9.htm (accessed 18 agustus 2013)

DAFTAR PUSTAKA

1. Azizahwati, Maryati Kurniadi, Heidi Hidayati, analisis zat warna sintetik terlarang unuk makanan yang beredar di pasaran. Available from: URL: http://journal.ui.ac.id/index.php/mik/article/download/1185/1091 (accessed 7 februari 2013) 2. Ditjend POM Depkes RI,1990 Nomor : 00386/C/SK/II/90 tentang Perubahan Lampiran Peraturan Menteri Kesehatan Nomor ; 239/ Menkes/Per/V/85 tentang zat warna tertentu yang dinyatakan sebagai bahan berbahaya. 3. Depkes RI, 1988. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 722/Menkes/Per/IX/1988 tentang Bahan Tambahan Makanan. Jakarta. 4. Soleh, sardjono,K. dan wisnu, C. Identifikasi zat warna yang dilarang (Rhodamin dan Methanyl Yellow) pada produk makanan dan minuman. Bandung. Jurusan Teknologi Pangan, FT-universitas pasudan; 2003. 5. Penyusun. Patologi Ginjal dan Saluran Kemih. 2008. Semarang: Badan Penerbit Universitas Diponegoro Semarang. 6. Risma Dumiri Manurung. Manfaat Pemberian Madu Terhadap Perubahan Kadar Ureum dan Kreatinin serta Makroskopik Ginjal dan Histopatologi Tubulus Proksimal Ginjal Menci (Mus musculus L.) Jantan yang diberi Rhodamin B. Magister Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Medan. 2011. 7. Umi Fatimah. Struktur Histologis Hepar dan Ren Tikus Putih (Rattus Norvegicus) Feminina Gravid Setelah Pemberian Rhodamin B secara oral. Fakultas MIPA Universitas Sebelas Maret. Surakarta. 2012.

45

46

8. Ariani. Studi Toksisitas dan Bioakumulasi Senyawa Rhodamine B. Skripsi. Depok: Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam Departemen Kimia Universitas Indonesia; 2004. 9. Sciencelab . Material Safety Data Sheet Rhodamine B, O MSDS . Available from: URL: http://www.sciencelab.com/msds.php?msdsId=9924812 10. Astuti R, Meikawati W, Siti S. Penggunaan Zat Warna “Rhodamin B” pada Terasi Berdasarkan Pengetahuan dan Sikap Produsen Terasi di Desa Bonang Kecamatan Lasem Kabupaten Rembang. 2010. Available from : URL : http://jurnal.unimus.ac.id 11. S. Hamdani. Rhodamine B. Available from: URL: http://catatankimia.com/catatan/rhodaminb.html (accessed 23 november 2013) 12. Chemical Product of Rhodamine B. Available from: URL: http://www.chemicalbook.com/ChemicalProductProperty_EN_CB748556 9.htm (accessed 18 agustus 2013). 13. N. Bhadusha, T. Ananthabaskaran. Kinetic, Thermodynamic and Equilibrium Studies on Uptake of Rhodamine B onto ZnCl2 Activated Low Cost Carbon.2011;9(1) Available from : URL: downloads.hindawi.com/journals/chem/2012/873026.pdf 14. Pamela Iryanti Widjanarko. Kinetika Absorpsi Zat Warna Congo Red dan Rhodamine B dengan Menggunakan Serabut Kelapa dan Ampas Tebu. Jurnal Teknik Kimia Indonesia.2006;5(3):416 15. Aroni, Rijali. Kajian Penghambatan Efek Toksik Karmoisin dan Rhodamin Terhadap Proliferasi Sel Limfosit Tikus Oleh Ekstrak Daun Jelatang (Urtica dioica L.). 2011. p. 4-6. Available from: http://repository.ipb.ac.id. 16. Santa Cruz. Material Safety Data Sheet of Rhodamine B. Available from; URL : http://datasheets.scbt.com/sc-203756.pdf.

47

17. Dr. Ir. Wisnu Cahyadi, M.Si. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. 1st ed. Jakarta. Ikrar Mandiriabadi; 2009 18. Sylvia AP, Lorraine MW. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit Volume 1 Edisi 6. Jakarta : EGC :2005 : p.868-994 19. Rhodamine B. http://id.scribd.com/doc/92982912/Rhodamin-B 20. Drake et Al. Gray’s Anatomy for Students 2nd Edition. 2010. Philadephia: Elsenvier. p. 355-59 21. Gartner, L. Hiatt. Color Textbook of Histology 3rd Edition. 2007. Available from : www.studentconsult.com

22. Macfarlane,

Reid,

Callander.

Pathology

Illustrated

5th

Edition.

Philadephia: Elsenvier. p. 429-32 23. Victor P. Eroschenko, Atlas Histologi Di Fiore. Edisi 9. Jakarta : EGC :2003 :p.247-255 24. Penyusun, Lecture Notes Histologi 2. 2010. Semarang: Badan Penerbit Universitas Diponegoro Semarang. 25. Stuktur

Histologi

Ginjal.

Available

from:

URL:

http://www.proteinatlas.org/dictionary/normal/kidney/detail+1/magnificati on+1 26. Robbins SL, Kumar V, Oswari J, editor. Buku ajar patologi I (Basic Pathology). Jakarta: EGC; 1995 27. Sarjadi, Wijaya I, Endro PB, Sandhana U. Panduan praktikum patologi anatomi. Ed 2. Semarang: Badan Penerbit Universitas Diponegoro; 2003 28. Underwood JCE. Ginjal dan traktus urinarius. In: Sarjadi, editor. Patologi umum dan sistemik. 2nd ED. Jakarta: EGC; 1999. P.665-668. 29. Macfarlane, Reid, Callander. Pathology Illustrated 5 th Edition. Available from: URL: http://www.freebook4u.net/2011/04/pathology-illustrated.html 30. Sudigdo S, Sofyan I. Dasar-dasar Metodologi Penelitian Klinis, Edisi 2. Jakarta: Sagung Seto; 2002 31. MacSween RNM, Whaley Keith, editor. Muir’s textbook of pathology. 13th ed. Great Britain; 1992

48

32. Hudgson E, Levi PE, A textbook of modern toxicology. 2nd ed. New York: The McGraw-Hill; 2001: 492-500 33. Robbins SL, Kumar V, Oswari J, editor. Buku ajar patologi II (Basic Pathology). Jakarta: EGC; 1995 34. Wijaya I, Miranti IP. Patologi ginjal & saluran kemih. Ed 3. Semarang: Badan Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro; 2005

49

Lampiran 1. Ethical clearance

50

Lampiran 2. Surat keterangan melakukan penelitian

51

Lampiran 3. Cara perhitungan dosis 1) Berat molekul sebesar 479 g/mol 2) Dosis lethal Rhodamine B tikus wistar = 887 mg/kgBB/hari a) Perlakuan pertama (kelompok kontrol) = 0 Dosis lethal = 0 x 887 = 0 mg/kgBB/hari b) Perlakuan kedua = 1/16 Dosis lethal = 1/16 x 887 = 55,44 mg/kgBB/hari c) Perlakuan ketiga = 1/8 Dosis lethal = 1/8 x 887 = 110,88 mg/kgBB/hari. d) Perlakuan keempat = 1/4 Dosis lethal = 1/4 x 887 = 221,75 mg/kgBB/hari e) Perlakuan kelima = 1/2 Dosis lethal = 1/2 x 887 = 443,5 mg/kgBB/hari. f) Perlakuan keenam = 1 Dosis lethal = 1 x 887 = 887 mg/kgBB/hari

52

Lampiran 4. Metode baku histologis pemeriksaan jaringan

A.

Cara pengambilan jaringan dan fiksasi 1) Mengambil jaringan sesegera mungkin setelah tikus wistar diterminasi dengan cara dislokasi leher (maksimal 2 jam) 2) Kemudian memasukkan ke dalam larutan fiksasi dengan urutan sebagai berikut: a) Fiksasi dalam larutan formalin 10% b) Dehidrasi dengan alcohol 30% selama 20 menit I, 20 menit II, dan 20 menit III Lalu lanjutkan dengan Alkohol 40% 1 jam Alkohol 50% 1 jam Alkohol 70% 1 jam Alkohol 80% 1 jam Alkohol 90% 1 jam Alkohol 96% 1 jam (alkohol 70-80% dapat ditunda sampai keesokan harinya c) Larutan xylol alcohol 1 : 1 dengan waktu kurang lebih 24 jam d) clearing dengan larutan xylol 1,2,3 dengan waktu masing-masing 20 menit, sehingga jaringan terlihat tembus pandang e) xylol parafin 1 : 1 selama 20 menit/24 jam dengan dipanaskan dalam oven 60o celcius

53

f) Embeding dan bloking : parafin 1,2,3 selama 20 menit, lalu jaringan dicetak blok parafin kemudian didinginkan, sehingga cetakan dapat dibuka g) Trimming: memotong balok-balok parafin sehingga jaringan mudah dipotong

B. Cara pemotong blok (sectioning) 1) Menyiapkan kaca objek bersih 2) Kaca objek diberi albumin ditengahnya 3) Blok yang sudah disiapkan dipotong dengan ketebalan 5 mikron, lalu dimasukkan dalam air panas kurang lebih 60 o celcius. Setelah jaringan mengembang, jaringan diambil dengan kaca objek yang sudah diberi albumin 4) keringkan 5) parafin yang ada pada kaca objek atau jaringan dihilangkan dengan dipanaskan dalam oven 60o celcius atau drngan tungku

C. Pewarnaan HE Slide jaringan dimasukkan dalam : 1) Xylol 1, xylol 2, xylol 3 masing-masing 10 menit 2) Rebidrasi dengan alcohol xylol selama 5 menit 3) Bilas alcohol 30-96% masing-masing kurang lebih 30 menit 4) Bilas aquades 1x kurang lebih 10 menit

54

5) Rendam dalam hematoksilin kurang lebih 10 menit 6) Bilas dengan air mengalir sampai bersih 7) Bilas aquades, lalu acid alcohol (alcohol+Nacl 0,9%) 8) Bilas alkohol 50-96% 9) Eosin kurang lebih 2-5% 10) Bilas alkohol 96% 2x 11) Bilas alkohol xylol 12) Keringkan dengan kertas saring, langsung dibersihkan kotorankotoran yang ada disekitar jaringan 13) Xylol 1 (5 menit), xylol 2 (5 menit), tetesi asam Canada, langsung ditutup kaca penutup 14) Preparat sudah siap untuk diamati

D. Pewarnaan PAS JONES 1) Lakukan deparafinisasi dan hidrasi dengan aquadest selama 10 menit 2) Rendam dalam periodic acid 0,5% selama 30 menit 3) Bilas dengan aquadest 4) Rendam dalam larutan GMS yang berisi aquadest, methenamine silver 6% AgNO3 2,5% dan borak 5%, panaskan dalam oven dengan suhu 600 C, selama 30 menit, cek tiap 10 menit sampai warna berubah menjadi coklat kayu 5) Bilas dengan aquadest

55

6) Tetesi Gold chloride 0,2 %, 5 tetes selama 1 menit atau sampai berwarna abu-abu 7) Bilas dengan aquadest 8) Tetesi Na thio sulfa 1% selama 1 menit 9) Cuci dalam air 10) Rendam dalam hematoksilin selama 10 menit 11) Cuci dalam air 12) Rendam dalam eosin selama 5 menit 13) Keringkan, bersihkan slide dan beri coverslip

56

Lampiran 5. Jumlah tubulus normal dalam 5 lapangan pandang lapangan pandang

KELOMPOK 1

2

3

4

5

total

K1

54

54

49

59

50

266

K2

55

52

54

49

56

266

K3

48

47

51

46

45

237

K4

49

49

46

50

45

239

K5

53

52

51

55

56

267

P1-A

35

34

38

36

35

178

P1-B

33

33

35

32

34

167

P1-C

36

35

34

36

33

174

P1-D

35

36

34

34

35

174

P1-E

36

36

36

34

33

175

P2-A

23

22

26

21

22

114

P2-B

24

22

23

23

26

118

P2-C

23

23

29

25

24

124

P2-D

22

26

23

24

23

118

P2-E

23

24

21

23

23

114

P3-A

11

12

13

10

16

62

P3-B

12

14

17

15

14

72

P3-C

16

16

16

10

13

71

P3-D

14

16

11

11

13

65

P3-E

10

12

10

14

14

60

P4-A

13

14

10

12

11

60

P4-B

12

10

13

12

13

60

P4-C

10

10

13

10

11

54

P4-D

11

14

11

12

11

59

P4-E

10

10

13

15

11

59

57

Lampiran 6. Hasil Analisis Pengamatan Histologis Tubulus Normal

Explore

Case Processing Summary Cases Valid kelompok tubulus normal

N

Missing

Percent

N

Total

Percent

N

Percent

kontrol

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 1

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 2

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 3

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 4

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Descriptives kelompok tubulus normal

kontrol

Statistic Mean 95% Confidence Interval for Mean

255.00 Lower Bound

235.70

Upper Bound

274.30

5% Trimmed Mean

255.33

Median

266.00

Variance Std. Deviation

15.540 237

Maximum

267

Range

30

Interquartile Range

29

Kurtosis

6.950

241.500

Minimum

Skewness

Std. Error

-.615

.913

-3.273

2.000

58

perlakuan 1

Mean 95% Confidence Interval for Mean

173.60 Lower Bound

168.59

Upper Bound

178.61

5% Trimmed Mean

173.72

Median

174.00

Variance

16.300

Std. Deviation

4.037

Minimum

167

Maximum

178

Range

11

Interquartile Range

6

Skewness Kurtosis perlakuan 2


-1.263

.913

2.709

2.000

117.60

1.833

Lower Bound

112.51

Upper Bound

122.69

5% Trimmed Mean

117.44

Median

118.00

Variance

16.800

Std. Deviation

4.099

Minimum

114

Maximum

124

Range

10

Interquartile Range

7


Mean 95% Confidence Interval for Mean 5% Trimmed Mean

1.806

1.022

.913

.918

2.000

66.00

2.387

Lower Bound

59.37

Upper Bound

72.63 66.00

59

Median

65.00

Variance

28.500

Std. Deviation

5.339

Minimum

60

Maximum

72

Range

12

Interquartile Range

11



.164

.913

-2.654

2.000

58.40

1.122

Lower Bound

55.28

Upper Bound

61.52

5% Trimmed Mean

58.56

Median

59.00

Variance

6.300

Std. Deviation

2.510

Minimum

54

Maximum

60

Range

6

Interquartile Range

4

Skewness Kurtosis

-2.017

.913

4.225

2.000

Tests of Normality Kolmogorov-Smirnov kelompok tubulus normal

Statistic

df

a

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

df

Sig.

kontrol

.360

5

.032

.725

5

.017

perlakuan 1

.339

5

.061

.875

5

.287

perlakuan 2

.261

5

.200

*

.862

5

.236

60

perlakuan 3

.226

5

.200

*

.903

5

.429

perlakuan 4

.394

5

.011

.710

5

.012

a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance.

Karena data signifikansinya tidak normal (p < 0.05) , maka data ditransformasikan

Explore

Case Processing Summary Cases Valid kelompok tubulus_trans

N

Missing

Percent

N

Total

Percent

N

Percent

kontrol

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 1

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 2

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 3

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

perlakuan 4

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Descriptives kelompok tubulus_trans

kontrol

Statistic Mean 95% Confidence Interval for Mean

2.4059 Lower Bound

2.3726

Upper Bound

2.4392

5% Trimmed Mean

2.4065

Median

2.4249

Variance Std. Deviation Minimum

.001 .02680 2.37

Std. Error .01198

61

Maximum

2.43

Range

.05

Interquartile Range

.05

Skewness

perlakuan 1

-.616

.913

Kurtosis

-3.267

2.000

Mean

2.2395

.00456

95% Confidence Interval for Mean

Lower Bound

2.2268

Upper Bound

2.2521

5% Trimmed Mean

2.2398

Median

2.2405

Variance

.000

Std. Deviation

.01019

Minimum

2.22

Maximum

2.25

Range

.03

Interquartile Range

.02



-1.307

.913

2.780

2.000

2.0702

.00670

Lower Bound

2.0516

Upper Bound

2.0888

5% Trimmed Mean

2.0696

Median

2.0719


.000 .01499

Minimum

2.06

Maximum

2.09

Range

.04

Interquartile Range

.03

Skewness

.970

.913

62

Kurtosis perlakuan 3


2.000

1.8184

.01569

Lower Bound

1.7749

Upper Bound

1.8620

5% Trimmed Mean

1.8185

Median

1.8129

Variance

.001

Std. Deviation

.03508

Minimum

1.78

Maximum

1.86

Range

.08

Interquartile Range

.07

Skewness

perlakuan 4

.755

.110

.913

Kurtosis

-2.596

2.000

Mean

1.7661

.00858

95% Confidence Interval for Mean

Lower Bound

1.7423

Upper Bound

1.7899

5% Trimmed Mean

1.7673

Median

1.7709


.000 .01918

Minimum

1.73

Maximum

1.78

Range

.05

Interquartile Range

.03

Skewness Kurtosis

-2.036

.913

4.292

2.000

63

Tests of Normality Kolmogorov-Smirnov kelompok tubulus_trans

Statistic

df

a

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

df

Sig.

kontrol

.361

5

.032

.725

5

.017

perlakuan 1

.343

5

.055

.870

5

.266

perlakuan 2

.255

5

.200

*

.866

5

.249

perlakuan 3

.225

5

.200

*

.908

5

.453

perlakuan 4

.398

5

.009

.703

5

.010

a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance.

Karena setelah data diransformasikan lalu dilakukan uji normalitas tetap tidak normal ( p < 0.05), maka selanjutnya dilakukan uji non parametrik yaitu uji kruskal wallis.

Kruskal-Wallis Test

Ranks kelompok tubulus normal

N

Mean Rank

kontrol

5

23.00

perlakuan 1

5

18.00

perlakuan 2

5

13.00

perlakuan 3

5

7.80

perlakuan 4

5

3.20

Total

25

64

Test Statistics

a,b

tubulus normal Chi-Square

22.979

df

4

Asymp. Sig.

.000

a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok

Di dapatkan hasil p = 0.000 (p > 0.05) yang berarti ada beda bermakna dan signifikan

Mann-Whitney Test


N

Mean Rank

Sum of Ranks

kontrol

5

8.00

40.00

perlakuan 1

5

3.00

15.00

Total

Test Statistics

10

b

tubulus normal Mann-Whitney U

.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.627

Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok

.009 a

.008

65


N

Mean Rank

Sum of Ranks

kontrol

5

8.00

40.00

perlakuan 2

5

3.00

15.00

Total

Test Statistics

10

b


.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.635

Asymp. Sig. (2-tailed)

.008 a

Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

.008

a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok


N

Mean Rank

kontrol

5

8.00

40.00

perlakuan 3

5

3.00

15.00

Total

Test Statistics

10

b


Sum of Ranks

.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.619

66


.009 a


.008



N

Mean Rank

Sum of Ranks

kontrol

5

8.00

40.00

perlakuan 4

5

3.00

15.00

Total

Test Statistics

10

b


.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.635


.008 a


.008



N

Mean Rank

Sum of Ranks

perlakuan 1

5

8.00

40.00

perlakuan 2

5

3.00

15.00

Total

10

67

Test Statistics

b


.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.635


.008 a


.008



N

Mean Rank

Sum of Ranks

perlakuan 1

5

8.00

40.00

perlakuan 3

5

3.00

15.00

Total

Test Statistics

10

b


.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.619


.009 a


.008



perlakuan 1

N

Mean Rank 5

8.00

Sum of Ranks 40.00

68

perlakuan 4

5

Total

Test Statistics

3.00

15.00

10

b


.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.635


.008 a


.008



N

Mean Rank

Sum of Ranks

perlakuan 2

5

8.00

40.00

perlakuan 3

5

3.00

15.00

Total

Test Statistics

10

b


.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.627

Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok

.009 a

.008

69


N

Mean Rank

Sum of Ranks

perlakuan 2

5

8.00

40.00

perlakuan 4

5

3.00

15.00

Total

Test Statistics

10

b


.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.643


.008 a


.008



N

Mean Rank

perlakuan 3

5

7.80

39.00

perlakuan 4

5

3.20

16.00

Total

Test Statistics

10

b


Sum of Ranks

1.000

Wilcoxon W

16.000

Z

-2.440

70

Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

.015 a

.016


Lampiran 7. Dokumentasi penelitian

Gambar 14. Proses penelitian a. Pemilihan tikus sesuai kriteria inklusi dan ekskusi; b.tikus diberi kandang secara terpisah; c.tikus diberi Rhodamine B selama 12 minggu; d. Preparat; e. Fiksasi preparat; f. pengecatan

71

Gambar 15. Pengamatan jaringan dengan setelah organ dijadikan preparat di lab.PA, pengamatan menggunakna mikroskop perbesaran 100x dan kemudian difoto dengan menggunakan alat eyepiece camera. Lampiran 8. Biodata penulis Identitas Nama NIM Tempat/tanggal lahir Jenis kelamin Alamat No.hp Email

:Seia Mahanani :G2A009059 :Semarang, 5 september 1991 :Perempuan :Jl. Hanoman Raya no.419 krapyak semarang :085659070700 :[email protected]

Riwayat Pendidikan Formal 1.SD :MI Pembangunan UIN JKT Lulus tahun : 2003 2.SMP :MTS Pembangunan UIN JKT Lulus tahun : 2006 3.SMA : SMA Negeri 3 JKT Lulus tahun : 2009 4.SI : Fakultas Kedokteran Univeritas Diponegoro Masuk tahun : 2009

9.htm (accessed 18 agustus 2013)

Recommend Documents