Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.3 - 1
Progesteronum
01/2015:0429
PROGESTERONUM Progeszteron
C21H30O2 [57-83-0]
Mr 314,5
DEFINÍCIÓ Pregn-4-én-3,20-dion. Tartalom: 97,0–102,0% (szárított anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér, kristályos por, illetve színtelen kristályok. Oldékonyság: vízben gyakorlatilag nem oldódik; etanolban bőségesen oldódik; acetonban és zsíros olajokban mérsékelten oldódik. Polimorfiára hajlamos (5.9). AZONOSÍTÁS A. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS progeszteronnal. Amennyiben a szilárd anyagok spektrumai eltérőek, a vizsgálandó anyagot és a referenciaanyagot külön-külön R vízmentes etanolban oldjuk, az oldatokat szárazra párologtatjuk, majd a maradékokból új spektrumokat veszünk fel. B. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat. 10 mg vizsgálandó anyagot 1 térfogatrész R metanol és 9 térfogatrész R diklórmetán elegyével 10 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat. 10 mg CRS progeszteront 1 térfogatrész R metanol és 9 térfogatrész R diklórmetán elegyével 10 ml-re oldunk. Lemez: R VRK szilikagél F254 lemez. Kifejlesztőszer: R etil-acetát – R diklórmetán (33+66 V/V). Felvitel: 5 µl. Kifejlesztés: a lemezmagasság háromnegyedéig. Szárítás: levegőn. Előhívás: 254 nm-es ultraibolya fényben.
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.3 - 2
Progesteronum
Értékelés: a vizsgálati oldat kromatogramjának főfoltja – helyét, színét és méretét tekintve – egyezzék meg az összehasonlító oldat kromatogramjának főfoltjával. VIZSGÁLATOK Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): +186 és +194 között (szárított anyagra). A vizsgálathoz 0,250 g anyagot R vízmentes etanollal 25,0 ml-re oldunk. Rokon vegyületek. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Vizsgálati oldat. 20,0 mg vizsgálandó anyagot a B-mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (a). 1,0 ml vizsgálati oldatot a B-mozgófázissal 100,0 ml-re hígítunk. Ezen oldat 1,0 ml-ét a B-mozgófázissal 10,0 m-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 2 mg CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt progeszteront (B-, C-, G-, I- és M-szennyezőt tartalmaz) a B-mozgófázissal 5,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (c). 2 mg CRS csúcsazonosításra szánt progeszteront (D-, E-, J-, K- és Lszennyezőt tartalmaz) a B-mozgófázissal 5,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (d). 20,0 mg CRS H-szennyező azonosítására szánt progeszteront (feltüntetett H-szennyező tartalommal) a B-mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (e). 20,0 mg CRS progeszteront a B-mozgófázissal 50,0 ml-re oldunk. Oszlop: –
méretei: l = 0,15 m, Ø = 4,6 mm;
–
állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt, sűrű keresztkötésű, oktadecilszililezett szilikagél (5 µm).
Mozgófázis: –
A-mozgófázis: R acetontiril – R víz (50 + 50 V/V);
–
B-mozgófázis: R víz – R acetontiril (20 + 80 V/V); Idő
A-mozgófázis
B-mozgófázis
(perc)
(%V/V)
(%V/V)
0 – 20
100
0
20 – 27
100 0
0 100
27 – 45
0
100
Áramlási sebesség: 1,0 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 241 nm-en, H-szennyező esetében 286 nm-en. Injektálás: 10-10 µl vizsgálati oldat, a), b), c) és d) összehasonlító oldat. A szennyezők azonosítása: a B-, C-, G, I- és M-szennyezőket a CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt progeszteronhoz mellékelt kromatogram és a b) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; a D+E-, J-, K- és L-szennyezőket a CRS csúcsazonosításra szánt progeszteronhoz mellékelt kromatogram és a c) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; a H-szennyezőt a d) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók a progeszteronra (retenciós ideje kb. 14 perc) vonatkoztatva: B-szennyező kb. 0,60; J-szennyező kb. 0,65; H-szennyező kb. 0,82; K-szennyező kb. 0,85; C-szennyező kb. 0,93; M-szennyező kb. 1,1; L-szennyező kb. 1,90; I-szennyező kb. 1,95; D- és E-szennyező kb. 2,05; G-szennyező kb 2,65.
Progesteronum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.3 - 3
Rendszeralkalmasság: b) összehasonlító oldat: –
hegy-völgy arány: legalább 4,0, ahol Hp az M-szennyezőnek megfelelő csúcs alapvonaltól mért magassága, és Hv az előbbi csúcsot a progeszteronnak megfelelő csúcstól elválasztó görbeszakasz minimumának alapvonaltól mért távolsága.
Követelmények: –
I-szennyező (a két epimer összege): csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének hatszorosa (0,6%);
–
C-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének háromszorosa (0,3%);
–
B-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének étszerese (0,2%);
–
D- és E-szennyező: csúcsterületük összege nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható csúcs területének 1,5-szerese (0,15%);
–
G-, J-, K-, L- és M-szennyező: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 1,5-szerese (0,15%);
–
H-szennyező 286 nm-nél mérve: legfeljebb 0,15%; a d) összehasonlító oldat kromatogramján a megfelelő csúcs területéből számolva, figyelembe véve a CRS H-szennyező azonosítására szánt progeszteron feltüntetett H-szennyező tartalmát;
–
egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezők: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,1%);
–
szennyezők összesen, kivéve a H-szennyezőt csúcsterületük összege nem lehet nagyobb, mint az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének tízszerese (1,0%);
–
elhanyagolási határ: az a) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,5szerese (0,05%).
Szárítási veszteség (2.2.32): legfeljebb 0,5%. Az anyag 0,500 g-ját szárítószekrényben, 2 órán keresztül 105 °C-on szárítjuk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékkromatográfia (2.2.29) a „Rokon vegyületek” vizsgálata pontban leírtak szerint, a következő kiegészítéssel. Injektálás: vizsgálati oldat, e) összehasonlító oldat. A százalékos C21H30O2-tartalmat a CRS progeszteron deklarált tartalmi értéke alapján számítjuk ki. ELTARTÁS Fénytől védve. SZENNYEZŐK Egyedi határértékhez kötött (specifikált) szennyezők: B, C, D, E, G, H, I, J, K, L, M. Egyéb kimutatható szennyezők (a következő szennyezők a cikkely valamelyik vizsgálatával kimutathatók, ha bizonyos határon felüli mennyiségben vannak jelen. Határértéküket az egyéb/egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezőkre vonatkozó általános követelmény és/vagy a Gyógyszeranyagok (2034) általános cikkely előírásai határozzák meg. Ezért ezeket a szennyezőket nem szükséges a megfelelés bizonyítása céljából azonosítani. Lásd még a Gyógyszeranyagok szennyezésvizsgálata (5.10) című általános fejezetet): A.
Progesteronum
A. pregna-4,14-dién-3,20-dion,
B. (20S)-20-hidroxipregn-4-én-3-on,
C. (20R)-20-hidroxipregn-4-én-3-on,
D. [(20S)-3-oxopregn-4-én-20-il]-acetát,
E. [(20R)-3-oxopregn-4-én-20-il]-acetát,
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.3 - 4
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.3 - 5
Progesteronum
G. 21-(ciklohexilidén)pregn-4-én-3,20-dion,
H. pregna-4,6-dién3,20-dion (Δ6-progeszteron),
és C* epimere I.
(20RS)-20-metil-3-oxopregn-4-én-21-al,
J. pregna-1,4-dién-3,20-dion,
K. pregna-4,9(11)-dién-3,20-dion,
Progesteronum
L. 20-metilidén-3-oxopregn-4-én-21-al,
M. (17α)-pregn-4-én-3,20-dion.
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.3 - 6
