Tartalom. 2011, XI. évfolyam 3. szám. GEN-LAB Kft

2011, XI. évfolyam 3. szám

GEN-LAB Kft.

Tartalom Kinetex – Melyik dimenzió, milyen készülék ?

2. oldal

Kinetex – Számoljunk egy kicsit....

3. oldal

AXIA preparatív kolonnák

4 – 6. oldal

Bemutatkoznak a 20m-es GC kolonnák

7 – 9. oldal

Fecskendőszűrők – jobbat, kedvezőbb áron ? HILIC kromatográfia – „ha túl poláros”

10. oldal 11 – 13. oldal

HPLC kiegészítők A-Z-ig

14. oldal

GC kiegészítők A-Z-ig

15. oldal

Hírek röviden.....

16. oldal

Gen-Lab Kft. H-1119 Budapest, Hadak útja 41. Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451 Email: [email protected] Web: www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Milyen nyomásértékek várhatóak a KinetexTM Core Shell oszlopok használatakor ? Sokszor feltesszük ezt a kérdést: A hatékonyság növelése könnyen elérhető, de milyen nyomásesés várható a használat során ? Az alábbi táblázatokban megtekinthetjük, hogy különféle oldószer összetétel esetén (50:50 MeCN:H2O és 60:40 MeOH:H2O) más-más dimenziójú oszlop esetén milyen nyomásértékeket várhatunk. Láthatjuk, hogy a kívánt (UHPLC-s) hatékonyság eléréséhez nincs szükség új, nagynyomású pumpával ellátott készülék beszerzésére. Hagyományos LC rendszeren is megvalósíthatunk gyors és nagy hatékonyságú elválasztást. Természetesen ha már rendelkezünk UHPLC készülékkel akár eddig nem látott eredményeket is elérhetünk. A grafikonok alatti táblázatban megtalálja, hogy melyik görbéhez milyen kolonna dimenzió tartozik. 50:50 MeCN/Víz

60:40 MeOH/Víz

2. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Kinetex - Nagy hatékonyság..... Ez mit is takar ? Sokszor olvashattuk már, hogy a Kinetex kolonnák használatával kimagasló hatékonyságot érhetünk el akár hagyományos (pmax<400 bar) HPLC készüléken. Nézzük meg, hogy ez számokban mit jelent ? 10μm teljesen porózus töltetről váltunk 2,6μm-es Kinetexre. Megközelítőleg 6x-os hatékonyság növekedés 5μm teljesen porózus töltetről váltunk 2,6μm-es Kinetexre. Megközelítőleg 3x-os hatékonyság növekedés 3μm teljesen porózus töltetről váltunk 2,6μm-es Kinetexre. Megközelítőleg 2x-es hatékonyság növekedés 2,5μm teljesen porózus töltetről váltunk 2,6μm-es Kinetexre. Megközelítőleg 1,5x-es hatékonyság növekedés 1,7μm teljesen porózus töltetről váltunk 2,6μm-es Kinetexre. Azonos hatékonyság

!

Mindez felbontás tekintetében mit takar ? Ha az oszlop hatékonyságát megtriplázzuk úgy, hogy egy 5μm-es oszlop helyett egy Kinetex 2,6μm-es kolonnát használunk (megegyező dimenzióval), milyen felbontásbeli növekedést tapasztalhatunk?

3x-os hatékonyság növekedéssel (ΔN=3) számolva: A felbontás megnövekszik √3-mal, ami pontosan 73% felbontásbeli növekedést jelent. Ez a gyakorlatban: Ha egy 150mm-es 5μm-es oszlopot használok és 1,3-es felbontás mérhető a kritikus pár között, kaphatok-e alapvonali elválást ha egy ugyanolyan dimenziójú Kinetex oszlopot használok ?

IGEN !

Tudjon meg többet www.gen-lab.hu

3. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

✔ Megnövelt oszlop élettartam a szabadalmaztatott technológiának köszönhetően ✔ Egységes töltés és reprodukálható csúcsalakok ✔ Nagyobb hatékonyság ✔ Nagy áramlási sebesség tűrés ✔ Megnövelt terhelhetőség ✔ Élesebb csúcsok Az AXIATM egy töltési technikát és részben ebből következően egy új kolonna megjelenési formát (hardvert) jelent. Ezek együttesen egy homogén és megfelelő sűrűségű, tehát nagy és állandó kolonna hatékonyságot (N) biztosító töltetágyat eredményeznek.

Választható töltetek: ● Luna - világszerte elismert töltetek, 99,99%-os tisztaságú szilika, állófázis: C18, C18(2), C8(2), Phenyl-hexyl, Pentafluorophenyl Propyl (PFP), szilika és amino, nagy fajlagos felület: 400 (C18: 440) m2/g; pórusátmérő: 100 Å Peszticid osztály ● Gemini - nagy pH (1-12!) stabilitás, hosszú élettartam - TWIN technológia, állófázis: C18, C6-Phenyl, nagy fajlagos felület: 375 m2/g; pórusátmérő: 110 Å ● Gemini - NX – nagy pH(1-12!) stabilitás, megnövelt élettartam –TWIN-NX technológia (etilén keresztkötésekkel védett szilika), állófázis: C18, nagy fajlagos felület: 375 m2/g; pórusátmérő: 110 Å ● Synergi - Synergi MAX-RP (C12) , Synergi Polar-RP (fenil-éter / poláris „endcapping”), Synergi Hydro-RP (C18 / poláris „endcapping”) ● Jupiter 300 – fehérjék elválasztásához ( > 10,000 MW), állófázis: C4, C5, C18 ● Jupiter Proteo – „kis” molekulatömegű ( < 10,000 MW) fehérjék és peptidek elválasztásához, állófázis: C12 ● Lux királis fázisok – 5 állófázis, melyek az enantiomerek több mint 92%-ra megfelelő elválasztással szolgálnak. 4. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

ÚJ GENERÁCIÓS PREPARATÍV OSZLOPOK

TÖLTÉSI TECHNOLÓGIA:

1

2

3 Az egyéb töltési technikákkal ellentétben az AXIA kolonnáknál nem szükséges az utókomprimálás.

1. A töltet belekerül egy hüvelyen keresztül az oszlopba. 2. A hidraulikus dugattyúval a megfelelő nyomással beletömörítik a töltetet az oszlopba. 3. A töltet homogén, a dugattyú a helyén marad (p=áll.). 4. A dugattyú még mindig az oszlopban (p=áll.) és ekkor megtörténik az oszlop lezárása. 5. A fedél ráhelyezése és a dugattyú szárának leválasztása (p=áll.). 6. a nyomás még mindig állandó, a töltet homogén maradt.

1. injektálás = 1000. injektálás 4

5

6

1. oszlop = 2. oszlop reprodukálhatóság

Hagyományos töltési eljárás A hagyományos töltési technikáknál a töltés befejeztével eltávolítják a dugattyút és a nyomóerő megszűnésével az összepréselt töltet kitágul. A kitágulás hatására kisebb sűrűségű helyek keletkeznek. A használat során az áramló fázis a kolonnatöltetet átrendezi, amelynek eredményeképpen a kolonna elején holttérfogat keletkezik, ezért az elméleti tányérszám (N) jelentős mértékben csökkenhet.

Tudjon meg többet www.axiaprep.com

5. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Élettartam vizsgálat: Luna 5u C18(2) Axia (1. vs. 800. injektálás):

Oszlop: Luna® 5 μm C18(2) 100 Å LC Column 50 x 21.2 mm, AXIA Packed Dimenzió: 50 x 21,2 mm ID Katalógusszám: 00B-4252-P0-AX Elúció típusa: Gradiens

Komponensek: 1 Triprolidine 2 Methacycline 3 Amitriptyline

A eluens: 0.5% TFA vízben B eluens: 0.5% TFA acetonitrilben

Profil:

Lépés:

Time (perc):

1 0 2 7 Áramlási sebesség: 30 mL/perc

Pct A:

Pct B:

95 5

5 95

Injektálás: 2 μL (250 °C) Detektálás: UV-Vis Abs. - Variable Wave. @ 254 nm

Peszticid osztály

Az alábbi táblázatban megtekintheti a jellemző injektálható mintamennyiséget (mg) és az ajánlott áramlási sebességet (mL/min) az analitikai mérettől (4.6 mm átmérő) a preparatív oszlopokig (21,2-50 mm):

Hossz / Átmérő

4.6 mm

21.2 mm

30 mm

50 mm

50 mm

0.5-2

10-45

20-90

60-270

75 mm

0.75-3

15-70

30-140

90-420

100 mm

2-6

20-105

40-210

120-630

150 mm

3-6

30-160

30-320

120-630

250 mm

2.5-10

50-240

100-480

300-1400

Áramlási sebesség (mL/perc)

1-1.5

20-40

40-80

120-270

Tudjon meg többet www.axiaprep.com

6. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Gázkromatográfiás mérések optimalizálása

20 méteres oszlopok Optimalizálás célja lehet: 1. Analízisidő csökkentése 2. Robosztusság növelése 3. Felbontás növelése 4. Érzékenység növelése A gázkromatográfiás mérések optimalizálásának és ezzel együtt a produktivitás növelésének egyik módja lehet általános (30 m; 0,25 μm; 0,25mm) oszlopaink kisebb méretűre cserélése. A belső átmérő csökkentésével megegyező élettartam mellett nagyobb felbontást és rövidebb analízisidőt lehet elérni.

Előnyök: 1. Jobb jel/zaj viszony 2. Rövidebb futási idő 3. Alacsonyabb költség 4. Nagyobb hatékonyság :

Hatékonyság - Kisebb átmérő → nagyobb oszlophatékonyság Az alábbi táblázatban megtekintheti, hogy az oszlop átmérőjének függvényében hogyan változik egy oszlop hatékonysága: Oszlop belső átmérője (mm)

Elméleti tányérszám (P/m)

Tányérszámváltozás (%)

Felbontásváltozás (%)

0,10

12500

83%

35%

0,18

6600

39%

18%

0,20

5940

22%

10%

0,25

4750

0%

0%

0,32

3710

-18%

-10%

0,53

2240

-63%

-40%

Tudjon meg többet www.gen-lab.hu 7. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Poliaromás szénhidrogének (PAH) ZB-5ms oszlopon: A következő két példa szemlélteti, milyen előnyökkel szolgálhat a kolonna méreteinek csökkentése, különös tekintettel a felbontás és az analízis időbeli változásaira vonatokozóan:

Oszlop: Zebron™ ZB-5MS GC kapilláris oszlop Fázis: 5% fenil – 95% dimetil-polisziloxán (Arilén Mátrix Technológia) Dimenzió: 30 m x 0,25 mm x 0,25 μm Katalógusszám: 7HG-G010-11 Hőmérséklet program: 155°C-ról 250°C-ig 25°C/perc-cel, majd 280°C-ra 5°C/perc-cel, majd 25°C/perc-cel 320°C-ra Vivőgáz: Hélium, 1,4 mL/perc Injektálás: split 15:1 1 μL (285 °C) Detektálás: MS (240°C)

8. oldal

Oszlop: Zebron™ ZB-5MS GC kapilláris oszlop Fázis: 5% fenil – 95% dimetil-polisziloxán (Arilén Mátrix Technológia) Dimenzió: 20 m x 0.18 mm x 0.18 μm Katalógusszám: 7FD-G010-08 Hőmérséklet program: 130 °C 0.5 percig, 250 °C ra 25°C/perc-cel, 270°C-ra 6 °C/perc-cel, 320 °C-ra 25°C/perc-cel, majd 320 °C 4 percig Vivőgáz: Hélium, 1,2 mL/perc Injektálás: split 15:1 1 μL (285 °C) Detektálás: MS (180°C)

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

Komponensek: 1 Naphthalene 2 Acenaphthylene 3 Acenaphthene 4 Fluorene 5 Phenanthrene 6 Anthracene 7 Fluoranthene 8 Pyrene 9 Benzo[a]anthracene 10 Chrysene 11 Benzo[b]fluoranthene 12 Benzo[k]fluoranthene 13 Benzo[a]pyrene 14 Indeno[1,2,3-cd]pyrene 15 Dibenz[a,h]anthracene 16 Benzo[g,h,i]perylene

További alkalmazások: www.gen-lab.hu

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

ASTM módszer D2887 ZB-1ms oszlopon:

Oszlop: Zebron™ ZB-1ms GC kapilláris kolonna Fázis: 100% dimethyl polysiloxane Dimenzió: 30 m x 0,25 mm x 0,25 μm Katalógusszám: 7HG-G011-11 Hőmérséklet program: 50 °C 0.5 percig, 360 °C-ra 30°C/perc-cel, majd 360°C 7 percig Vivőgáz: Hélium, 1,6 mL/perc Injektálás: Split 30:1 1 μL (330°C) Detektálás: Flame Ionization (FID) (360°C)

Oszlop: Zebron™ ZB-1ms GC kapilláris kolonna Fázis: 100% dimethyl polysiloxane Dimenzió: 20 m x 0.18 mm x 0.18 μm Katalógusszám: 7FD-G011-08 Hőmérséklet program: 50°C 0.5percig, 350°C-ra 30°C/perc-cel majd hőntartás 8percig Vivőgáz: Hélium, 1,1 mL/perc Injektálás: Split 30:1 0,5 μL (340°C) Detektálás: Flame Ionization (FID) (360°C)

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

Komponensek: 1 Pentane (C5) 2 Solvent Contaminant 3 Hexane (C6) 4 Heptane (C7) 5 Octane (C8) 6 Nonane (C9) 7 Decane (C10) 8 Undecane (C11) 9 Dodecane (C12) 10 Tetradecane (C14) 11 Pentadecane (C15) 12 Hexadecane (C16) 13 Heptadecane (C17) 14 Octadecane (C18) 15 o-Terphenyl 16 Eicosane (C20) 17 Tetracosane (C24) 18 Octacosane (C28) 19 Dotriacontane (C32) 20 Hexatriacontane (C36) 21 Tetracontane (C40) 22 Tetratetracontane (C44)

További alkalmazások: www.gen-lab.hu 9. oldal

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Phenex™ fecskendőszűrő

Fecskendőszűrők: Kiváló minőségű Phenomenex termékek, melyek segítségével egyszerűen és költséghatékonyan tisztíthatja mintáit. A PhenexTM fecskendőszűrők gyors és hatékony megoldást jelenthetnek oszlopaink élettartamának megnövelésére, illetve méréseink reprodukálhatóságának javítására.

Kiváló Ár!

Átmérő / Mennyiség

4 mm

15-17 és 25-28 mm

100 db

210 Ft/db

263 Ft/db

500 db

168 Ft/db

210 Ft/db

Membrán típusok:

Membrán átmérők:

- PTFE Polytetrafluoroethylene - PES Polyethersulfone - RC Regenerated Cellulose - NY Nylon - GF/NY Glass fiber / Nylon - GF/CA Glass Fiber / Cellulose Acetate - GF Glass Fiber

- 4 mm Minta mennyisége: ≤ 2 mL - 15-17 mm Minta mennyisége: 2 -10 mL - 25-28 mm Minta mennyisége: 10 – 100 mL

Pórusméret: - 0,2 μm - 0,45 μm

Akár Akár 24 24 órás órás kiszállítással! kiszállítással!

Kérjen mintacsomagot: [email protected]

10. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

HILIC Bár a HPLC-n történő elválasztások nagy része hidrofób állófázison (C18, C8, fenil...) történik, a hidrofil anyagok visszatartása nagyon kis mértékű fordított fázisú körülmények között. A hidrofób állófázis mellett stagnáló szerves oldószer réteg kedvezőtlen hatással van a poláris vegyületek és állófázis között kialakuló kölcsönhatásra, ennek eredményeképpen ezeknek az anyagoknak a visszatartása kicsi lesz. A HILIC (Hidrophilic Interaction Liquid Chromatography) megnövekedett retenciót biztosít poláris anyagokra akár magas szerves tartalmú mozgófázisban is. Az állófázis felületén egy vízréteg alakul ki, amely elősegíti a poláris vegyületek transzferét a szerves mozgófázisból az állófázisra, így jelentősen nő a visszatartás. HILIC módban minél polárisabb egy vegyület, annál nagyobb visszatartásra számíthatunk. Nagy előnye még a HILIC-nek, hogy a mozgófázis magas szerves oldószer tartalma miatt ideális MS detektáláshoz. Meghatározó kölcsönhatások HILIC módban: ● ●

H-híd Dipol-dipol

mozgófázis

Vízben gazdag réteg az állófázis felületén

HILIC esetén az eluensek erősségi sorrendje: THF < aceton < acetonitril < izopropanol <etanol < metanol < víz

A HILIC további előnye, hogy lehetővé teszi az SPE-vel és protein precipitációval történt mintaelőkészítés után az eluált mintakomponens azonnali injektálását az oszlopra, mivel ezek az oldószerek gyengébb eluensek, mint a HILIC mozgófázis, így nem okoznak zónaszélesedést, illetve korai elúciót.

11. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Ajánlott általános gradiens profil HILIC módban: 90% → 50% ACN A HILIC módban gyengén visszatartott anyagok meghatározására 2,5 percig tartsuk az acetonitrilt 90%-on 7,5 perc gradiens szakasz, a szerves fázis kezdő- és végkoncentrációja módosítható a maximális szelektivitás eléréséig Az acetonitrilt izokratikus módban 2,5 percig 50%-on tartjuk a HILIC módban erősen visszatartott vegyületek meghatározására.

Vízoldható vitaminok Kinetex 2.6um HILIC 150 x 4.6mm oszlopon Oszlop: Kinetex™ 2.6 μm HILIC 100 Å LC Dimenzió: 150 x 4,6 mm ID Katalógusszám : 00F-4461-E0 Elúciós profil: gradiens Eluens A: Acetonitril Eluens B: 100mM Ammónium formiát pH 3.2 Eluens C: Víz Gradiens profil: Idő (perc) A B C 1 0 90 10 0 2 5 90 10 0 3 20 50 10 40 Áramlási sebesség: 1 mL/min Hőmérséklet.: szobahőmérséklet Detektálás: UV-Vis 260 nm-en

Minták: 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Nikotinamid PABA Piridoxin Riboflavin Nikotinsav Aszkorbinsav Fólsav B12 vitamin Tiamin

12. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

HILIC vs. RP Poláris anyagok meghatározásának összehasonlítása HILIC és C18 oszlopon Nikotin és metabolitjainak meghatározása Luna HILIC oszlopon

Oszlop: Luna® 5 µm HILIC 200 Å LC 100 x 2 mm Katalógusszám:00D-4450-B0 Dimenzió:100 x 2 mm ID Elúciós profil: Izokratikus Eluens A: 90/10 Acetonitril/100mM Ammónium Formiát pH 3.2 Gradiens Profil: Idő (min) A 0 100 Áramlási sebesség: 0,4 mL/min Hőmérséklet: szobahőmérséklet Detektálás: Tömegspektométer (MS)

Nikotin és metabolitjainak meghatározása C18 oszlopon

Oszlop: Gemini® 5 μm C18 110 Å LC 100 x 2 mm Katalógusszám: 00D-4435-B0 Dimenzió: 100 x 2 mm ID Elúciós profil: gradiens Eluens A: víz 0,1 % v/v hangyasavban Eluens B: acetonitril 0,1% v/v hangyasavban Gradiens profil: 1 2 3 4 5

Idő (min) 0 1 3 3,01 5,5

A 97 97 70 97 97

B 3 3 30 3 3

Áramlási sebesség: 0,4 mL/min Hőmérséklet: szobahőmérséklet Detektálás: Tömegspektrométer (MS)

13. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Kromatográfiás kiegészítők

HPLC kiegészítők

SolventTrak™ Oldószer visszanyerő rendszer

Degassex™ Oldószer gáztalanító készülék

PEEK Különböző belső átmérővel

ThermaSphere™ Kolonna termosztátok

Kék, sárga, piros

Csatlakozók Synergi™ Kolonna választó

Kolonna védelem

Sure-Fit™ Connector Önbeállófejes csatlakozó bármely HPLC oszlophoz

FilterSys™ Eluens szűrő

KrudKatcher™ Mechanikai előszűrő

Analitikai in-line filter

Sure-Lok™ Coupler Alacsony holttérfogatú csatlakozó

SecurityGuard™

Tudjon meg többet www.gen-lab.hu

Védőkolonna

14. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

GEN-LAB KFT

GEN-LAB KFT

Kromatográfiás kiegészítők

GC kiegészítők

Detektor tisztító készlet

Injektor tisztító készlet Ferrule eltávolító

Fecskendők Hamilton SGE, VICI

Cool-Lock™ Nut Kolonna csatlakozó

Szeptum

Merlin Microseal™ Septum Csatlakozók

Kolonna vágó Inlet base seal O-ring

Ferrule

Linerek

Gáz-, nedvesség-, oxigén csapdák

Tudjon meg többet www.gen-lab.hu 15. oldal

Telefon: 206-2455

Fax: 206-2451

E-mail: [email protected]

www.gen-lab.hu

Hírek röviden... A Gen-Lab Kft. hagyományteremtő szándékkal megrendezi első kromatográfiás horgászversenyét. Az időpont Szeptember 3. Bővebb információért keresse fel honlapunkat – www.gen-lab.hu Új Kinetex állófázisok várhatók szeptemberben. . Tekintse meg legújabb technikai videóinkat: - UPLC készülék és Kinetex - Agilent 1100-as optimalizálása A videókat keresse honlapunkon (www.gen-lab.hu), Kinetex aloldalon Szeptemberben rengeteg szemináriummal jelentkezünk: Prep HPLC, GC, SPE, Kinetex Királis elválasztási problémákkal került szembe ? Királis módszerfejlesztés, módszer optimalizálás, keressen minket bizalommal – [email protected]

Tudjon meg többet www.gen-lab.hu

Gen-Lab Kft. H-1119 Budapest, Hadak útja 41. Telefon: (36-1)206-2455 Fax: (36-1)206-2451 Email: [email protected] Web: www.gen-lab.hu