ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR GAMBAR. 1# Proses perkembang-biakan Saccharomyces cerevisiae

ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

DAFTAR

GAMBAR

Gambar

Halaman

1# Proses perkembang-biakan Saccharomyces cerevisiae

...........................................

5

2. Hasil identifikasi Saccharomyces cerevlsiae .

19

3. Hasil kromatografi lapisan tipis dengan fasa gerak Heksan : etil asetat

...................

Zb

if. Hasil kromatografi lapisan tipis dengan fasa gerak CHCl^ : etil asetat

SKRIPSI

....................

Deteksi Sterol Dari Jamur Saccharomyces...

26

Trikoranti Mustikawati


BAB

I

PENDAHULUAN D e w a s a i n i p r o d u k s i o b a t - o b a t a n di d u n i a s e m a k i n lam a s e m a k i n m e n i n g k a t , b a i k prod u k s i oba t m o d e r n raaupun p r o d u k s i obat t r a d i s i o n a l * 3 e r b a g a i p e n g e m b a n g a n dan p e n e l i tian o b a t - o b a t a n telah b a n y a k d i l a k u k a n d a l a m u s a h a pence g a h a n dan p e n g o b a t a n penyakit, p e n i n g k a t a n t araf k e s e h a t an m a s y a r a k a t dan l a i n - l ainnya.

(1)

M e n g i n g a t a k a n k e b u t u h a n o b a t - o b a t a n i n i terus m e n i n g kat, m a k a a i p e r l u k a n s u m b e r - s u m b e r b a han oaku y a n g aapat d i g u n a k a n u n t u k p e m b u a t a n obat-obatan. B a h a n ba k u u n t u k p e m b u a t a n o b a t - o b a t a n ini -cemyata dapat b e r a s a l dari turn b u h - t u m b u h a n . P a d a p e n e l i t i a n tera k h i r b a h a n bak u u n t u k p e m b u a t a n o b a t - o b a t a n sebagian b esar b e r a s a l dari tanaman tinggi. S e d a n g k a n dari tanadar, reniai a a s i h j a r a n g dilaku ■ Z"til« B e r d a s a r k a n ;iai c o r s e - a s ,

paa a p e n e l i t i a n

ini akan d i c o b a u n ~ u k aieneli“i lari ta n a m a n r e n d a h y a i t u jamur Saccharomyces cerevisiae. J a m u r S a c c h a r o m y c e s ce r e v i s i a e seisin m u d a h didapat, juga s e r i n g d i g u n a s a n d a l a m i n d u s w r i - i n d u s c r i dan t e r n y a t a juga m e m p u n y a i k a n d u n g a n sterol.

(2,3,-+)

C b a t - o b a t g o l o n g a n st e r o i d ini t e m y a t a juga telah la m a dikenal dan d a p a t dipakai sebagai obat.

i

SKRIPSI




M i s a l n y a p e m a k a i a n u n t u k o b a t - o b a t a n t i i n f l a m a s i (kortik o s t e r o i d ) , k a r d i o t o n i k ( d i g i t o k s i n ) , pr o v i t a m i n D (ergost e r o l ) dan y a n g a k h i r - a k h i r ini s e m a k i n banyak digunakan yaitu untuk obat-obat kontrasepsi ron).

(estrogen dan progeste-

(5)

S e d a n g k a n u n t u k m e n u m b u h k a n j a m u r Saeeharomyces c e r e v i s i a e d i p e r l u k a n suatu m e d i a dan m e d i a ini berma c a m - m a cam. Dari k e t e r a n g a n ini tiabul aasaiah, m e d i a m a n a k a h y a n g i e b i h b a i k u n t u k m e n u m b u h k a n j amur o a c c h a r o s y s e s ce r e v i s i a e dan a p a k a h dengan a d a n y a p e r b edaan m e d i a akan m e m p e n g a r u h i k a n d u n g a n sterolnya. B e r d a s a r k a n hal tersebut diatas, ma k a pada p e nelitian i n i akan d i c o b a u n t u k m e l i h a t h a s i l pert u m b u h a n jamur 3accharoinyces cerevi si ae dari b e b e r a p a m a c a m m edia dan m e l i h a t h a s i l de t e k s i sterolnya.

SKRIPSI




BAB hasil

IV p e u ELItiak

1. I d e n t i f i k a g i S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e . (8) J i k & sel-sel S a c c h a r o m y c e s cerevisiae di l i h a t dibav/ah cikrcs k o p , akan t e r i i h r t thallus ya n g terdiri da r i satu sel, b e r b e n t u k b u l a t atau b ulat telur d e n g a n d i a m e ter k-h r.ikron dan p a n j a n g 3 - 1 5 cikron. P a d a s e l - s e l nya aapat t e r l i h a t t e r b e n t u k n y a budding*

Gaabar 2 H a s i l i d e n t i f i k a s i Saccharomyces c e r e v i s i a e ( p e r b e s a r a n i+OO kali)

19

SKRIPSI




2. Data nasil pertumbuhan .ianur Saccharomvces cerevisiae.

K 7

0,320^

0,0979

0,3-52

0,1635

0,0/86

0,51"

0,2627

0,0209

C 262 c

0 2659

0,0950

n

-

0,25^1

0 , 0ol5

0 ,2=11

0 ,2579

r' ) 1 ^ j'J i 4i*

0,1557

C ,1942

r*.

0,0956

0,04^9

1 CP-

0,1767

0,0116

0,1557

0,1555

0,057^

0 ,1556

0,160°

0,0^71

0,1565

0 043£

0

berat bassh

1

^■S' •

,

V>

3 e r a t rata - r a t a

Berat kering

t!

rrar.)

Herat rata-rata

SKRIPSI

c

M*

y k—

W

-

w'

,

0,1632

^

Tabel

I


,

r\ Z. Q w

,

.»>

£O

,



21

Keterangan

:

K - p e n a n a m a n jamur S a c c h a r o m v c e s c e r evisiae pad? m e d i a K e n t a n g Glukosa Agar. penanamar. jamur S s c c h a r o m v c e s c e revisiae p^da media" W o r t e l Agar, C = penanamar. jamur S a c c h a r o m y c e s c e revisiae pada m e d i a Czapek Dox Agar.

Dengan diketanuinvc. b e rot rats-rstc. drri t i a r -tiap b o t o l u n t u k m a s i n g - m a s i n g media, ma k a bahan y a n g d i b u t u h k a n u n t u k e k s t r a k s i sterol a apat d i p e roieh dengan ca r a m e n u m b u h k a n j a m u r S a c c h a r o m v c e s cerevisiae sebanyak 30 b o t o l u n t u k K dan '.V, s e d a n g k a n C membutuhkar. 3C botol.

SKRIPSI




22

3. Data hasii deteksi sterol berdasarkan kromatografi l a pisan t i p i s . K LT

Jumlah noda

p

+++

1

K

+

5

W

++

3

C

++

3

-

Tabel

■

II

Keterangan : Intensitas warna yang diperoleh dari hasil krom a t o g r a fi lapisan tipis : -

= tidak meng a n d u n g sterol

+ = kurang jelas ++ = jelas +++ = sangat jelas Hasil dapat dilihat pada tabel II, tabel III, tabel IV serta gambar 3
SKRIPSI




r. = rer-'jisr.sj: j a m u r a s c c n u r o m y c e r cerevisiae rad s rêdit i.er.zzr^r jiuko?.= rer.ar.ar:.;

.1 a m u r

cr.arorrvces cerevisise

n:ec.ie

icz.ur

cr.arorrvcesr cerevisiae

.c.r- meciig

j:

lErc.

• /... terc_, rtirr.: r~er: _ a-r. eerier

ro^.

SKRIPSI




24

Gambar

3

H a s i l k r o m a t o g r a f i l a p i s a n tipis d e n g a n fasa g e r ak h e k s a n

: etil-

a s e t a t (8 : 2) Keterangan

:

Hasil k r o m a t o g r a f i l a p i s a n t ipis dengan F a s a diam

: K i e s e l g e l 60 F 2.5k, E. M e r c k tebal 0,2 mm

F a s a gerak

: Heksan

: Etil a s e t a t = 8 : 2

Penampak noda

: p e r e a k s i a n i s a l d e h i d - a s a m sulfat

K s p e n a n a m a n j a m u r S a c c h a r o m y c e s ce r e v i s i a e pada m e d i a K e n t a n g G l u k o s a Agar.

V/ = p e n a n a m a n jamur S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e pada m e d i a

SKRIPSI




25

Wortel Agar, penanaman jamur Saccharomyces cerevisiae pada m e d i a Czapek Dox Agar. pembanding sterol (SJierck 3

a HT

; 3741) yang terdlri

dari campuran sitosterol, stigmasterol dan campesterol.

SKRIPSI




SKRIPSI




27

Y/ortel Agar. penaaaman jamur Saccharomvces cerevisiae pada media Czapek Dox Agar* pembanding sterol (E.Merck. , ART : 37^1) y a n g t e r d i r i dari campuran sitosterol, stigmasterol dan caapesterol.

SKRIPSI




28

Tabel

III

Hasil kromatografi lapisan tipis dengan fasa gerak CHCl^ : etila setat (9 : 1)

Warna noda p

1. ungu

0,36

K

1. ungu merah

0,21.

2. ungu merah

0,28

3* ungu merah

0,48

4. ungu merah

0,60

5. ungu merah

0,72

1. ungu merah

0,21

2. ungu merah

0,36

3- ungu merah

0,69

1. ungu merah

0,20

2. ungu merah

0,34

3. ungu merah

0,62

W

C

SKRIPSI

Karga Rf


*



29

Keterangan

:

H a s i l k r o n a t o g r a f i l a p i s a n îpis dengan Fasa diaa

: K i e s e l g e l 60 F 2.yU, E, M e r c k tebal 0 , 2 ms

Fasa g e r a k

: CHC1-

: Etil asetat = 9 : 1

Penampak noda

: p e r e a k s i a n i s a l d e h i d - a s a n sulfa*

K = pen an am an j a a u r Sacchg.romyces c e r evisiae pa a a r.edia K e n t a n g G l u k o s a Agar. ’ .V = pen an am an j a n u r .^rrârflwyrpe cgrpvlsiae p a d a m e d i a V/ortel Agar. C = p e n a n a m a n j a m u r Saccharosivces cerevisiae pa d a n e d i a Czapek D o x Agar. P = pembanding sterol

(Z.Merck , ArH

: 5741) y a n g c e r d i r i

dari cam p u r a n s i c o s t e r o l , s t i g n a s t e r o l dan c a n p e s t e rol.

SKRIPSI




30

Tab el

IV

H a s i l k r o m a t o g r a f i l a p i s a n tipis d e n g a n f a s a g e r a k K e k s a n : etila s e t a t (8 : 2)

Warna noda p

1. ungu

0,19

K

1. ungu merah

0,14

2. ungu merah

0,20

3. ungu merah

0,33

4. ungu merah

0,39

5. ungu merah

0,62

1. ungu merah

0,19

2. ungu merah

0,28

3. ungu merah

0,60

1. ungu merah

0,18

2« ungu merah

0,28

3. ungu merah

0,54

W

c

SKRIPSI

Harga Rf




31

Keterangan

:

H a s i l k r o m a t o g r a f i l a p i s a n tipis dengan F a s a dian

: K i e s e l g e l 60 F 2.5k, E. M e r c k tebal 0 , 2 mm

Fasa gerak

: Heksan

: Etil a s e t a t = 8 : 2

Penampak noaa

: p e r e a k s i a n i s a l d e h i a - a s a m sulfat

K = p e n a n a m a n jamur S a c c h a r o m v c e s c e r e v i s i a e pada m e d i a Ilentang G l u k c s a Agar. IV = p e n a n a m a n j a m u r S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e pada m e d i a V.'ortel Agar. C = p e n a n a m a n jamur S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e pada m e d i a Csapek D o x Agar. P = pembanding sterol

(E.Merck , A R T : 3741) yan g te r d i r i

dari c a m p u r a n s i t o s t e r o l , s t i g m a s t e r o l dan campesterol.

SKRIPSI




BAB

V

PB-1BAHASAN Telah dilakukan deteksi sterol dari jamur S a c c h a r o m y ces cerevisiae yang ditanam pada beberapa macam media, P a d a percobaan ini pertama-tama diidentifikasi dahulu ja m u r Saccharomyces c e r e v i s i a e . Jika sel-sel Saccharomyces cerevisiae dilihat dibawah mikroskop, akan terlihat thallus yang terdiri dari satu e e l , •berbentuk bulat atau b u lat telur dengan diameter 2-8 mikron dan panjang 3 - 1 ? m i kron, Pada sel-selnya dapat terlihat terbentuknya budding, Pertumbuhan dari jamur Saccharomvces cerevisiae yang ditanam pada k e t i g a macam media ternyata mempunyai berat pertumbuhan y a n g berbeda. Berat pertumbuhan dari jamur Saccharomvces cerevisiae yang ditanam pada m e d i a K e n t a n g Glukosa Agar adalah lebih baik bila dibandingkan dengan m e d i a Wortel Agar dan m e d i a Czapek Dox Agar. Dan juga jamur dapat tumbuh menyebar diseluruh permukaan media. Sedangkan pada m e d i a Wortel Agar dan media Czapek Dox Agar jamur tumbuh k u r a n g menyebar di permukaan media dan tumbuh berkelompok-kelompok, Demikian juga p e r t u m b u h an dari jamur Saccharomvces cerevisiae yang ditanam pada media Czapek Dox Agar tidak secepat pertumbuhan jamur y ang ditanam pada k e d u a macam media lainnya. M ILIK

32

SKRIPSI

Pcjt " I AKAAN •UNJVt; ' ' s MRLANOOA'

i» L


^ » A Y A _____



33 Hasil pertumbuhan jamur Saccharomvces cerevisiae untuk rr.asing-masing media dilakukan setelah 7 hari dari penanamannya. Hal ini dilakukan agar pertumbuhan dari jamur dar?.t teramati dengan baik dan perbedaannya dapat secara jel=?s diketahui. Setelah itu jamur dipisahkan dari media dan dikeringk a n kesudian diekstraksi dalam Petroleum eter dengan v o lume yang sama untuk jamur dari masing-masing media. Setelah fasa Petroleum eter diuapkan kemudian ditambah klorcform dalam volume yang sama dan juga penotolannya pada lem-oeng kromatografi lapisan tipis dalam volume yang s^ma. Hal ini dimaksudkan agar dapat diketahui hasil deteksi sterol manakah yang paling baik dari ketiga macam media dan apakah dari hasil deteksi ini ada perbedaan kandungan sterol. Ternyata dari hasil kromatografi lapisan tipis, W dan. C mengnasilkan 3 macam noda sedangkan K menghasilkan ? macam noda, Dari no d a - n o d a yang timbul dapat dimungkinkan adanys kandungan sterol. Kernungkinan terdapatnya kandungan sterol adalah berdasarkan v/arna noda yang timbul dan harga Rf serta dibandingkan dengan suatu pembanding. Berdasarkan intensitas warns yang diperoleh dari k r o matografi lapisan tipis ternyata tidak dapat ditentukan dengan pasti apakah jamur dari media yang satu mempunyai perbedaan kandungan sterol dari pada media yang lain.

SKRIPSI



3k


Dan juga tidak dapat ditentukan dengan pasti bahwa jsunur dengan pertumbuhan yang lebih baik pada hasil deteksinya m e n unjukkan hasil kandungan sterol yang lebih baik pula. Hal ini perlu dilakukan penelitian yang lebih lanjut.

SKRIPSI




BAB

VI

XESIMPULAN Dari h a s i l percobaan ini a a p3t disi m p u l k a n bahv/? : - H a s i l b e r a t p e r t u m b uhan dari j a m u r 3accharomvces c e r e v i s i a e y a n g di t a n a m p-sda m e d i a m e d i a K e n t a n g llukosa A g a r a d a l a h lebih baik bila d i b a n d i n g k a n dengan jamur o a c s n a r o m v c e s cerev i siae y a n g di t a n a m pada meJia Vortel A g a r dan m e d i a Czapek 2 q x Agar, - D a r i h a s i l k r o m a t o g r a f i la p i s a n tipis .V dan C menghas i l k a n 5 m a c a m n c d a s e d a ngkan K m e n g h a s i l k a n 5 macam nod-?. Dari noda-nod-? yang timbul dap"t dimungkinkan a d a n y a k a n d u n g a n sterol.

35

SKRIPSI




3AS

VII

3ARAN B e r d a s a r k a n p e r c o b a a n yan g telah dilakukan, maka

:

Perlu d i l a k u k a n p e n e l i t i a n l eoih l a n j u t unt uk ineâs * i kan h a s i l k a n d u n g a n sterol dari ja.ûr 3acch aronr/ce.? c^revi.-iae y a n g ditar.arr. pada .-zeti.ya .71a c am .7.edia versecut. P?rlu d i l a k u k a n p e n e l i t i a n leoih l a n j u t unt

".S '.'.fiS ui j - “

kan s t r u k t u r s t e r o l v a n 5 terdacat pada ja.r.u r o a c c a ro ~

SKRIPSI




BAB

VII

5 A RAN B e r d a s a r k a n p e r c o b aan y a n g telah dilakukan, maka : 1. Perlu d i l a k u k a n p e n e l i t i a n l e b i h l a n j u t untuk .r.einastik a n h a s i l k a n d u n g a n sterol dari j amur Sacc.iaromvces cqrevi.îae y a n g ditar.am pada k s t i g a m a cam media zersebut. 2., Perlu d i l a k u k a n p e n e l i t i a n l ebih l a n j u t untuk r.er.a3 tikan s t r u k t u r s t e r o l yan g cerdapat pada jamur oaccharo^

SKRIPSI

^ ^

^ ^



38


Dari h a s i l k r o m a t o g r a f i l a p i s a n tipis, jamur yang ditanam p a d a m e d i a K e n t a n g G l u k o s a A g a r m e m p u n y a i jumlah nod a y a n g l e b i h banyak. J a m u r y a n g d i t a n a m pada m edia Wortel A g a r dan m e d i a Czapek Dox Agar m e n g h a s i l k a n 3 m acam n o d a s e d a n g k a n j a m u r y a n g d i t a n a m p a d a m e d i a Kentang Gl u k o s a A g a r m e n g h a s i l k a n 5 m a c a m noda. Darx n o d a - n o d a y a n g timbul d a p a t dimung k i n k a n aaanya k a n d u n g a n sterol.

SKRIPSI




BAB DAFTAR

IX KEPUSTAKAAN

1. Donatus, I.A. et.al. Risalah Simposium Penelitian Pumbuhan Obat III,

; Universitas Gajah Mada : Yogyakarta,

1983, hal. 1. 2. Karborne, J.3. P h y t o c h e m i c a l Methods, A Guide to M o dern T e c h n i q u e s of P l ant Analysis.

; Chapman and Hall

London, 1973, hal. 110, 3. Karsten, V/eber a n d Stahl. L e h r b u c h der Pharmakognosie. Gus t a v F i s c h e r V e r l a g

: Stuttgart, 1962, hal, 28-29.

U , S t e i n egger, S. a n d Hansel, R. L e h r b u c h der Allg e m e i n e n Pharmakognosie.

: S p r i n g e r V e r l a g : Berlin, 1963, hal,

510. 5. Pyler. V.2. et.al. P h a r m a c o g n o s y , 7 Febiger

; Lea &

: P h i l a d e l p h i a , 1976, hal, 197-213.

6. A l e x o pculus, Hal l

edition,

C.J. I n t r o d u c t o r y Mycology.

; Chapman &

: London, 1953, hal. 247,

7. Dv/idjoseputro, D. P e n g a n t a r Mikologi. 2**

edition,

;

IK I P Malang, 1978, hal, 133-137. 3, V a s h i s h i t a , 3.R. B o t a n y for Degree Students, Fungi, t**n 7 ' “ edition. ; 3, C h and & Co m p a n y Ltd, , Ram tfagar : /.sv; Delhi, 1979, hal, 215-227. 9. Youngken, H.V/, T e x t b o o k of P h a r m a c o g n o s y .

edition.

The B l a k i s t o n C o m p a n y : Philadelphia, 1950, hal. 82.

39

SKRIPSI



ADLN-PERPUSTAKAAN 40UNIVERSITAS AIRLANGGA

10. Sarles, et.al, Microbiology, 2n<* edition* ; Harper & Brothers : New York, 1956, hal, 45-49. 11. Pelczar, J, , Michael, J, and Chan, E,C,S. Elements . of Microbiology.

; Me, Graw Hill Inc, ; Tokyo, 1961,

hal# 141-143, 664. 12. Prescot, Samuel Cate, , Cecil Gordon Dunn, Industrial Microbiology, 3 pany Inc,

edition, ; Me, Graw Hill Book Com

: London, 1959, hal, 10-52,

13# Jutono, et.al, Pedoman Praktikum Mikrobiologi Umum (Untuk Perguruan Tinggi), ; Universitas Gajah Mada : Yogyakarta, 1973, hal, 8-15, 81, 214-215. 14- Merck, E. Handbook of Microbiology,

; Darmstadt : Fe

deral Republic of Germany, hal, 37-38, 152, 188, 286, 297, 390. 15* Stahl, E , Thin Layer Chromatography, 2n<^ edition, ; Springer Verlag Berlin Heidelberg ; New York, 1969* 16, Hoover, J.E. Remington's Pharmaceutical Sciences, 1 4 fck edition,

; Mack Publishing Co. : Pennsylvania,

1970, hal, 456, 479-430. 17. Truter, V.E, Thin Film Chromatography,

; First Publi

shed Interscience Publisher : New York, 1963, hal. 76-88* 13. Finar, I.L, Chemistry, Stereochemistry and The Che mistry of Natural Product. 5 th edition. Vol. 2, ; The English Language Book Society and Longman Group Limi ted : London, 1975, hal. 513-604.

SKRIPSI




DAFTAH

TABEL

Tabel

Halaman

I. Hasil p e r t u m b u h a n j amur S a c c h a r o m v c e s cerevisiae

................. ......... .......

20

II. Hasil d e t e k s i s t e r o l b e r d a s a r k a n k r o m a to g r a f i l a p i s a n t i p i s

....................

22

III. H a s i l k r o m a t o g r a f i l a p i s a n tipis dengan fasa g e r a k CHC1-, : etil asetat

.........

28

IV. Hasil k r o m a t o g r a f i l a p i s a n tipis dengan fasa g e r a k H e k s a n : etil a s e t a t

'U .

........

30

• iO.'»' S v

A A

vi

SKRIPSI




BAB

IX

TIN lTAUAK

PUSTAKA

1* Tln.jauan tentang Saccharomvceg cerevisiae. Saccharomyces berasal dari kata Saccharon = gula dan mykes = jamur, dinaaakan demikian karena jamur ini hidup dalam media yang m e n g a n d u n g gula, (6,7) Saccharomyces cerevisiae merupakan jenis dari ragi y a n g sering digunakan dalam industri-industri. M orfologi dari Saccharomyces cerevisiae adalah sebagai berikut : (3,8,9,10,11) - eelnya berbentuk bulat atau bulat telur, - mempunyai ukuran dengan diameter 2-8 mikron

dan

panjang 3-15 mikron. - berkembang biak balk secara aseksual maupun seksual, oaccharomyces cerevisiae terdapat iiaana-mana teru tama tuabuh-tumbuhan y a n g meng a n d u n g kadar gula

yang

tinggi, (if) Saccharomyces cerevisiae pada umumnya berkembang biak secara aseksual yaitu dengan cara budding (pem bentukan kuncup) dan dalam keadaan tertentu dapat ber k e m b a n g biak secara seksual y a n g dimulai dengan penyatuan dari sel yang sesuai, Setelah itu terjadi plasmogamy (penyatuan dari plasma) dan diikuti dengan terja-

3

SKRIPSI



ADLN-PERPUSTAKAAN kUNIVERSITAS AIRLANGGA

d i n y a karyogamy (penyatuan dari inti). Setelah inti

ber-

satu maka akan terbentuk zygot. Zygot ini kemudian

ber-

k e c a m b a h dan membentuk sel. Sel ini dapat berkembang biak dengan cara budding dan juga dapat berkembang biak secara seksual dengan membentuk askus. Askus akan mengalami meio s i s dan membentuk askospora. Askospora akan berkecambah dan membentuk sel. Kemudian sel ini dapat berkembang biak l a g i baik secara aseksual maupun seksual. (3) Beberapa hal yang dapat mempengaruhi per!:smbang-biakan Saccharomyces cerevisiae : (12) u n t u k memperoleh perkembang-biakan Saccharomyces cerevi siae y a n g maksimum, maka media yang digunakan haruslah m e n g a n d u n g bahan makanan dalam jumlah yang cukup, baik bahan organik maupun bahan anorganik. Bahan yang mengandung karbon dapat disediakan

dalam

b e n t u k gula, etanol, asam laktat, as am sitrat dan

lain-

lain. Nitrogen dapat disediakan dari garam-garam ammonium, asaa-*3'.;B *:nino, peptida, turunnn-turunan protein

yang

l a r u t misalnya pepton. u

ddxakaii s ^ o a g a i rval.Lum diniîro^jsn

—

fosfat, asam fosfat atau dalam bentuk lain. Magnesium dalam bentuk magnesium fosfat 7 H 2 O. V i t a min-vitamin juga dibutuhkan untuk pertumbuhan

ragi-

ragi agar diperoleh hasil-hasil yang maksimum.

SKRIPSI




Sar. b a r

1

P r o s e s p e r k e m b a n g - b i a k a n 3acchnrc~"~~s cerevisiae

SKRIPSI




6

Temperatur untuk perkembang-biakan Saccharomyces cerevisiae adalah sebagai berlkut : - temperatur maksimum 35-37° C, - temperatur minimum 9*11° C. - temperatur optimum 30° C. Susunan klasifikasi dari Saccharomyces cerevisiae adalah sebagai berikut : (8) Divisi

: Mycota

Anak divisi

: Eumycotina

Kelas

: Ascomycetes

Anak kelas

: Kemiascomycetidae

Bangsa

: Endomyce ticîe

Suku

: Saccharomycetaceae

M arga

: Saccharomyces

Jenis

: Saccharomyces cerevisiae

*

Tin.iauan tentang s t e r o i d . Steroid adalah suatu senyawa organik yang menganiun^ inti siklopentanoperhidrofenantren, dengan tiga cincin beratom C enam dan satu cincin beratom C lima. (5)

Struktur steroid dapat digambarkan sebagai berikut : K

SKRIPSI




7

K e l o m p o k a t o m - a t o m dari cincin s t e r o i d ini d i i k a t d e n g a n s e b u a h c i n c i n y a n g dis ebut a l p h a (<£•) jik a l e t a k n y a b e r a d a di b a w a h b i d a n g k e r t a s at a u b e t a (jl) j i k a l e t a k n y a b # r a d a di a t a s b i d a n g kertas.

Ikatan atom-atom dalam susunan <*■ditunjukkan sebagai garis patah-patah dan susunan |£ ditunjukkan sebagai garis y a n g kokoh. Atom-aton yang terletak pada posisi 8 , 9 , 1 0 , 1 3 , 1 4 <*i“ anggap sebagai 8 p ,9c^,10(5» ,13(J ,1 4 <*-

dan rantai karbon

(S) yang terletak pada posisi 17 dianggap sebagai $> *

Menurut tatanama dari kebanyakan steroid, cincin B dan C dan cincin C dan D bila digabungkan sebagai trans, sedangkan cincin A dan B bila digabungkan sebagai cis atau trans. Berdasarkan rantai samping dari inti steroid, maka senyawa steroid dapat dibagi menjadi : (2,5>l6) a • o 1 51'01 . ^

*>n alif-^tis, -nengandung satu atau l e b i h gu, -

gu~ On y a n g terikat pada rantai a l isiklis*

b. Sapogenin. R nengandung cincin oxasiklis. c. Glikosida kardiotonik. R a erupakan cincin lakton, mempunyai ikatan dengan gula dan bila dihidrolisa akan terjadi gula dan aglikon.

SKRIPSI




8

d. Hormon sex, R mengandung gugus keton atao gugus OH. e. As am empedu. R merupakan lima atom karbon yang diakhiri dengan suatu asam karboksilat. Pada tahun-tahun terdahulu, senyawa steroid sebagian besar dianggap sebagai substansi-substansi hewan (seperti hormon sex, asam empedu dan lain sebagainya), tetapi dalam tahun terakhir suatu jumlah yang menanjak dari senyav/a semacam itu telah diternukan dalam jaring an tumbuh-tumbuhan.

(5)

3. Tin.iauan tentang m e d i a p e r b e n i h a n . Untuk menumbuhkan jamur Saccharomyces cerevisiae diperlukan suatu media perbenihan yang cocok. Supaya jamur dapat tumbuh dengan baik dalam suatu m e d i a perbenihan, syarat-syarat yang perlu riipenuhi : (13) - m e d i a perbenihan harus mengandung bahan makanan yang cukup. - media perbenihan tidak mengandung zat-zat penghambat. - m e d i a perbenihan harus steril. M e d i a yang dapat digunakan untuk menumbuhkan jamur Saccharomyces cerevisiae adalah : 3*1* Media Kentang Glukosa A g a r . (I k )

SKRIPSI




9

Kentang

200

g

Gl u k o s a

20

s

Agar-agar

15

tr o

Aquadest

1000

M e d i a 'Yortel Agar.

ml (13)

1000

O3*

Ca30,u.

2

s

Agar-agar

4

s

'.Yortel

Aquadest

200

al

M e d i a CzaT)ek Dox A *■nr. (14) Sukrosa

30

5

ilallO-. 2 MgSO,u. 7H-0 d

3

cr o

0, 5

S

SCI

0, 5

s

FeSG, 7HÔ ft K - r.PO, 4 Agar-agar

0, 01

a*j ■

1

s

-i. W

. . •"1 ** 9

y 'Av

cr o

15 ^

lU l

?

u • A * '*i

-•. V ^ Cj C

Pepton

10

ocr

Glukosa

20

o

igar-agar

17

5

v^cuades ^

1000

2

j

al

M e d i a Wort A s a r . (14)

SKRIPSI



10


Ekstrak malt

13

Pepton

;

g

0,78

g

12,75

g

Dekstrin

2,75

o

Gliserol

2,35

g

KgHFO^

1

S

NH^Cl

1

g

15

33*

1000

ml

Maltosa

Agar-agar Aauadest

Media Glucose Affar. (14) Ekstrak daging

3

g

Pepton kasein

10

g

Glukosa

10

g

5

g

13

S

NaCl Agar-agar Acuaaest *•

i p w V Q l *

1000

»*A W

* » «■

n

mT ~ > ' J

ml •*o ii-

zisrzec ut

r m s k s n untuk nenusbuhkan jsssur Sacch?.romyc3s cerevi•i n

-ada nenelitian Ini adalah media Mental,: "lukosa

Agar, media '.Vortel Agar dan m e d i a Czapek Dox Agar, de n gan alsan : - bahan-bahannya mudah diperoleh* - harganya relatif murah. M e d i a perbenihan dapat disterilkan dengan cara : - penyaringan (filtrasi). - uap air aengalir (100° C selama 30 menit).

SKRIPSI




11

- autoklave (121^ C selama 15 aenit dengan tekanan + 2 ataosfir). 4. Tin.iauan ten t a n g k r o m a t o g r a f i . (15,17)

Kromatografi adalah suatu aetoda analisa untuk aeaisahkan koaponen-koaponen zat dari caapurannya dengan cara aelswatkan campuran aelalui sistia dua fasa. Pada dasarnya cara kromatografi menggunakan dua fa33 yaitu fasa diaa dan fasa ber~erak.

Prinsip fisika-kiaia yang aenyebabkan terjadinya pemisahan pada kromatografi an tar a lain : 1. A d s o r b s i

: p e n y e r a p a n z a t - z a t pad a fasa diaa.

2. Partisi

: kelarutan zat-zat pada fasa bercerak.

5. P e r t u k a r a n ion : t e r i k a t n y a z a t - z a t aexalui ikatan

ionik pada fasa diaa. Sl^trOiwre.sa : per.:erakjn zat-zat kare:::. *.liran / daya li~trik. 3. Perr.isi : a a s u k n y a zat-zat p a d a sistia

:el yan g cer-

;cri 'Tasa iiaa).

Macaa .-crcmatografi beraasarxan tennis pelaksanaan : ; jr-> :L kolom.

2. Kroaatcgrafi kertas. 5. iCroaatcgrafi lapisan tipis, vw- Tuii gas.

SKRIPSI




Kromatografi lapisan tifeis. (15)17) Mekanisme terjadinya pemisahan pada kromatografi lapisan tipis dapat berdasarkan atas prinsip adsorbsi, partisi, pertukaran ion maupun filtrasi, tergantung pada adsorbent y a n g dipakai. Tetapi yang piling umum adalah atas dasar prinsip adsorbs! atau parti si, Sebagai fasa diam adalah zat padat yang dialiri dengan sat cair sebagai fasa oergeraknya. Pelarut yang digunakan u n t u k kromatografi lapis an tipis ditentukan oleh polaritas dari zat yang dianalisa. Kromatografi lapisan tipis dapat digunakan sebagai tahrp pendahuluan untuk penetapan suatu zat yaitu dengan cara aenghitung harga 2f se'oab aasing-masing zat aeapunyai harga 3f y a n g tertentu pada keau.aan yang cetap*

piaan tipis adolr.h sebagai berikut : pert.isia-taz:? disediakan dahulu lempeng kromatografi# Larutan sampel dalam pelarut yang mudah ^tenguap ditotolkan di atas lapisan tipis dengan menggunakan pipet kapiler* Setelah noda kering, lempeng ailetakkan dal-m bejana secara v e r t i k a l 3 dengan tepi yang di bawah dieelupk a n kedalam fasa bergerak. Setelah pelarut naik sampa! batas yang telah ditentukan, lempeng diamoil dan M i I I K. PERP-w ■ >IA K V A h

'UNIVERMr

MiU.ANOOA'

S U K A B A Y a ____

SKRIPSI




13

d i d i a n k a n s a m p a i p e l a r u t rsenguap Itemudian noda-no’ da tersebut diidenrifiitasi d engan m e n g r a n a k a n penanpsk no d a y a n g cesuai.

■

SKRIPSI




BAB METODA

III PEHELITIAN

1. Bahan percobaan1*1. Bahan percobaan. Bahan yang digunakan untuk penelitian ini adalah ragi roti yang bereaar di pasaran. 1.2* Bahan pembuat media. Media perbenihan yang digunakan adalah : 1.2.1. Media Kentang Glukosa Agar : (14) oo*

Kentang

200

Glukosa

20

g

Agar-agar

1?

g.

1000

ml

Aquadest

1.2.2. Media .'/ortel Agar : (13) .Vortel

xGCC

3* O

ao0

3*

Agar-agar Aquadest

g

200

ml

1.2.3* Media Czapek Pox Agar : (14) Sukrosa

SKRIPSI

S

NaNQj

3

g

MgSO^ 7H20

0,3

g

KC1

0,3

g

FeSO^ 7 H^C

0,01 g




15

K^HPO^ Agar-agar Aquadest

1

g

13

g

1000

ml

1.3* Bah an untuk ekstraksi sterol. Sebagai bahan u n t u k ekstraksi sterol digunakan pelarut Petroleum eter. 1.4. Bahan untuk deteksi sterol, Heksan Kloroform Etil asetat Pereaksi anisaldehid-asam sulfat 2. A l at-alat. \ n

Botol (disterilkan selama 2 jam pada suhu 170

C)

Kawat ose (kawat inokulasi) Mikroskop 3. Pola p e ne litian. 3.1* Pembuatan media 3*2. Penanaman Saccharomyces cerevisiae 3.3« Xdentifikasi Saccharomyces cerevisiae 3.4. Penimbangan hasil pertumbuhan Saccharomyces ce revisiae 3.5. Ekstraksi dan deteksi sterol Cara k e r l a . 4.1. Pembuatan media Kentang Glukosa A g a r . (14) Setelah kentang dikupas, dicuci bersih, diiris kecil-kecil, ditimbang sebanyak 200 g, lalu di-

SKRIPSI




rebus d e n g a n a q u a d e s t 1000 ml. D i b i a r k a n m e n d i d i h sel a m a 3 0 m e n i t sambil dijaga a g a r v o l u m e n y a t e t a p sep e r t i semula. A g a r - a g a r s e b a n y a k I p g, d i p o t o n g - p o tong, k e m u d i a n dimas ukkan k e a a l a m r e b u s a n k e n t a n g tadi dan d i a d u k s a m p a i larut semua. S e l a n j u t n y a ditamb a h k a n 2 0 g g l u k o s a keaa l a m n y a . K e m u d i a n m e d i a i n i da lam k e a d a a n p a n as d i s a r i n g dengan kai n p e n y a r i n g dan di s t e r i l k a n d e n g a n a u t o k l a v e p a d a t e m p e r a t u r 121° C selar.a 1 3 ner.it den gar. tekanan ± 2 atmosfir. P e m b u a t a n m e d i a W o r t e l A g a r . (13) W o r t e l d i c u c i b e r s i h kemu d i a n d i g i l i n g s a n p a i hancur. S e t e l a h itu d i t a m b a h 200 ml a q u a d e s t p a d a g i l i n g a n v/ortel t e r s e b u t dan dididihkan selams 10 m e n i t sambil dijaga a g a r v o l u m e n y a tetap s e p e r t i semula, K e m u d i a n d i sa r i n g dan p a d a filiratnya d i t a m b a h a g a r - a g a r s e r t a CaSOj,. D i d i d i h k a n lagi sampai a g a r terl a r u t dan d i s a r i n g dengan k a i n p e n y a r i n g . ^ S e l a n j u t n y a d i s t e r i l k a n dengan a u t o k l a v e p a d a t e m p e r a t u r 121° C s e l a m a 1 5 m e n i t dengan t e k a n a n ± 2 atmosfir. P e m b u a t a n m e d i a Cza-oek Pox A c a r . {Ik) Semua b a h a n - b a h a n d i masukkan k e d a l a m 1 0 0 0 ml a q u a d e s t dan d i b i a r k a n 1 5 menit, k e m u d i a n d i d i d i h k a n u n t u k dil a ru t k a n s e l u r u h n y a . Setelah itu d i s a r i n g dengan k a i n p e n y a r i n g dan d i s t e r i l k a n dengan a u t o k l a v e p a d a t e m p e r a t u r 121° C s e l a m a 1 5 m e n i t dengan tekanan ± 2 a t mosfir.

SKRIPSI




17 4.4# Penanaman Saccharomyces cer e v i s i a e . Ragi ditanamkan pada media yang suaah memadat. Media ini didiamkan dua sampai tiga hari pada suhu kamar. Kemudian koloni dari Saccharomyces cerevisiae yang terjadi diamati. Ujung kawat ose dibakar diatas api 6piritus sampai memijar, sedangkan sisa kawat ose cu k u p dilewatkan diatas nyala api. Setelah itu ujung kawat digunakan untuk mengambil koloni dari Sacchromvces cerevisiae dan cepat-cepat ditanamkan pada m e dia lain yang suaah memadat. Media ini didiamkan pa da suhu k a m a r sampai didapatkan koloni dari Saccha romyces cerevisiae.

4.5. Identifikasi .jamur Saccharomyces cerevisiae. J ika 6el-sel Saccharomyces cerevisiae dilihat di bawah mikroskop, maka akan terlihat thallus yang terdi ri dari satu sel, berbentuk bulat atau bulat telur dan mempunyai ukuran dengan^diameter 2-8 mikron dan panjang 3-15 mikron. Pada sel-selnya dapat terlihat terbentuknya budding. 4.6. Penimbangan hasil pertumbuhan jamur Saccharomyces cerevisiae untuk setiap botol : bobot basah dan bobot kering. 4.7. Ekstraksi sterol. J a m ur yang telah dipisahkan dari media, dikeringkan dan ditimbang sebanyak 2 g. Kemudian direfluks da*-' lam 100 ml Petroleum eter selama 2 jam sebanyak 3

SKRIPSI




lo

kali, S e t e l a h itu d i s a r i n g dan filtrat y a n g di d a p a t diuapkan s a m p a i k e r i n g , k e m u d i a n d i l a r u t k a n dalam k l o r o f o r m 1 ml* Hal y a n g sama d i l a kukan pada j a m u r dari m a s i n g - m a s i n g media* i+.S. De t e k s i s t e r o l , Fasa k l o r o f o r m y a n g didapat dilakukan d e t e k s i terhadar k a n d u n g a n s t e r o l n y a dengan cara k r o m a t o g r a f i l a pisan tipis. Fasa diam

: K i e s e l g e l 6C F 25^, E # M e r c k tecal 0 , 2 mm

Fasa g e r a k

: H e k s a n : Etil asetat = 6 : 2 C H C l^

Penampak noda

: Etil asetat = 9 : 1

: p e r e a k s i a n i s a l a e h i d - a s a m sulfat

Cara k e r l a : Pa d a l e a p e n g K i e s e l g e l 60 F
l e m p e n g dian g k a t dan dibi

a r k a n m e n g e r i n g p ad a suhu kamar. K e m u d i a n disemprot d e n g a n p e r e a k s i penam p a k n o d a dan dipa n a s k a n p a d a suhu 1 0 5 - 1 1 0

SKRIPSI

C selama 5-10 menit.



ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA DAFTAR GAMBAR. 1# Proses perkembang-biakan Saccharomyces cerevisiae

Recommend Documents