A rendőrség keresi a tettest Az ügy:
Police released surveillance image of the suspect.
A rendőrség keresi azt a személyt, aki hétfőn reggel betört az Intézetbe és dulakodás közben több késsel megölt egy orvostanhallgatót. Szúrásnyomok láthatóak a hát, a nyak és a has területén. A gyilkos eszköz nem került elő. A gyanúsítottról fényképet rögzített a biztonsági kamera: a kb. 25 éves feltehetőleg férfi 180-190 cm magas, szürke farmert, sötét kapucnis pulóvert és maszkot viselt „Az ilyen kegyetlen gyilkosoknak nem kegyelmeznék” – mondta a biztonsági őr, aki kora reggel rátalált a vérbefagyott áldozat testére. Az eset, ami azután történt, hogy 1 héttel korábban egy diáklányt erőszakoltak meg, majd megöltek és testét az út mellé dobták, igen felkavarta a város lakóinak kedélyeit. A feladat: A sorozatgyilkost 3 gyanúsított közül keresi a rendőrség. A feladatod, hogy megállapítsd melyik gyanúsítottnak a DNS mintája található a legutóbbi gyilkosság helyszínén!
„az emberek hazudnak, de a bizonyítékok nem”
Bizonyítékok típusai:
- indirekt (pl. fotó) - direkt (pl. haj) - „hideg nyom” (textil) - „forró nyom” (DNS)
A gyakorlat: 0. mintagyűjtés a helyszínen 1. DNS extrakció 2. DNS amplifikáció (PCR) 3. DNS festés (gél elektroforézis) 4. Minták összevetése
Biológiai minták, mint bizonyítékok • • • • • • • •
Vér ondó nyál vizelet haj fog csont szövet
VÉR:
3ul elegendő DNS kivonáshoz
DNS-extrakció protokollok
SZERVES
vér
SZŰRŐPAPÍR
CHELEX
SDS, DTT, EDTA
proteinase K
vér
Vér beszárítása a speciális szűrőpapíron
víz
INKUBÁLÁS (56 oC)
lyukasztás
CENTRIFUGÁLÁS
INKUBÁLÁS Phenol, chloroform, isoamyl alcohol
CENTRIFUGÁLÁS
Felülúszó ELTÁVOLÍTÁSA VORTEX
5% Chelex
CENTRIFUGÁLÁS
Vizes fázis új csőbe
Felülúszó ELTÁVOLÍTÁSA INKUBÁLÁS (56 oC)
TE puffer
PCR Reagensek
INKUBÁLÁS(100 oC) Centrifuge
DNS KONCENTRÁLÁS (ethanol precipitation)
DNS cc mérés nélkül PCR végrehajtása
CENTRIFUGÁLÁS
DNS cc. mérés
DNS cc. mérés PCR végrehajtása Figure 3.1, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2
Mosás extrakciós pufferben
PCR végrehajtása nd
Edition © 2005 Elsevier Academic Press
1. feladat: DNS preparálás lymphocytákból • • • • • • • • • • • • •
minta: vérfoltos textil darab egy vérfoltot steril ollóval elfelezni, csipesszel Eppendorf-csőbe tenni pipettázz 1000 ul steril vizet a mintához vortex pár perc inkubálás szobahőn vortex centrifugálás 1500 rpm-el, 2 perc ig 950 ul leszív, eldob a textilmintához 150 ul 1% Chelex oldat + 50 ul ProtK pipettázása 5 percig inkubálni kézmelegben vortex 65 Co 2 perc, ProtK inaktiválás jégen tárolni
2. PCR • 5 ul DNS mintához PCR komponensek: • • • • • •
26,5 ul víz 5 ul puffer mix 2,5 ul primer F 2,5 ul primer R 5 ul dNTP Mix 2,5 ul MgCl2
• utoljára: • 1 ul ultra Fast DNS Polimeráz enzim (jégen tárolva) .
PCR Program: CSI 1. 95 Co 2 min 2. 95 Co 10 sec 3. 55 Co 15 sec 4. 72 Co 20 sec • 30x: ciklus 2-4 ismétlése • 1 min 72 Co • 4 Co (összesen kb. 30 min)
Mik a PCR lépései?
Személyazonosság kérdése (DNS-Ujjlenyomat) • Törvényszéki esetek – gyanúsított és bizonyíték egyezés bizonyítása
• • • • • •
Apasági teszt – (mater semper certa est pater nunquam) Tömegkatasztrófa esetek– Történelmi sírok azonosítása Eltűnt személyek azonosítása Katonai DNS-dögcédula Elkövetők DNS adatbázisának létrehozása
Ugyanazok az STR markerek (short tandem repeat) használhatóak
Forensic Sciences 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Igazságügyi Pszichiátria Igazságügyi Pathológia Igazságügyi Toxikológia Igazságügyi Kriminalisztika Igazságügyi Rovartan Igazságügyi Fogászat Igazságügyi Epidemiológia stb.
Igazságügyi Rovartan: A Magyarországon előforduló légyfajok fejlődésének üteme holttesten: (Schranz Dénes nyomán)
lárva növekedési ideje
Házilégy petéje kikel: 10-12 óra múlva
Kék dongólégy petéje kikel: 12-16 óra múlva
Smaragd légy petéje kikel: 12-16 óra múlva
Húslégy Sajtlégy petéje azonnal mozog petéje kikel: (vivipara) 10-12 óra múlva
2. nap 3. nap 4. nap 5. nap
2mm 2-3mm 4-5mm 6-7mm
3-4mm 5-6mm 7-8mm 10-12mm
2mm 2-3mm 3-4mm 5-6mm
3-4mm 5-6mm 7-9mm 10-12mm
1mm 2-3mm 4-5mm 5-6mm
6. nap
7-8mm
13-14mm
7-8mm
13-14mm
Báboz
7. nap
8mm
Báboz
8-9mm
15-16mm
Báb (3-4mm)
8. nap
Báboz
Báb (9-10mm)
Báboz
16-18mm
Báb
9. nap
Báb (5-6mm)
Báb
Báb (6-7mm)
19-20mm
Báb
10. nap 12. nap
Báb Báb
Báb Báb
Báb Báb
Báboz Báb (10-12mm)
Báb Kirepül (4-5mm)
14. nap
Kirepül (7-8mm)
Kirepül (12-13mm)
Kirepül (7-9mm)
Báb
16. nap
Báb, majd a 18. napon kirepül (16-18mm)
A DNS ujjlenyomatvizsgálat elméleti alapjai Minden egyes ember egyedi genommal rendelkezik (kivéve az egypetéjű ikrekeket!). A genomunkat a szüleinktől örököljük. Genetikai variációk sorozatát használhatjuk a különbözőség statisztikai valószínűségének megállapítására
A DNS minta információtartalmát hatékonyan és reprodukálhatóan kell kinyerni (a bíróság több év után is kérhet új vizsgálatot) A jelenlegi DNS-ujjlenyomat standardok nem géneket vesznek figyelembe, a fenotípus tulajdonságairól (rassz, betegségek, hajszín, stb) kevés/semmilyen információt nem kapnak. De a 3. generációs szekvenátorokkal a jövőben minden ismert lesz?
A DNS, mint bizonyíték
Igazságügyi DNS vizsgálatok rövid története Sir Alec Jeffreys
1900-as évek: Landsteiner felfedezi az AB0 vércsoportokat, a szerológia tudománya forradalmasítja a törvényszéki vizsgálatokat. Az elkülönítési próba ereje: kb. 103 1980-as évek: RFLP + Southern blot: Alec Jeffreys kidolgozza az első genetikai marker alapú elkülönítést betegségekre. 6 Southern próbával az elkülönítés ereje: 106-108, személyazonosításra is alkalmazzák. 1984: A Colin-Pitchfork ügy Angliában: először alkalmaz a bíróság DNS alapú bizonyítékot két meggyilkolt diáklány esetében. 5000 Narborough környéki férfi önkéntes véradása útján megtalálják a gyilkost. Hátrányok: nagy mennyiségű (50-100 ng) tiszta, nagy molekulasúlyú DNS kell hozzá, nem ideális a gyakran degradálódott mintákhoz
Igazságügyi DNS vizsgálatok rövid története 1984: Karry Mullis kidolgozza a PCR technikát • Sokkal kevesebb (1-2ng), rossz minőségű minta is elég hozzá • A próba ereje egy szekvencia esetén 102-106 ,ami kevés az elkülönítéshez 1986: PCR + STR: nem kódoló, 4-7 ismétlődésekből álló, egyénenként változó kromoszóma szakasz vizsgálata. Nagyon kevés DNS-t igényel (<1ng), az elkülönítési próba ereje 1014-1023 A Föld lakossága 109 nagyságrendű! 1987 az FBI és NIH támogatásával létrehozzák a Combined DNA Index System (CoDIS) adatbázist. Ebbe helyszínelési minták és elkövetők anyagai egyaránt bekerülnek. Jelenleg kb. 9M adatot tartalmaz. 1990-es évek: a DNS vizsgálat megkérdőjelezhetetlen igazságügyi bizonyítéknak van feltüntetve. „Olyan esetekben, ahol 1:33 Mrd az esélye annak, hogy nem a tettes DNS-ét találták meg nincs is szükség bíróságokra!” - Robert Brower főügyész
az O.J. Simpson ügy
Az évszázad pere: “Dollárok v. DNS” vagy California v OJ Simpson
1995: OJ Simpson-t az esküdtszék Felmentette!
Igazságügyi eljárásban használt genetikai markerek összehasonlítása
magas
RFLP Multi-Locus Próbák
Multiplex PCR STRs
RFLP Single Locus Próbák
próba ereje (genetikai elkülönítés)
mtDNS PCR: HV1, HV2
PolyMarker STR próba D1S80 single STR Próba ABO vércsoport
alacsony lassú
Technika sebessége
Figure 1.1, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
gyors
Igazságügyi DNS vizsgálat markerei ma: STR: 2-7 bp ismétlődő egységekből álló allélok, a centromer környékén, egyénenként változó méretűek. Az FBI 1996-ban létrehozott CODIS adatbázisa ezen alapul.
Y-STR: az Y kromoszómaspecifikus STR allélok az apai leszármazást mutatják. A férfi nem megállapításánál (szexuális bűncselekmények) használt lókuszok.
Mitochondriális DNS: a sejtmag nélküli sejtekben is van (haj, fog, csont), de csak az anyai leszármazás egyezésére/kizárására alkalmas. A történelmi sírok ill tömegsírok vizsgálatánál alkalmas lehet a degradált nukleáris DNS vizsgálat helyettesítésére. (Romanov család, vietnámi sírok) Mini-STR: degradált minták esetén a sejtmagi STR-ek alternatív lehetősége: egészen kicsi DNS fragmentek amplifikációjával. (2001 szept.11. maradványok esetén pl. ezt használták.) SNPs: single nt polymorphizmusok: egyetlen bázis amplifikációjával és populációs gyakoriságának összehasonlításával http://www.forensicdnacenter.com
Minisatellite Marker (D1S80) Flanking regions
Repeat region GAGGACCACCAGGAAG
16 bp repeat unit
STR Marker (TH01) Flanking regions
Repeat region TCAT
4 bp repeat unit Figure 5.1, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
Polymorphismusok a homológ kromoszómákon
(A) Hossz polymorphismus: VNTR és STR – Technika: (VNTR-PCR) ---------(AATG)(AATG)(AATG)------------------(AATG)(AATG)----------
3 repeats 2 repeats
(B) Szekvencia polymorphismus: SNP – Technika: (AS-PCR) --------AGACTAGACATT-------
--------AGATTAGGCATT------Figure 2.5, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
Y-STR Csak a férfi Y kromoszóma lókuszai amplifikálhatók vele, amikor a PCR hatékonysága nem egyenlő a női és férfi STR-ek esetén, jól használható
•
Problémák: ~99%-át a bűncselekményeknek férfiak követik el…
„Dzsingisz kán érvelés”: Az apai rokonok mind tartalmazzák a hasonló Y-STR haplotípusokat (pl.10%-a közép-ázsiaiaknak hordozza Dzsingisz kán haplotípusát)
16024
Hypervariable Region1
16365
73
1
340
HV2
HV1
Hypervariable Region2 576
Control region (D-loop)
16024
OH
F 12S rRNA
T
Heavy (H) strand
cyt b
22 tRNAs 2 rRNAs
V
13 genes
16S Mitochondriális 1/16,569 DNS (mtDNS) rRNA
Előnyök: Egyetlen sejt tartalmaz E ~1000 mt-ot, 1 sejt szenzitivitás ND6 Égett minták esetén, haj, csontmaradványok esetén ND5 Anyai rokonságot közvetlenülMitochondria mutatja
P
• • •
L2 S2 H
“16,569” bp
L1 ND1 Q
I M
O Light (L) A ND4 ND2 Hátrányok: L N strand Egyetlen sejt tartalmaz ~1000 mt-ot, 1 sejt szenzitivitás miattCa kontamináció lehetősége Y nagyobb! W ND4L Heteroplasmia – nem homogén mt populáció a sejtekben R ND3
9-bp deletion
S1
COI
G COIII ATP6
ATP8
COII K
Figure 10.1, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
D
Single Nucleotide Polymorphisms (SNPs) • • •
Pontmutációk (bázis szubtitúciók), amelyek gyakorisága 1%-nál nagyobb a populációban 5 Millió kb a humán genomban Minden-Semmi válasz alkalmazható micro-array vizsgálatban
• •
~50 SNPs ugyanakkora erővel jósol jó kizárást, mint a 13 STR locus A magáncégek is alkalmazzák populációgenetikai vizsgálatoknaál
Mi a technikai alapja az STR lókuszok vizsgálatának?
Laser Capillary filled with polymer solution
Detecti on window
Kapilláris Gélelektroforézis (cathode)
Inlet Buffer
5-20 kV
+ (anode)
Outlet Buffer
Data Acquisition Sample tray automatically Sample tray moves beneath the cathode end of the capillary to deliver each sample in succession
Kapillárisok
Fluoreszcensen jelölt primerekkel Elektródák a folyadék injekcióhoz
(A) Multiplex PCR: egyszerre 3 allélt tudunk adott lókuszról amplifikálni a homológ kromoszóma párról Deletion of Locus B
Locus C
Locus A
Locus A
Locus C
Locus B
(B) A PCR termékeket méret alapján elkülönítjük kapilláris gélelektroforézissel: A peakek jelentik a termékeket: A
B
C
(RFU)
RFU: relative fluorescence unit t: time
10min
15 min
small
large
50 bp
(t)
70 bp
Modified Figure 4.3 J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
CODIS (Combined DNA Index System, developed by FBI and NIH)
Kromoszóma szám
Nem-specifikus marker
FBI’s core STR Lókuszok: 13
D8S1179
D21S11
(12 alleles)
(24 alleles)
D3S1358 (8 alleles)
D19S433 (15 alleles)
D7S820
CSF1PO
(10 alleles)
(10 alleles)
TH01
D13S317
D16S539
(10 alleles)
(8 alleles)
(9 alleles)
VWA
TPOX
(14 alleles)
(8 alleles)
AMEL
D5S818
FGA low
(2 alleles)
(10 alleles)
(19 alleles)
100 bp
150 bp 139bp 160 bp
200 bp
250 bp*
D2S1338
Blue panel
Green panel
(14 alleles)
Yellow panel
D18S51 (23 alleles)
Red panel
FGA high (9 alleles)
300 bp
Orange panel 340 bp 350 bp
LIZ-labeled GS500 DNA sizing standard Figure 5.6, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
Hogyan értelmezzük a CODIS file STR adatokat?
GeneScan
Genotyper
Allél (repeatek száma): az azonos körülmények között Futtatott referencia mintával hasonlítva pontosan megadja a repeatek számát Peak magasság: relativ fluorescencia unit (RFU)
Helyszíni STR Profil összevetése 2 gyanúsítottéval
Gyanúsított 1 Exklúzió: Nincs találat
Gyanúsított 2
Inklúzió: Van találat
Bizonyíték
Mekkora az esély arra, hogy a két független minta az adott populációban azonos STR mintázatot ad? A minta egyezési valószínűsége a valódi tettessel nem mindig egyértelmű. Ez az „ügyészi tévedés” lehetősége: Ha egy elefántnak négy lába van, kicsi a valószínűsége, hogy ha egy állatnak 4 lába van, az elefánt.
Norrgard, K. (2008) Forensics, DNA fingerprinting, and CODIS. Nature Education 1(1)
A gyakorlatban két minta egyezésének valószínűsége: ca.1:100 000 000 Miért?
Magyarázza el az apasági per mintavételét!
D1 = biologiai lány 2 = anya gyereke,
S1 = a pár biologikai fia S2 = adoptált gyerek
(A) Mendeli Öröklődés
apa
anya A,B
C,D
B,C
gyerek Apasági vizsgálat str-ekkel
(B) Pl.:
11,14
8,12
Mik a lehetséges kombinácók? Csak az apa génjei:
12,14
8,14
11,12
12,14
8,11
14
14
11
14
11
Figure 23.2, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
(A) STR lókuszok direkt összevetése egy tárgyyal: DNS Profil: tömegkataszrófa esetén
D5S818
CSF1PO
D7S820 D13S317
D16S539
Penta D
DNA profil közvetlen bizonyítékkal
(B) Indirekt bizonyítás: rokonvizsgálat: áldozat D5S818 D13S317 D7S820
?
feleség
D16S539
CSF1PO
Penta D
11,13
8,12
8,12
8,9
10,12
8,10
Feleség
11,13
8,14
8,9
9,13
10,10
9,10
fiú
Jósolt genotípus
11,? or ?,13
?,14
9,?
?,13
?,10
9,?
Aktuális genotípus
12,13
11,14
9,9
11,13
10,10
9,12
fiú
Figure 24.1, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
apa
3. Gélelektroforézis
• adj 5 ul PCR mintát az előre elkészített 5 ul kék mintafelvívőhöz. • Vidd fel a mintát (10 ul) GelRedes gélre • Indítsd el 30 min, 100V
Feladat: VNTR ANALYSIS AZ FBI ÁLTAL IS HASZNÁLT EGYIK VNTR LOKUSZ (FGA) VIZSGÁLATA AZ 5 GYANÚSÍTOTT KÖZÖTT. AZ ISMÉTLŐDŐ EGYSÉG HOSSZA 4 bp, SZEKVENCIÁJA: TTTC.
AZ ISMÉTLŐDÉSEK SZÁMA 5-250, TEHÁT 60-1040 bp HOSSZÚSÁGÚ TERMÉKEKET VÁRUNK (természetesen a két primer hosszát is beleszámítva). A PCR primereket az ismétlődések két oldalán levő (konszenzus) szekvenciákra terveztük: 1 2 3 4 5 P1: gctagtaacggcattaccag, P2: catcgcataagaatttcacg
GYAKORLATI FELADAT-VNTR ANALÍZIS FUTTASSA MEG GÉLEN AZ ELŐZŐ CSOPORT REAKCIÓIT, ÉS ÁLLAPÍTSA MEG, HOGY HÁNY ISMÉTLŐDÉST TARTALMAZNAK AZ AMPLIFIKÁLT ALLÉLOK! 1
2
3
4
5 1900 770 620
760
340
360
336
340
420 340 270
272
180 152
140 120 100 90
ismétlődések (tandem repeat)száma:
75
180
58
74
75
75
80
28
25
15
két primerhosszat (40bp) levonva osszuk el a DNS fragmentumhos szat 4-el, így megkapjuk az ismétlődések számát
1. FELADAT A felső szekvencia vad típusú (+), az alsó mutáns (-). Keressük meg a mutációt! Milyen típusú mutáció? (+) CCT GAC TTT AGC ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAT.................. CTA GCG CCA TCC CTT CTA ACT
(-) CCT GAC TTT AGC ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAA..................... CTA GCG CCA TCC CTT CTA ACT
A felső szekvencia vad típusú, az alsó mutáns. Keressük meg a mutációt! Milyen típusú mutáció? pontmutáció, aminósavcserét eredményez, ”misszensz” Milyen módszert ismer a pontmutációk/SNP-k kimutatására? ASA-PCR (allélspecifikus Tervezzen primereket a két allél allélspecifikus amplifikációjához! (+) CCT GAC TTT AGC ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAT.................. CTA GCG CCA TCC CTT CTA ACT
(-) CCT GAC TTT AGC ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAA..................... CTA GCG CCA TCC CTT CTA ACT
PCR TERMÉKEK
5’ ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAT 3’
5’ AGT TAG AAG GGA TGG CGC TAG 3’
(+) 5’ ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAT........... CTA GCG CCA TCC CTT CTA ACT 3’
3’ TAC GGC CCT AGC CAA GAA TTA
GAT CGC GGT AGG GAA GAT TGA 5’
(-) 5’ CCT GAC TTT AGC ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAA........... CTA GCG CCA TCC CTT CTA ACT 3’
3’ GGA CTG AAA TCG TAC GGC CCT AGC CAA GAA TTT
5’ CCT GAC TTT AGC ATG CCG GGA TCG GTT CTT AAA3’
GAT CGC GGT AGG GAA GAT TGA 5’
5’ AGT TAG AAG GGA TGG CGC TAG 3’
PCR TERMÉKEK GÉLELEKTROFORÉZISE
+/+
-/-
+/-
2. FELADAT Ella keresi fel ön rendelőjét, lányával, Lindával. Ella elmondja, hogy Linda apja az Öröm együttes valamelyik tagja. Ön az együttes tagjaitól száramazó DNS minták alapján elvégzi a VNTR analízist. Nos, ki Linda apja? Miért? Miért különleges a B mikroszatellit? VNTR
Ella
Linda
Bálint
Kolos
Donát
Aladár
Álmos
A
7 & 8
2 & 7
3 & 7
2 & 7
2 & 8
3 & 7
3 & 2
B
4 & 5
6 &
4
7
6
4
6
C
11 & 8
11 & 9
9 & 10
13 & 8
10
9 & 12
9 & 13
D
7 & 19
21 & 7
21 & 7
7 & 9
21 & 7
15 & 8
21 & 15
E
10 & 6
12 & 6
6 & 9
12 & 9
17 & 10
6 & 12
17 & 12
4
A jövő/jelen igazságügyi tudománya? A Genome-Wide Association vizsgálat 5 lókuszt azonosított (PRDM16, PAX3, TP63, C5orf50, and COL17A1) Amelyek az arc morfológiáját befolyásolják. Pl. A Pax3 a nasion hosszát.
Citation: Liu F, van der Lijn F, Schurmann C, Zhu G, Chakravarty MM, et al. (2012) A Genome-Wide Association Study Identifies Five Loci Influencing Facial Morphology in Europeans. PLoS Genet 8(9): e1002932.
Az ASA alapján határozza meg, hogy milyen szemszínű és hajszínű lehetett a tettes! Gene/SNP
HAJ
SZEM Blue/green
Brown
Blond/red
Brown
AA/TT
GG/CC
AA/TT
GG/CC
AA/TT
GG/CC
HERC2 Rs12913832
GG/CC
Oca2 rs1800407
AA/TT
Tyr Rs1393350
AA/TT
GG/CC
AA/TT
GG/CC
TT/AA
CC/GG
TT/AA
CC/GG
GG/CC
CC/GG
GG/CC
CC/GG
AA/TT
CC/GG
AA/TT
CC/GG
IRF4 rs12203592
SLC24A5 rrs16891982
ExoC2 rs49592270
The HIrisPlex system for simultaneous prediction of hair and eye colour from DNA Forensic Science International: Genetics Volume 7, Issue 1, January 2013, Pages 98–115 IrisPlex: A Sensitive DNA Tool for Accurate Prediction of Blue and Brown Eye Colour in the Absence of Ancestry Information Journal:
A szekvenálás eredménye: Rs12913832: Rs1800407: Rs1393350: Rs12203592: Rrs16891982: Rs49592270:
AA GG GG CT CC AC
Hasonlítsa össze az amplifikált mintákat a referencia képpel! Határozza meg az ismétlődések száma alapján a gyanúsítottak közül a tettest! Reference Gel
gyanúsítottak 1
2
3
áldozat
marker
1900 620 272
336
340
360
152
420 340 270 180
120 140 100 90
1
2
3
Ki a lehetséges tettes?
Fogalmak: • PCR lépései • Személyazonosítás technikai alapjai: • RFLP, VNTR, STR, SNP profil, CODIS, ASA