1/1/2013
MATERI KULIAH BIOLOGI TANAH JURUSAN AGROTEKNOLOGI UPNVY
Pembuatan Biofertilizer & Bioaktivator Dosen Ir. Sri Sumarsih,MP. Email:
[email protected] Weblog: Sumarsih07.wordpress.com
I. ISOLASI MIKROBA
PRINSIP PEMBUATAN BIOFERTILIZER • • • • •
I. ISOLASI II. UJI KEMAMPUAN III. SELEKSI III. FORMULASI IV. APLIKASI
STERILISASI MEDIA DAN ALAT
SUMBER ISOLAT:
-BINTIL AKAR -TANAH RHIZOSFER -TANAH KEBUN/SAWAH -TANAH HUTAN -FILOSFER/SERESAH -KOMPOS -PUPUK KANDANG, DLL
MEDIUM PERTUMBUHAN MIKROBA:
-MEDIUM CAIR/PADAT -MEDIUM SPESIFIK/KHUSUS -MEDIUM DIPERKAYA
METODE ISOLASI:
-METODE PENGAYAAN/ENRICHMENT -METODE TABURAN -METODE TABURAN PERMUKAAN -METODE GORESAN
AUTOCALVE
MEDIA: 121 OC 15 MENIT
SEMUA ALAT YANG DIGUNAKAN DISTERILISASI
ALAT: 121 OC 30 MENIT
1
1/1/2013
TEKNIK KERJA ASEPTIS UNTUK PENANAMAN MIKROBA
Contoh Isolasi Bakteri Penambat N2 Udara dengan teknik goresan
Bintil akar
Bintil akar disterilkan, dipecah, diambil cairannya menggunakan jarum ose
STERILISASI OSE
MENANAM MIKROBA PADA PETRIDISH Menanam bakteri di laminer air flow
Pengenceran untuk teknik isolasi taburan
Ose digoreskan di atas media agar
Hasil Isolasi Mikroba
• Pengenceran sumber isolat dilakukan agar diperoleh koloni yang tumbuh terpisah
Teknik Taburan: koloni yang tumbuh terpisah dimurnikan lagi dengan mengambilnya dengan ose dan digoreskan di media baru
Teknik Goresan: koloni yang tumbuh terpisah dimurnikan dengan cara menumbuhkan lagi dengan teknik goresan pada medium baru
Pada isolasi teknik goresan, sumber isolat bisa diencerkan terlebih dahulu menggunakan air steril, agar diperoleh koloni terpisah.
Figure 6.15
2
1/1/2013
Pembuatan kultur murni bakteri
DITANAM DI MEDIA AGAR MIRING
II. UJI KEMAMPUAN METODE KIMIA: -N15 UNTUK FIKSASI N2 BAKTERI PENAMBAT NITROGEN -P TERLARUT UTK PELARUT BATU FOSFAT -CO2 / HARA TERSEDIA UTK PEROMBAK BAHAN ORGANIK -SULFAT UNTUK OKSIDASI SULFUR,dll
Koloni yang tumbuh terpisah diambil dengan ose dan ditanam
METODE MIKROBIOLOGIS: -MEDIUM BEBAS NITROGEN UNTUK BAKTERI PENAMBAT N2
Simpan dalam refrigerator (almari es tapi bukan di freezernya)
PEMELIHARAAN KULTUR MIKROBA UNGGUL
III. SELEKSI Contoh seleksi untuk bakteri Rhizobium: -DIPILIH YANG MEMPUNYAI KEMAMPUAN TINGGI DALAM MENAMBAT NITROGEN -DIPILIH YANG DAPAT MEMBENTUK BINTIL AKAR EFEKTIF DALAM PERSENTASE YANG TINGGI -DIPILIH YANG MEMPUNYAI PERTUMBUHAN CEPAT -DIPILIH YANG TAHAN TERHADAP KONDISI LINGKUNGAN DALAM TANAH (toleran pH, suhu, kegaraman, dll)
-MEDIUM + BATU FOSFAT UNTUK MIKROBA PELARUT P -MEDIUM + BAHAN ORGANIK YANG DIUJI UTK PEROMBAK BO -MEDIUM + SULFUR / Fe S (PIRIT) UTK PENGOKSIDASI SULFUR -MEDIUM + Mn SO4, dll UNTUK MIRKOBA PENGOKSIDASI Mn.
DIBUAT BIAKAN MURNI: -KULTUR STOK -KULTUR SEDIAAN
PENYIMPANAN KULTUR: 1. JANGKA PENDEK/SEGERA DIGUNAKAN
BIAKAN CAIR/PASTA, PADA SUHU 5-15OC TAHAN SAMPAI 1 BULAN BIAKAN AGAR MIRING/ DISIMPAN SUHU 5-15OC TAHAN 3-6 BULAN BIAKAN AGAR MIRING + LAPISAN GLISEROL, PADA SUHU 5-15OC TAHAN SAMPAI 1 TAHUN
2. JANGKA PANJANG/ UNTUK STOK YG TAHAN HIDUP SAMPAI BEBERAPA TAHUN
BIAKAN DALAM MEDIUM PASIR ATAU TANAH BIAKAN LIOFILIK
3
1/1/2013
TEKNIK PERBANYAKAN MIKROBA
Penggandaan skala produksi mikroba
STARTER UNTUK: • (a) MENGADAPTASI MIKROBA DARI MEDIUM AGAR KE MEDIUM PERBANYAKAN • (b) MEMBUAT INOKULUM DARI SKALA KECIL (BIAKAN MURNI DALAM TABUNG REAKSI) MENJADI SKALA YANG LEBIH BESAR
PENGGANDAAN SKALA UNTUK: • PRODUKSI SKALA LABORATORIUM SAMPAI SKALA PABRIK • PENGATURAN PRODUKSI DAN KONTROL KUALITAS
Sistem Fermentasi untuk Perbanyakan Sel FERMENTASI PADAT: • • • •
DALAM NAMPAN/ KANTONG FERMENTOR KOLOM FERMENTOR DRUM PUTAR FLUIDIZED BED DEVICES
• FERMENTASI CAIR • KULTUR GOJOK (SHAKE CULTURE) • DALAM ALAT FERMENTOR KULTUR CAIR
Media dari bahan yang mudah didapat
Diberi sumber mikroba
Starter
Skala produksi kecil menggunakan fermentor sederhana
Teknik produksi mikroba menggunakan Fermentor sederhana
4
1/1/2013
PEMBUATAN BIOFERTILIZER/BIOAKTIVATOR DENGAN TEKNOLOGI MODEREN
Kultur Mikroba BERBAGAI BIAKAN MURNI
Dosen: Ir Sri Sumarsih DIPERBANYAK DALAM FERMENTOR
III. FORMULASI INOKULAN INOKULAN: • CAMPURAN MIKROBA + CARRIER
SIFAT BAHAN CARRIER/PEMBAWA: • INERT • MUDAH DICAMPUR • MUDAH DIBENTUK
FORMULASI INOKULAN: • BAKTERI: INOKULAN UNTUK BIJI / TANAH, PADAT / CAIR • JAMUR : FORMULASI VERMICULITE, TEPUNG/BUBUK, TABLET, PRIL, GEL
IV. APLIKASI BIOFERTILIZER • Contoh Aplikasi Biofertilizer Rhizobium • BENTUK PRODUK: POWDER • PENGGUNAAN: DICAMPUR DENGAN BIJI/BENIH TANAMAN KACANGKACANGAN • PENCAMPURAN SEDAPAT MUNGKIN MENGHINDARI CAHAYA MATAHARI LANGSUNG • BIJI YANG TELAH DICAMPUR DENGAN BIOFERTILIZER LANGSUNG DITANAM DI LAHAN • INDIKATOR KEBERHASILAN PENGGUNAAN BIOFERTILIZER Rhizobium adalah terbentuknya bintil akar efektif , terjadinya penambatan nitrogen, dan pertumbuhan serta hasil panen tanaman yang baik.
5