Výsledky monitoringu mykotoxinů v krmivech (ÚKZÚZ) Markéta Pospíchalová
[email protected] Mykotoxiny a zemědělská produkce, 13.3.2013, Brno
Průchod vzorku laboratoří
Akreditace ČSN EN ISO17025:2005
Příjem Přečištění pomocí imunoafinitních kolonek
Úprava
Modifikovaná QuEChERS metoda
Příprava extraktu, přečištění HPLC-DAD; HPLC-FLD; LC-MS/MS; UPLC-MS/MS
Měření Zpracování dat
Výstup protokol
•
Stanovované mykotoxiny
• • •
PAT AFM1 DON
ZEN
FB2 T-2
•
EN 15791/2010 - Determination of Deoxynivalenol in animal feed – HPLC method with UV detection and immunoaffinity column clean-up. EN 15792/2010 - Determination of Zearalenone in animal feed – HPLC method with fluorescence detection and immunoaffinity column clean-up. EN 16007 - Determination of Ochratoxin A in animal feed – HPLC method with fluorescence detection and immunoaffinity column clean-up. EN 16006 - Determination of Fumonisin B1& B2 in compound animal feed with immunoaffinity column clean up and RP-HPLC with fluorescence detection after pre-or post column derivatisation CEN 327: Feed and Feed Ingredients – Multimethod Mycotoxins – LC-MS/MS
FB1
HT-2
OTA
AF B2 AF G1 AF G2 AF B1
NIV
Krmiva Potraviny
Alternaria toxins Ergot alkaloids
Moniliformin
EnB1
Beauv
EnB2
EnA EnA1
Nově požadované
Phomopsins
Sterigmatocystin Citrinin
EFSA výzva na sledování dalších mykotoxinů
Obtížnost matrice především u multimetody LC-MS/MS
Stanovované materiály
180
ostatní
160
sojový loupaný šrot
140
sojový extrahovaný šrot KKS
120
DKS
100
siláž
80
seno senáž
60
žito pšenice
40
oves
20
kukuřice
0
ječmen
2006
2007
2008
2009
2010
2011
2012
Zastoupení mykotoxinů ve vybraných komoditách (%)
V Ý S L E D K Y 25
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
H ay
ila ge
ge
S
gr o ea n
C
om
pl
S
C
om
oy b
pl
H ay la
at s
ze
W
M ai
ey
et e
B
fe
ar l
ed s
s fe ed ta ry em en
he at
ZEA FUM B1 FUM B2 OTA DON T-2 HT-2
Dosavadní výsledky potvrzují situaci ve Střední Evropě Četnost výskytu mykotoxinů ve vzájemných kombinacích (%)
22
20
15 10
8,8
8,2
9,9
9,3
8,5 5,6
5 1,7
2,3
T-2
HT-2
2,5
2,5
3,4
2,3
1,7
1,1
1,4
1,4
1,1
1,4
1,4
2,3
1,2
0 ZEA
DON
FUMs
OTA
ZEADON
ZEAFUMs
ZEAFUMsDON
OTADON
T-2 HT-2
ZEA- ZEA- FUMs- FUMs- ZEAOTA- DON-T- DON DON-T- OTA DON 2 -HT-2 2 -HT-2
ZEA- ZEA-T- FUMs- ZEAFUMs- 2 -HT-2 OTA OTAOTA DON-T2 -HT-2
ZEAFUMsDON-T2 -HT-2
ZEAFUMsDONOTA-T2 HT-2
Typy kontrolovaných komodit u prvovýrobců a výrobců 40 35
P r v o v ý r o b c i
V ý r o b c i Rozdíly ??
30 25 20 15 10 5 0 2009 P
2010 P
2011 P
suroviny
2012 P
objemná krmiva
2009 V směsi
2010 V
soja
2011 V
ostatní
2012 V
řepka
Zastoupení mykotoxinů (%) 70 60 50 40 30 20 10 0 2009 P
2010 P
2011 P ZEN
2012 P
FUMB1
FUMB2
2009 V OTA
DON
2010 V T-2
2011 V
HT-2
2012 V
Koncentrační hladiny
Zearalenon
Deoxynivalenol
180
160
144
140 120
7000
169
160
DON Med
6000 5000
116
112
100
ZEN Med
80
ZEN Max
60
4563
4000 3000
6209
DON Max
3230 2612
2000
40 24,7
20
33,2
1694
1000
21,4
915
0
0 2009 P
2010 P
2011 P
2012 P
2009 V
2010 V
2011 V
2009 P
2012 V
2010 P
2011 P
2012 P
Fumonisin B1 400 FUMB1 Med
1380
FUMB1 Max
1200
350 250
800
200
600
150
532 205
200
288
261 108
10,5
0 2009 P
2010 P
2011 P
2012 P
2009 V
2010 V
2011 V
376
2010 V
2011 V
2012 V
FUMB2 Med FUMB2 Max
300
1000
400
2009 V
Fumonisin B2
1600 1400
723
633
199
100 166 2012 V
83
50 16,6
0 2009 P
2010 P
86,8
43,1
2011 P
28,5
6 2012 P
2009 V
2010 V
2011 V
2012 V
Koncentrační hladiny 0chratoxin A 60
OTA Med
50,9
50
OTA Max
40
Koncentrační hladiny jsou pro jednotlivé mykotoxiny u prvovýrobců i výrobců podobné
30
29,1
24,6
20 14,7
10
26,8
25,1
10,9
6,37
0 2009 P
2010 P
2011 P
2012 P
T-2 toxin
T-2 Med
70
T-2 Max
68,4
84,5
120
80
40
60
30
40
26,2 17,7
17,2
24,2
26,9
2009 P
2010 P
2011 P
HT-2 Med
120
HT-2 Max
2012 P
51,7
55 38,6
20
5,1
0
2012 V
140
50
10
2011 V
100
60
20
2010 V
HT-2 toxin
90 80
2009 V
37,5
28,5
16,4
14,7
0 2009 V
2010 V
2011 V
2012 V
2009 P
2010 P
2011 P
2012 P
2009 V
2010 V
2011 V
2012 V
Rozdílnost v četnosti výskytu několika mykotoxinů najednou
Četnost výskytu mykotoxinů ve vzájemných kombinacích (%) 100% 90% 80% 70%
60% 50% 40% 30% 20%
10% 0% 2009 P
2010 P
2011 P
2012 P
2009 V
2010 V
2011 V
2012 V
ZEN
DON
FUMs
OTA
T-2, H-T2
ZEN-DON
ZEN-FUM
FUMs-DON
ZEN-OTA
OTA-T-2-HT-2
FUMs-OTA
ZEN-T-2-HT-2
DON-T-2-HT-2
ZEN-FUMs-DON
ZEN-FUMs-T-2-HT-2
ZEN-OTA-DON
ZEN-DON-T-2-HT-2
FUMs-DON-T-2-HT-2
DON-OTA-T-2-HT-2
ZEN-FUMs-OTA-DON
ZEN-FUMs-DON-T-2-HT-2
ZEN-OTA-DON-T-2-H-T-2
ZEN-FUMs-DON-OTA-T-2-HT-2
Vliv doby odběru vzorků na výskyt mykotoxinů
leden, únor, březen duben, květen, červen červenec, srpen, září říjen, listopad, prosinec
Potvrzení vlivu doby skladování na výskyt mykotoxinů
M A X I M Á L N Í M E D I Á N Y
H O D N O T Y
2009 P
2010 P
2011 P
2012 P
2009 V
2010 V
2011 V
2012 V
ZEN
kukuřice
pšenice
kukuřice
KKS - P
DKS Telata
DKS Skot
kukuřice
kukuřice
FUMB1
kukuřice
kukuřice
kukuřice
KKS - P
KKS Kuřata
ječmen
KKS Ptáci
kukuřice
FUMB2
kukuřice
kukuřice
kukuřice
KKS - P
DKS Telata
ječmen
KKS Ptáci
oves
OTA
senáž
KKS - P
tritikale
KKS - P
ječmen
kukuřice
pšenice
KKS Králíci
DON
kukuřice
ječmen
ječmen
KKS - P
KKS Nosnice
tritikale
kukuřice
kukuřice
T-2
seno
oves
oves
ječmen
kakaové slupky
kukuřice
DKS Ptáci
KKS Ptáci
HT-2
kukuřice
oves
oves
ječmen
KKS - P
KKS - P
DKS Ptáci
KKS Ptáci
2009 P
2010 P
2011 P
2012 P
2009 V
2010 V
2011 V
2012 V
ZEN
kukuřice
siláž
KKS
pšenice
KKS
KKS
kukuřice
KKS
FUMB1
kukuřice
KKS
siláž
siláž
DKS
KKS
sojový šrot
kukuřice
FUMB2
siláž
kukuřice
ječmen
senáž
KKS
KKS
KKS
kukuřice
OTA
ječmen
oves
pšenice
ječmen
KKS
DKS
KKS
pš.otruby
DON
siláž
pšenice
KKS
pšenice
DKS
KKS
pšenice
pš.otruby
T-2
ječmen
pšenice
ječmen
ječmen
DKS
KKS
KKS
KKS
HT-2
ječmen
siláž
seno
ječmen
DKS
pšenice
KKS
KKS
Ochratoxin A T-2, HT-2 toxin Vysoká citlivost Poškození zobákové dutiny
Průjmy
Fumonisiny
Satratoxiny
Snížení hmotnosti
Vysoká citlivost
Stachybotryotoxikóza
Snížení produkce vajec
Leukoencepahlomalacie u koní (ELEM)
Deoxynivalenol, T-2 toxin
Poškození nervového systému
Aflatoxiny
Pokles hmotnosti
Abnormální opeření
Netečnost
Potlačení imunity
Prudké snížení produkce vajec
Zpomalený růst
Anorexie
Aflatoxiny Poškození jater
Snížená produkce vajec Zvýšená mortalita
Zearalenon
Zvětšení jater
Aflatoxiny
Poruchy ledvin
Pokles produkce mléka
Vysoká citlivost především u mladých zvířat
Ochratoxin A
Estrogenní účinky
Snížení plodnosti
Prasečí nefropatie
Poruchy reprodukce
Kontaminace mléka AFM1
Zearalenon Špatná reprodukční užitkovost
Potlačení imunity
Fumonisiny Nekróza jater Edém plic
Ochratoxin A, Deoxynivalenol, Fumonisiny Vyšší tolerance (neplatí u telat)
Deoxynivalenol Poruchy zažívání Úbytek váhy Průjmy, zvracení
Poruchy reprodukce T-2, HT-2 toxin Aflatoxiny Poškození jater Potlačení imunity Zpomalený růst Nechutenství Hrubá srst
Potlačení imunity
T-2
Neplodnost, potraty
Poruchy zažívání
Gastroenteritida u skotu
Úbytek váhy
Snížení produkce mléka
Poškození sliznic a pokožky Průjmy, zvracení Neplodnost spojená s poškozením vaječníků a dělohy
Různé druhy zvířat jsou různě citlivé k různým mykotoxinům
Polní mykotoxiny
Výjimka
DON, zearalenon, fumonisiny, T-2, HT-2, Vegetace
Obiloviny - fuzáriové mykotoxiny i během skladování
Biologické faktory
Počasí: teplota, vlhkost
Inokulum
Napadení škůdci, stres
Podmínky během sklizně
Substrát
Předplodina, datum setí
Doba sklizně
Podmínky prostředí
Náchylnost odrůdy
Vlhkost zrna
Lokalita, způsob pěstování
Poranění palic, zrna
Skladištní mykotoxiny Ochratoxin A, aflatoxiny Výjimka kukuřice – aflatoxiny už za vegetace
Skladování Teplota Vlhkost Odstranění prachu, poškozených zrn
Detekování přítomnosti mykotoxinů
Napadení hmyzem a plísněmi Bezpečné skladování u obilovin např. 14% při 20 C
Výroba a distibuce potravin, krmiv
Mykotoxiny v životním prostředí
zvířata
spotřebitel
Import surovin, potravin a krmiv
Závěry Mezi nejčastěji se vyskytující mykotoxiny v krmivech patří DON, ZEN, OTA a FUMs. Nejčastěji mykotoxiny kontaminovanými komoditami jsou kukuřice, siláž, KKS a DKS. Mykotoxiny se v krmivech vyskytují v nízkých koncentracích, za sledované období byly směrné hodnoty překročeny zcela ojediněle. Vzorky odebrané v 1.polovině roku (před sklizní) vykazují vyšší kontaminaci mykotoxiny – projevuje se vliv uskladnění. Mykotoxiny se v krmivech a v surovinách pro výrobu krmiv vyskytují často ve svých vzájemných kombinacích, a tím zvyšují toxický účinek na zvířata. Společný výskyt více mykotoxinů najednou je častější u KKS a DKS než u surovin. Různé druhy mykotoxinů.
zvířat
jsou
různě
citlivé
k
účinkům
různých
V souvislosti s EFSA požadavky je potřeba rozšířit spektrum stanovovaných mykotoxinů.
Poděkování Ing.Marie Mrkvicová RNDr.Zuzana Nehybová Ing.Martina Bolechová Mgr.Petra Kosubová, Ph.D. Marie Jakšová Ing.Iva Strížová
Děkuji Vám za pozornost
