan bahan aktif yang paling banyak dan sering digunakan untuk repellent di Indonesia. Selain DEET, umumnya repellent mengandung bahan kimia sintetis yang dapat menolak nyamuk untuk mendekati kulit.
Bahan
kimia
lain
yang
juga
digunakan
diantaranya
adalah
permetrin,picaridin. Selain itu ada juga bahan yang berasal dari tumbuhan seperti citronella, cedar, verbena, pennyroyal, geranium, lavender, bawang putih, pine (cemara) dll. Repellent dikenal sebagai salah satu jenis pestisida rumah tangga yang digunakan untuk melindungi tubuh (kulit) dari gigitan nyamuk. Sekarang ini, orang lebih mengenalnya sebagai lotion anti nyamuk. Sebenarnya produk repellent tidak hanya berbentuk lotion, ada juga yang berbentuk spray (semprot). Sehingga cara penggunaannya adalah dengan mengoleskan atau menyemprot kan bahan tersebut ke kulit. 2.2.1 Cara kerja repellent menolak nyamuk Nyamuk memiliki kemampuan untuk mencari mangsa dengan mencium bau karbondioksida, asam laktat dan bau lainnya yang berasal dari kulit yang hangat dan lembab. Nyamuk sangat sensitif dengan bahan kimia tersebut, sehingga dapat mendeteksi darah yang merupakan makanannya dengan jarak 2,5 meter. Umumnya repellent termasuk DEET akan memanipulasi bau dan rasa yang berasal dari kulit dengan menghambat reseptor asam laktat pada antena nyamuk sehingga mencegah nyamuk mendekati kulit.
25
Serangga mendeteksi bebauan yang ditimbulkan ketika bau senyawa yangmudah menguap berikatan dengan protein reseptor bau (odorant receptorproteins) yang terdapat pada dendrit bersilia dari specialized odour receptorneurons (ORNs) yang terpapar dengan lingkungan luar, seringkali terdapat padaantena dan palpus maksilaris pada serangga, dan beberapa ORNs, seperti OR83byang penting dalam proses penghiduan dan dimana reseptor tersebut dihambatoleh repellent sintetik standar DEET (N, N-diethyl-3-methylbenzamide).Menariknya, odour receptors yang berespon terhadap DEET juga dapat beresponterhadap eucalyptol dan linalool pada Culex quinquefasciatus. Pada Anophelesgambiae, reseptor DEET OR83b juga dapat distimulasi olehcitronellal.Bagaimanapun, banyak tanaman mengandung senyawa volatile yang dapatbertindak sebagai penolak atau repellent serangga. Senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid,flavonoid dan saponin dapat menghambat proses terjadinya molting pada serangga.Tanin juga dapat menganggu proses pencernaan pada serangga karena menganggu pertumbuhan dan perkembangan karena kurangnya nutrisi yang dibutuhkan terutama protein.hal ini terjadi karena tanin dapat menurunkan aktifitas enzim digestif seperti protase dan amilase.oleh karena itu senyawa yang terkandung dalam tumbuhan bintaro dapat berpotensi sebagai antireplant. 2.2.2 DEET DEET merupakan amida aromatik yang efektif untuk digunakan pada produkrepellent, juga dikenal sebagai N,N-diethyl-meta-toluamide atau m-DET. DEETsangat larut dalam pelarut benzen, etil eter dan etanol, pertamakali
26
dikembangkan oleh tentara Amerika pada tahun 1946 dan mulai digunakan secara luas oleh masyarakat pada tahun 1957. Konsentrasi DEET pada sebuah produk mengindikasikan seberapa lama waktu efektifnya produk tersebut. Konsentrasi yang lebih tinggi menunjukkan produk tersebut
efektif
untuk
periode
waktu
yang
lebih
lama.
Misalnya
produkmengandung ≤10% akan efektif selama 2 jam, sedangkan produk denganpersentase yang lebih tinggi akan bertahan dua kali lebih lama.Untuk itu, produk dengan konsentrasi DEET lebih rendah memerlukanpengolesan berulang karena lama kerjanya lebih pendek. Namun, hal ini jugadipengaruhi dari lamanya waktu seseorang berada di luar rumah. Selain itu, jenisaktifitas tertentu menuntut seseorang untuk mengoleskan kembali produkrepellent, sebagai contoh DEET akan tercuci setelah berenang atau melakukanaktifitas yang mengeluarkan keringat berlebih. DEET
diserap
kulittergantung
kedalam dari
tubuh
konsentrasi
melalui dan
kulit.
pelarut
Penyerapannya dalam
formulasi
melalui produk
repellenttersebut. Suatu hasil penelitian menyebutkan bahwa konsentrasi DEET sebesar15% dalam etanol akan diserap kedalam tubuh, rata-rata 8,4%. Penyerapannyakedalam tubuh akan dimulai dalam 2 jam setelah penggunaan secara topikal.Penyerapan DEET juga tergantung pada umur dan massa tubuh. Bayi yangberumur < 2 bulan memiliki rasio luas permukaan tubuh terhadap massa tubuhyang
lebih
besar
sehingga
lebih
mudah
terserap
dan
mudah
mencapaikonsentrasi plasma yang tinggi. Absorpsi juga dapat meningkat ketika digunakanpada kulit yang luka. Ketika DEET dilarutkan dalam etanol, absorbsi juga dapatmeningkat karena etanol dapat
27
meningkatkan permeabilitas kulit. Absorbsi dapatmenurun dalam keadaan berkeringat dan suhu tubuh yang tinggi.Ketika digunakan pada kulit, sebagian DEET diabsorbsi, sebagian lagi menguapatau hilang terhapus pakaian. DEET yang diabsorbsi oleh kulit masuk ke dalamjaringan lemak tetapi tidak terakumulasi dalam lapisan superfisial kulit. DEETyang terabsorbsi, kemudian akan masuk ke dalam lapisan kulit yang lebih dalam,akan mengalami metabolisme dan diekskresikan melalui urin. Semua produk yang ditujukan untuk mengendalikan nyamuk adalah racun, tidakada satupun racun yang aman. Begitupula pula dengan repellent. Kandungan repellent
seperti
DEET
merupakan
bahan
korosif.
Walaupun
telah
ditambahkandengan zat-zat lain yang berfungsi sebagai pelembab, zat ini tetap berbahaya.Penggunaan repellent hanya jika dalam keadaan benar-benar dibutuhkan danjangan digunakan pada kulit sensitif atau luka. U.S. EPA (EnvironmentalProtection Agency) mengklasifikasikan DEET dalam kategori dengan toksisitasakut yang rendah (kategori III) dan tidak bersifat karsinogen pada manusia. Toksisitas DEET tergantung dari rute paparan dan konsentrasi yang masuk ke dalamtubuh. Rute paparan yang sering terjadi pada penggunaan DEET adalah karenatertelan dan penggunaan topikal yang berlebihan. Selain itu juga dapat masukmelalui kontak dengan mata dan inhalasi (terhirup).Tertelan DEET menyebabkan gangguan pada saluran pencernaan seperti mualdan muntah (tertelan dalam jumlah kecil), biasanya bersifat reversibel. konsentrasi lebih tinggi menyebabkan hipertensi, takikardi, kejang, depresi sistem sarafpusat, letargi, ataksia, tremor, opisthotonus, hipertonia, hepatitis toksik, depresisaluran
28
pernafasan
dan
koma.
Tertelan
DEET
dengan
konsentrasi
besar
dapatmenyebabkan akibat yang fatal, terutama jika tertelan bersamaan dengan obatobatyang menekan sistem saraf pusat seperti obat-obat sedatif. Ketika digunakan secara langsung pada kulit, masalah yang sering munculadalah iritasi kulit, termasuk eritema (kemerahan pada kulit) dan pruritis (gatal).Pada saat bertugas, beberapa orang dari kalangan militer dan petugas hutansering menggunakan DEET dengan konsentrasi yang tinggi setiap hari danakibatnya mengalami efek yang parah akibat paparan dalam jangka waktu lama(kronik), seperti insomnia, kram otot, gangguan pada suasana hati (mooddisturbances) dan terbentuk ruam. Setelah penggunaan yang berulang dandalam jangka waktu lama, absorbsi melalui kulit dapat menyebabkan keracunansistemik. Hal ini terutama terjadi pada anak-anak. Kontak dengan matamenyebabkan efek yang ringan sampai sedang tetapi umumnya iritasi jangkapendek bersifat tidak permanen. Keracunan melalui inhalasi umumnya karenam produk repellent yang berbentuk spray sehingga menyebabkan iritasi saluranpernafasan atas. Untuk mengurangi dampak negatif antinyamuk berbahan pestisida yang nantinya berpengaruh bagi kesehatan maka diperlukan alternatif antinyamuk berbahan alami, salah satunya dengan memanfaatkan daun bintaro sebagai antinyamuk alami.
2.5 Ekstraksi
29
Ekstraksi adalah penyarian zat-zat aktif dari bagian tanaman obat. Adapun tujuan dari ekstraksi yaitu untuk menarik komponen kimia yang terdapat dalam simplisia. 2.5.1 Tujuan Ekstraksi Tujuan ekstraksi adalah untuk menarik semua komponen kimia yang terdapat dalam simplisia. Ekstraksi ini didasarkan pada perpindahan massa komponen zat padat ke dalam pelarut dimana perpindahan mulai terjadi pada lapisan antar muka, kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut. Secara umum, terdapat empat situasi dalam menentukan tujuan ekstraksi: 1. Senyawa kimia telah diketahui identitasnya untuk diekstraksi dari organisme. Dalam kasus ini, prosedur yang telah dipublikasikan dapat diikuti dan dibuat modifikasi yang sesuai untuk mengembangkan proses atau menyesuaikan dengan kebutuhan pemakai 2. Bahan diperiksa untuk menemukan kelompok senyawa kimia tertentu, misalnya alkaloid, flavanoid atau saponin, meskipun struktur kimia sebetulnya dari senyawa ini bahkan keberadaannya belum diketahui. Dalam situasi seperti ini, metode umum yang dapat digunakan untuk senyawa kimia yang diminati dapat diperoleh dari pustaka. Hal ini diikuti dengan uji kimia atau kromatografik yang
sesuai
untuk
kelompok
senyawa
kimia
tertentu
3. Sifat senyawa yang akan diisolasi belum ditentukan sebelumnya dengan cara apapun. Situasi ini (utamanya dalam program skrining) dapat timbul jika tujuannya adalah untuk menguji organisme, baik yang dipilih secara acak atau didasarkan pada penggunaan tradisional untuk mengetahui adanya senyawa dengan aktivitas biologi khusus. Proses pengekstraksian komponen kimia dalam
30
sel tanaman yaitu pelarut organik akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif, zat aktif akan larut dalam pelarut organik di luar sel, maka larutan terpekat akan berdifusi keluar sel dan proses ini akan berulang terus sampai terjadi keseimbangan antara konsentrasi cairan zat aktif didalam dan diluar sel . 2.6Maserasi Penyarian zat aktif yang dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari yang sesuai selama tiga hari pada temperatur kamar terlindung dari cahaya, cairan penyari akan masuk ke dalam sel melewati dinding sel. Isi sel akan larut karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan di luar sel. Larutan yang konsentrasinya tinggi akan terdesak keluar dan diganti oleh cairan penyari dengan konsentrasi rendah ( proses difusi ). Peristiwa tersebut berulang sampai terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel. Selama proses maserasi dilakukan pengadukan dan penggantian cairan penyari setiap hari. Endapan yang diperoleh dipisahkan dan filtratnya dipekatkan.
31
2.7 Kerangka konsep
bahaya gigitan nyamuk antinyamuk sintetis hanya sampai efek knockdown(pin gsan) kemudian nyamuk mampu mendetoksifikas i DEET sehingga
menyebabkan alergi seperti gatal-gatal,hingga DBD
cara pengendalian serangan nyamuk bahan alami mengandung minyak atsiri dan metabolit sekunder seperti alkaloid,flavonoid ,tanin dan saponin
bahan sintetis yang mengandung DEET
resisten.
memiliki efek negatif jangka panjang bagi kesehatan
Ramah lingkungan karena mudah didegradasi, aman untuk manusia, dan hewan
menghentikan siklus hidup nyamuk
Bahan alami sebagai alternatif
metabolit sekunder alkaloid,flavonoid,terpenoi d dan saponin
Minyak atsiri lavender,rosmery,dan sereh
daun bintaro
keefektifan minyak atsiri umumnya lebih rendah dan kerjanya lebih lambat.
flavonoid
steroid
saponin
alkaloid
Dapat menghambat pertumbuhan serangga pertumbuhan dan perkembangan karena kurangnya nutrisi yang dibutuhkan terutama protein.hal ini terjadi karena senyawa seperti saponin dapat menurunkan aktifitas enzim digestif seperti protase dan amilase. Berpotensi sebagai antinyamuk alami.
2.8 Hipotesis 1. Terdapat pengaruh pada perbedaan konsentrasi 0,289 gram/100ml, 0,57292 gram/100ml, dan 1,1584 gram/100mlekstrak etanol daun bintaro terhadap kematian nyamuk.
32
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian
Berdasarkan permasalahannya, penelitian ini dapat digolongkan dalam penelitian eksperimental yang bertujuan mengetahui keefektifan ekstrak etanol daun bintaro terhadap mortalitas nyamuk. Rancangan dalam penelitian ini meliputi determinasi tanaman bintaro ,pembuatan simplisia,ekstraksi dengan metode maserasi, evaporasi ekstrak etanol,pembuatan seri konsentrasi 0,289 gr, 0,5792, 1,1584 dan persiapan kotak media uji ukuran 25cm x 17cm x 21cm, serta perlakuan penelitian untuk melihat mortalitas nyamuk. 3.2 Populasi dan Sampel Penelitian Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak etanol daun bintaro dan sampel dalam penelitian ini adalah hasil ekstrak etanol kental dengan konsentrasi 0,289 gram, 0,5792 gram, dan 1,1584 gram. 3.3 Tempat dan Waktu Penelitian Uji efektifitas ekstrak etanol dari daun bintaro terhadap nyamuk dengan metode eksperimental ini dilakukan di laboratorium Farmakognosi dan Laboraturium Mikrobiologi Akademi Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang yang dilakukan pada bulan februari-mei 2016
33
.3.4 Defenisi Operasional Variabel Variabel
Sub
Defenisi
Alat
varia
Operasional
Ukur
Jenis data
Hasil ukur
bel
varia
ekstrak
kental pada
bel
berwarna
bebas
yang didalamnya
uji
hijau
tabung: Kualitatif
uji
visu 1.ekstrak+(Ac2O)+ al
asam
sulfat
mengandung
pekatwarna
etanol
metabolit
merah(adanya
daun
sekunder
terpenoid)
dan
bintaro
flavonoid,
warna
biru
1.Ekstrak
alkaloid,
tanin
(senyawa golongan
dan saponin.
steroid
Dibuat
+0,5
dalam
)2.ekstrak ml
asam
konsentrasikonse
klorida pekat,dan 3-
ntrasi 0,289 gr,
4
0,5792 gr, 1,1584
Mg.Adanya
gr dalam 100 ml
flafonoid
aquades.
dengan
pita
logam
ditandai warna
merah,orange dan hijau Variabel
Sub
Defenisi
Alat
varia
Operasional
Ukur
Hasil ukur
Jenis data
34
bel
Variabel
banyaknya
Visual
terikat
nyamuk
yang
1.keefektifan
mati selama 24
ekstrak
jam dalam persen
terhadap
mortalitas (yaitu
mortalitas
rasio
nyamuk
nyamuk mati
Jumlah
nyamuk Kuantitatif
mati
jumlah yang dengan
jumlah populasi nyamuk
awal
dikali 100%) 3.5 Instrumen Penelitian 1.Alat Alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu neraca,botol coklat,rotary evaporator, blender,plat KLT,kain hitam,dan glassware. 2.Bahan Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu daun bintaro,etanol 96%,aquades,anhidrat
asetat(Ac2O),H2SO4
pekat,HCl
Mg,KI,HgCl2,bismut subnitrat,asam asetat glasial,iodine.
pekat,logam
35
3.6 Pengumpulan Data 3.6.1 Determinasi Tanaman Determinasi daun bintaro dilakukan di UPT Materia Medika Batu. 3.6.2 Persiapan Bahan 1. Daun binataro yang sudah dipetik dicuci dengan air mengalir. 2. Dikering anginkan sampai kering. 3. Dihaluskan menggunakan blender.
3.6.3 Pengekstrakan dengan Maserasi 1. Serbuk daun bintaro ditimbang sebanyak 500 gram 2. Dimaserasi dengan etanol 96 % sebanyak 750 ml selama semalam 3. Campuran disaring menggunakan corong buchner 4. Maserat diuapkan dengan rotary evaporator pada suhu 60-70 oC sampai diperoleh ekstrak kental 3.6.4
Skrining Fitokimia
1. Skrining Fitokimia Flavonoid. sebanyak 2 ml ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambah dengan 0,5 ml asam klorida pekat,dan 3-4 pita logam Mg.Adanya flafonoid ditandai dengan warna merah,orange dan hijau tergantung pada struktur flafonoid yang terkandung dalam sampel tersebut. 2. Skrining Fitokimia Alkaloid ekstrak ditambahkan 0,5-1 ml asam sulfat 2N dan dikocok sampai terbentuk dua lapisan.lapisan asam(atas) dipipet dan dimasukkan ke dalam
36
tiga buah tabung reaksi.ke dalam tabung reaksi yang pertama ditambahkan dua tetes pereaksi meyer.ke dalam tabung reaksi kedua ditambahkan dua tetes pereaksi dragendorf dan ke dalam tabung reaksi ketiga dimasukkan dua tetes pereaksi wagner.adanya senyawa alkaloid ditandai dengan terbentuknya endapan putih pada tabung reaksi yang pertama dan timbulnya endapan berwarna coklat kemerahan pada tabung reaksi kedua dan ketiga. pembuatan pereaksi mayer: senyawa HgCl2,sebanyak 1,5 gram dilarutkan dengan 60 ml aquades.di tempat lain dilarutkan KI sebanyak 5 gram dalam 10 ml aquades.kedua larutan yang telah dibuat tersebut kemudian dicampur dan disencerkan dengan aquades sampai volime 100ml.pereaksi mayer yang diperoleh selanjutnya disimpan dalam botol gelap. pembuatan pereaksi dragendorf: bismut subnitrat sebanyak 1 gram dilarutkan dalam campuran 10 ml asam asetat glasial dan 40 ml aquades.ditempat lain 8 gram KI dilarutkan dalam 20 ml aquades.kedua larutan yang telah dibuat dicampur kemudian diencerkan dengan aquades sampai volumenya 100 ml.pereaksi dragendof harus disimpan dalam botol berwarna gelap dan hanta dapat digunakan selama periode bebberapa minggu setelah dibuat. pembuatan pereaksi wagner: senyawa KI sebanyak 2 gram dan iodine sebanyak 1,3 gram dilarutkan dengan aquades sampai volumenya 100 ml.kemudian disaring.pereaksi wagner ini juga harus disimpan dalam botol gelap.
37
3. Skrining fitokimia tanin sampel ditambahkan air panas dan didihkan selama 5 menit. setelah dingin disaring, filtratnya dibagi menjadi 2 masing-masing ditambahkan FeCl3 1% dan gelatin 10%.jika positif akan berubah menjadi hijau/biru. 4. Skrining fitokimia saponin Sampel ditambhakan air panas dan didihkan selama 5 menit, setelah itu disaring.Filtratnya diambil 10 ml kemudian dikocok.jika positif akan menimbulkan busa 3.6.5
Analisis KLT
1.Menjenuhkan Cairan eluasi etil asetat : P-Metanol :P-air (100:13,5:10) didalam camber. 2.Melakukan penotolan ekstrak pada plat KLT yang sudah di oven . 3.Penotolan dilakukan sebanyak 4 totolan. 4.Di eluasi dengan eluen yang sudah jenuh. 5.Di semprotkan reagen spesifik pada masing-masing totolan. 6.Di amati bercak pada sinar UV.
3.6.6 Pembuatan reagen semprot 1. Analisa aldehida-asam sulfat untuk gula,steroid dan terpenoid pembuatan:1 ml asam sulfat pekat ditambahkan ke dalam 0,5 ml anisaldehida dalam 50 ml asam asetat.dianjurkan untuk menggunakan pereaksi yang baru setiap pemakaian.
38
perlakuan stelah penyemprotan:dipanaskan pada 100-105 Oc sampai noda muncul dengan intensitas warna yang maksimum.latar belakang yang berwarna merah muda dapat dihilangkan dengan membiarkannya terkena uap dari penangas air. 2.Alumunium klorida untuk flavonoid pembuatan:larutan 1% alumunium klorida dalam etanol. perlakuan setelah penyemprotan:noda berflourosensi kekuningan dianalisis menggunakan lampu UV. 3.pereaksi dragendorff untuk alkaloid. uji positif ditandai dengan munculnya warna coklat kemerahan. pembuatan:larutan a:1,7 gram bismut nitrat basa dan 20 gram asam tartrat dilarutkan dalam 80 ml air. larutan b; 16 gram kalium iodida dilarutkan dalam 40 ml air larutan stok:larutan a dan b dengan jumlah yang sama dicampur dan dapat disimpan beberapa bulan dalam pendingin.pereaksi semprot:5 ml larutan stok ditambahkan ke dalam larutan 10 gram asam tartrat dalam 50 ml air.
39
3.6.7Uji Mortalitas nyamuk metode eksperimentals
1. dipersiapkan wadah tertutup seperti aquarium ukuran 25 cm x 17cm x 21cmyang didalamnya terdapat kain hitam yang diletakkan pada tiap dinding kotak serta bagian atasnya dan sudah disemprotkan ekstrak kental
eatnol
daun bintaro yang sudah di encerkan dalam 100 ml aquades. 2. dimasukkan larva nyamuk yang siap menetas. 3. diamati selama 24 jam dan menghitung banyaknya nyamuk yang mati dalam wadah, keefektifan ekstrak etanol daun bintaro dapat dilihat dari banyaknya jumlah nyamuk yang mati dalam setiap wadah yang berisikan 10 ekor jenis nyamuk dalam waktu 24 jam.
3.7 Analisa Data Setelah semua data yang didapatkan dari jumlah nyamuk yang mati,selanjutnya dilakukan pengolahan dan analisis data menggunakan software spss.Terdapat beberapa prosedur uji statistik yang dilakukan, yaitu: 1.uji analisis varian(one way ANOVA) Digunakan untuk menginformasikan adanya perbedaan yang signifikan secara statistik pada keselutuhan antar rata-rata perlakuan kelompok uji. 2.uji least significance difference(LSD) Digunakan untuk menginformasikan adanya perbedaa yang signifikan secara statistik antararata-rata dua perlakuan kelompok
40
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Determinasi
Sampel tanaman daun bintaro yang diperoleh dilakukan determinasi di Materia Medika Batudihasilakn kunci determinasi seperti pada lampiran. 4.2 Hasil pembuatan simplisia Pada pembuatan simplisia daun bintaro yang didaptkan sebanyak 800 gram daun segar dilakukan sortasi pada daun untuk memishkan antara tangkai dan daun kemudian dicuci denagn air mengalir untuk menghilangkan debu dan binatang seperti semut. Proses pembuatan simplisia dilakukan dengan cara dikering anginkan diatas tampah yang luas agar daun satu dan lainnya tidak bertumpukan dan mempercepat proses pengeringan karena telkstur tampah yang berlupbang kecil jug memperceepat proses dengan metode kering angin, hal ini dilakukan untuk menjaga senyawa flavonoid,alkaloid,saponin dan tanin yang mudah rusak pada suhu lebih dari 60 derajat.Proses pengeringan dilakukan selama kurang lebih 5 hari kemudian didapatkan daun kering 500 gram di blender untuk mendapatkan tekstur yan lebih kecil kemudian juga memudahkan pelarut dapat mengabsobsi senyawa metabolit sekunder dengan cepat.
39
41
4.3 Hasil pembuatan ekstrak etanol daun bintaro Sebanyak 500 gram simplisia kering yang sudah diblender dimasukkan dalam botol kaca gelap untuk dilakukan proses ekstraksi dengan metode maserasi.Proses
maserasi
dilakukan dalam botol
kaca
gelap untuk
menghindari kesrusakan pelarut etanol dan senyawa metabolit sekunde dari sinar matahri langsung, jika di tempatkan dalam wadah plastikan dikhawatirkan senyawa polimer plastik akan bereaksi dengan pelarut polar.Pemilihan pelarut etanol 96% karena etanol 96% ini mampu menarik senyawa polar mapun nonpolar kemudian kemurnian lebih tinggi karena tidak banyak campuran air dan lebih cepat dipisahkan ketika dievaporasi karena mudah menguap. Prosees maserasi diakukan selama 3 hari dengan jumlah pelarut etanol sebanyak 700 ml.setelah didaptkan ekstrak kemudian ekstrak dipisahkan antra pearut dan ekstrak dengan dievaporasi menggunakan alat evaporator kemudian dilanjutkan untuk mendaptkan ekstrak kental dengan menggunakan waterbath. Dihasilkan ekstrak kental 61,325 gram. 4.4 Hasil pengamatan ekstraksi dan skrining fitokimia 4.4.1
Hasil skrining foitomikia
Hasil skrining fitokimia juga menunjukkan bahawa ekstrak daun bintaro mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin yang ditandai dengan perubahan warna saat perlakuan pada uji tabung dan uji KLT dengan menggunakan reagen semprot spesifik.
42
Tabel 4.1 hasil skrining fitokimia
No
Metabolit sekunder
Reage n
1
Flavonoid
HCl + Warna serbuk merah,or Mg ange dan hijau
Warna hijau
2
Tannin
FeCl
biru/hita m
coklat kehitaman
gelati n
endapan coklat
coklat kemerahan
1.Rea gen mayer : 2. Wagn er
1.endpan putih
1.endapan putih
+
2.larutan coklat kemerah an 3. larutan coklat kemerah an
2.:coklat kemerahan
+
3.coklat kemerahan
+
3
Alkaloid
3. drage ndort:
Hasil pada literatur
Hasil pengujian
Kete rang an(+ /-) +
+
Gambar
43
Tabel 4.2 hasil uji KLT dengan eluen etil asetat:metanol:aquades (100:13,5:10)
Metabolit sekunder Alkaloid Tanin Saponin Flavonoid
Warna noda Hijau kehitaman Lembayung Ungu gelap Hijau
RF 0,80 0,60 0,90 0,78
Keterangan + + + +
Uji Flavonoid, Flavonoid adalah senyawa yang mengandung karbon C15 atas dua inti fenolat yang dihubungkan tiga satuan karbon cincin A yang memiliki karakteristik bentuk hidroksilasi phloroglusinal dan cincin B biasanya 4,3,4 atau 3,4,5 terhidroksilasi Penambahan logam Mg dan HCl untuk mendeteksi adanya senyawa flavanoid dimana flavanoid akan bereaksi dengan Mg setelah penambahan asam klorida pekat dengan terjadinya perubahan warna merah muda/ungu dan hijau sebab flavanoid mengalami perubahan serapan cahaya ke arah panjang gelombang yang lebih besar akibat adanya reaksi reduksi oleh HCl.Dari hasil uji skrining fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun bintaro mengandung flavonoid yang ditandai dengan berubahnya ekstrak dari berwarna kecoklatan menjadi hijau, Uji tanin denga gelatin, tanin dalam bentuk larutan akan mengendapkan gelatin(protein) mementuk endapan coklat kehitaman.pada uji ekstrak daun bintaro terbentuk larutan merah kecoklatan dengan bintik-bintik hitam yang kemungkinan adalah endapan hasil eaksi antara tanin dan gelatin. Uji tanin dengan FeCl3. Seperti senyawa fenol lainnya tanin akan bereaksi dengan garam Besi (III). Larutan sampel akan memberikan warna intesif merah,
44
biru, unggu atau hijau, dari kompleks triaryloksi yang menandakan adanya senyawa fenol dalam sampel tersebut. Berikut mekanisme reaksinnya:
Uji breamer’s(FeCl3) Pada tanin terhidrolisa seperti Gallotanin dan Ellagitanin memberikan endapan berwarna Biru Kehitaman. Sedangkan pada tanin terkondensasi seperti Phlobatanin atau Katekol tanin, dengan FeCl3 akan memberikan endapan berwarna hijau kecoklatan.pada ekstrak daun bintaro mmenunjukkan mengandung tanin dengan ditandai berubahnya ekstrak menjadi coklat saat di teteskan FeCl,
Uji alkaloid adalah senyawa yang mempunyai struktur heterosiklik yang mengandung atom N didalam intinya dan bersifat basa, karena itu dapat larut dalam asam-asam serta membentuk garamnya, dan umumnya mempunyai aktifitas fisiologis baik terhadap manusia ataupun hewan. Sebelumnya ekstrak ditambahkan H2SO4 2N, Penambahan asam sulfat pada filtrat dimaksudkan untuk memprotonasi senyawa yang diidentifikasi dengan pereaksi meyer,wegner, dan pereaksi Dragendorf. Hal ini diebabkan karena terjadi pengikatan kembali alkaloid menjadi garam alkaloid yang dapat bereaksi dengan pereaksi logamlogam berat yang spesifik sehingga alkaloid menghasilkan kompleks garam anorganik yang tidak larut dan terpisah dengan metabolit sekundernya. Lapisan asam sulfat diambil dan dibagi menjadi dua tabung. Tabung pertama ditambahkan pereaksi meyer dan tabung kedua ditambahkan pereaksi Dragendorf. pereaksi
45
meyer bersifat elektrofilik (Hg2+), mengadisi atom C no.2, dimana terlebih dahulu K2HgI4 terlarut dalam air secara reversible dengan mensorvasi asam iodide + KI + HgO, Hg2+ dan HgO membentuk kompleks dengan dua molekul kolid sebagai endapan putih. Menggunakan pereaksi dragendorf (kalium tetraiodo bismutat) (+) alkaloid apabila terbentuk endapan coklat kemerahan atau hitam. Hal ini karena ikatan yang terjadi antara alkaloid yang mengandung atom N dengan pereaksi ini adalah ikatan koordinasi dengan Hg pada pereaaksi meyer dan dengan Bi pada pereaksi Dragendorf sehingga terbentuk senyawa koordinasi dengan N sebagai ligan dengan warna khas pada masing-masing pencampuran yang bersifat non polar. Saponin adalah senyawa aktif permukaan yang kuat, menimbulkan busa jika dikocok dalam air dan pada konsentrasi yang rendah sering menyebabkan hemolisis dalam merah. Mula-mula disebut saponin karena sifatnya yang khas menyerupai sabun (bahasa latin, sapo : sabun). Ekstrak daun bintaro mengandung saponin dilihat dari pengamatan uji tabung setelah dikocok ekstrak menghasilkan buih yang sangat sedikit dan cepat hilang.(Fessenden. 1982. Kimia Organik Edisi Ke 3 Jilid 2. Erlangga. Jakarta.) 4.5 Hasil uji mortalitas ekstrak daun bintaro terhadap nyamuk aedes aegpthy
Dalam uji mortalitasBanyaknya nyamuk yang mati dalam waktu 24 jam dengan pengamatan tiap 15 menit dengan jumlah semprotan yang sama menunjukkan keefektifan dari ektrak etanol daun bintaro.kematian nyamuk disebabkan oleh ekstrak daun bintaro yang memiliki senyawa aktif metabolit sekunder flavonid,saponin ,tanin dan alkaloid yang bersifat racun.kandungan
46
alkaloid dan flavonoid mampu menghambat kinerja jantung dengan cara menghambat saluran ion kalsium di otot jantung sehingga menyebabkan kematian nyamuk.kandungan saponin
meningkatkan permeabilitas
akibat rusaknya
membran sel sehingga banyak zat toksik yang masuk ke dalam tubuh nyamuk dan saponin memiliki sifat inhibitorik sehingga menyebabkan kejang otot kemudian saponin juga menyebabkan kutikula pada tubuh nyamuk rusak akibatnya nyamuk kehilangan cairan sehingga mampu menyebabkan nyamuk mati. Kandungan tanin mempengaruhi penurunan aktivitas pengikatan protarin dan penyerapan makanan di saluran cerna. Tabel 4.3 Uji hasil Mortalitas nyamuk. Kelompok perlakuan
replikasi
konsentrasi 1 0,289
1 2 3
Rata-rata SD Konsentrasi 2 0,5792 Rata-rata SD Konsentrasi 3 1,1584 Rata-rata SD Kontrol (+)
Rata-rata SD Kontrol (-)
Rata-rata SD
1 2 3
1 2 3
1 2 3
1 2 3
Jumlah morrtalitas nyamuk 6 7 6 6,34 0,47 9 8 9 8,67 0,47 10 10 10 10,00 0,00 10 10 10 10,00 0,00 0 1 1 0,67 0,47
47
angka rata-rata mortalitas
grafik mortalitas nyamuk aedes aegpthy terhadap ekstrak etanol daun bintaro 12 10
10
10 8.67
8 6.34
6
hasil rata-rata mortalitas nyamuk
4 2 0
0.67
kontrol kontrol dosis 1 dosis 2 dosis 3 negatif positif
Grafik 4.1 hasi perlakuan terhadap mortalitas nyamuk aedes aegpthy dengan ekstrak etanol daun bintaro Berdasarkan hasil perlakuan uji ekstrak etanol daun bintaro terhadap mortalitas nyamuk aedes aegpthy dapat dilihat pada grafik 4.1 bahwa semakin besar konsentrasi yang di semprotkan pada nyamuk dan didiamkan selama 24 jam maka jumlah nyamuk yang mati akan semakin bertambah,karena konsentrasi semakin tinggi maka ekstrak akan semakin pekat dan mengandung lebih banyak metabolit sekunder seperti flavonoid,alkaloid dan tanin yang memperngaruhi sistem metabolit pada nyamuk dan menyebabkan kematian nyamuk yang semakin banyak. sedangkan kontrol negaif memperlihatkan jumlah nyamuk yang mati tidak ada hal ini dikarenakan kontrol positif berisi aquades yang tidak mengandung ekstrak daun bintaro .
Dalam penelitian yang berjudulkan keefektifan ekstrak daun bintaro terhadap mortalitas nyamuk aedes aegpty ini membuktikan bahwa daun bintaro yang biasanya hanya digunakan sebagai tumbuhan penghias kota
memiliki
48
kemampuan membunuh nyamuk aedes aegpty dalam konsentrasi
1,1584
gram/100ml aquades secara efektif, karena dalam hitungan waktu 15 menit dan diamati selama 24 jam dengan 50 kali semprotan ekstrak daun bintaro denagn konsentrasi
1,1584 gram/100ml aquades mampu membunuh semua nyamuk
aedes aegpty. Pemilihan daun binato sebagai bahan adalah kerena bagian tanaman pohon bintaro yang banyak adalah daun dan tidak memerlukan waktu yang lama seperti menunggu buahnya, kemudian jika ekstrak daun bintaro ini mampu efektif membunuh nyamuk aedes aegpty masyarakat dapat dengan mudah mendapatkan bagian tumbuhan bintaro yaitu daunnya.Untuk mendapatkan ekstrak daun bintaro harus memalui ekstraksi metode maserasi dmenggunakan pelarut polar etanol 96%. Proses pengembangbiakan nyamuk juga mempengarui untuk penelitian ini sehingga pembelian nyamuk harus dimulai sejak larva instar IV dimana fase ini merupakan fase terakhir untuk menjadi pupa kemudian menjadi nyamuk dewasa.Ketika larva instar IV diberikan makan pelet dengan ditempatkan pada wadah yang berisi air dengan suhu udara kamar sekitar 25◦C -35◦C selama 3 hari kemudian akan menadi pupa dengan berubah bentuk seperti tanda koma (,) kemudian dipindahkan pada wadah untuk ditetaskan menjadi nyamuk selama 3-4 hari didalam sangkar yang sudah dibuat.Ketika sudah menjadi nyamuk dewasa diberi makan dengan air gula yang dibasahkan pada kapas.Selanjutnya jika akan proses pengaplikasian ekstrak daun bintaro nyamuk dewasa harus di puasakan terlebih dahulu kemudian diamati apakah ada nyamuk yang mati sebelum pengaplikasian.Jika tidak ada proses penyemprotan pada sarang nyamuk dilakukan pada bagian atas sangkar sebanyak 50 seprotan yang sama untuk semua
49
perlakuan kemudian diamati hingga didaptkan pada konsentrasi 0,289 gram selama 15 menit pertama hingga 24 jam terdapat rata-rata 6 nyamuk yang mati dari 10 nyamuk yang ada , konsentrasi 0,5792 gram terdapat rata-rata 8 nyamuk yang mati dari 10 nyamuk yang ada, konsentrasi 1,1584 gram terdapat rata-rata 10 nyamuk mati dari 10 nyamuk yang ada dan menandaakan semua nyamuk mati selama 15 menit pertama hingga pengamatan 24 jam untuk konsentrasi ini.
grafik linearitas 20 10
10
8.67
6.34
0
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
rata-rata mortalitas nyamuk dosis y = 1.83x + 4.6767 Linear (rata-rata mortalitas nyamuk) R² = 0.9757 Linear (rata-rata mortalitas nyamuk) Linear (rata-rata mortalitas nyamuk)
3.5
50
BAB V PENUTUP
5.1 Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa: 1.
Eksrak daun bintaro (Cerbera manghas) memiliki pengaruh terhadap mortalitas atau kematian nyamuk aedes aegphty pada setiap konsentrasi 0,289 gram, 0,5792 gram, 1,1584 gram.
2.
Ekstrak daun bintaro efektif terhadap mortalitas nyamuk aedes aegpty dalam 24 jam dengan diperoleh lethal concentration50 (LC50) 0,117gram .
5.2 Saran 1. Sebaiknya untuk penelitian selanjutnya dapat digunakan sebagai sediaan antinyamuk semprot. 2. Dilakukan uji coba dalam konsentrasi 0,117 gram/100 ml untuk mengetahui apakah nyamuk aedes aegpty benar-benar mati dalm 24 jam. 3. Sebaiknya membandingkan antara daun,buah dan biji tumbuhan bintaro pada konsentrasi yang sama untuk keefektifan mortalitas nyamuk aedes aegpthy.
50
DAFTAR RUJUKAN
kristanti, dkk. 2008.buku ajar fitokimia.surabaya:universitas airlangga. Fesesenden, R., J., 1986. Kimia Organik,Jilid II, Erlangga, Jakarta. hal. 2-51. Badan penelitian dan pengembangan pertanian pusat penelitian dan pengembangan perkebunan.2001.penelitian dan pengembangan tanaman industri. prayuda, yoga eka.2014.efikasi ekstrak biji bintaro (cerbera manghas) sebagai larvasida pada larva aedes aegypti L.instar III/IV.skripsi tidak diterbitkan.jakarta:UIN Syarif hidayatullah. medikanto, bian rahmadi, dkk.2013.pengaruh ekstrak daun legundi (vitex trifolia) sebagai repellent terhadap nyamuk aedes aegypti.ISSN.universitas lampung
lenny,
sovia.
2006.karyailmiah
senyawa
flavonoida,fenilpropanoida, dan alkaloida.departemen kimia: universitas sumatra utara sa’diyah, nur alindatus.2013.pengaruh ekstrak daun bintaro(cerbera odollam) terhadap perkembangan ulat grayak (spodoptera litura F): institut sepuluh november (ITS) widiani, ni putu pitri, dkk.2011.formulasi dan uji aktivitas minyak legundi (vitex trifolia l)sebagai sediaan anti nyamuk:Akademi farmasi putra indonesia malang http://gitapertiwi.org/bahaya-obat-anti-nyamuk-dan-cara penanggulangannya.diakses pada tanggal 24-11-2015 http://npic.orst.edu/RMPP/rmpp_ch8.pdf.diakses pada tanggal 24-11-2015
51
52
LAMPIRAN-LAMPIRAN
Lampiran 1.Hasil rendemen ekstrak daun bintaro 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘𝑘𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙 𝑋 100% 𝑏𝑒𝑟𝑎𝑡𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 =
61,325 𝑔𝑟𝑎𝑚 500 𝑔𝑟𝑎𝑚𝑑𝑎𝑢𝑛𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔
=12,265%
𝑋 100%
53
Lampiran 2 Proses pembuatan ekstrak kental daun bintaro
Daun bintaro sega
Daun bintaro kering
ekstrak daun bintaro setelah dimaserasi
evaporasi ekstrak evaporasi menggunakan waterbath
ekstrak kental
54
Lampiran 3 gambar hasil KLT ekstrak kental daun bintaro dengan reagen semprot. Alkaloid
Flavonoid
Tanin
Saponin
55
Lampiran 4 proses metamorfosis nyamuk
larva nyamuk aedes aegptty
Pupa nyamuk aedes aegpty
nyamuk aedes aegpty dewasa
56
Lampiran 5 hasil pengolahan data menggunakan spss 15.0 Tabel uji diskriptif
Jumlah
N
Mean
Stddevit iation
Std. error
Konsentrasi 1 konsentrasi 2 konsentrasi 3 Kontrol negatif Kontrol positif Total
3 3 3 3 3 15
6,33 8,67 10,00 ,67 10,00 7,13
,577 ,577 ,000 ,577 ,000 3,642
,333 ,333 ,000 ,333 ,000 ,940
95% confidence interval for mean Lower Upper bound bound 4,90 .7,77 7,23 10,10 10,00 10,00 -,77 2,10 10,00 10,00 5,15 9,15
minimu m
Maximu m
6 8 10 0 10 0
7 9 10 1 10 10
uji homogenitas Kemudian setelah mendapatkan distribusi data normal dapat dianjutkan dengan uji homogenitas untuk mengetahui data varian yang sama atau homogen.varian data dapat dilihat saat uji one way anova.pada uji homogenitas ini dapat dilihat bahwa varian data homogen(p>0,05) Tabel hasil uji homogenitas
Levence statistic 8,000
Df1 4
Df2 10
Sig ,235
Dari hasil uji didaptkan data dengan varian data normal dan dapat dilanjutkan pada uji one way anova.
57
Tabel hasil uji anova Jumlah Between groups within groups total
Sum of squares 183,733 2,000 185,733
Df 4 10 14
Mean square 45,933 ,200
F
Sig
229,667
,000
Dari data one way anova didapatkan nilai sig ,000 yang menandakan (p<0,05) sehingga dari data dapat dikatakan terdapat perbedaan yang signfikn dari uji mortalitas nyamuk aedes aegpty akibat perbedaan konsentrasi. 4.7 uji post hoc Merupakan analisa data untuk mengetahui perbedaan yang signifikan antara kelompok perlakuan yang lainnya.
58
Tabel hasil uji post hoc
Berdasarkan
hasil
ui
statistik
menggunakan
spss
15.0
dengan
menggunakan uji one way anova menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan terhadap 5 kelompok perlakuan karena probabilitas 0,000 <0,05 sehingga H0 ditolak sehingga terdapat perbedaan yang signifikan tiap perbedaan konsentrasi .kemudian pada analisa LSD bertujuan untuk melihat hasil perakukan yang memiliki perbedaan yang signifikan dengan melihat nilai sig pada konsentrasi
3 yang > 0,05 yang membuktikan bahwa konsentrasi 3 meiliki
perbedaan yang signifikan antara konsentrasi 1 dan 2.
59
