Sérologický kardiolipinový a netreponemový test určený pro rychlou detekci Syphilisu KATALOGOVÉ ČÍSLO: RPRL-0100 (100 testů)

R P R L V D RL C a r b o n

Sérologický kardiolipinový a netreponemový test určený pro rychlou detekci Syphilisu KATALOGOVÉ ČÍSLO: RPRL-0100 (100 testů) KLINICKÝ VÝZNAM (1, 2) Syfilis je venerické onemocnění způsobené spirochétou Treponema pallidum. Toto onemocnění se rozvíjí během několika let ve 3 stádiích, oddělených asymptomatických stádiích, během kterých může být diagnóza stanovena pouze sérologickými testy. Vzhledem k tomu, že tento organismus není možno kultivovat na kultivačních půdách, závisí diagnostika syfilisu na korelaci klinických dat a výsledcích sérologických testů. Protilátky jsou detekovatelné asi 3-4 týdny po nakažení a na detekovatelné hladině se mohou udržet po dlouhé období po léčbě. Vznikají 2 skupiny protilátek: netreponemové protilátky (reaginy), které reagují s nespecifickými antigeny (VDRL nebo RPR test), a treponemové protilátky, které reagují se specifickými antigeny T. pallidum (TPHA test). Protilátky k netreponemovým antigenům se objevují (normálně) při aktivním onemocnění a jejich hladina klesá po úspěšné léčbě. Specifické protilátky přetrvávají dlouhou dobu potom, co byla infekce úspěšně léčena. Je nezbytně nutné testovat obě skupiny protilátek, protože netreponemové protilátky mohou stoupat i z jiných důvodů než je infekce syfilisu. Titr protilátek detekovaný RPR testem je přesnějším obrazem stáří nemoci a její odpovědi na léčbu. METODA (3-6) Kvalitativní nebo semikvantitativní aglutinační test. PRINCIP TESTU RPR test je sérologický kardiolipinový a netreponemový test určený pro rychlou detekci syfilisu. Činidla obsahují suspenzi kardiolipin/lecitin/cholesterol a uhlíkové částice pro zlepšení vizuálního odečtu. Kardiolipinové antigeny reagují s protilátkami (reaginem) přítomnými ve vzorku a dochází k formování makroskopicky viditelných černých shluků. SLOŽENÍ ČINIDEL A MATERIÁL, KTERÝ JE SOUČÁSTÍ SOUPRAVY Antigen suspenze kardiolipin/lecitin/cholesterol s uhlíkovými částicemi Pozitivní kontrola sérum obsahující protilátky Negativní kontrola sérum bez protilátek Plastová míchadélka Reakční destičky Nádobka na činidla Kapátko/jehla na nádobku POTŘEBNÝ MATERIÁL, KTERÝ NENÍ SOUČÁSTÍ SOUPRAVY Mikropipety Fyziologický roztok (0,9% NaCl) Rotátor schopný rotovat rychlostí 100 rpm

Autorizovaný zástupce výrobce v České republice: BioVendor – Laboratorní medicína a.s. Sídlo: Tůmova 2265/60, 616 00 Brno, Provozovna: Karásek 1767/1, 621 00 Brno-Řečkovice Tel.: 549 124 111, fax: 549 211 465, e-mail: [email protected], www.biovendor.cz

1 x 2 ml 1 x 0,5 ml 1 x 0,5 ml 100 ks 10 ks 1 ks 1 ks

BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ - Činidla a kontroly obsahují méně jak 0,1% azidu sodného. Azid sodný reaguje s měděnými a olověnými instalačními trubkami za vzniku explozivních azidů kovů. Pokud vylíváte do kanalizace, splachujte zároveň velkým množstvím vody. - Kontroly obsahují materiál humánního původu. Dbejte běžných bezpečnostních opatření a správné laboratorní praxe. Všechny humánní materiály by měly být považovány za potencionálně infekční. Všechny výrobky odvozené z krve a jsou připravovány výhradně z krve individuálně testovaných dárců, která byla negativní na HbsAg a protilátky k HCV a HIV 1/ HIV 2. Nicméně, nakládejte s materiálem s jako potencionálně infekčním. - Zamezte působení příliš vysokých teplot a přímého slunečního svitu. - Pro eliminaci kontaminace používejte čisté laboratorní vybavení nebo materiál na jedno použití. - Doporučuje uchovávat lahvičky se suspenzí kardiolipinového antigenu ve vertikální poloze, aby se eliminovala možnost aglutinace. - Oblasti vlastní reakce se nedotýkejte prsty. Dotek by mohl zanechat mastné stopy, které mohou způsobit invaliditu testu. LIKVIDACE ODPADU Veškerý materiál likvidujte dle místních nařízení. SKLADOVÁNÍ ČINIDEL Činidla a kontroly skladované při 2-8 °C a chráněné před světlem jsou stabilní do data exspirace vyznačeného na obalu. Žádné z činidel nezmrazujte. Po otevření soupravy skladuje reakční destičky při pokojové teplotě. PŘÍPRAVA A STABILITY PRACOVNÍKU ROZTOKU Činidla jsou připravená k použití. Před použitím přizpůsobte všechna činidla pokojové teplotě (20-25 °C) a promíchejte je převracením lahvičky, abyste zamezili vzniku pěny. Souprava obsahuje nádobku na antigen. Lahvičku obsahující suspenzi antigenu řádně protřepejte. Nasaďte kapátko na nádobku a nasajte do nádobky suspenzi antigenu. Při dlouhém skladování suspenze v nádobce může tato ztratit svoji stabilitu, proto se doporučuje na konci pracovního dne přenést suspenzi zpět do původní skleněné lahvičky. Vyprázdněnou nádobku pak opláchněte destilovanou vodou a nechte uschnout na vzduchu. VZORKY - Vzorek Čerstvé sérum nebo plazma. Nepoužívejte hemolyzované, kontaminované nebo lipemické sérum. Séra by měla být před provedením testu přizpůsobena pokojové teplotě a resuspendována. - Skladování Sérum může být před testováním uchováváno při teplotě 2-8 °C po dobu 48 hodin. V případě dlouhodobějšího skladování je možné zamrazit na teplotu -20 °C po dobu maximálně 1 měsíce. Rozmrazené vzorky musí být před testováním promíchány. Autorizovaný zástupce výrobce v České republice: BioVendor – Laboratorní medicína a.s. Sídlo: Tůmova 2265/60, 616 00 Brno, Provozovna: Karásek 1767/1, 621 00 Brno-Řečkovice Tel.: 549 124 111, fax: 549 211 465, e-mail: [email protected], www.biovendor.cz

Vzorky séra opakovaně nezmrazujte, protože by došlo ke vzniku falešně pozitivních výsledků. KALIBRACE Test je kalibrován dle referenčního séra pro sérodiagnostické testy treponemálních infekcí Světové zdravotnické organizace (WHO) (ref 3-1980). KONTROLA KVALITY Doporučuje se testovat funkčnost test kontrolními séry pro každou sérii. PRACOVNÍ POSTUP Kvalitativní test Činidla přizpůsobte pokojové teplotě (20-25 °C). - Do kroužku na reakční destičce naneste 1 kapku (50 µl) vzorku. - Pomocí plochého konce plastového míchadélka rozneste vzorek po celé oblasti testovacího kroužku. Pro každý vzorek použijte nové míchadélko. - Naneste jednu volně ukápnutou kapku (16 µl) suspenze antigenu pomocí přiložené nádobky nebo pipety. - Rotujte destičkou rychlostí 100 rpm na automatickém rotátoru po dobu 8 minut. - Pod dobrým světlem hledejte okamžitě přítomnost nebo absenci viditelné aglutinace. Poznámka: neodečítejte déle než po 8 minutách. Semikvantitativní test Činidla přizpůsobte pokojové teplotě (20-25 °C). - Nařeďte vzorek (který byl již shledán pozitivním) ve fyziologickém roztoku (NaCl 0,9%): ½; ¼; 1/8; 1/16; atd. - Do kroužku na reakční destičce naneste 1 kapku (50 µl) každého ředění. - Pomocí plochého konce plastového míchadélka rozneste vzorek po celé oblasti testovacího kroužku. Pro každý vzorek použijte nové míchadélko. - Naneste jednu volně ukápnutou kapku (16 µl) suspenze antigenu pomocí přiložené nádobky nebo pipety. - Rotujte destičkou rychlostí 100 rpm na automatickém rotátoru po dobu 8 minut. - Pod dobrým světlem hledejte okamžitě přítomnost nebo absenci viditelné aglutinace. Poznámka: neodečítejte déle než po 8 minutách. ODEČET A INTERPRETACE Silně pozitivní: průměrné a velké černé shluky obecně rozprostřené po celém povrchu testovací kruhové oblasti. Slabě pozitivní: krásně rozptýlené černé shluky Negativní výsledek: homogenní uhlíkaté shluky v centru testovací oblasti nebo šedá suspenze na celém povrchu kruhové testovací oblasti. Negativní kontrola by neměla vykazovat po 8 minutách žádnou aglutinaci. Pozitivní kontrola by měla vykazovat po 8 minutách pozitivní výsledek. Autorizovaný zástupce výrobce v České republice: BioVendor – Laboratorní medicína a.s. Sídlo: Tůmova 2265/60, 616 00 Brno, Provozovna: Karásek 1767/1, 621 00 Brno-Řečkovice Tel.: 549 124 111, fax: 549 211 465, e-mail: [email protected], www.biovendor.cz

Pokud kontroly a známé vzorky pacientů nevykazují po 8 minutách očekávané výsledky, test by měl být považován za invalidní. U semikvantitativního testu je titrem séra poslední ředění, které vykázalo pozitivní výsledek. Pozitivní kontrola by měla mít titr ¼ +/- jedno ředění. PROVÁDĚCÍ CHARAKTERISTIKY - Prozonový efekt Nebyl detekován žádný prozonový efekt (Hook) až do ředění 1/128. - Korelace RPR test byl vyhodnocen na 675 vzorcích v roce 1995 NRL pro Syfilis ve Velké Británii. Zde jsou výsledky: Výsledky RPR testu Pozitivní vzorky Negativní vzorky Celkem 0 645 645 Syphilis pozitivní 30 0 30 Syphilis negativní 30 645 675 Celkem Senzitivita: > 99% Specificita: > 99% LIMITACE (1, 8, 9) 1- Výzkum syfilisu pro systémové testování musí být prováděn kardiolipinovou reakcí skupiny 1 (RPR-VDRL Carbon, VDRL latex, VDRL barvený) a reakcí skupiny 2 (TPHA. FTA Abs nebo EIA). Finální diagnóza může být stanoveny pouze při korelaci výsledků s klinickými příznaky. 2- Jako u jiných testů založených na determinaci reaginů, může RPR test produkovat falešně pozitivní výsledky díky biologickým důvodům: infekce (např.: lepra, jiné venerické onemocnění, mononukleóza), nebo neinfekční důvody (např.: autoimunitní onemocnění (lupus erythematodes revmatoidní horečka), drogová závislost, těhotenství, hepatitida, vyšší věk). 3- Vzorek pacienta, který byl shledán kvalitativně negativní, ale syfilis se předpokládá, musí být testován semikvantitativně, aby se eliminoval možný prozonový efekt. LITERATURA


Poslední revize: 10/2013 Poslední revize překladu do českého jazyka: 10/2014

ELITech MICROBIO Parc d’activités du Plateau 19, allée d’Athènes 83870 SIGNES FRANCE Tel.: 33 (0)4 94 88 55 00 Fax: 33 (0)4 94 88 55 22


Sérologický kardiolipinový a netreponemový test určený pro rychlou detekci Syphilisu KATALOGOVÉ ČÍSLO: RPRL-0100 (100 testů)

Recommend Documents