ČESKÁ TECHNICKÁ NORMA Únor 2015
ICS 07.100.30
Mikrobiologie potravin, krmiv a vody – Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd
ČSN EN ISO 11133 OPRAVA 1 56 0099
Corrigendum
ČSN EN ISO 11133 (56 0099) Mikrobiologie potravin, krmiv a vody – Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd z prosince 2014 se na základě Correction Notice vydaného CEN dne 2014-11-12 opravuje takto: Na titulní straně se označení shodnosti opravuje takto: idt ISO 11133:2014, Corrected version: 2014-11 Titulní strana evropské normy, předmluva a tabulky E.1 a F.1 se nahrazují takto:
© Úřad pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví, 2015 Podle zákona č. 22/1997 Sb. smějí být české technické normy rozmnožovány a rozšiřovány jen se souhlasem Úřadu pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví.
96725
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
2
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
EVROPSKÁ NORMA EUROPEAN STANDARD NORME EUROPÉENNE EUROPÄISCHE NORM ICS 07.100.30
EN ISO 11133 Květen 2014 Nahrazuje CEN ISO/TS 11133-1:2009, CEN ISO/TS 11133-2:2003
Mikrobiologie potravin, krmiv a vody – Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd (ISO 11133:2014, opravené vydání 2014-11-01) Microbiology of food, animal feed and water – Preparation, production, storage and performance testing of culture media (ISO 11133:2014, Corrected version 2014-11-01) Microbiologie des aliments des aliments pour animaux et de l'eau – Préparation, production, stockage et essais de performance des milieux de culture (ISO 11133:2014, Version corrigée 2014-11-01)
Mikrobiologie von Lebensmitteln, Futtermitteln und Wasser – Vorbereitung, Herstellung, Lagerung und Leistungsprüfung von Nährmedien (ISO 11133:2014, korrigierte Fassung 2014-11-01))
Tato evropská norma byla schválena CEN dne 2014-03-20. Členové CEN jsou povinni splnit vnitřní předpisy CEN/CENELEC, v nichž jsou stanoveny podmínky, za kterých se této evropské normě bez jakýchkoliv modifikací uděluje status národní normy. Aktualizované seznamy a bibliografické citace týkající se těchto národních norem lze obdržet na vyžádání v Řídicím centru CEN-CENELEC nebo u kteréhokoliv člena CEN. Tato evropská norma existuje ve třech oficiálních verzích (anglické, francouzské, německé). Verze v každém jiném jazyce přeložená členem CEN do jeho vlastního jazyka, za kterou zodpovídá a kterou notifikuje Řídicímu centru CEN-CENELEC, má stejný status jako oficiální verze. Členy CEN jsou národní normalizační orgány Belgie, Bulharska, Bývalé jugoslávské republiky Makedonie, České republiky, Dánska, Estonska, Finska, Francie, Chorvatska, Irska, Islandu, Itálie, Kypru, Litvy, Lotyšska, Lucemburska, Maďarska, Malty, Německa, Nizozemska, Norska, Polska, Portugalska, Rakouska, Rumunska, Řecka, Slovenska, Slovinska, Spojeného království, Španělska, Švédska, Švýcarska a Turecka.
Evropský výbor pro normalizaci European Committee for Standardization Comité Européen de Normalisation Europäisches Komitee für Normung Řídicí centrum CEN-CENELEC: Avenue Marnix 17, B-1000 Brusel © 2014 CEN
Veškerá práva pro využití v jakékoli formě a jakýmikoli prostředky jsou celosvětově vyhrazena národním členům CEN. 3
Ref. č. EN ISO 11133:2014 E
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Předmluva Tento dokument (EN ISO 1133:2014, opravené vydání 2014-11-01) vypracovala technická komise ISO/TC 34 Potravinářské výrobky ve spolupráci s technickou komisí CEN/TC 275 Analýza potravin – Horizontální metody, jejíž sekretariát zajišťuje DIN. Této evropské normě je nutno nejpozději do listopadu 2014 udělit status národní normy, a to buď vydáním identického textu, nebo schválením k přímému používání, a národní normy, které jsou s ní v rozporu, je nutno zrušit nejpozději do listopadu 2014. Upozorňuje se na možnost, že některé prvky tohoto dokumentu mohou být předmětem patentových práv. CEN [a/nebo CENELEC] nelze činit odpovědným za identifikaci jakéhokoliv nebo všech patentových práv. Tento dokument nahrazuje CEN ISO/TS 11133-2:2003, CEN ISO/TS 11133-1:2009. Podle vnitřních předpisů CEN/CENELEC jsou tuto evropskou normu povinny zavést národní normalizační orgány Belgie, Bulharska, Bývalé jugoslávské republiky Makedonie, České republiky, Dánska, Estonska, Finska, Francie, Chorvatska, Irska, Islandu, Itálie, Kypru, Litvy, Lotyšska, Lucemburska, Maďarska, Malty, Německa, Nizozemska, Norska, Polska, Portugalska, Rakouska, Rumunska, Řecka, Slovenska, Slovinska, Spojeného království, Španělska, Švédska, Švýcarska a Turecka. Oznámení o schválení Text ISO 11133:2014, opravené vydání 2014-11-01 byl schválen CEN jako EN ISO 11133:2014 bez jakýchkoliv modifikací.
4
Tabulka E.1 – Testovací mikroorganismy a kritéria výkonnosti kultivačních půd běžně používaných v mikrobiologii potravin Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy
agar pro listerie: Ottaviani a Agosti
e
Typ S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
Listeria monocytogenes
ISO 11290-2
produktivita
selektivita
Inkubace
(44 ± 4) h při (37 ± 1) °C
BairdParker
S
koagulázopozitivní stafylokoky
ISO 6888-1
produktivita
5
selektivita specificita
BGBLB
L
koliformní bakterie
ISO 4831
PR ≥ 0,5
modrozelené kolonie se zónou zákalu
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
–
kvalitativní
–
modrozelené kolonie bez zóny zákalu
00034 00032
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
černé nebo šedé kolonie se zónou projasnění (egg-yolk reakce s projasněním)
00012 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
–
kvalitativní
–
černé nebo šedé kolonie bez egg-yolk reakce s projasněním
–
kvalitativní
zákal (2) a v Durhamově zkumavce plyn
tvorba plynu a zákal
–
kvalitativní
částečná inhibice bez tvorby plynu
–
00109
Escherichia coli
00012 NA2) nebo
d
00013 d
Escherichia coli
00009 nebo 00087 00017
d
b
Staphylococcus saprophyticus
00159
Staphylococcus epidermidis
00036
Escherichia coli
00012 00013
Citrobacter freundii
00006
b
(24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (30 ± 1) °C
d
00009 00087
f
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Viz informativní národní příloha NA.
kvantitativní
Listeria monocytogenes 1/2a
Enterococcus faecalis
NA2)
TSA
b
b
produktivita
selektivita
Charakteristická reakce
00021
(24 ± 2) h až (48 ± 2) h při Staphylococcus aureus (37 ± 1) °C
(24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (37 ± 1) °C
Kritéria
Listeria monocytogenes 4b
Listeria innocua
(48 ± 2) h při (37 ± 1) °C
Metoda kontroly
Číslo c WDCM
Enterococcus faecalis specificita
Referenční půdy
Kontrolní kmen
Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy CFC
e
Typ S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
Pseudomonas spp.
ISO 13720
produktivita
Inkubace
(44 ± 4) h při (25 ± 1) °C selektivita DG18
S
kvasinky a plísně
ISO 21527-2
produktivita
selektivita
kvasinky a plísně
ISO 21527-1
produktivita
5 dní při (25 ± 1) °C selektivita
EC
L
Escherichia coli
ISO 7251
Pseudomonas fluorescens
00115
Pseudomonas fragi
00116
d
b
Wallemia sebi
00182
b
Aspergillus restrictus
00183
Eurotium rubrum
00184 00012 g nebo 00013
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
Saccharomyces cerevisiae
00058
b
Aspergillus brasiliensis
00053
b
Candida albicans
00054
Mucor racemosus
00181
Escherichia coli
d
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristická reakce
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
–
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
SDA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky
–
kvalitativní
žádný růst
–
00012 g nebo 00013
SDA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky
–
kvalitativní
žádný růst
–
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
Escherichia coli
00012 00013
–
kvalitativní
zákal (2) a v Durhamově zkumavce plyn
tvorba plynu a zákal
Pseudomonas aeruginosa
00025
–
kvalitativní
žádný růst
–
produktivita
selektivita
00012 00013 00058
d
Referenční půdy
b
Saccharomyces cerevisiae
Escherichia coli
6 S
Číslo c WDCM
Escherichia coli
5 dní při (25 ± 1) °C
DRBC
Kontrolní kmen
f
b
(24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (44 ± 1) °C
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy
IS („TS“)
e
Typ S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
bakterie redukující sulfity
ISO 15213
produktivita
specificita LST
L
koliformní bakterie
ISO 4831
ISO 7251
7 S
bakterie rodu Campylobacter
ISO 10272-2
S
ISO 15214
00007 00080
Clostridium perfringens
Escherichia coli
00012 nebo 00013
d
(24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (30 ± 1) °C
Escherichia coli
00012 00013
Citrobacter freundii
00006
Enterococcus faecalis
TSA nebo jiná neselektivní kvantitativní půda pro anaeroby
d
00009 00087
(24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (37 ± 1) °C
Escherichia coli
Enterococcus faecalis
d
Kritéria
Charakteristická reakce
PR ≥ 0,5
černé kolonie
–
kvalitativní
–
–
kvalitativní
zákal (2) a v Durhamově zkumavce plyn
chybějící černé zbarvení
tvorba plynu a zákal
–
kvalitativní
žádný růst
–
tvorba plynu a zákal
f
f
00012 00013
–
kvalitativní
zákal (2) a v Durhamově zkumavce plyn
00009 00087
–
kvalitativní
žádný růst
–
PR ≥ 0,5
kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem
b
b
Campylobacter jejuni (44 ± 4) h při (41,5 ± 1) °C mikroaerobní atmosféra
produktivita
(72 ± 3) h při (30 ± 1) °C selektivita
Metoda kontroly
00156 00005
krevní agar kvantitativní
00004
Campylobacter coli
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná nebo částečná ihibice (0 až 1)
–
Staphylococcus aureus
00034
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Lactobacillus sakei
00015
b
Lactococcus lactis
00016
b
kvantitativní
PR ≥ 0,7
Pediococcus pentosaceus
již ověřená šarže MRS
kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy
00158
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Escherichia coli
Escherichia coli
d
d
Bacillus cereus
00012 nebo 00013 00001
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
bakterie mléčného kvašení
b
Referenční půdy
b
produktivita
selektivita
MRS
Číslo c WDCM
Kontrolní kmen
produktivita
selektivita mCCDA
(24 ± 3) h až (48 ± 2) h při (37 ± 1) °C anaerobní atmosféra
produktivita
selektivita Escherichia coli
Inkubace
Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy MYP
Typ
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmen
Číslo c WDCM
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristická reakce
S
Bacillus cereus
ISO 7932
produktivita
(24 ± 3) h až (44 ± 4) h při (30 ± 1) °C
Bacillus cereus
00001
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
růžové kolonie se zónou precipitace
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
–
kvalitativní
–
žluté kolonie bez zóny precipitace
(24 ± 2) h až (48 ± 2) h při Staphylococcus aureus (37 ± 1) °C
00034 00032
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
černé nebo šedé kolonie se zónou zákalu
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
–
kvalitativní
–
černé nebo šedé kolonie bez zóny zákalu
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
–
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
modré kolonie
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
kvalitativní
–
bílé až zeleno-béžové kolonie
e
selektivita specificita RPFA
S
koagulázopozitivní stafylokoky
ISO 6888-2
produktivita
selektivita specificita
8 PPA
S
Pseudomonas spp.
(44 ± 4) h při (30 ± 1) °C
(48 ± 2) h při (37 ± 1) °C (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (37 ± 1) °C
ISO/TS 11059 produktivita (48 ± 2) h při (25 ± 1) °C selektivita
TBX
S
β-Dglukuronidázopozitivní Escherichia coli
ISO 16649-1 a ISO 16649-2
Escherichia coli
Escherichia coli
specificita
d
b
Staphylococcus saprophyticus
00159
Staphylococcus epidermidis
00036
Pseudomonas fluorescens
00115
Pseudomonas aeruginosa
00025
Escherichia coli
d
Escherichia coli
h
b
b
00012 nebo 00013 d
produktivita
selektivita
d
(21 ± 3) h při (44 ± 1) °C
Enterococcus faecalis Citrobacter freundii Pseudomonas aeruginosa
00012 d 00013 b 00202 d
00009 00087 00006
b
00025
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
e
Půdy
Typ
TSC (SC)
S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
Clostridium perfringens
ISO 7937
produktivita
selektivita VRBG
S
bakterie čeledi Enterobacteriaceae
ISO 21528-2
Inkubace
(20 ± 2) h při (37 ± 1) °C anaerobní atmosféra
9
koliformní bakterie
ISO 4832
00007 00080
00012 nebo 00013
d
TSA nebo jiná neselektivní kvantitativní půda pro anaeroby
Kritéria
Charakteristická reakce
PR ≥ 0,5
černé kolonie
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
00012 00013
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
červenofialové (purpurově červené) kolonie se zónou precipitace nebo bez ní
00009 00087
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
kvalitativní
–
bezbarvé až béžové kolonie
00012 00013
Salmonella d,i Typhimurium
00031
Salmonella d,i Enteritidis
00030
Enterococcus faecalis
d
00009 00087 b
Escherichia coli
specificita
Metoda kontroly
–
Escherichia coli
produktivita
selektivita
Referenční půdy
b
produktivita
selektivita S
b
Clostridium perfringens
Escherichia coli
(24 ± 2) h při (37 ± 1) °C
VRBL
Číslo c WDCM
Kontrolní kmen
(24 ± 2) h při (30 ± 1) °C
Enterococcus faecalis Pseudomonas aeruginosa
d
00025
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Neselektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy PCA MPCA
e
Typ S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
aerobní mikroorganismy – technika počítání kolonií
ISO 4833
produktivita
Inkubace
(72 ± 3) h při (30 ± 1) °C
Kontrolní kmen
Číslo c WDCM
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
Escherichia coli
00012 00013
Staphylococcus aureus
00034
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristická reakce
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,7
–
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce cílového mikroorganismu
–
kvalitativní
> 10 kolonií na mCCDA
kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
b
b
Selektivní pomnožovací půdy a
Půdy Bolton
e
Typ L
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
bakterie rodu Campylobacter
ISO 10272-1
produktivita
Inkubace
Číslo c WDCM
Kontrolní kmen Campylobacter jejuni + Escherichia coli
10
(5 ± 1) h při (37 ± 1) °C a pak (44 ± 4) h při (41,5 ± 1) °C mikroaerobní atmosféra
d
00156 nebo 00005 00012 00013
+ Proteus mirabilis
00023
Campylobacter coli
00004
+ Escherichia coli
d
+ Proteus mirabilis selektivita
d
Escherichia coli
d
Proteus mirabilis
00012 00013 00023 00012 00013 00023
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Selektivní pomnožovací půdy a
Půdy EE
e
Typ L
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
bakterie čeledi Enterobacteriaceae
ISO 21528-1
produktivita
Inkubace
–
kvalitativní
> 10 kolonií na VRBG
růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
–
kvalitativní
> 10 kolonií na agaru pro listerie: Ottaviani a Agosti
modrozelené kolonie se zónou zákalu
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
< 100 kolonií na TSA
–
+ Enterococcus d faecalis
00009 nebo 00087
Salmonella d,i Typhimurium
00031 nebo
Salmonella Enteritidis
d,i
produktivita
d
Listeria monocytogenes 4b
11
+ Escherichia coli
(48 ± 2) h při (37 ± 1) °C
00030 00009 nebo 00087
Enterococcus faecalis ISO 11290-1
Charakteristické reakce cílového mikroorganismu
00012 00013
selektivita
Listeria monocytogenes
Kritéria
Escherichia coli
+ Enterococcus d faecalis
L
Metoda kontroly
Číslo c WDCM b
(24 ± 2) h při (37 ± 1) °C
Fraser
Referenční půdy
Kontrolní kmen
00009 nebo 00087 00021
b
00012 nebo 00013
d
+ Enterococcus d faecalis
00009 nebo 00087
Listeria monocytogenes 1/2a
00109
+ Escherichia coli
00012 nebo 00013
d
00009 nebo 00087
+ Enterococcus d faecalis selektivita
d
Enterococcus faecalis
d
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Escherichia coli
Selektivní pomnožovací půdy a
e
Půdy
Typ
Giolitti a Cantoni
L
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
koagulázopozitivní stafylokoky
ISO 6888-3
produktivita
Inkubace
Staphylococcus aureus (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při d + Escherichia coli (37 ± 1) °C Staphylococcus aureus + Escherichia coli
selektivita
HalfFraser
L
Listeria monocytogenes
ISO 11290-1
(48 ± 2 ± 4) h při (37 ± 1) °C
produktivita
Escherichia coli
12 (24 ±2) h při (30 ± 1) °C
Charakteristické reakce cílového mikroorganismu
–
kvalitativní
> 10 kolonií na garu podle Baird-Prakera nebo na agaru RPFA
kolonie charakteristické podle použité půdy (viz ISO 6888-1 pro agar podle Baird-Parkera a ISO 6888-2 pro agar RPFA)
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
–
kvalitativní
> 10 kolonií na agaru pro listerie: Ottaviani a Agosti
modrozelené kolonie se zónou zákalu
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
< 100 kolonií na TSA
–
b
00012 nebo 00013 00032
00012 nebo 00013
d
+ Escherichia coli
Kritéria
00034
00021
b
00012 nebo 00013
d
+ Enterococcus d faecalis
00009 nebo 00087
Listeria monocytogenes 1/2a
00109
+ Escherichia coli
00012 nebo 00013
d
00009 nebo 00087
+ Enterococcus d faecalis selektivita Escherichia coli
d
Enterococcus faecalis
Referenční půdy
00012 nebo 00013
d
Listeria monocytogenes 4b
(poloviční Fraser)
Metoda kontroly
Číslo c WDCM
Kontrolní kmen
d
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Selektivní pomnožovací půdy a
Půdy ITC
e
Typ L
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
Yersinia enterocolitica
ISO 10273
produktivita
Inkubace
Kritéria
Charakteristické reakce cílového mikroorganismu
–
kvalitativní
> 10 kolonií na CIN nebo SSDC
kolonie charakteristické podle použité půdy (viz ISO 10273)
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
–
kvalitativní
> 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby
kolonie charakteristické podle použité půdy (viz ISO 6579)
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
částečná inhibice ≤ 100 kolonií na TSA
–
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
< 10 kolonií na TSA
–
Yersinia enterocolitica
00038
00025 00160
Yersinia enterocolitica
00012 or 00013
d
+ Pseudomonas aeruginosa
00025
Pseudomonas aeruginosa
00025 00023
Proteus mirabilis
13
MKTTn
L
bakterie rodu Salmonella
ISO 6579
produktivita
b
00012 nebo 00013
d
+ Pseudomonas aeruginosa
+ Escherichia coli
selektivita
Metoda kontroly
Číslo c WDCM
+ Escherichia coli
(44 ± 4) h při (25 ± 1) °C
Referenční půdy
Kontrolní kmen
Salmonella Enteritidis
d,i
00030
Salmonella Typhimurium
00031
d,i
+ Escherichia coli (24 ± 3) h při (37 ± 1) °C
00012 nebo 00013
d
+ Pseudomonas aeruginosa
00025
selektivita Escherichia coli
d
d
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Enterococcus faecalis
Selektivní pomnožovací půdy a
Půdy MSRV
k
e
Typ SS
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
bakterie rodu Salmonella
ISO 6579
produktivita
Inkubace
Číslo c WDCM
Kontrolní kmen Salmonella Enteritidis
d,i
Salmonella d,i Typhimurium
selektivita
d
d
14 PSB
L
β-Dglukuronidázopozitivní Escherichia coli
ISO 16649-3
Yersinia enterocolitica
ISO 10273
(24 ± 2) h při (37 ± 1) °C
produktivita
Escherichia coli Enterococcus faecalis
d
Yersinia enterocolitica + Escherichia coli
3 až 5 dní při (25 ± 1) °C
selektivita
Charakteristické reakce cílového mikroorganismu
kvalitativní
šedobílá zakalená zóna šířící se kolem naočkované kapky (kapek); po 24 h až 48 h se zakalená zóna (zóny) rozšíří (téměř) po celé plotně
–
možnost navíc: charakteristické kolonie k po subkultivaci na XLD
–
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
v místě naočkované kapky (kapek) je možný růst bez zakalené zóny
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
žádný růst
–
00012 00013
–
kvalitativní
tvorba kyseliny
změna zbarvení na žluté
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
žádný růst
–
–
kvalitativní
> 10 kolonií na CIN nebo SSDC
kolonie charakteristické podle použité půdy
b
produktivita selektivita
Kritéria
00030
00031
Enterococcus faecalis L
Metoda kontroly
2 × (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) °C
Escherichia coli
MMG
Referenční půdy
d
00038
b
00012 nebo 00013
+ Pseudomonas aeruginosa
00025
Yersinia enterocolitica
00160
+ Escherichia coli
d
(viz ISO 10273)
00012 nebo 00013
+ Pseudomonas aeruginosa
00025
Pseudomonas aeruginosa
00025
Proteus mirabilis
00023
b
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Selektivní pomnožovací půdy a
Půdy RVS
e
Typ L
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
bakterie rodu Salmonella
ISO 6579
produktivita
Inkubace
Číslo c WDCM
Kontrolní kmen Salmonella Enteritidis
d,i
Salmonella d,i Typhimurium
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce cílového mikroorganismu
kvalitativní
> 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby
kolonie charakteristické podle použité půdy (viz ISO 6579)
–
00030 00031
+ Escherichia coli (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) °C
Referenční půdy
00012 nebo 00013
d
+ Pseudomonas aeruginosa
–
00025
selektivita Escherichia coli
d
Enterococcus faecalis TSPB
L
Bacillus cereus
ISO 21871
d
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
částečná inhibice ≤100 kolonií na TSA
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
< 10 kolonií na TSA
–
00001
–
kvalitativní
>10 kolonií na PEMBA nebo MYP
kolonie charakteristické podle použité půdy (viz ISO 21871)
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0) na TSA
–
produktivita
15
Bacillus cereus selektivita
(48 ± 4) h při (30 ± 1) °C Escherichia coli
d
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Neselektivní tekuté půdy a ředicí roztoky a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmen
Číslo c WDCM
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristická reakce
Staphylococcus aureus
00034
–
kvalitativní
zákal f (1 až 2)
–
–
kvalitativní
zákal f (1 až 2)
–
BHI
L
koagulázopozitivní stafylokoky
ISO 6888-1 ISO 6888-3
produktivita
(24 ± 2) h při (37 ± 1) °C
bujón pro brucely
L
bakterie rodu Campylobacter
ISO 10272 (všechny části)
produktivita
2 až 5 dní při (41,5 ± 1) °C mikroaerobní atmosféra
ISO 6887 (všechny části)
zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem
16
ředicí roztok pro zvláštní účely, např. BPW s bromkresolovou červení
L
Ringerův roztok o čtvrtinové koncentraci
L
ředicí roztoky
ředicí roztoky
ISO 6887 (všechny části)
45 min až 1 h při 20 °C až 25 °C
fyziologický roztok s peptonem
d
00156 00005 00004 00012 nebo 00013
TSA Staphylococcus aureus
Escherichia coli
45 min až 1 h při 20 °C až 25 °C
d
Campylobacter coli Escherichia coli
zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem
roztok s peptonem
Campylobacter jejuni
d
00034
kvantitativní
b
± 30 % počtu kolonií/T0 (± 30 % výchozího počtu kolonií)
–
00012 nebo 00013
TSA
kvantitativní
± 30 % počtu kolonií/T0 (± 30 % výchozího počtu kolonií)
–
kvalitativní
zákal f (1 až 2)
–
–
kvalitativní
zákal f (1 až 2)
–
b
Staphylococcus aureus
00034
Clostridium perfringens
00007
Listeria monocytogenes 4b
00021
Listeria monocytogenes 1/2a
00109
–
roztok fosfátového pufru thioglykolát
L
Clostridium perfringens
ISO 7937
produktivita
TSYEB
L
Listeria monocytogenes
ISO 11290 (všechny části)
produktivita
(21 ± 3) h při (37 ± 1) °C (21 ± 3) h při (25 ± 1) °C
b
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Selektivní izolační půdy a
Půdy
agar pro listerie: Ottaviani j a Agosti
e
Typ S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
Listeria monocytogens
ISO 11290-1
produktivita
selektivita
Inkubace
(44 ± 4) h při (37 ± 1) °C
mCCDA
j
S
bakterie rodu Campylobacter
ISO 10272 (všechny části)
17 S
Escherichia coli O157
ISO 16654
produktivita
selektivita
Escherichia coli
d
Escherichia coli
d
Yersinia enterocolitica
ISO 10273
kvalitativní
–
modrozelené kolonie bez zóny zákalu
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem
000012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná nebo částečná inhibice (0 až 1)
00034
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
průsvitné kolonie zbarvené světle žlutavě až nahnědle a o průměru asi 1 mm
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
–
kvalitativní
částečná inhibice (1)
00038 00160
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná nebo částečná inhibice (0 až 1)
00034
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
b
00156 00005 00004
(netoxinogenní kmen)
Staphylococcus d aureus d
produktivita
00032 nebo 00034 00012 nebo 00013 b
Yersinia enterocolitica selektivita
–
(21 ± 3) h při (30 ± 1) °C
Escherichia coli
d
Staphylococcus aureus
Charakteristická reakce modrozelené kolonie se zónou zákalu
žádné charakteristické kolonie
růst několika růžových kolonií kolonie charakteristické podle použité půdy (viz ISO 10273) žádné charakteristické kolonie –
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
SSDC
S
–
00014
Escherichia coli CIN
úplná inhibice (0)
00009 nebo 00087 00017
d
Referenční půdy
b
00012 nebo 00013
d
Escherichia coli O157:H7 (21 ± 3) h při (37 ± 1) °C
kvalitativní
00109
Staphylococcus aureus CT-SMAC
–
Listeria monocytogenes 1/2a
Campylobacter coli selektivita
kvalitativní
00021
Campylobacter jejuni (44 ± 4) h při (41,5 ± 1) °C mikroaerobní atmosféra
–
dobrý růst (2)
Listeria monocytogenes 4b
Listeria innocua
produktivita
Kritéria
Číslo c WDCM
Enterococcus faecalis specificita
Metoda kontroly
Kontrolní kmen
Selektivní izolační půdy a
Půdy CPC mCPC
MYP
j
e
Typ S
S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
bakterie rodu Vibrio druhy jiné než Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae
ISO/TS 21872-2
Bacillus cereus
ISO 21871
Funkce
Inkubace
produktivita
(24 ± 3) h při (37 ± 1) °C
18
Bacillus cereus
produktivita
(21 ± 3) h až 48 h při (30 ± 1) °C
ISO 21871
produktivita
(44 ± 4) h při (30 ± 1) °C (21 ± 3) h až (44 ± 4) h při (37 ± 1) °C
selektivita specificita SDS
S
bakterie rodu Vibrio druhy jiné než Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae
Kritéria
Charakteristická reakce
b
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
žluté kolonie obklopené žlutým zbarvením půdy
b
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
purpurově zbarvené kolonie obklopené purpurovým zbarvením půdy
00012 nebo 00013 nebo 00090
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
00001
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
růžové kolonie se zónou precipitace
00012 nebo 000013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
–
kvalitativní
–
žluté kolonie bez zóny precipitace
Bacillus cereus
00001
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
tyrkysově modré kolonie se zónou precipitace
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
–
kvalitativní
–
bílé kolonie bez zóny precipitace
Vibrio vulnificus
00187
b
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
kolonie purpurově/zeleně zbarvené obklopené zónou zákalu
Vibrio cholerae non-O1/non-O139
00203
b
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
žluté kolonie obklopené zónou zákalu
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Vibrio vulnificus
00187
Vibrio cholerae non-O1/non-O139
00203
Escherichia coli
specificita S
Metoda kontroly
Číslo c WDCM
selektivita
selektivita
PEMBA
Referenční půdy
Kontrolní kmen
ISO/TS 21872-2
(44 ± 4) h při (37 ± 1) °C
d
Bacillus cereus
Escherichia coli
Escherichia coli
d
d
produktivita
(24 ± 3) h při (37 ± 1) °C selektivita
Escherichia coli
d
00012 nebo 00013 nebo 00090
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Selektivní izolační půdy a
Půdy TBX
j
e
Typ S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
β-Dglukuronidázopozitivní Escherichia col
ISO 16649-3
produktivita
Inkubace
(21 ± 3) h při (44 ± 1) °C
specificita
TCBS
S
Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae
ISO/TS 21872-1
h
Enterococcus faecalis
19
S
bakterie čeledi Enterobacteriaceae
produktivita
(24 ± 3) h při (37 ± 1) °C
ISO 21528-1
Charakteristická reakce
00012 d 00013 b 00202
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
modré kolonie
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
–
kvalitativní
–
bílé až zeleno béžově kolonie
00006
b
00025
Vibrio parahaemolyticus
00185
b
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
zelené kolonie (sacharózonegativní)
Vibrio furnissii
00186
b
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
žluté kolonie (sacharózopozitivní)
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
00012 nebo 00013 nebo 00090
d
b
produktivita
00012 00013
Escherichia coli
(24 ± 2) h při (37 ± 1) °C selektivita
Kritéria
Pseudomonas aeruginosa
Escherichia coli j
d
Citrobacter freundii
selektivita
VRBG
Metoda kontroly
d
Escherichia coli selektivita
Referenční půdy
Číslo c WDCM
Kontrolní kmen
00031
Salmonella d,i Typhimuriumm
nebo
Salmonella d,i Enteritidis Enterococcus faecalis
00030 d
00009 nebo 00087
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Selektivní izolační půdy a
Půdy XLD
e
Typ S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
bakterie rodu Salmonella
ISO 6579
produktivita
Inkubace
Kontrolní kmen
Číslo c WDCM
Salmonella d, i Typhimuriumd
00031
Salmonella Enteritidis selektivita
(24 ± 3) h při (37 ± 1) °C
Escherichia coli
d, i
00012 nebo 00013 d
Metoda kontroly
00009 nebo 00087
Kritéria
Charakteristická reakce
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
kolonie s černým středem a obklopené slabě průsvitnou načervenalou zónou v důsledku změny barvy půdy
–
kvalitativní
růst nebo částečná inhibice (0 až 1)
žluté kolonie
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristická reakce
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
–
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
–
00030
d
Enterococcus faecalis
Referenční půdy
Neselektivní izolační půdy a
Půdy
20
živný d agar
TSYEA
e
Typ S
S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
bakterie čeledi Enterobacteriaceae
ISO 21528 (všechny části)
bakterie rodu Salmonella
ISO 6579
Funkce produktivita
Inkubace
Kontrolní kmen
Číslo c WDCM
(24 ± 2) h při (37 ± 1) °C
Escherichia coli
00012 00013
Salmonella d,i Typhimurium
00031
Salmonella d,i Enteritidis
00030
Yersinia enterocolitica
00038 00160
Listeria monocytogenes 4b
00021
Listeria monocytogenes 1/2a
00109
(24 ± 2) h při (37 ± 1) °C
Yersinia enterocolitica
ISO 10273
Listeria monocytogenes
ISO 11290 (všechny části)
(24 ± 2) h při (30 ± 1) °C produktivita (21 ± 3) h při (37 ± 1) °C
b
b
b
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (pokračování)
Tabulka E.1 (pokračování) Prostředí pro více účelů a
Půdy m
BPW
e
Typ L
21
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu všech mikroorganismů
ISO 6887 (všechny části)
ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu Listeria monocytogenes
ISO 11290-2
půda pro předpomnožení při průkazu bakterií rodu Salmonella
ISO 6579
půda pro předpomnožení při průkazu bakterií čeledi Enterobacteriaaceae
ISO 21528-1
Funkce zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem
Inkubace
Kontrolní kmen
Číslo c WDCM
Escherichia coli
00012 00013
Staphylococcus aureus
00034
b
Listeria monocytogenes 4b
00021
b
Listeria monocytogenes 1/2a
00109
Salmonella d,i Typhimurium
00031
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristická reakce
kvantitativní
± 30 % počtu kolonií/T0 (± 30 % výchozího počtu kolonií)
–
TSA
kvantitativní
± 30 % počtu kolonií/T0 (± 30 % výchozího počtu kolonií)
–
–
kvalitativní
zákal (1 až 2)
f
–
–
kvalitativní
zákal (1 až 2)
f
–
b
45 min až 1 h při 20 °C až 25 °C
(1 h ± 5°min) při (20 ± 2) °C
produktivita (18 ± 2) h při (37 ± 1) °C
TSA
Salmonella d,i Enteritidis
00030
Escherichia coli
00012 00013
Salmonella d,i Typhimurium
00031
b
produktivita (18 ± 2) h při (37 ± 1) °C
Salmonella Enteritidis
d,i
00030
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Referenční půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy krevní agar
TSA
n
e
Typ S
S
Mikroorganismus
Mezinárodní norma
Funkce
počet kolonií bakterií rodu Campylobacter
ISO 10272-2
produktivita
počet kolonií
–
Inkubace
Kontrolní kmen
(44 ± 4) h při (41,5 ± 1) °C
Campylobacter jejuni
produktivita jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá TSA
SDA
S
počet kolonií
–
produktivita
d
22
Číslo c WDCM
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristická reakce
00156 00005
již ověřená šarže krevního agaru
kvantitativní
PR ≥ 0,7
–
již ověřená šarže TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,7
kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy
již ověřená šarže SDA
kvantitativní
PR ≥ 0,7
v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky
Campylobacter coli
00004
Bacillus cereus
00001
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
Escherichia coli
00012
Listeria monocytogenes 4b
00021
Staphylococcus aureus
00034
jak je uvedeno Saccharomyces v postupu, kde cerevisiae se jako referenční půda Aspergillus brasiliensis používá SDA
00058 00053
b
b
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka E.1 (dokončení)
Tabulka F.1 – Testovací mikroorganismy a kritéria výkonnosti kultivačních půd běžně používaných v mikrobiologii vody Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
00013 00090
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
E. coli: žluté zbarvení a fluorescence
Klebsiella pneumoniae
00206
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
koliformní bakterie: žluté zbarvení stejné nebo intenzivnější než komparátor pro koliformní bakterie
Pseudomonas d aeruginosa
00025 NA5) nebo 00024
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
žluté zbarvení méně intenzivní než komparátor
2 až 5 dní při (36 ± 2) °C
Legionella pneumophila
00107 00180
5 až 10 dní při (36 ± 2) °C
Legionella anisa
00106
Enterococcus d faecalis
00009 nebo 00087
Pseudomonas d aeruginosa
00026 nebo 00025
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Inkubace
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Escherichia coli
b
Colilert-18
L
Escherichia coli/ koliformní bakterie
produktivita (20 ± 2)°h při (36 ± 2) °C
ISO 9308-2
selektivita
produktivita
f
GVPC
S
baterie rodu Legionella
ISO 11731 a ISO 11731-2
23
selektivita
Viz informativní národní příloha NA.
BCYE
kvantitativní
PR ≥ 0,5
kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
kvalitativní
úplná nebo částečná inhibice (0 až 1)
–
–
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
NA5)
3 dny při (36 ± 2) °C
b
Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
žluté zbarvení půdy pod membránovým filtrem
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Pseudomonas d aeruginosa
00025 nebo 00026
–
kvalitativní
–
červené kolonie, modře zbarvená půda
Clostridium perfringens
00007 00080 00174
PR ≥ 0,5
žluté kolonie; fosfatázový test pozitivní
Clostridium bifermentans
00079
–
kvalitativní
–
modré kolonie; fosfatázový test negativní
selektivita
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
produktivita
Pseudomonas aeruginosa
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
modrozelené kolonie s fluorescencí pod UV světlem (360 ± 20 nm)
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Escherichia coli
00179 00012 00013
Enterobacter aerogenes
00175
Citrobacter freundii
00006
selektivita
Enterococcus d faecalis
specificita
produktivita
Funkce
Inkubace
b
produktivita laktóza – TTC
S
Escherichia coli/ koliformní bakterie
(21 ± 3) h při (36 ± 2) °C
ISO 9308-1
b
24 mCP
S
Clostridium perfringens
Směrnice 98/83/ES specificita
(21 ± 3) h při (44 ± 1) °C anaerobní atmosféra
00024
TSA nebo jiná neselektivní kvantitativní půda pro anaeroby
b
00025 00026
Pseudomonas CN
S
Pseudomonas aeruginosa
(44 ± 4) h při (36 ± 2) °C
ISO 16266
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Enterococcus d faecalis
00009 nebo 00087
selektivita
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka F.1 (pokračování)
Tabulka F.1 (pokračování) Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Enterococcus faecalis
00009 00087 00176
Enterococcus d faecium
00177 00178
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Staphylococcus d aureus
00032 nebo 00034
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
TSA
kvantitativní
PR ≥ 0,5
kolonie v odstínech červené, kaštanově hnědé
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
PR ≥ 0,5
černé kolonie
–
bez černého zbarvení
PR ≥ 0,5
černé kolonie
úplná inhibice (0)
–
b
produktivita Slanetz a Bartley
S
intestinální enterokoky
(44 ± 4) h při (36 ± 2) °C
ISO 7899-2
selektivita
železnato siřičitanový agar [Sulfite Iron (IS)]
25
tryptózo siřičitanový agar [Tryptose Sulfite (TS)]
produktivita S
anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie)
(44 ± 4) h při (37 ± 1) °C anaerobní atmosféra
ISO 6461-2
specificita
b
Clostridium perfringens
00007 00080
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Clostridium perfringens
00007 00080 00174
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
b
produktivita TSC
S
Clostridium perfringens
ISO 14189
specificita
(21 ± 3) h při (44 ± 1) °C anaerobní atmosféra
TSA nebo krevní agar, nebo jiná kvantitativní neselektivní půda pro anaeroby
–
kvalitativní
TSA nebo krevní agar, nebo jiná kvantitativní neselektivní půda pro anaeroby –
kvalitativní
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
00013 00090
již ověřená šarže Colilert
kvantitativní
PR ≥ 0,7
E. coli: žluté zbarvení a fluorescence
Klebsiella pneumoniae
00206
již ověřená šarže půdy Colilert
kvantitativní
PR ≥ 0,7
koliformní bakterie: žluté zbarvení stejné nebo intenzivnější než komparátor pro koliformní bakterie
Pseudomonas d aeruginosa
00025 nebo 00024
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
žluté zbarvení méně intenzivní než komparátor
2 až 5 dní při (36 ± 2) °C
Legionella pneumophila
00107 00180
5 až 10 dní při (36 ± 2) °C
Legionella anisa
00106
Enterococcus d faecalis
00009 nebo 00087
Pseudomonas d aeruginosa
00026 nebo 00025
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Inkubace
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Escherichia coli
b
Colilert-18
L
Escherichia coli/ koliformní bakterie
produktivita (20 ± 2)°h při (36 ± 2) °C
ISO 9308-2
selektivita
produktivita
f
26
GVPC
S
baterie rodu Legionella
ISO 11731 a ISO 117312 selektivita
3 dny při (36 ± 2) °C
b
již ověřená šarže půdy GVPC
kvantitativní
PR ≥ 0,7
kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
kvalitativní
úplná nebo částečná inhibice (0 až 1)
–
–
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka F.1 (pokračování)
Tabulka F.1 (pokračování) Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
již ověřená šarže půdy laktóza – TTC
kvantitativní
PR ≥ 0,7
žluté zbarvení půdy pod membránovým filtrem
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Pseudomonas d aeruginosa
00025 nebo 00026
–
kvalitativní
–
červené kolonie, modře zbarvená půda
Clostridium perfringens
00007 00080 00174
již ověřená šarže půdy mCP
kvantitativní
PR ≥ 0,7
žluté kolonie; fosfatázový test pozitivní
Clostridium bifermentans
00079
–
kvalitativní
–
modré kolonie; fosfatázový test negativní
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Pseudomonas aeruginosa
00024 00025 00026
již ověřená šarže půdy Pseudomonas CN
kvantitativní
PR ≥ 0,7
modrozelené kolonie s fluorescencí pod UV světlem (360 ± 20 nm)
Escherichia d coli
00012 nebo 00013 –
kvalitativní
00009 nebo 00087
úplná inhibice (0)
–
Enterococcus d faecalis
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Escherichia coli
00179 00012 00013
Enterobacter aerogenes
00175
Citrobacter freundii
00006
selektivita
Enterococcus d faecalis
specificita
produktivita
Funkce
Inkubace
b
produktivita laktóza – TTC
S
Escherichia coli/ koliformní bakterie
(21 ± 3) h při (36 ± 2) °C
ISO 9308-1
b
27
mCP
S
Clostridium perfringens
Směrnice 98/83/ES
specificita
(21 ± 3) h při (44 ± 1) °C anaerobní atmosféra
selektivita
b
produktivita Pseudomonas CN
S
Pseudomonas aeruginosa
(44 ± 4) h při (36 ± 2) °C
ISO 16266 selektivita
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Enterococcus faecalis
00009 00087 00176
Enterococcus d faecium
00177 00178
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Staphylococcus d aureus
00032 nebo 00034
b
produktivita Slanetz a Bartley
intestinální enterokoky
S
(44 ± 4) h při (36 ± 2) °C
ISO 7899-2
selektivita
železnato siřičitanový agar [Sulfite Iron (IS)]
28
tryptózo siřičitanový agar [Tryptose Sulfite (TS)]
anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie)
S
Clostridium perfringens
S
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
již ověřená šarže půdy Slanetz a Bartley
kvantitativní
PR ≥ 0,7
kolonie v odstínech červené, kaštanově hnědé
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
kvantitativní
PR ≥ 0,7
černé kolonie
Clostridium perfringens
00007 00080
již ověřená šarže půdy Sulfite Iron (IS) nebo Tryptose Sulfite (TS)
specificita
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
–
bez černého zbarvení
produktivita
Clostridium perfringens
00007 00080 00174
již ověřená šarže půdy TSC
kvantitativní
PR ≥ 0,7
černé kolonie
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
již ověřená šarže YEA
kvantitativní
PR ≥ 0,7
–
produktivita ISO 6461-2
(44 ± 4) h při (37 ± 1) °C anaerobní atmosféra
b
b
TSC
Referenční půdy
ISO 14189 specificita
(21 ± 3) h při (44 ± 1) °C anaerobní atmosféra
Neselektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy
YEA
Typ
Mikroorganismy
S
celková mikroflóra
e
Mezinárodní norma
ISO 6222
Funkce
Inkubace
produktivita
(44 ± 4) h při (36 ± 2) °C
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Bacillus subtilis subsp. spizizenii
00003
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka F.1 (pokračování)
Tabulka F.1 (pokračování) Selektivní pomnožovací půdy a
e
Půdy
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmeny Campylobacter jejuni
produktivita Bolton
L
Preston
bakterie rodu Campylobacter
(44 ± 4) h při (37 ± 1) °C mikroaerobní atmosféra
ISO 17995
selektivita
29 MUG/EC
g
CM
L
Escherichia coli/ koliformní bakterie
ISO 9308-3
produktivita
48 h při (44 ± 0,5) °C
produktivita
h
MUD/SF
L
intestinální enterokoky
(44 ± 4) h při (44 ± 0,5) °C
ISO 7899-1
d
Referenční půdy
Metoda kontroly
–
kvalitativní
–
kvalitativní
Kritéria
Charakteristické reakce
> 10 kolonií
malé ploché nebo vypouklé kolonie s lesklým povrchem
b
00156 00005
+ Escherichia d coli
00012 nebo 00013
+ Proteus mirabilis
00023 b
Campylobacter coli
00004
+ Escherichia d coli
00012 nebo 00013
+ Proteus krabilis
00023
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Proteus krabilis
00023
Escherichia coli
00179
Enterococcus faecalis
00176
Enterococcus hirae
00089
Enterococcus faecium
00178
Aerococcus viridans
00061
Lactococcus lactis
00016
Staphylococcus epidermidis
00132
na mCCDA
b
úplná inhibice na TSA
–
Podrobnosti k metodám kontroly a kritériím kvality pro půdu MUG/EC jsou uvedeny v ISO 9308-3:1998, příloha E.
Podrobnosti k metodám kontroly a kritériím kvality pro půdu MUD/SF jsou uvedeny v ISO 7899-1:1998, příloha E.
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
selektivita
Čísla c WDCM
Selektivní pomnožovací půdy a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
produktivita
RVS
bakterie rodu Salmonella
L
(24 ± 3) h při (41,5 ± 1) °C
ISO 19250
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Salmonella d,i Enteritidis
00030
Salmonella d,i Typhimurium
00031
+ Escherichia d coli
00012 nebo 00013
+ Pseudomonas aeruginosa
00025
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Enterococcus d faecalis
00009 nebo 00087
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
–
kvalitativní
> 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby
kolonie charakteristické podle použité půdy (viz ISO 19250)
–
kvalitativní
částečná inhibice ≤ 100 kolonií na TSA
–
–
kvalitativní
Referenční půdy
selektivita
30
< 10 kolonií na TSA
–
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
Neselektivní tekuté půdy a ředicí roztoky a
Půdy
DRCM
Typ
Mikroorganismy
L
anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie)
e
Mezinárodní norma
ISO 6461-1
Funkce
Inkubace
produktivita
(44 ± 4) h při (36 ± 1) °C anaerobní atmosféra
specificita
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Clostridium perfringens
00007 00080
–
kvalitativní
zákal (1 až 2)
j
černé zbarvení
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
zákal (0 až 1)
j
bez černého zbarvení
b
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka F.1 (pokračování)
Tabulka F.1 (pokračování) Neselektivní tekuté půdy a ředicí roztoky a
Půdy
Typ
Mikroorganismy
L
ředicí roztoky
e
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
fyziologický roztok roztok s peptonem fyziologický roztok s peptonem Ringerův roztok o čtvrtinové koncentraci
zkouší se vliv kontaktu ISO 8199 s ředicím roztokem
45 min až 1 h při 20 °C až 25 °C
Escherichia d coli
00012 nebo 00013
Staphylococcus aureus
00034
TSA
b
± 30 % počtu kolonií/T0 kvantitativní (± 30 % výchozího počtu kolonií)
–
31
roztok fosfátového pufru Selektivní izolační půdy a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmeny
Campylobacter jejuni produktivita Campylobacter coli
S
bakterie rodu Campylobacter
(44 ± 4) h při (41,5 ± 1) °C mikroaerobní atmosféra
ISO 17995
Escherichia coli
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
d
selektivita Staphylococcus d aureus
d
–
kvalitativní
dobrý růst (2)
malé ploché nebo vypouklé kolonie s lesklým povrchem
00012 nebo 00013 nebo 00179 nebo 00090
–
kvalitativní
úplná nebo částečná inhibice (0 až 1)
žádné charakteristické kolonie
00032 nebo 00034
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
b
00156 nebo 00005 00004
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
mCCDA
Referenční půdy
Čísla c WDCM
Selektivní izolační půdy a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmeny
Čísla c WDCM
Salmonella d, i Typhimurium
00031
XLD
bakterie rodu Salmonella
S
(24 ± 3) h při (36 ± 2) °C
ISO 19250
Escherichia coli
Metoda kontroly
selektivita Enterococcus d faecalis
Charakteristické reakce kolonie s černým středem a obklopené slabě průsvitnou načervenalou zónou v důsledku změny barvy půdy
kvalitativní
dobrý růst (2)
00012 nebo 00013
–
kvalitativní
růst nebo částečná inhibice (0 až 1)
žluté kolonie
00009 nebo 00087
–
kvalitativní
úplná inhibice (0)
–
Referenční půdy
Metoda kontroly
Kritéria
Charakteristické reakce
00030
d
Kritéria
–
produktivita Salmonella d,i Enteritidis
Referenční půdy
Prostředí pro více účelů a
Půdy
e
Typ
Mikroorganismy
32 k
BPW
L
Mezinárodní norma
Funkce
ředicí roztok zkouší se vliv pro přípravu kontaktu ředění s ředicím ISO 6887 při stanovení roztokem počtu všech mikroorganismů půda pro předpomnožení při průkazu bakterií rodu Salmonella
ISO 19250
produktivita
Inkubace
45 min až 1 h při 20 °C až 25 °C
(18 ± 2) h při (36 ± 1) °C
Kontrolní kmeny
Escherichia coli
Čísla c WDCM
d
Staphylococcus aureus
00012 nebo 00013
TSA
00034
Salmonella d,i Typhimurium
00031
Salmonella d,i Enteritidis
00030
–
± 30 % počtu kolonií/T0 kvantitativní (± 30 % výchozího počtu kolonií)
kvalitativní
zákal (1 až 2)
j
–
–
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Tabulka F.1 (pokračování)
Tabulka F.1 (dokončení) Referenční půdy pro stanovení počtu mikroorganismů a
Půdy
BCYE
e
Typ
S
Mikroorganismy
Mezinárodní norma
počet kolonií
ISO 11731 a ISO 11731-2
Funkce
Inkubace
Kontrolní kmeny
produktivita
2 až 5 dní při (36 ± 2) °C
Legionella pneumophila
Escherichia coli
TSA
l
S
počet kolonií
–
produktivita
jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá TSA
Čísla c WDCM
00107
d
b
Referenční půdy
Metoda kontroly
již ověřená kvantitativní šarže BCYE
Kritéria
Charakteristické reakce
PR ≥ 0,7
kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla
PR ≥ 0,7
kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy
00012 00013 00179 00090
Clostridium perfringens
00007
Pseudomonas aeruginosa
00024
Enterococcus faecalis
00087
již ověřená šarže TSA
kvantitativní
33 ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
ČSN EN ISO 11133/Opr. 1
Do tabulky E1 jsou zapracovány tyto opravy: Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů – půda mCCDA: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM 00156 bylo doplněno b; – půda mCCDA: u kontrolního kmene E. coli bylo upraveno kritérium na „úplná nebo částečná inhibice (0 až 1)“ a u kontrolního kmene S. aureus na „úplná inhibice (0)“; – půda TSC: byl vypuštěn řádek obsahující Pseudomonas aeruginosa a číslo WDCM 00025. Selektivní pomnožovací půdy – půda Bolton, produktivita: směsi kontrolních kmenů byly rozděleny do dvou oddělených buněk; – půda ITC, produktivita: byla přidána nová směs kontrolních kmenů; – půda PSB selektivita: po čísle WDCM 00025 bylo přidáno b; Selektivní izolační půdy – půda mCCDA: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM 00156 bylo doplněno b; – půda PEMBA, aspekt produktivita: po slovech „dobrý růst (2)“ bylo vypuštěno i; Neselektivní izolační půdy – půda TSYEA: bylo opraveno jméno a číslo WDCM na Listeria monocytogenes 4b WDCM 00021 b. Referenční půdy pro stanovení počtu mikroorganismů – půda TSA: bylo vypuštěno „Escherichia coli O157:H7 WDCM 00014 (netoxinogenní kmen)“; – půda SDA: u kontrolního kmene Aspergillus brasiliensis byla doplněna specifikace takto: WDCM 00053 b. Do tabulky F1 jsou zapracovány tyto opravy: Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou – půda Colilert: byl upraven název na Colilert-18 a číslo WDCM kontrolního kmene Pseudomonas aeruginosa bylo změněno z 00207 na 00024. Selektivní půdy pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) – půda Colilert: byl upraven název na Colilert-18 a číslo WDCM kontrolního kmene Pseudomonas aeruginosa bylo změněno z 00207 na 00024; – půda laktóza – TTC: mezi kontrolními kmeny Enterococcus faecalis a Pseudomonas aeruginosa včetně jejich čísel WDCM byla doplněna dělicí čára. Selektivní pomnožovací půdy – půda Bolton/Preston, produktivita: směsi kontrolních kmenů byly rozděleny do dvou oddělených buněk. Neselektivní tekuté půdy a ředicí roztoky – fyziologický roztok: u kontrolního kmene Staphylococcus aureus WDCM 00034 bylo doplněno b; Selektivní izolační půdy – půda mCCDA: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM 00156 bylo doplněno b. Vypracování opravy normy Zpracovatel: Úřad pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví, IČ 48135267, ve spolupráci s RNDr. Ljubou Schlemmerovou, CSc. Pracovník Úřadu pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví: Ing. Kateřina Hanzlová
34
U p o z o r n ě n í : Změny a doplňky, jakož i zprávy o nově vydaných normách jsou uveřejňovány ve Věstníku Úřadu pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví. Vaše názory, podněty a připomínky týkající se technických norem a zájem o možnou účast v procesech technické normalizace lze zaslat na e-mailovou adresu
[email protected].
ČSN EN ISO 11133 OPRAVA 1
96725
Vydal Úřad pro technickou normalizaci, metrologii a státní zkušebnictví, Praha Rok vydání 2015, 36 stran Cenová skupina 998
+!5J0JG3-jghcfh!