PENGARUH PENAMBAHAN YEAST PADA PEMBERIAN LAMTORO MERAH (Acacia villosa) TERHADAP HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS (Rattus rattus) DEWI HIDAYATI

1

PENGARUH PENAMBAHAN YEAST PADA PEMBERIAN LAMTORO MERAH (Acacia villosa) TERHADAP HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS (Rattus rattus)

DEWI HIDAYATI

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2008

2

PENGARUH PENAMBAHAN YEAST PADA PEMBERIAN LAMTORO MERAH (Acacia villosa) TERHADAP HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS (Rattus rattus)

DEWI HIDAYATI

Skripsi Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2008

3

ABSTRAK

DEWI HIDAYATI. Pengaruh Penambahan Yeast pada Pemberian Lamtoro Merah (Acacia villosa) terhadap Histopatologi Ginjal Tikus (Rattus rattus). Dibimbing oleh EVA HARLINA. Acacia villosa (Lamtoro merah) termasuk leguminosa dalam sub famili Mimosidae yang mengandung protein tinggi sehingga dapat dijadikan sebagai sumber protein bagi ternak ruminansia. Namun, tanaman ini juga mengandung senyawa antinutrisi yaitu tanin dan asam amino non protein. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh pemberian daun Acacia villosa dan yeast terhadap performa dan gambaran histopatologi ginjal tikus. Sebanyak 8 ekor tikus putih dibagi menjadi dua kelompok perlakuan, yaitu kelompok yang diberi 27% Acacia villosa dan yang diberi 27% Acacia villosa ditambah yeast. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian Acacia villosa dan yeast tidak mempengaruhi konsumsi pakan namun mempengaruhi bobot badan dan menyebabkan perubahan histopatologi ginjal. Perubahan histopatologi pada glomerulus berupa penebalan kapsula Bowman, perluasan ruang Bowman dan atropi mesangium, sedangkan perubahan tubulus berupa degenerasi berbutir, degenerasi hidropis, serta nekrosa epitel tubulus dan endapan protein dan hyalin di lumen tubulus. Pemberian yeast cenderung mengurangi toksisitas Acacia villosa

4

ABSTRACT

Acacia villosa (Red lamtoro) is a leguminous tree in the sub family Mimosoidae contain high protein, could be potential as a protein source of ruminant feedstuff. However, it is containing antinutritive compounds that are tannin and non protein amino acid. The aim of this research was to study the effects Acacia villosa and yeast on rat perform and kidney histopathological changes. A number of 8 rats were divided into 2 group, one group fed 27% Acacia villosa and the second group fed 27% Acacia villosa plus yeast. The results showed that rat feed consumption and body weights were not significantly different among the treatments, however causing histopathological change of kidney. The histopathological change of glomeruli were thickening of capsula Bowman, widening of Bowman space and atrophy of mesangium, tubuli changes were cloudy swelling, hydrophic degeneration and necrosis, protein accumulation and hyalin degeneration in lumen tubulus. Yeast tend to reduce Acacia villosa toxicity

5

Judul Skripsi

: Pengaruh Penambahan Yeast pada Pemberian Lamtoro Merah (Acacia villosa) terhadap Histopatologi Ginjal Tikus (Rattus rattus)

Nama

: Dewi Hidayati

NRP

: B01499129

Menyetujui, Pembimbing skripsi

Dr. drh. Eva Harlina, MSi NIP. 131841793

Mengetahui, Wakil Dekan Fakultas Kedokteran Hewan

Dr. Nastiti Kusumorini NIP. 131669942

Tanggal Lulus:

i

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Bangkalan, Provinsi Jawa Timur pada tanggal 10 Desember 1980. Penulis merupakan putri kedua dari tiga bersaudara dari pasangan Bapak Moh. Mochtar dan Ibu Siti Marumijah. Pada tahun 1993 penulis menyelesaikan sekolah dasar di SD Negeri 01 Kemayoran, kemudian pada tahun 1996 penulis menyelesaikan studi di SMP Negeri 02 Bangkalan. Penulis menyelesaikan pendidikan SMU di SMU Negeri 02 Bangkalan pada tahun 1999. Pada tahun yang sama penulis berkesempatan melanjutkan pendidikan di Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk Institut Pertanian Bogor (USMI). Selama menjadi mahasiswi penulis aktif berorganisasi di Himpro HKSA (Hewan Kesayangan dan Aquatik).

ii

KATA PENGANTAR

Syukur Alhamdulilah penulis panjatkan Kehadirat Allah SWT yang telah menganugerahkan rahmat dan karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan baik. Atas selesainya skripsi ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sedalam-dalamnya kepada 1. Kedua orangtua, Kakak dan Adik sekeluarga yang telah dengan tulus berdoa dan memberikan pengertian, dukungan moril dan materiil selama menempuh pendidikan ini. 2. Dr. drh. Eva Harlina, MSi selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan, saran, nasehat dan bantuan dalam pelaksanaan penelitian dan penyusunan skripsi ini. 3. Dr. drh. Wiwin Winarsih, MSi selaku dosen penguji atas masukan dan sarannya untuk kesempurnaan penulisan skripsi ini. 4. Dr. drh. Agus Setiadi selaku dosen pembimbing akademik atas bimbingan dan nasehatnya. 5. Seluruh staf dan pegawai Laboratorium Patologi (Pak Soleh, Pak Kas, Pak Ndang) atas segala bantuan yang diberikan selama penelitian. 6. Ratna Wulandari sebagai rekan sepenelitian atas kerja sama, bantuan dan dorongannya. 7. Inong, Siska, Lian, Eni, Erik, Ame’ dan rekan Gamet yang tidak dapat disebutkan satu persatu. 8. Semua penghuni Pondok Mutiara atas kebersamaan dan semangatnya. 9. Wida, Ana, M’ Denti, Teri, Babe, Bapak Ibu Rachmat atas tawa, semangat dan dukungan yang tiada putusnya. 10. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang turut membantu penulis selama menyelesaikan skipsi ini.

iii

Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penulisan skripsi ini. Untuk itu penulis berharap saran dan kritik dari semua pihak. Penulis berharap Skipsi ini dapat bermanfaat untuk kemajuan ilmu pengetahuan bagi semua pihak.

Bogor, Maret 2008

Penulis

iv

DAFTAR ISI

Halaman DAFTAR ISI .........................................................................................

iv

DAFTAR GAMBAR .............................................................................

vi

DAFTAR GAMBAR .............................................................................

vii

DAFTAR LAMPIRAN .........................................................................

viii

PENDAHULUAN Latar Belakang ...........................................................................

1

Tujuan .......................................................................................

2

TINJAUAN PUSTAKA Acacia villosa ............................................................................

3

Asam Amino non Protein ...........................................................

5

Tanin .........................................................................................

7

Ginjal.........................................................................................

8

Yeast ..........................................................................................

10

BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian.....................................................

12

Bahan dan Alat...........................................................................

12

Metode ......................................................................................

12

Desain Penelitian ...............................................................

12

Pembuatan Pakan .............................................................

13

Evaluasi Histopatologi......................................................

13

Analisis Statistik...............................................................

14

HASIL DAN PEMBAHASAN Pengaruh Pemberian Acacia villosa dan Penambahan Yeast terhadap Performa Tikus .........................................................................

15

Pengaruh Pemberian Acacia villosa dan Penambahan Yeast terhadap Histopatologi Ginjal Tikus .......................................................

20

KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan ...............................................................................

27

Saran.........................................................................................

27

v

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................

28

LAMPIRAN ..........................................................................................

32

vi

DAFTAR TABEL No.

Hal 1. Konsumsi pakan tikus pada pemberian 27% A.villosa dan 27% A.villosa ditambah yeast selama 12 minggu.................................

15

2. Bobot badan dan Pertambahan bobot badan tikus pada pemberian 27% A.villosa dan 27% A.villosa ditambah yeast selama 12 minggu ....................................................................................

17

vii

DAFTAR GAMBAR No.

Hal. 1. Batang, daun dan bunga Acacia villosa

.....................................

4

2. Struktur Asan Amino non Protein ADAB yang berubah menjadi DABA setelah melalui proses pencernaan ...................................

5

3. Struktur mimosin dan tyrosin .......................................................

6

4. Perubahan mimosin menjadi DHP................................................

7

5. Konsumsi pakan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu .......................

19

6. Bobot badan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu. ...............................

19

7. Rata-rata presentase kerusakan Glomerulus dan Tubulus ginjal pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu. .......................................................................

20

8. Glomerulus yang mengalami atropi (a), perluasan ruang Bowman (b), dan penebalan kapsula Bowman (c) pasca pemberian 27% A.villosa selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar = 20 µm. ........................

21

9. Tubulus yang mengalami degenerasi berbutir pasca pemberian 27% A.villosa + yeast selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar = 10 µm.

24

10. Tubulus yang mengalami degenerasi hyalin (panah hitam) degenerasi hidropis (kepala panah) pasca pemberian 27% A.villosa + yeast selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar = 10 µm.

24

11. Tubulus yang mengalami endapan protein (panah hitam) dan degenerasi hyalin (kepala panah) pasca pemberian 27% A.villosa selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar = 20 µm..........................

25

12. Nekrosa tubuli pasca pemberian 27% A.villosa selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar = 20 µm. .....................................................

25

viii

DAFTAR LAMPIRAN

No.

Hal 1. Komposisi pakan..........................................................................

33

2. Energi dan komposisi kimia dari Acacia villosa ...........................

33

3. Bobot badan .................................................................................

34

4. Konsumsi pakan...........................................................................

34

5. Rata-rata persentase kerusakan glomerulus dan tubulus ginjal pada pemberian 27% A.villosa dan 27% A.villosa + yeast selama 12 minggu .....................................................................................

34

6. Pembuatan Sediaan Histopatologi ................................................

35

7. Pewarnaan Hematoxylin Eosin .....................................................

36

8. Analisis statistik ANOVA ............................................................

37

9. Analisis statistik Regresi Konsumsi Pakan ...................................

54

10. Analisis statistik Regresi Bobot Badan .........................................

56

11. Grafik regresi Konsumsi pakan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu .........

58

12. Grafik regresi Bobot badan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27%A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu. .......

58

1

PENDAHULUAN

Latar Belakang Ketersediaan hijauan yang cukup, berkualitas dan kontinyu sangat diperlukan oleh ruminansia. Hijauan merupakan pakan utama ternak ruminansia yang megandung zat makanan seperti energi, protein, lemak, serat, vitamin dan mineral dengan tingkat kandungan yang bervariasi. Hijauan yang biasanya digunakan sebagai pakan alternatif adalah leguminosa, karena hijauan ini tidak memerlukan penanaman dan perawatan yang intensif. Leguminosa mempunyai kandungan protein kasar yang cukup tinggi (12-30%), sehingga dapat dijadikan sumber protein bagi ternak ruminansia untuk menggantikan rumput yang berprotein rendah. Keuntungan lain dari leguminosa adalah murah, mudah diperoleh dan pasokan terjamin sepanjang tahun, mengandung sejumlah tanin sehingga dapat mencegah kembung dan melindungi degradasi protein yang berlebih oleh mikroba rumen, beradaptasi baik pada berbagai lahan serta banyak lagi kegunaannya (Manurung 1995). Salah satu tanaman leguminosa yang dapat dimanfaatkan untuk pakan adalah Acacia villosa. Tanaman ini biasanya banyak dijumpai di daerah penyangga hutan dan merupakan salah satu jenis leguminosa dari keluarga Mimosoidae. A.villosa juga dikenal dengan nama lamtoro merah. Diantara berbagai jenis akasia, ada yang menyerupai A.villosa yaitu Acacia Angustissima, yang sering digunakan sebagai pakan alternatif pengganti Leucaena leucocepala (Cheeke 2004). A.villosa mengandung protein yang cukup tinggi (22-28%) sehingga potensial digunakan sebagai sumber protein pakan ternak, namun A.villosa juga mengandung beberapa senyawa antinutrisi yaitu total fenol sebesar 15,24%, tanin terkondensasi 12,51%, dan asam amino non-protein (AANP) sebesar 5,64% (Bansi 2001). Tanin dalam konsentrasi tinggi dapat menghambat degradasi protein dalam rumen sehingga menurunkan nilai kecernaan pakan. Teknologi dengan memanfaatkan mikroorganisme untuk meningkatkan kualitas pakan dan mengoptimumkan fungsi kerja rumen sehingga dapat meningkatkan produksi ternak sudah mulai diperkenalkan di Indonesia.

2

Bentuknya dapat berupa probiotik (bakteri, jamur, khamir atau campurannya), produk fermentasi atau produk ekstrak dari suatu proses fermentasi (biasanya enzim) (Wina 2005). Penambahan yeast pada pakan adalah salah satu usaha untuk meningkatkan kecernaan pakan pada ternak melalui proses fermentasi. Penambahan yeast dalam pakan mampu memanipulasi rumen dengan cara meningkatkan populasi bakteri pemecah serat sehingga dapat meningkatkan kecernaan dan kemudian meningkatkan bobot badan (Wina 2000). Diharapkan cara ini dapat meningkatkan kecernaan pakan. Tujuan Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui performa dan gambaran histopatologi ginjal tikus yang diberi pakan mengandung A.villosa yang dicampur yeast selama 12 minggu.

3

TINJAUAN PUSTAKA

Acacia villosa Lamtoro merah atau Acacia villosa termasuk leguminosa dalam keluarga (sub famili) Mimosoidae (Allen dan Allen 1981). A.villosa banyak ditemukan di daerah penyangga hutan. Tanaman ini pertama kali masuk ke Indonesia pada tahun 1920 yang berasal dari Curacao (West Indies) (Wina dan Tangendjaja 2000) dan diperkenalkan di Jawa pada tahun 1920 dengan nama “wana pana” (Becker dan Van den Brink 1963, Henyne 1987). Tanaman ini kemudian berkembang secara alami terutama di Yogyakarta (Jukema dan Danimihardja 1997). Saat ini A.villosa dapat ditemukan di daerah sekitar hutan di Jawa dan Sumatera. Sinonim dari A.villosa adalah Mimosa glauca, Acacia glauca dan Acaciella villosa. Dibeberapa negara, A.villosa sering disebut wild dividivi, Red wood, wata pana (Inggris), Acacia (Amerika) dan Amourette (Perancis). Di Indonesia biasanya disebut mlanding sebrang, mlanding merah (Jawa) dan petes merah (Timor Barat) (Jukema dan Danimihardja 1997). Di Kupang tanaman ini disebut lamtoro merah karena menyerupai tanaman lamtoro tetapi dahan dan rantingnya berwarna merah (Wina dan Tangendjaja 2000). A.villosa tersebar didataran rendah sampai dataran tinggi dengan ketinggian ±1200 meter diatas permukaan laut, pada curah hujan rata-rata 200520 mm/tahun dan kelembaban 50-70%. A.villosa berbentuk perdu dengan tinggi mencapai 4 meter. Pada tanah dengan kondisi yang sangat jelek dan kritis serta sudah lama terbuka, A.villosa dapat dijadikan sebagai tanaman penutup tanah karena mempunyai kemampuan tumbuh yang tinggi (Riyanto 1976). A.villosa kurang baik pada temperatur rendah (Jukema dan Danimiharja 1997). A.villosa merupakan pohon kecil semak tidak berduri dengan batang dan cabang merah tua. Sistem perakaran kokoh menyebar dan dangkal. Daun majemuk bersirip ganda, bunga pendek. Bunga yang baru berwarna putih kemudian berubah menjadi kekuningan, bunga berkembang dengan biseksual. Buah berbentuk polong pipih warna coklat mengkilap dengan biji bulat telur

4

berwarna coklat (Jukema dan Danimiharja 1997). Bentuk batang, daun dan bunga A.villosa disajikan pada Gambar 1.

Batang Acacia villosa

Daun Acacia villosa

Bunga Acacia villosa Gambar 1. Batang, daun, dan bunga Acacia villosa. Sumber : Perez et al. 1999.

Di Indonesia tanaman ini digunakan sebagai tanaman alternatif pengganti Leucaena leucocepala untuk merehabilitasi tanah yang terdegradasi dan mereboisasi hutan yang gundul. Kayunya cocok untuk bahan bakar dan alat-alat rumah tangga. Di Timor Barat digunakan sebagai pakan ternak. Diperkebunan teh ditanam untuk pupuk hijau dan pohon pelindung. Di Timor ditanam dibawah pohon kayu putih untuk menutup tanah dan pupuk hijau. Di Karibia digunakan untuk obat kumur, menyembuhkan sakit tenggorokan dan radang mulut serta obat batuk (Jukema dan Danimiharja 1997).

5

Asam Amino Non Protein (AANP) Asam amino non protein (AANP) adalah asam amino yang tidak tergolong dalam protein. Hampir 300 senyawa asam amino non protein telah berhasil diisolasi dari tanaman, umumnya terakumulasi dalam biji dan daun. Mekanisme kerja AANP didalam tubuh analog dengan asam amino esensial dan bersifat toksik (Hegarty 1978). Karena strukturnya yang analog, AANP sering mengganggu fungsi asam amino penyusun protein, seperti metabolit mimosin pada lamtoro yang mengganggu fungsi dari tirosin. Konsentrasi AANP tertinggi pada A.villosa yaitu ADAB (2-amino 4-acetylaminobutyric acid) sebesar 2,88%. Kandungan AANP pada A.villosa tertinggi dibandingkan pada leguminosa lainnya (Wina dan Tangendjaja 2000). Senyawa ADAB bersifat racun dan strukturnya mirip dengan 2-4 diamino butyric acid (DABA) yaitu lathyrogen yang terkandung pada tanaman Lathyrus silvestris (flatpea) (Smith et al. 2001). Gejala keracunan yang ditimbulkan A.villosa mirip dengan keracunan flatpea sehingga ada dugaan telah terjadi proses biotransformasi ADAB menjadi DABA yang beracun dalam proses pencernaan daun tersebut (Gambar 2). Di dalam tubuh, DABA menghambat sintesa protein dalam hati dan menyebabkan gejala yang serupa dengan keracunan amonia (Smith et al. 2001). McSweeney et al (2005) melaporkan bahwa DABA diduga bersifat neurotoksik dan hepatotoksik pada ternak ruminansia. Struktur Asam Amino Non Protein ADAB dan DABA disajikan pada Gambar 2. NH2 | CH3-CO-NH-CH2-CH2-CH-COOH 2-amino-4-acetylaminobutyric acid (ADAB)

NH2 | NH2-CH2-CH2-CH-COOH 2,4-diaminobutyric acid (DABA)

Gambar 2. Struktur Asam Amino Non Protein ADAB yang berubah menjadi DABA setelah melalui proses pencernaan. Asam amino non protein telah banyak ditemukan pada leguminosa. Mimosine ditemukan pada Leucaena leucocephala dan Canavanine ditemukan pada Sesbania grandiflora (Wina dan Tangendjaja 2000).

6

Mimosin merupakan AANP heterosiklik yang toksik dengan struktur β-N (3-hidroksi-4

oxypyridyl)-α-amino-propenoic

acid

yang

bekerja

sebagai

antimitotik. Mimosin memiliki struktur yang sama dengan tyrosin (Gambar 3) dan phenilalanin yang telah diketahui menggantikan fungsi asam amino tersebut. Penggantian tersebut dapat menyebabkan hilangnya enzim dan aktivitas fungsional protein (Widyastuti 2001).

O ║

OH

N NH2 │ │ CH2-CH-COOH Mimosin

OH │

│ CH2 │ H2N-CH-COOH L-Tyrosin

Gambar 3. Struktur mimosin dan tyrosin.

Rumansia lebih tahan terhadap pengaruh racun mimosin dibanding ternak yang berlambung tunggal, sebab memiliki bakteri yang dapat mengubah mimosin menjadi 3-hidroksi 4(1H)-pyridone (DHP) yang kurang beracun (Gambar 4) (Jones 1997). Tempat metabolisme mimosin menjadi DHP adalah di rumen. Kerugian akibat pemberian dosis tinggi Leucaena yaitu salivasi berlebihan, gondok sehingga menekan level serum tiroksin dalam darah (T1 dan T3), nafsu makan berkurang, berat badan turun, kelemahan bahkan kematian. DHP inilah yang dianggap sebagai penyebab gondok (Hegarty et al. 1976). Toksisitas mimosin dapat menyebabkan kerontokan rambut pada kuda, hewan ternak dan hewan laboratorium, juga menyebabkan katarak mata pada tikus serta masalah reproduksi pada rodensia. Disamping itu mimosin juga dapat menghambat tumortumor tertentu (Hegarty 1978).

7

O ║

OH │

N Bakteri rumen │ CH2-CH(NH2)-COOH

N

Mimosin

DHP

OH

Gambar 4. Perubahan mimosin menjadi DHP.

Canavanine yang mirip AANP pada Canavalia anciformis secara kimia analog dengan arginin. Canavinine menyebabkan degenerasi lemak hati dan fokal nekrosa. A.villosa mengandung juga saponin namun konsentrasinya sangat rendah. Saponin merupakan antiprotozoa sehingga lebih menguntungkan daripada merugikan karena dapat mengurangi populasi protozoa yang akhirnya meningkatkan pertumbuhan bakteri selulosa (Wina dan Tangendjaja 2000).

Tanin Selain AANP, leguminosa juga menghasilkan tanin. Tanin adalah senyawa polifenol yang sifat utamanya dapat berikatan dengan protein atau polimer lainnya seperti selulosa, hemiselulosa dan pektin untuk membentuk suatu senyawa yang stabil (Tangenjaja et al. 1992). Tanin mempunyai berat molekul berkisar antara 500 - >20000, larut dalam air kecuali beberapa struktur dengan berat molelul besar. Tanin mempunyai kemampuan untuk mengikat protein dan membentuk kompleks tanin-protein yang larut ataupun tidak larut (Anonim 2001). Tanin mempunyai pengaruh yang besar pada nutrisi hewan karena kemampuannya untuk membentuk ikatan kompleks dengan beberapa molekul seperti karbohidrat, protein, polisakarida membran bakteri dan enzim pencernaan (Anonim 2001). Tanin secara umum dibagi menjadi dua golongan berdasarkan struktur kimiawi yaitu tanin terhidrolisis dan tanin terkondensasi (Leinmuller et al. 1991). Pada A.villosa tanin terkondensasi jumlahnya lebih banyak dibandingkan tanin terhidrolisis.

8

Fungsi tanin pada tanaman yaitu sebagai mekanisme pertahanan terhadap agen patogen, herbivor serta keadaan lingkungan sekitar. Pada hewan, tanin memberikan efek negatif yaitu pada asupan dan kecernaan pakan serta efisiensi produksi. Efek ini tergantung pada jumlah dan jenis tanin yang dikonsumsi, tipe saluran pencernaan, perilaku makan, ukuran tubuh, sistem pertahanan tubuh serta mekanisme detoksifikasi (Anonim 2001). Tanin mempunyai sifat astringensia yaitu sensasi rasa sepat karena pembentukan kompleks antara tanin dengan glikoprotein ludah (Anonim 2001). Banyaknya tanin dalam tanaman dipengaruhi oleh spesies tanaman, genetik dan tingkat pertumbuhan serta fakor lingkungan seperti temperatur, curah hujan, pemotongan dan defoliasi (Wiryawan 1999, Sugiarto 2002). Pada hewan monogastrik pemberian tanin dibawah 5% mengakibatkan penurunan laju pertumbuhan, penurunan pemanfaatan protein, kerusakan pada lapisan mukosa saluran pencernaan, serta menigkatnya ekskresi protein dan asam amino esensial lisin dan metionin (Anonim 2001). Pada unggas pemberian tanin dalam jumlah kecil dapat menyebabkan efek yang kurang baik seperti penurunan produksi telur, penurunan laju pertumbuhan dan juga dapat menyebabkan kematian (Anonim 2001). Pada hewan ruminansia dampak tanin berawal pada proses mastikasi. Tanin akan berikatan dengan protein saliva sehingga konsumsi pakan menurun. Tanin masuk dalam rumen dan membentuk senyawa kompleks dengan protein, karbohidrat, mineral, vitamin dan enzim-enzim mikroba rumen. Senyawa kompleks tersebut tidak larut dalam rumen namun akan tercerna secara enzimatis dalam abomasum (Makkar 1993).

Ginjal Ginjal merupakan alat tubuh yang penting artinya sebagai sarana untuk mengeksresikan zat-zat yang tidak menguap dalam tubuh. Fungsi utama ginjal adalah memelihara tekanan osmosis darah agar tetap pada suatu nilai tertentu dengan jalan mengekskresikan sejumlah air dan memelihara cadangan alkali darah. Pemeliharaan tekanan osmosis dilakukan dengan jalan mengekskresikan setiap asam yang tidak menguap yang terbentuk dalam proses metabolisme, melalui

pembentukan

amonia

akan

menetralisasikan

kelebihan

asam,

9

mengekskresikan seluruh produk sisa metabolisme nitrogen terutama asam urat, mengekskresikan konstituen anorganik dari makanan yang tidak diperlukan dan tidak dapat dimetabolir. Oleh karena itu ginjal merupakan organ utama yang bertanggung jawab menjaga komposisi zat-zat tubuh, khususnya komposisi dalam darah (Poerwodhiredjo 1980). Gangguan pada ginjal dalam melaksanakan fungsinya akan sangat mempengaruhi pembuangan zat-zat yang tidak diperlukan tubuh, dan mungkin zat-zat yang tertimbun tersebut dapat menyebabkan gangguan kesehatan. Kerja utama ginjal adalah memproduksi urin sehingga urin merupakan jalur utama ekskresi sebagian besar senyawa racun. Ginjal mempunyai volume aliran darah yang tinggi, mengkonsentrasikan senyawa racun pada filtrat, membawa toksikan melalui tubulus dan mengaktifkan senyawa racun tertentu. Hal ini menyebabkan ginjal sebagai organ sasaran utama efek toksik (Lu 1995). Produksi urin dilakukan dalam unit terkecil dari ginjal yang dinamakan nefron, yang terdiri atas gromerulus, tubulus proksimal dan distal. Fungsi dari nefron adalah untuk membersihkan atau menjernihkan plasma darah dari substansi yang tidak diinginkan oleh tubuh (Guyton 1994). Filtrasi terjadi pada kapiler glomerulus. Pada glomerulus terdapat sel-sel endotelium kapiler yang berpori (podosit) sehingga mempermudah proses penyaringan. Beberapa faktor yang

mempermudah

proses

penyaringan

adalah

tekanan

hidrolik

dan

permeabilitias yang tinggi pada glomerulus. Selain penyaringan, di glomelurus terjadi pula pengikatan kembali sel-sel darah, keping darah, dan sebagian besar protein plasma. Substansi dengan ukuran molekul yang kecil sampai sedang seperti sodium, potassium, klorida, fosfat inorganik, glukosa, urea, kreatinin dan asam urat dapat melewati dinding kapiler glomerulus. Protein plasma yang mempunyai ukuran molekul besar biasanya tidak dapat melewati dinding kapiler dan tidak terfiltrasi (Sturkie 1976). Perubahan patologi pada ginjal antara lain nephrosis yaitu peradangan pada ginjal yang disebabkan oleh gangguan pertukaran zat. Nefrosis dapat dibagi menjadi tubulo-nephrosis dan glomerulo-nephrosis. Tubulo-nephrosis merupakan perubahan pada epitel tubuli karena tubuli selain berfungsi sebagai tempat sekresis juga reabsorbsi. Yang termasuk tubulo-nephrosis adalah degenerasi

10

hidropik-vakuolar yang disebabkan oleh gangguan metabolisme air dan protein dalam sel, degenerasi hyalin, nefrosa hipokhloremik dan lain sebagainya. Glomerulo-nephrosis adalah perubahan bersifat radang pada glomerulus yang disebabkan gangguan pra-renal dan humoral (Ressang 1984). Perubahan patologis dapat terjadi pada ginjal akibat senyawa-senyawa yang bersifat nefrotoksik. A.villosa mengandung senyawa kimia yang bersifat nefrotoksik. Pemberian A.villosa dengan domba dosis tinggi tanpa adaptasi akan menimbulkan glomerulonefrosis dengan endapan protein pada glomerulus dan tubulus (Bariata 2000).

Ragi (Yeast) Yeast atau ragi adalah fungi miskroskopik berukuran 3-15µm, bereproduksi dengan cara membelah diri dan membentuk spora yang menyebabkan fermentasi dan atau pembusukan bahan pangan. Yeast yang tersebar di alam telah diketahui sebanyak lebih dari 600 spesies. Yeast berasosiasi dengan mikroorganisme lain pada habitat normal di tanah, tanaman, laut dan lingkungan air. Beberapa spesies yeast juga terdapat pada tubuh manusia dan hewan (Anonim 2006). Umumnya yeast digunakan untuk pembuatan roti, pematangan keju dan pembuatan produk antibiotik. Yeast dapat pula digunakan sebagai bahan campuran pakan ternak untuk meningkatkan produktivitas. Penambahan ragi mampu memanipulasi rumen dengan meningkatkan populasi bakteri pemecah serat sehingga dapat meningkatkan kecernaan dan kemudian meningkatkan bobot badan (Wina 2000). Teknologi dengan memanfaatkan mikroorganisme untuk meningkatkan kualitas pakan dan mengoptimumkan fungsi kerja rumen sehingga dapat meningkatkan produksi ternak sudah mulai diperkenalkan di Indonesia. Bentuknya dapat berupa probiotik (bakteri, jamur, khamir atau campurannya), produk fermentasi atau produk ekstrak dari suatu proses fermentasi (biasanya enzim) (Wina 2005). Yeast mengandung 61 jenis nutrisi yang terbagi menjadi 11 nutrisi vital (lesitin, kolin, Q10, dll), 11 vitamin (B1,B2,B6, dll), 20 asam amino dimana 8

11

asam amino esensial, 19 mineral (kalsium, besi, mangan, dll) dan trace element. Tidak hanya itu, yeast juga mengandung 16 ekstrak herbal seperti Chamomile, Cinnamon, Lavender, Peppermint, Thyme, dll. Ekstrak herbal tersebut sangat baik untuk meningkatkan daya tahan tubuh terhadap penyakit flu, influenza, saluran pernafasan dan pencernaan (Anonim 2007). Selain mengandung vitamin B, yeast juga juga dapat bertindak sebagai toxin binder. Saat ini Alltech Indonesia telah memiliki sebuah produk dengan nama Mycosorb, merupakan beta glukan yang diekstrak dari yeast Saccharomyces cerevisiae strain 1026. Produk ini memiliki kemampuan untuk mengikat berbagai jenis mikotoksin, penggunaannya dalam ransum yang rendah dan bersifat biodegradable (Trobos 2007a).

12

BAHAN DAN METODE

Tempat dan Waktu Penelitian dilakukan di Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor, dari bulan Agustus 2003 hingga Mei 2004.

Bahan dan Alat Penelitian ini menggunakan hewan percobaan tikus putih (Rattus rattus) berumur empat minggu dari jenis Sprague Dowley (SD) dengan bobot badan berkisar antara 48-69 gram. Tikus diperoleh dari Laboratorium Satwa Harapan, Fakultas peternakan, Institut Pertanian Bogor sebanyak 8 ekor. Bahan yang digunakan adalah daun A.villosa yang diperoleh dari Balai Penelitian Ternak Ciawi yang dibuat menjadi tepung daun dan dicampur dengan bahan-bahan pakan (Lampiran 1) dan yeast (Pakmaya®, Alsa Farma Group) dari jenis Saccharomyces cerevisiae. Bahan-bahan lain yang digunakan adalah Bufferred Neutral Formaline (BNF) 10%, bahan-bahan untuk pembuatan sediaan histologi terdiri dari alkohol bertingkat 70-100%, xylol, parafin, Larutan Hematoxylin, eosin, lithium carbonat dan air. Peralatan yang digunakan adalah kandang pemeliharaan tikus yang terbuat dari plastik, blender, timbangan, alat-alat nekropsi, alat pembuatan sediaan histopatologi dan mikroskop.

Metode 1. Desain Penelitian Sebanyak 8 ekor tikus dibagi menjadi dua kelompok perlakuan, kelompok pertama diberi 27% A.villosa dan kelompok kedua diberi 27% A.villosa ditambah 2 % yeast. Perlakuan dilakukan selama 12 minggu. Sebelum diberi pakan perlakuan, tikus diadaptasikan terlebih dahulu dengan diberi pakan kontrol selama sebulan. Setiap minggu sisa pakan ditimbang untuk mengetahui konsumsi pakan perminggu. Pada akhir minggu perlakuan, tikus ditimbang untuk mengetahui pertambahan bobot badan.

13

Pada akhir penelitian hewan coba diterminasi menggunakan ether. Selanjutnya dilakukan nekropsi untuk pengambilan sampel organ. Sampel tersebut kemudian difiksasi dengan Neutral Bufferred Formalin (NBF) 10% dan selanjutnya dibuat sediaan histopatologi dengan pewarnaan HE (Lampiran 6).

2. Pembuatan Pakan Daun Acacia villosa yang diperoleh dari Balai Penelitian Ternak Ciawi, dijemur hingga kering, kemudian digiling halus hingga membentuk tepung daun. Tepung daun dan yeast dicampurkan ke dalam bahan pakan tikus untuk dibuat ransum dengan komposisi yang telah ditentukan (Lampiran 1). Selanjutnya pakan dibuat dalam bentuk pelet.

3. Evaluasi Histopatologi Pengamatan histopatologi dilakukan pada organ ginjal dengan cara menghitung persentase glomerulus dan tubulus yang mengalami kerusakan. Parameter kerusakan yang diamati pada glomerulus adalah penebalan kapsula Bowman, perluasan ruang Bowman dan atropi mesangium. Pengamatan kerusakan pada tubulus adalah adanya endapan protein pada epitel dan lumen tubulus, degenerasi hidropis, degenerasi hyalin serta nekrosa pada epitel tubuli. Persentase kerusakan glomerulus diperoleh dengan cara menghitung jumlah glomerulus rusak dibagi dengan jumlah glomerulus yang ditemui pada seluruh lapang pandang dikali 100%.

% Kerusakan

∑ Glomerulus rusak

Glomerulus =

× 100 ∑ Glomerulus

Persentase kerusakan tubulus diperoleh dengan cara menghitung jumlah tubulus yang rusak dengan pembesaran 100×, dibagi dengan jumlah tubulus yang ditemui pada lima lapang pandang dikali 100%.

14

∑ Tubuli rusak

% Kerusakan Tubuli (5 lapang pandang)

=

× 100 ∑ Tubuli

4. Analisis Statistik Analis statistik dilakukan pada data bobot badan, konsumsi pakan, kerusakan glomerulus dan tubulus yang diolah dengan metode statistik menggunakan regresi dan uji ANOVA (sidik ragam dan rancangan acak lengkap) yang dilanjutkan dengan uji Duncan (α =0,05).

15

HASIL DAN PEMBAHASAN Pengaruh Pemberian Acacia villosa dan Penambahan Yeast terhadap Performa Tikus Pengamatan yang dilakukan terhadap kondisi tikus selama masa perlakuan tidak memperlihatkan perubahan tingkah laku dan tanda-tanda keracunan. Bentuk feses normal dan urin tikus yang teramati terlihat berwarna lebih kuning. Konsumsi pakan dan pertambahan bobot badan selama perlakuan disajikan pada Tabel 1 dan 2 serta Gambar 5 dan 6. Secara umum pemberian 27% A. villosa dan penambahan yeast dalam pakan tidak mempengaruhi konsumsi pakan karena konsumsi pakan tikus konstan hingga akhir penelitian (Tabel 1). Analisis regresi menunjukkan korelasi regresi konsumsi pakan tikus yang diberi 27 % A.villosa adalah 0,944 sedangkan yang ditambah yeast adalah 0,145 (Lampiran 9). Konsumsi pakan tikus yang diberi 27% A. villosa tidak berbeda nyata (p>0,05) dengan yang ditambah yeast. Dengan demikian penambahan yeast tidak mempengaruhi konsumsi pakan. Tabel 1. Konsumsi pakan tikus pada pemberian 27% A.villosa dan 27% A.villosa ditambah yeast selama 12 minggu Minggu ke1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

27% A.villosa (g) 67.00 ± 9.81 a 77.55 ± 4.34 a 75.50 ± 6.48 a 70.58 ± 10.88 a 71.50 ± 8.99 a 71.63 ± 9.25 a 70.18 ± 12.34 a 71.63 ± 8.84 a 74.10 ± 7.21 a 73.95 ± 6.71 a 69.73 ± 10.86 a 73.53 ± 7.35 a

27% A.villosa + Yeast (g) 78.65 ± 4.85 a 78.28 ± 7.22 a 79.05 ± 5.32 a 73.03 ± 10.38 a 70.33 ± 10.29 a 66.88 ± 14.70 a 69.95 ± 9.71 a 74.95 ± 8.46 a 73.25 ± 8.02 a 74.15 ± 7.64 a 68.28 ± 12.03 a 73.98 ± 8.26 a

Ket : Huruf berbeda pada kolom dan baris yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0.05)

16

Keberadaan tanin A. villosa tidak memberikan efek negatif terhadap konsumsi pakan tikus karena konsumsi pakan tetap stabil hingga akhir penelitian (Tabel 1). Hal ini diduga karena daun A. villosa yang digunakan telah melalui proses pengeringan dengan cara dijemur sebelum dijadikan pakan. Menurut Anonim (2001) pengeringan dapat mengurangi kadar tanin. Selain itu tanin mudah membentuk komplek tanin-protein yang sulit dicerna (Ahn et al. dalam Hove et al. 2003). Namun menurut Firdus et al. (2004) pengeringan kaliandra dapat meningkatkan reaktivitas tanin terhadap nutrien pakan, khususnya protein. Hal tersebut dapat menghambat pemecahan partikel pakan, baik oleh mikroba rumen maupun enzim-enzim pencernaan lainnya. Menurut Makkar dan Singh dalam Hove et al. ( 2003), pengeringan pada daun oak mempengaruhi kadar airnya sehingga menurunkan kadar total fenol dan tanin terkondensasi. Berkurangnya kadar tanin juga menyebabkan berkurangnya sifat astringensia

tanin,

sehingga

mengurangi

atau

menghilangkan

kendali

palatabilitas. Menurut Wiryawan et al. (1998), tikus menghasilkan saliva yang mengandung Proline-Rich Protein yang dapat berikatan dengan tanin. Hal ini mencegah interaksi tanin dengan protein pakan. Dengan demikian pemberian A. villosa tidak mempengaruhi konsumsi pakan tikus. Penambahan yeast dalam pakan bertujuan sebagai sumber vitamin vitamin B [thiamin (B1), riboflavin (B2), piridoksin (B6), asam folat, sianokobalamin (B12)] untuk meningkatkan kekebalan tubuh guna menunjang metabolisme tubuh (Anonim 2007). Namun adanya tanin yang merusak lapisan mukosa saluran pencernaan diduga mengakibatkan vitamin B tidak dapat diserap dengan baik. Menurut Wulansari (2007) daun A.villosa baik yang dikukus maupun yang tidak dikukus menyebabkan deskuamasi epitel mukosa lambung dengan derajat keparahan yang berbeda. Hal ini mengindikasikan bahwa toksin A.villosa bersifat iritan pada lambung tikus sehingga menyebabkan terjadinya deskuamasi. Selain itu, A.villosa juga menyebabkan terjadinya poliferasi sel goblet, hiperplasia enterosit serta deskuamasi enterosit pada duodenum. Bobot badan tikus yang diberi 27% A. villosa tidak berbeda nyata (p>0,05) dibandingkan dengan 27% A. villosa ditambah yeast (Tabel 2, Lampiran 8). Analisis regresi menunjukkan koefisien regresi bobot badan tikus yang diberi 27

17

% A.villosa adalah 6,03 sedangkan yang ditambah yeast adalah 6,87 (Lampiran 12). Hal ini menunjukkan bahwa bobot badan tikus yang diberi 27% A. villosa tidak berbeda nyata (p>0,05) dengan yang ditambah yeast. Bobot badan tikus terlihat berbeda nyata (p<0,05) hanya pada minggu pertama dan kedua perlakuan (Tabel 2). Bobot badan tikus kedua kelompok perlakuan bertambah setiap minggunya, namun pertambahan bobot badan mulai menurun pada minggu ke-2 hingga minggu ke-12. Pada minggu terakhir perlakuan kedua kelompok mulai mengalami penurunan bobot badan. Hal ini diduga disebabkan oleh tanin dan senyawa AANP A.villosa. Tabel 2. Bobot badan dan pertambahan bobot badan tikus pada pemberian 27% A.villosa dan 27% A.villosa ditambah yeast selama 12 minggu Minggu ke-

Awal 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

27% A.villosa Bobot badan Pertambahan (g) bobot badan (g)

27% A.villosa + Yeast (g) Bobot badan Pertambahan (g) bobot badan (g)

110.32 ± 5.41 138.15 ± 9.96 150.00 ± 7.25 159.35 ± 8.67 167.30 ± 10.57 173.35 ± 15.46 179.23 ± 18.44 181.83 ± 17.68 188.80 ± 19.68 190.63 ± 22.16 194.33 ± 22.62 199.43 ± 28.18

100.55 ± 1.69 127.08 ± 7.51 137.18 ± 8.98 148.98 ± 10.15 158.00 ± 14.43 165.15 ± 18.78 170.63 ± 19.75 174.45 ± 22.66 182.53 ± 23.48 185.55 ± 25.10 189.20 ± 25.63 195.88 ± 31.56 195.28 ± 30.63

198.40 ± 25.94

27.83 ± 6.18 Aa 11.85 ± 6.78 Ab 9.35 ± 3.06 Abc 7.95 ± 5.53 Abcd 6.05 ± 5.66 Abcde 5.65 ± 2.96 Abcde 2.83 ± 2.76 Acde 6.98 ± 2.87 Abcd 1.38 ± 4.09 Ade 3.70 ± 1.85 Acde 5.10 ± 5.66 Abcde -1.03 ± 2.24 Ae

26.53 ± 6.70 Aa 10.10 ± 1.92 Abc 11.78 ± 1.26 Ab 9.03 ± 4.59 Abcd 7.15 ± 4.63 Abcde 5.48 ± 1.07 Acde 3.83 ± 3.12 Adef 8.03 ± 1.97 Abcde 3.03 ± 2.74 Aef 3.65 ± 0.89 Adef 6.68 ± 6.27 Abcde -0.60 ± 1.30 Af

Ket :Huruf berbeda pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0.05) Huruf kapital berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0.05)

Tanin A. villosa mudah berikatan dengan Proline-Rich Protein saliva namun diduga masih ada sebagian tanin yang bebas. Akumulasi tanin yang bebas tersebut dapat mengikat protein dan makromolekul lain yang diperlukan untuk pertumbuhan sehingga menyebabkan penurunan pertambahan bobot badan.

18

Senyawa AANP A.villosa bersifat hepatotoksik (McSweeney et al. 2005). Adanya bahan yang bersifat hepatotoksik tersebut menyebabkan proses metabolisme nutrien dihati terganggu. Akibatnya, protein yang telah diserap tidak dapat diubah menjadi energi untuk pertumbuhan. Senyawa AANP juga menyebabkan terganggunya fungsi ginjal. Hal ini berdampak pada lolosnya protein ke dalam lumen tubuli yang kemudian terbuang bersama urin. Terbuangnya protein menyebabkan berkurangnya jumlah protein yang berguna

untuk

pertumbuhan,

yang

akhirnya

mengakibatkan

penurunan

pertambahan bobot badan. Penambahan yeast dalam pakan bertujuan sebagai sumber vitamin B guna menunjang metabolisme tubuh (Anonim 2007). Vitamin B dibutuhkan untuk beberapa aktivitas metabolis, terutama metabolisme karbohidrat, lemak, protein, glukosa, dan alkohol serta membantu enzim untuk menghasilkan energi dari nutrisi penting untuk tubuh (Sutardi 1980). Namun penambahan yeast tidak meningkatkan kecernaan pakan. Hal ini karena adanya sebagian tanin yang diduga merusak lapisan mukosa saluran pencernaan menyebabkan vitamin B yang merupakan produk yeast tidak dapat diserap seluruhnya oleh tubuh. Menurut Oritz et al. (1994) tanin dapat merusak mukosa traktus gastrointestinal ayam, namun tingkat kerusakannya pada tikus percobaan lebih sedikit. Bansi (2001) melaporkan bahwa jenis tanin terbesar yang terkandung dalam A.villosa adalah tanin terkondensasi. Brooker (2000) menyatakan bahwa pakan yang mengandung tanin terkondensasi menyebabkan terbuangnya protein endogenus dan menghambat aktifitas enzim gastrointestinal pada bebek. Dengan demikian pemberian yeast tidak mempengaruhi bobot badan.

19

90

K o n s u m s i P a k a n (g )

80 70 60

Av

50

AvY

40 30 20 10 0 1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

Minggu Gambar 5. Konsumsi pakan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu.

250

B o b o t B a d a n (g )

200 150

Av

100

AvY

50

12

11

9

8

7

6

5

4

3

2

1

10

Aw

al

0 Minggu

Gambar 6. Bobot badan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu.

20

Pengaruh Pemberian Acacia villosa dan penambahan Yeast terhadap Histopatologi Ginjal Tikus Pada pemeriksaan histopatologi ginjal tikus ditemukan adanya perubahan pada glomerulus dan tubulus serta adanya pembendungan pada bagian interstitial. Pembendungan disebabkan oleh ether yang digunakan pada euthanasia (Malole dan Pramono 1989). Kerusakan pada glomerulus maupun tubulus menunjukkan adanya bahan toksik yang melewati ginjal. Bahan toksik tersebut mengakibatkan penurunan kemampuan absorpsi ginjal. Presentase kerusakan glomerulus dan

% Kerusakan

tubulus ginjal disajikan pada Gambar 7.

14 12 10 8 6 4 2 0

Glomerulus Tubulus

Av

AvY

Gambar 7. Rata-rata persentase kerusakan glomerulus dan tubulus ginjal pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu. Perubahan glomerulus yang ditemui berupa penebalan kapsula Bowman, perluasan ruang Bowman dan atropi mesangium. Perubahan tubulus umumnya berupa degenerasi pada epitel yang diawali dengan degenerasi berbutir (cloudy swelling) dan berlanjut menjadi degenerasi hidropis atau degenerasi lemak. Ditemukan juga endapan protein dan hyalin pada lumen tubulus. Selanjutnya ditemukan epitel tubulus yang mengalami nekrosa yang ditandai dengan inti piknotis dan sitoplasma yang lebih menyerap warna eosin. Hasil rataan kerusakan glomerulus dan tubulus pada pemberian A.villosa lebih tinggi dibandingkan A.villosa ditambah yeast, namun keduanya tidak berbeda nyata (p>0.05) (Gambar 7). Hal ini menunjukkan bahwa penambahan yeast dalam pakan dapat mengurangi toksisitas A. villosa sehingga dapat menghambat atau mengurangi kerusakan ginjal. Selain sebagai sumber vitamin B,

21

diduga yeast pada penelitian ini berfungsi sebagai toksin binder (pengikat toksin) yang dapat mengikat toksin dalam pakan. Selain itu yeast kemungkinan juga berperan dalam meningkatkan antioksidan yaitu mencegah kerusakan kandungan nutrisi pakan akibat oksidasi (Trobos 2007b). Kerusakan glomerulus maupun tubulus diduga disebabkan oleh asam amino non protein yang bersifat nefrotoksik (Anonim 2001). Kerusakan gromerulus ginjal tikus setelah pemberian 27% A.villosa disajikan pada Gambar 8.

Gambar 8. Glomerulus yang mengalami atropi (a), perluasan ruang Bowman (b), dan penebalan kapsula Bowman (c) pasca pemberian 27% A.villosa selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar 20 µm.

Pada Gambar 8 terlihat bahwa glomerulus mengalami beberapa perubahan yaitu penebalan kapsula Bowman, perluasan ruang Bowman dan atropi mesangium. Glomerulus berfungsi sebagai filter plasma darah yang pada dasarnya akan menghasilkan filtrat yang bebas protein (Guyton 1994). Hasil filtrasi ditampung pada ruang Bowman kemudian disalurkan ke tubulus proksimalis. Materi yang melalui glomerulus selalu dalam jumlah sedikit, namun dalam kondisi patologis menjadi berlebihan. Perluasan ruang Bowman disebabkan oleh banyaknya filtrat glomerulus dan adanya endapan protein yang terakumulasi di

22

ruang Bowman. Hal ini dikarenakan kebocoran filter glomerulus akibat permeabilitas kapiler yang meningkat sehingga semakin banyak protein yang lolos memenuhi ruang Bowman. Kebocoran filter glomerulus disebabkan oleh senyawa nefrotoksik Acacia villosa. Penebalan kapsula Bowman terjadi karena poliferasi sel epitel parietal yang menghasilkan sel multilapis dan dikelilingi oleh materi yang menyerupai kolagen yang menjulur ke ruang Bowman (Ettinger 1975). Atropi mesangium disebabkan oleh tekanan intertisial dan adanya masa protein dalam lumen tubulus (Rumawas 1989; Robin dan Kumar 1995). Perubahan yang terjadi pada tubulus berupa degenerasi berbutir, degenerasi hidropis, degenarasi hyalin dan endapan protein di lumen. Epitel tubulus sangat sensitif terhadap bahan toksik sehingga menimbulkan reaksi berupa degenerasi berbutir (cloudy swelling) dan degenerasi hyalin. Derajat degenerasi tersebut tergantung pada sifat dan banyaknya bahan toksik yang masuk ke dalam aliran darah. Degenerasi berbutir disebabkan oleh beberapa hal antara lain: infeksi, demam, keracunan, suhu yang rendah atau tinggi, anoreksia, gizi buruk dan gangguan sirkulasi yang bersifat reversibel. Cloudy swelling terjadi akibat kerusakan membran plasma sehingga terjadi kebocoran yang menyebabkan ketidakseimbangan elektrolit dalam sel dimana ion K+ keluar sel dan ion Ca2+, Na+ dan air masuk secara berlebihan kedalam sel (Cheville 1999). Beberapa penyebab kerusakan membran plasma antara lain substansi toksin, hipereksia dan gangguan keseimbangan asam-basa selular (Beattie et al. 1984). Perubahan ini ditandai oleh sel-sel yang membengkak disertai sitoplasma yang bergranul atau berbutir sehingga sitoplasma tampak keruh (Ressang 1984). Tubulus yang mengalami degenerasi berbutir disajikan pada Gambar 9. Pada tubulus yang berdilatasi juga ditemukan epitel dengan sitoplasma yang

mengalami

degenerasi

hyalin.

Degenerasi

hyalin

terjadi

karena

pembengkakan lysosom sehingga lysosom mengalami gangguan enzimatik (Hall 1983, Jub 1993). Pada tikus percobaan ini ditemukan degenerasi hyalin yang merupakan indikasi peningkatan intensitas absorbsi protein dan gangguan fungsi enzimatik lysosom. Degenerasi hyalin biasanya berhubungan dengan peradangan

23

pada tubuli yang disebabkan iskemia atau racun. Butiran hyalin akan tampak berwarna merah cerah yang bersifat homogen. Perubahan ginjal yang berupa degenerasi hyalin disajikan pada Gambar 10. Degenerasi hidropis merupakan suatu keadaan dimana pada sitoplasma sel terdapat air. Hilangnya kontrol air disebabkan oleh kerusakan pompa sodium, dimana jumlah ion Na yang masuk ke dalam sel berlebihan. Hal ini menyebabkan air banyak masuk ke dalam sel. Pada awalnya air terakumulasi di sitosol dan sisterna retikulum endoplasma. Namun seiring berjalannya waktu seluruh sel membengkak (Cheville 1999). Degenerasi hidropis disebabkan oleh ketidak cukupan sel terhadap makanan dan ketuaan individu secara keseluruhan atau jaringan tertentu. Pada penelitian ini degenerasi hidropis disebabkan oleh senyawa sekunder AANP A.villosa yang bersifat toksik. (Suyanti 2008). Secara mikroskopik sel terlihat mengandung ruangan-ruangan yang jernih yang mengelilingi inti tetapi tidak sejernih glikogen atau lemak (Cheville 1999). Epitel tubulus yang,mengalami degenerasi hidropis disajikan pada Gambar 10. Endapan protein pada lumen tubulus disebabkan oleh malfungsi glomerulus akibat rusaknya struktur membran kapiler. Struktur membran kapiler yang rusak meningkatkan permeabilitas filter, sehingga protein dengan molekul besar dan albumin plasma dapat menerobos keluar memasuki filtrat. Kelainan pada sistem filter glomerulus dapat berupa hilangnya kaki podosit (sel epitel) glomerulus. Berbagai komponen yang berkemampuan merusak filter glomerulus diantaranya bahan toksik, molekul bermuatan atau kompleks imun. Lolosnya protein dapat menimbulkan kondisi proteinuria (Glainster 1986). Selain itu, gangguan reabsorpsi karena melebihi ambang batas kemampuan atau rusaknya epitel tubulus dapat juga menjadi penyebab hadirnya endapan protein di tubulus. Faktor lain yang menjadi penyebab adanya protein dalam lumen tubuli adalah gangguan fungsi enzim lysosom epitel tubuli yang diakibatkan oleh akumulasi bahan yang bersifat merusak (Gleinster. 1986). Bila degradasi protein yang diserap secara enzimatik terganggu maka akan menimbulkan residu protein yang tersisa baik dalam lumen maupun pada sel epitel. Adanya endapan protein ditandai dengan massa berwarna merah muda pada pewarnaan HE (Gambar 11).

24

Gambar 9. Tubulus yang mengalami degenerasi berbutir pasca pemberian 27% A.villosa + yeast selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar 10 µm.

Gambar 10. Tubulus yang mengalami degenerasi hyalin (panah) dan degenerasi hidropis (kepala panah) pasca pemberian 27% A.villosa + yeast selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar 10 µm.

25

Gambar 11. Tubulus yang mengalami endapan protein (panah) dan degenerasi hyalin (kepala panah) pasca pemberian 27% A.villosa selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar 20 µm.

Gambar 12. Nekrosa tubuli pasca pemberian 27% A.villosa selama 12 minggu. Pewarnaan HE, Bar 20 µm.

26

Perjalanan sel dari degenerasi menuju nekrosa dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu perubahan tekanan, pH yang rendah, peningkatan laju metabolisme dan hipoksia. Semua faktor tersebut menyebabkan kurangnya adenosin trifosfat (ATP) sebagai sumber energi sel, sehingga proses pemenuhan energi terhenti dan degenerasi sel berlanjut menjadi nekrosa (Cheville 1999). Asupan bahan yang bersifat nefrotoksik dapat mengakibatkan nekrosa tubular akut. Pada epitel tubulus yang mengalami nekrosa ditandai dengan inti piknotis dan sitoplasma yang lebih menyerap warna eosin. Tubuli yang mengalami nekrosa disajikan pada Gambar 12. Seluruh perubahan patologi yang terjadi pada ginjal diakibatkan oleh asam amino non protein A.villosa yang bersifat nefrotoksik. Menurut Suyanti (2008) asam amino non protein A.villosa mengakibatkan perubahan histopatologi ginjal baik pada parenkim maupun intersisial. Semakin tinggi dosis fraksi AANP yang diberikan maka semakin hebat perubahan histopatologi yang ditimbulkan.

27

KESIMPULAN DAN SARAN

Kesimpulan 1. Penambahan 2% yeast pada pemberian 27% A.villosa tidak mempengaruhi konsumsi pakan dan bobot badan. 2. Penambahan 2% yeast pada pemberian 27% A.villosa cenderung mengurangi kerusakan histopatologi ginjal.

Saran Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan memberikan Acacia villosa yang dikukus maupun tanpa dikukus dan ditambahkan yeast dalam dosis yang lebih tinggi untuk mengetahui pengaruhnya pada histologi ginjal.

28

DAFTAR PUSTAKA Allen ON and Allen EK. 1981. The Leguminous A Scoure Book of Characteristics Uses and Nodulation. The University of Wiconsin Press. pp. xiii-xvi, 3706 [Anonim]. 2001. Tannin : Definition. http://www.ansci.cornel.edu/. [ 24 Januari 2003 ]. [Anonim]. 2006. What is Yeast. http://www.dakotayeast.com/yeast_what.html. [ 20 Juni 2006 ]. [Anonim]. 2007. Bio-Strath, Suplemen Bantu ADD/ADHD. http://www.medicastore.com. [ 15 Maret 2008].

Konsentrasi

Penderita

[Anonim]. 2008. Brewer’s Yeast pada Suplemen. http://www.halalguide.info/content/view/1083/846/. [ 15 Maret 2008]. Bansi H. 2001. Potensi Lamtoro Merah (Acacia villosa) dan Kaliandra Putih (Calliandra tetragona) sebagai Pakan Sumber Protein Baru bagi Ternak Ruminansia. Skripsi. Fakultas Peternakan. Institut Pertania Bogor. Bogor. Bariata NC. 2001. Gambaran Histopatologi Toksisitas Hijauan Mlanding Sabrang (Acacia villosa) Dosis Tinggi pada Domba Garut. Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Beattie JM, Dickson WEC, Drennan AM, Hememann W, editor. 1984. A Texbook of Pathology. Ed ke-5. Vol 1. London. Medical Books Ltd. Becker CA and Van den Brink RCB. 1963. Flora of Java. N.V.P. Noorshoff, Gronigen, Netherlands.pp.557. Brooker JD. 2000. Priority setting disscussion. Di dalam : Brooker JD, editor. Tannins in Livestock and Human Nutrition. Proceeding of an International Workshop ; Adalaide 31 Mei – 2 Juni 1999. Canberra : ACIAR. Hlm 1-7. Cheeke PR. 2004. Contemporary Issues in Animal Agriculture. 3rd Edition. New Jersey: Pearson Education, Inc. Cheville NF.1999. Introduction to Veterinery Pathology. 2nd Edition. Iowa: Iowa State University Press. Ettinger SJ. 1975. Teksbook of Veterinary Internal Medicine. Disease of The Dog and Cat. Vol 2. W.B. Saunders Company. Philadelphia.

29

Firdus DA, Astuti dan Wina E. 2004. Pengaruh Kondisi Fisik Kaliandra dan Campurannya dengan Gamal Segar terhadap Konsumsi dan Kecernaan Nutrien pada Domba. JITV 9(1) : 12-16 Glainster JR. 1986. Prinsiple of Toxicological Phatology. Taylor and Francis. London. England. Guyton AG. 1994. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 7. Penerbit Buku Kedokteran. EGC. Jakarta. Hall LW. 1983. Veterinary Nephrorology. Heinemann Veterinary Book. London. Hegarty MP. 1978. Toxic Amino acids of Plant Origin. In: Keeler RF, VanKampen KR, James LF. Effects of Poisonous Plants on Livestock. Procceding of a Joint United States-Australian Symposium on Poisonous Plant at Utah State Univ. Academic Press. Hegarty MP, Court RD, Christie GS and Lambourne LJ. 1976. Leucaena leucephala – A Bibliography. Journal Veterinary. Australia. Vol 52 : 490. Henyne K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia II. Terjemahan Badan Litbang Kehutanan Jakarta. Yayasan Sarana Wana Jaya. Pp. 884-885. Hove L, Ndlovu LR, Sibanda S. 2003. The Effects of Drying Temperature on Chemical Composition and Nutritive Value of Some Tropical Fodder Shurbs. Agroforestry Systems 59: 231-241. Humason, GL. 1967. Animal Tissue Technique. 2nd Edition. WH. Freeman And Company. San Francisco. Jones RJ, LeFeuvre PP and Playne MJ. 1992. Losses of dry matter, nitrogen, mineral and fiber fraction from nylon bags containing Leucaena and two Calliandra spesies in the rumen. J. Anim. Feed Sci. and Tech. 37: 297307. Jubb KVF, Kennedy PC, Palmer N.1993. Pathology of Domestic Animals. 4nd Edition. Academic Press. San Diego. Jukema J dan Danimihardja S. 1997. Acacia. In: Hanum, IF and LJG. Van der Maesen, (eds). Auxiliary Plants. Plant Resources of Shouth East Asia. Prosea. Bogor. Indonesia. pp: 58-60. Leinmuller E, Steingass H and Karl-Heinz Menke. 1991. Tannin in Ruminant Feedstuls in Animal Research and Development. Edited in Conjuction with Numerous Members of German Universities and Research Institutions by the Institute for Scientific Co-operation: Vol 33-52. Lu FC. 1995. Toksikologi Dasar. Edisi ke-2. UI Press. Jakarta.

30

Makkar HPS. 1993. Anti nitrional Factor in Food for Livestock. British Society of Anim Prod (occasional Publication no 16). British society of Animal Production, UK. pp: 69-85. Malole MBM dan Pramono CSR. 1989. Penggunaan Hewan-hewan Percobaan di Laboratorium. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Pusat Antar Universitas Bioteknologi. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Manurung T. 1995. Penggunaan Leguminosa Pohon Sebagai Sumber Protein Ransum Sapi Potong. Jurnal Ilmu Ternak dan Veteriner. 1(3): !43-147. McSweeney et al. 2005. Enrichment, Isolation and Characterisation of Ruminal Bacteria that Degrade Non-Protein Amino Acids from The Tropical Legume Acacia Angustissima. http://www.Elsevier.com/locate/anifeedsci [19 Maret 2005]. Oritz LT, Alzueta C, Trevino J, Castano M.1994. Effects of Faba Bean Tannin on The Growth and Histological Structures of The Intestinal Tract and Liver of Cicks and Rats. Brit Doult Scie 35: 743-754. Perez D, Chavarria F, Espinoza R And Guadamuz. 1999. Acacia villosa. http://www.acguanacaste.ac.cr [24 Januari 2003]. Poerwodhiredjo B. 1980. Farmakologi Umum. Pusat Antar Universitas. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Ressang AA. 1984. Buku Ajar Patologi Khusus Veteriner. Fakultas kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Riyanto. 1976. Perbandingan Pertumbuhan Lamtoro dan Acacia villosa (Mlanding sabrang) pada beberapa Kondisi Tanah. Duta Rimba 133: 3-6. Robbin SL dan Kumar V. 1995. Buku Ajar Patologi II. Edisi 4. Penerbit Buku Kedokteran . EGC. Jakarta. Rumawas W. 1989. Patologi Umum. Fakultas kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Smith AH, Odenyo AA, Osuji PO, Wallig MA, Kandil FE, Seigler DS and Mackie RI. 2001. Evaluation of toxicity of Acacia angustissima in a rat bioassay. Anim. Feed. Sci. Tech. 91: 41-57 Sturkie PD. 1976. Kidney, Extrarenal Salt Exretion and Urine. In: Avian Physiology. 3rd Edition. New York, Heidelberg, Springer-Verlag. Sutardi T. 1980. Landasan Ilmu Nutrisi. Departemen Ilmu Nutrisi dan Makanan Ternak. Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

31

Sugiarto. 2002. Konsumsi, Kecernaan (in vivo) dan Protein Gas (in vitro) Pakan Kering Campuran Acacia villosa, Calliandra calothyrsus atau Leucaena diversifolia dengan Rumput Gajah Pada Domba. Skripsi. Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

Suyanti L. 2008. Gambaran Histopatologi Hati dan Ginjal Tikus pada Pemberian Fraksi Asam Amino non Protein Lamtoro Merah (Acacia villosa) pada Uji Toksisitas Akut. Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Tangendjaja B, Wina E, Ibrahim T and Palmer B. 1992. Kaliandra dan Pemanfaatannya. Balai Penelitian Ternak. ACIAR. Tiem Trobos. 2007a. Problem Unggas di Musim Penghujan. http://www.trobos.com/show_article.php?rid=11&aid=808. [ 15 Maret 2008]. Tiem Trobos. 2007b.Aflatoksin di Musim Hujan. http://www.trobos.com/show_article.php?rid=11&aid=307. [ 15 Maret 2008]. Widyastuti T. 2001. Detoksifikasi Daun Lamtoro (Leucaena leucephala) secara Fisik dan Kimia serta Pemanfaatannya sebagai Sumber Pigmentasi dalam Ransum Ayam Broiler. Tesis. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Wina E dan Tangendjaja B. 2000. The Possibility of Toxic Compounds Present in Acacia villosa. Buletin Peternakan. 24(1). Wina E. 2000. Pemanfaatan Ragi (Yeast) Sebagai Pakan Imbuhan untuk Meningkatkan Produktivitas ternak Ruminansia. WARTAZOA. 9(2). pp: 50-56. Wina E. 2005. Teknologi pemanfaatan mikroorganisme dalam pakan untuk meningkatkan produktifitas ternak ruminansia di Indonesia. WARTAZOA. 15(4). pp 173-186. Wiryawan KG. 1999. Upaya Pengurangan Kadar Tanin dalam Kaliandra (Calliandra calothyrsus) Dengan Menggunakan Larutan Kapur Tohor dan Uji Kecernaannya secara in vitro. Media Peternakan. 22(2). Wiryawan et al. 1998. The Effect of Tannin Degrading Bacterial Inoculation on The Performance Calliandra (Calliandra colothyrsus) Feed Goats. Bulletin of Animal Science. Supplement Edition. Wulansari W. 2007. Gambaran Histopatologi Duodenum Tikus Pasca Pemberian Lamtoro merah (Acacia villosa). Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.

32

33

Lampiran 1. Komposisi Pakan

Kandungan Dedak Minyak Lysin Methimine Tepung tulang Kapur/ biofos Garam Top mix Jagung Bungkil Acacia villosa Yeast pakmaya

kontrol (3 Kg) 204 30 9,3 10,86 37,89 45 6,39 2,58 2218,29 435,15 -

27% (5 Kg) 300 520,5 15,5 19,95 24,9 4,7 4.3 238,85 370,75 1350 -

27% Yeast (5 Kg) 367,5 510 15,65 19.9 26,05 4,05 4,3 2406,85 295,75 1300 100

Lampiran 2. Energi dan Komposisi Kimia A. villosa Metabolizable Energy Bahan kering (%) Protein kasar (%) NDF (Natural Deterjen Fiber %) ADF (Acid Deterjen Fiber %) Lignin (%) Abu (%) Ca (%) P (%) Tanin terkondensasi (%) Lysine (%) Methionin (%) Tryptofan (%) Theonin (%) Na (%)

3800 – 3900 Kkal 40.22 29.61 27.32 21.50 7.77 5.04 1.49 0.23 12.51 0.9 0.6 0.15 0.53 0.1

34

Lampiran 3. Bobot Badan Minggu

Awal 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A1 117,9 136,8 147,7 152,8 163,3 165,5 169,8 173,7 182,9 180,9 183,1 185,6 185,7

27% A. villosa (g) A2 A3 116,9 118,1 128,3 135,5 150,0 142,5 162,3 152,0 176,7 154,2 190,8 156,2 200,5 159,0 204,7 163,5 213,8 166,6 220,0 168,1 225,4 173,3 238,8 174,1 234,6 175,0

Bobot Badan 27% A. villosa + Yeast (g) A4 B1 B2 B3 B4 128,4 107,1 105,3 109 105,6 152,0 125,7 125,2 137,6 119,8 159,8 137,4 135,0 149,0 127,3 170,3 149,8 147,2 161,8 137,1 175,0 156,2 156,9 177,0 141,9 180,9 160,3 163,7 190,8 145,8 186,7 164,9 169,1 197,8 150,7 185,4 167,3 171,3 206,3 152,9 191,9 174,0 182,0 214,8 159,3 193,5 177,2 181,6 221,1 162,3 195,5 179,7 185,9 225,5 165,7 199,2 184,3 194,9 239,4 164,9 198,3 184,0 193,1 238,0 166,0

Lampiran 4. Konsumsi Pakan Minggu

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A1 55,9 75 68,3 74,8 64,9 65,6 75,6 69,9 74,7 70,4 71,3 70,3

Konsumsi Pakan 27% A. villosa (g) 27% A. villosa + Yeast (g) A2 A3 A4 B1 B2 B3 B4 67,9 64,6 79,6 81,5 83,9 75,6 73,6 84 76,4 75 78,8 83 83,4 67,9 84 75,6 74,1 72,1 82,3 84 77,8 84 62,6 60,9 60,7 78,7 84 68,7 84 65 72,1 60,8 72,2 84 64,3 84 63,6 73,3 53,6 74,2 84 55,7 84 65,6 55,5 62,9 68,8 84 64,1 84 63 69,6 64,4 78,9 84 72,5 84 67,7 70 65,7 74,4 84 68,9 84 71 70,4 67,3 76,3 84 69 84 58,5 65,1 60,4 71,2 84 57,5 84 67,1 72,7 67,5 77,5 84 66,9

Lampiran 5. Rata-rata persentase kerusakan glomerulus dan tubulus ginjal pada pemberian 27% A.villosa dan 27% A.villosa + yeast selama 12 minggu

% Kerusakan Glomerulus % Kerusakan Tubulus

27% A.Villosa 11,78 ± 1,26 a 11,85 ± 6,78 a

27% A.villosa + Yeast 9,35 ± 3,06 a 10,10 ± 1,92 a

Ket : Huruf berbeda pada baris yang sama menunjukkan perbedaan yang nyata (p<0.05)

35

Lampiran 6. Pembuatan Sediaan Histopatologi

Sampling Organ ↓ Fiksasi dalam BNF 10 % Selama 6-24 jam ↓ Dehidarasi dalam alkohol 70%, 80%, 90%, alkohol absolut I dan alkohol absolut II masing-masing 2 jam ↓ Clearing xylol I dan xylol II masing-masing 2 jam ↓ Embedding ( penanaman jaringan dalam parafin) ↓ Sectioning menggunakan mikrotom setebal 5µm ↓ Mounting (penempelan sediaan pada gelas objek) ↓ Staining (pewarnaan)

36

Lampiran 7. Pewarnaan Hematoxylin Eosin

Xylol I : 2 menit ↓ Xylol II : 2 menit ↓ Alkohol absolud : 2 menit ↓ Alkohol 95% : 1 menit ↓ Cuci dengan air kran : 1 menit ↓ Mayer’s Haematoxylin : 8 menit ↓ Cuci dengan air kran : 30detik ↓ Ithium Carbonat : 15-30 detik ↓ Cuci dengan air kran : 2 menit ↓ Eosin : 2-3 menit ↓ Cuci dengan air kran : 30-60 detik ↓ Alkohol 95% : 10 celupan ↓ Alkohol absolud I : 10 celupan ↓ Alkohol absolud II : 2 menit ↓ Xylol I : 1 menit ↓ Xylol II : 2 menit ↓ Tutup degan cover glass

37

Lampiran 8. Analisis Statistik ANOVA UJI UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KONSUMSI PAKAN MINGGU 1 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: KP01 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.430540 Source DF PERL 1

Sum of Squares 271.44500000 359.03000000 630.47500000 C.V. 10.62207 Anova SS 271.44500000

Mean Square 271.44500000 59.83833333

F Value 4.54

Pr > F 0.0772

Root MSE 7.73552411 Mean Square 271.44500000

KP01 Mean 72.82500000 F Value Pr > F 4.54 0.0772

Analysis of Variance Procedure Level of -------------KP01 -------------KP01-----------KP01-----------PERL N Mean SD AV 4 67.0000000 9.80714026 AVY 4 78.6500000 4.84733604 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: KP01 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 59.83833 Number of Means 2 Critical Range 13.38 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 78.650 4 AVY A 67.000 4 AV

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KONSUMSI PAKAN MINGGU MINGGU 2 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: KP02 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.004913 Source DF PERL 1


Mean Square 1.05125000 35.48958333 Root MSE 5.95731343 Mean Square 1.05125000

F Value 0.03

Pr > F 0.8690

F Value 0.03

KP02 Mean 77.91250000 Pr > F 0.8690


38

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KONSUMSI KONSUMSI PAKAN MINGGU 3 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: KP03 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.106713 Source DF PERL 1


Mean Square 25.20500000 35.16500000

F Value 0.72

Pr > F 0.4297




UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KONSUMSI KONSUMSI PAKAN MINGGU 4 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: KP04 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.017384 Source DF PERL 1



F Value 0.11

Pr > F 0.7556


Analysis of Variance Procedure Level of -------------KP04 -------------KP04-----------KP04-----------N Mean SD PERL AV 4 70.5750000 10.8825166 AVY 4 73.0250000 10.3805507 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: KP04 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 113.0925 Number of Means 2 Critical Range 18.40 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 73.025 4 AVY A 70.575 4 AV

39

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KONSUMSI PAKAN MINGGU 5 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: KP05 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.004907 Source DF PERL 1


Mean Square 2.76125000 93.32791667

F Value 0.03

Pr > F 0.8691



Analysis of Variance Procedure Level of -------------KP05 -------------KP05-----------KP05-----------N Mean SD PERL AV 4 71.5000000 8.9892528 AVY 4 70.3250000 10.2883024 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: KP05 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 93.32792 Number of Means 2 Critical Range 16.72 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 71.500 4 AV A 70.325 4 AVY




F Value 0.30

Pr > F 0.6041



40




F Value 0.00

Pr > F 0.9781






F Value 0.30

Pr > F 0.6065

F Value 0.30

KP08 Mean 73.28750000 Pr > F 0.6065

Analysis of Variance Procedure Procedure Level of -------------KP08 -------------KP08-----------KP08-----------PERL N Mean SD AV 4 71.6250000 8.84321774 AVY 4 74.9500000 8.46187528 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Range Test for variable: KP08 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 74.90292 Number of Means 2 Critical Range 14.97 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 74.950 4 AVY A 71.625 4 AV

41



Mean Square 1.44500000 58.15833333

F Value 0.02

Pr > F 0.8799




UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KONSUMSI PAKAN PAKAN MINGGU 10 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: KP10 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.000258 Source DF PERL 1


Mean Square 0.08000000 51.66666667

F Value 0.00

Pr > F 0.9699




42

UJI UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KONSUMSI PAKAN MINGGU 11 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: KP11 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.005311 Source DF PERL 1



F Value 0.03

Pr > F 0.8638





Mean Square 0.40500000 61.16583333

F Value 0.01

Pr > F 0.9378



Analysis of Variance Procedure Level of -------------KP12 -------------KP12-----------KP12-----------N Mean SD PERL AV 4 73.5250000 7.35045350 AVY 4 73.9750000 8.26453265 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: KP12 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 61.16583 Number of Means 2 Critical Range 13.53 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 73.975 4 AVY A 73.525 4 AV

43

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK PBB MINGGU 1 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: PBB01 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.013363 Source DF PERL 1


Mean Square 3.38000000 41.59250000

F Value 0.08

Pr > F 0.7852


PBB01 Mean 27.17500000 F Value Pr > F 0.08 0.7852

Analysis of Variance Procedure Level of ------------PBB01 ------------PBB01-----------PBB01-----------N Mean SD PERL AV 4 27.8250000 6.18459107 AVY 4 26.5250000 6.70341953 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB01 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 41.5925 Number of Means 2 Critical Range 11.16 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 27.825 4 AV A 26.525 4 AVY




F Value 0.25

Pr > F 0.6371

F Value 0.25

PBB02 Mean 10.97500000 Pr > F 0.6371

Analysis of Variance Procedure Level of ------------PBB02 ------------PBB02-----------PBB02-----------PERL N Mean SD AV 4 11.8500000 6.77864293 AVY 4 10.1000000 1.92353841 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB02 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 24.825 Number of Means 2 Critical Range 8.621 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 11.850 4 AV A 10.100 4 AVY

44



Mean Square 11.76125000 5.47958333

F Value 2.15

Pr > F 0.1933



Analysis of Variance Procedure Level of -----------------------PBB03 --------PBB03-----------PBB03-----------PERL N Mean SD AV 4 9.3500000 3.06104557 AVY 4 11.7750000 1.26062154 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB03 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 5.479583 Number of Means 2 Critical Range 4.050 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 11.775 4 AVY A 9.350 4 AV



Mean Square 2.31125000 25.84291667

F Value 0.09

Pr > F 0.7750



Analysis of Variance Procedure Level of ------------PBB04 ------------PBB04-----------PBB04-----------PERL N Mean SD AV 4 7.95000000 5.52961723 AVY 4 9.02500000 4.59447132 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB04 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 25.84292 Number of Means 2 Critical Range 8.796 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 9.025 4 AVY A 7.950 4 AV

45



Mean Square 2.42000000 26.71000000

F Value 0.09

Pr > F 0.7736






Mean Square 0.06125000 4.96625000

F Value 0.01

Pr > F 0.9152



Analysis of Variance Procedure Procedure Level of ------------PBB06 ------------PBB06-----------PBB06-----------PERL N Mean SD AV 4 5.65000000 2.96479342 AVY 4 5.47500000 1.06887792 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: variable: PBB06 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 4.96625 Number of Means 2 Critical Range 3.856 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 5.650 4 AV A 5.475 4 AVY

46



Mean Square 2.00000000 8.67250000

F Value 0.23

Pr > F 0.6481



Analysis of Variance Variance Procedure Level of ------------PBB07 ------------PBB07-----------PBB07-----------PERL N Mean SD AV 4 2.82500000 2.76088754 AVY 4 3.82500000 3.11809237 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB07 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 8.6725 Number of Means 2 Critical Range 5.095 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 3.825 4 AVY A 2.825 4 AV



Mean Square 2.20500000 6.05583333

F Value 0.36

Pr > F 0.5683



Analysis Analysis of Variance Procedure Level of ------------PBB08 ------------PBB08-----------PBB08-----------N Mean SD PERL AV 4 6.97500000 2.86981416 AVY 4 8.02500000 1.96871362 Analysis of Variance Procedure Duncan's Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB08 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 6.055833 Number of Means 2 Critical Range 4.258 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 8.025 4 AVY A 6.975 4 AV

47



Mean Square 5.44500000 12.10250000

F Value 0.45

Pr > F 0.5273






Mean Square 0.00500000 2.10833333

F Value 0.00

Pr > F 0.9627



Analysis of Variance Procedure Level of ------------PBB10 ------------PBB10-----------PBB10-----------PERL N Mean SD AV 4 3.70000000 1.85112578 AVY 4 3.65000000 0.88881944 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB10 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 2.108333 Number of Means 2 Critical Range 2.512 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 3.700 4 AV A 3.650 4 AVY

48

UJI BEDA NILAI NILAI TENGAH UNTUK PBB MINGGU 11 Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: PBB11 Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.022670 Source DF PERL 1

Level of PERL AV AVY


N 4 4

Mean Square 4.96125000 35.64791667

F Value 0.14

Pr > F 0.7219



Analysis of Variance Procedure ------------PBB11 ------------PBB11-----------PBB11-----------Mean SD 5.10000000 5.65979976 6.67500000 6.26597957

Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB11 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 35.64792 Number of Means 2 Critical Range 10.33 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 6.675 4 AVY A 5.100 4 AV


Sum of Squares 0.36125000 20.12750000 20.48875000 C.V. -225.4218 Anova SS 0.36125000

Mean Square 0.36125000 3.35458333

F Value 0.11

Pr > F 0.7539


PBB12 Mean -0.81250000 F Value Pr > F 0.11 0.7539

Analysis of Variance Procedure Level of ------------PBB12 ------------PBB12-----------PBB12-----------N Mean SD PERL AV 4 -1.02500000 2.24109348 AVY 4 -0.60000000 1.29871732 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBB12 NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 3.354583 Number of Means 2 Critical Range 3.169 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A -0.600 4 AVY A -1.025 4 AV

49

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK MEMBEDAKAN MINGGU KONSUMSI PAKAN PADA PERLAKUAN 27% A.VILLOSA

Class PERL

Levels 12

Analysis of Variance Procedure Class Level Information Values Mg01 Mg02 Mg03 Mg04 Mg05 Mg06 Mg07 Mg08 Mg09 Mg10 Mg11 Mg12 Number of observations in data set = 48 Analysis of Variance Procedure

Dependent Variable: KPAV Source DF Model 11 Error 36 Corrected Total 47 R-Square 0.111943 Source DF PERL 11


Mean Square 32.35704545 78.43402778

F Value 0.41

Pr > F 0.9410


KPAV Mean 72.23750000 F Value Pr > F 0.41 0.9410

Analysis of Variance Procedure Level of -------------KPAV -------------KPAV-----------KPAV-----------PERL N Mean SD Mg01 4 67.0000000 9.8071403 Mg02 4 77.5500000 4.3370497 Mg03 4 75.5000000 6.4822835 Mg04 4 70.5750000 10.8825166 Mg05 4 71.5000000 8.9892528 Mg06 4 71.6250000 9.2492793 Mg07 4 70.1750000 12.3402796 Mg08 4 71.6250000 8.8432177 Mg09 4 74.1000000 7.2143376 Mg10 4 73.9500000 6.7059675 Mg11 4 69.7250000 10.8573708 Mg12 4 73.5250000 7.3504535

Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: KPAV NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 36 MSE= 78.43403 Number of Means 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Critical Range 12.70 13.35 13.78 14.08 14.31 14.50 14.65 14.77 14.87 14.96 15.03 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 77.550 4 Mg02 A 75.500 4 Mg03 A 74.100 4 Mg09 A 73.950 4 Mg10 A 73.525 4 Mg12 A 71.625 4 Mg08 A 71.625 4 Mg06 A 71.500 4 Mg05 A 70.575 4 Mg04 A 70.175 4 Mg07 A 69.725 4 Mg11 A 67.000 4 Mg01

50

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK MEMBEDAKAN MINGGU KONSUMSI PAKAN PADA PERLAKUAN 27% A.VILLOSA + YEAST

Class PERL

Levels 12


Dependent Variable: KPAVY Source DF Model 11 Error 36 Corrected Total 47 R-Square 0.185603 Source DF PERL 11


Mean Square 64.33037879 86.24958333

F Value 0.75

Pr > F 0.6885


KPAVY Mean 73.39583333 F Value Pr > F 0.75 0.6885

Analysis of Variance Procedure Procedure Level of ------------KPAVY ------------KPAVY-----------KPAVY-----------PERL N Mean SD Mg01 4 78.6500000 4.8473360 Mg02 4 78.2750000 7.2228226 Mg03 4 79.0500000 5.3207142 Mg04 4 73.0250000 10.3805507 Mg05 4 70.3250000 10.2883024 Mg06 4 66.8750000 14.6972503 Mg07 4 69.9500000 9.7065270 Mg08 4 74.9500000 8.4618753 Mg09 4 73.2500000 8.0168572 Mg10 4 74.1500000 7.6395899 Mg11 4 68.2750000 12.0270182 Mg12 4 73.9750000 8.2645327

Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: KPAVY NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 36 MSE= 86.24958 Number of Means 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Critical Range 13.32 14.00 14.45 14.77 15.01 15.20 15.36 15.49 15.59 15.68 15.76 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 79.050 4 Mg03 A 78.650 4 Mg01 A 78.275 4 Mg02 A 74.950 4 Mg08 A 74.150 4 Mg10 A 73.975 4 Mg12 A 73.250 4 Mg09 A 73.025 4 Mg04 A 70.325 4 Mg05 A 69.950 4 Mg07 A 68.275 4 Mg11 A 66.875 4 Mg06

51

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK MEMBEDAKAN MINGGU PBB PADA PERLAKUAN 27% A.VILLOSA

Class PERL

Levels 12


Dependent Variable: PBBAV Source DF Model 11 Error 36 Corrected Total 47 R-Square 0.768700 Source DF PERL 11


Mean Square 215.72020833 19.83354167

F Value 10.88

Pr > F 0.0001


PBBAV Mean 7.30208333 F Value Pr > F 10.88 0.0001

Analysis of Variance Procedure Level of -----------------------PBBAV ------PBBAV-----------PBBAV-----------PERL N Mean SD Mg01 4 27.8250000 6.18459107 Mg02 4 11.8500000 6.77864293 Mg03 4 9.3500000 3.06104557 Mg04 4 7.9500000 5.52961723 Mg05 4 6.0500000 5.65832720 Mg06 4 5.6500000 2.96479342 Mg07 4 2.8250000 2.76088754 Mg08 4 6.9750000 2.86981416 Mg09 4 1.3750000 4.08768476 Mg10 4 3.7000000 1.85112578 Mg11 4 5.1000000 5.65979976 Mg12 4 -1.0250000 2.24109348

Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: PBBAV NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 36 MSE= 19.83354 Number of Means 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Critical Range 6.387 6.714 6.928 7.081 7.198 7.290 7.365 7.426 7.478 7.521 7.559 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 27.825 4 Mg01 B 11.850 4 Mg02 C B 9.350 4 Mg03 C B D 7.950 4 Mg04 C B D 6.975 4 Mg08 C E B D 6.050 4 Mg05 C E B D 5.650 4 Mg06 C E B D 5.100 4 Mg11 C E D 3.700 4 Mg10 C E D 2.825 4 Mg07 E D 1.375 4 Mg09 E -1.025 4 Mg12

52

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK MEMBEDAKAN MINGGU PBB PADA PERLAKUAN 27% A.VILLOSA + YEAST

Class PERL

Levels 12


Dependent Variable: PBBAVY Source DF Model 11 Error 36 Corrected Total 47 R-Square 0.811699 Source DF PERL 11


Mean Square 184.23750000 13.05944444

F Value 14.11

Pr > F 0.0001


PBBAVY Mean 7.88750000 F Value Pr > F 14.11 0.0001

Analysis of Variance Procedure Level of ------------PBBAVY ------------PBBAVY----------PBBAVY----------PERL N Mean SD Mg01 4 26.5250000 6.70341953 Mg02 4 10.1000000 1.92353841 Mg03 4 11.7750000 1.26062154 Mg04 4 9.0250000 4.59447132 Mg05 4 7.1500000 4.62637367 Mg06 4 5.4750000 1.06887792 Mg07 4 3.8250000 3.11809237 Mg08 4 8.0250000 1.96871362 Mg09 4 3.0250000 2.73785196 Mg10 4 3.6500000 0.88881944 Mg11 4 6.6750000 6.26597957 Mg12 4 -0.6000000 1.29871732

Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test Test for variable: PBBAVY NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 36 MSE= 13.05944 Number of Means 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Critical Range 5.182 5.448 5.621 5.746 5.841 5.915 5.976 6.026 6.068 6.103 6.134 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 26.525 4 Mg01 B 11.775 4 Mg03 C B 10.100 4 Mg02 C B D 9.025 4 Mg04 C E B D 8.025 4 Mg08 C E B D 7.150 4 Mg05 C E B D 6.675 4 Mg11 C E D 5.475 4 Mg06 E F D 3.825 4 Mg07 E F D 3.650 4 Mg10 E F 3.025 4 Mg09 F -0.600 4 Mg12

53

UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK GLOMERULUS Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: GLO Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.263476 Source DF PERL 1


Mean Square 11.76125000 5.47958333

F Value 2.15

Pr > F 0.1933


GLO Mean 10.56250000 F Value Pr > F 2.15 0.1933

Analysis of Variance Procedure Level of -------------GLO -------------GLO-----------GLO------------------------N Mean SD PERL AV 4 11.7750000 1.26062154 AVY 4 9.3500000 3.06104557 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Range Test for variable: GLO NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 5.479583 Number of Means 2 Critical Range 4.050 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 11.775 4 AV A 9.350 4 AVY UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK TUBULUS Analysis of Variance Procedure Class Level Information Class Levels Values PERL 2 AV AVY Number of observations in data set = 8 Analysis of Variance Procedure Dependent Variable: TUB Source DF Model 1 Error 6 Corrected Total 7 R-Square 0.039497 Source DF PERL 1


Mean Square 6.12500000 24.82500000

F Value 0.25

Pr > F 0.6371


TUB Mean 10.97500000 F Value Pr > F 0.25 0.6371

Analysis of Variance Procedure Level of -------------TUB -------------TUB-----------TUB------------------------PERL N Mean SD AV 4 11.8500000 6.77864293 AVY 4 10.1000000 1.92353841 Analysis of Variance Procedure Duncan's Multiple Multiple Range Test for variable: TUB NOTE: This test controls the type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha= 0.05 df= 6 MSE= 24.825 Number of Means 2 Critical Range 8.621 Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N PERL A 11.850 4 AV A 10.100 4 AVY

54

Lampiran 9. Analisis Statistik Regresi Konsumsi Pakan KONSUMSI PAKAN Correlations: Av, Minggu Pearson correlation of Av and Minggu = 0.010 P-Value = 0.944 Regression Analysis: Av versus Minggu The regression equation is Av = 72.1 + 0.025 Minggu Predictor Coef SE Coef Constant 72.077 2.558 Minggu 0.0247 0.3476 S = 8.31343 R-Sq = 0.0% Analysis of Variance Source DF SS Regression 1 0.35 Residual Error 46 3179.20 Total 47 3179.55

T P 28.17 0.000 0.07 0.944 R-Sq(adj) = 0.0%

MS 0.35 69.11

F 0.01

P 0.944

Unusual Observations Obs Minggu Av Fit SE Fit Residual St Resid 1 1.0 55.90 72.10 2.26 -16.20 -2.02R 28 7.0 55.50 72.25 1.21 -16.75 -2.04R R denotes an observation with a large standardized residual. Durbin-Watson statistic = 2.09793 Normplot of Residuals for Av

Residuals vs Fits for Av

Normal Probability Plot of the Residuals

Residuals Versus the Fitted Values

(response is Av)

(response is Av)

99

10 95

5

90

70

Residual

Percent

80 60 50 40 30

0 -5 -10

20 10

-15

5

-20

1

-20

-10

0 Residual

10

20

72.10

72.15

72.20

72.25 Fitted Value

72.30

72.35

72.40

55

KONSUMSI PAKAN Correlations: Avy, Minggu Pearson correlation of Avy and Minggu = -0.214 P-Value = 0.145 Regression Analysis: Avy versus Minggu The regression equation is Avy = 77.0 - 0.551 Minggu Predictor Coef SE Coef T P Constant 76.979 2.737 28.13 0.000 Minggu -0.5512 0.3719 -1.48 0.145 S = 8.89408 R-Sq = 4.6% R-Sq(adj) = 2.5% Analysis of Variance Source DF SS Regression 1 173.80 Residual Error 46 3638.82 Total 47 3812.62

MS 173.80 79.10

F 2.20

P 0.145

Unusual Observations Obs Minggu Avy Fit SE Fit Residual St Resid 21 6.0 53.60 73.67 1.30 -20.07 -2.28R 24 6.0 55.70 73.67 1.30 -17.97 -2.04R R denotes an observation with a large standardized residual. Durbin-Watson statistic = 1.92901 Normplot of Residuals for Avy

Residuals vs Fits for Avy


Residuals Versus the Fitted Values

(response is Avy)

(response is Avy)

99

15

95

10

90

5 70

Residual

Percent

80 60 50 40 30

0 -5 -10

20 10

-15

5

-20 1

-20

-10

0 Residual

10

20

70

71

72

73 74 Fitted Value

75

76

77

56

Lampiran 10. Analisis Statistik Regresi Bobot Badan BOBOT BADAN Correlations: Av, Minggu Pearson correlation of Av and Minggu = 0.802 P-Value = 0.000 Regression Analysis: Av versus Minggu The regression equation is Av = 136 + 6.03 Minggu Predictor Coef SE Coef Constant 136.213 4.496 Minggu 6.0298 0.6358 S = 17.1540 R-Sq = 64.3% Analysis of Variance Source DF SS Regression 1 26469 Residual Error 50 14713 Total 51 41182

T P 30.30 0.000 9.48 0.000 R-Sq(adj) = 63.6%

MS 26469 294

F 89.95

P 0.000

Unusual Observations Obs Minggu Av Fit SE Fit Residual St Resid 46 11.0 238.80 202.54 3.97 36.26 2.17R 51 12.0 175.00 208.57 4.50 -33.57 -2.03R R denotes an observation with a large standardized residual. Durbin-Watson statistic = 2.85834 Normplot of Residuals for Av

Residuals vs Fits for Av Residuals Versus the Fitted Values


(response is Av)

(response is Av) 40

99

30

95 90

20

70

Residual

Percent

80 60 50 40 30

10 0 -10

20

-20 10

-30

5

-40

1

-40

-30

-20

-10

0 Residual

10

20

30

40

130

140

150

160

170 180 Fitted Value

190

200

210

57

BOBOT BADAN Correlations: Avy, Minggu Pearson correlation of Avy and Minggu = 0.804 P-Value = 0.000 Regression Analysis: Avy versus Minggu The regression equation is Avy = 123 + 6.88 Minggu Predictor Coef SE Coef Constant 123.103 5.092 Minggu 6.8754 0.7201 S = 19.4289 R-Sq = 64.6% Analysis of Variance Source DF SS Regression 1 34414 Residual Error 50 18874 Total 51 53288

T P 24.18 0.000 9.55 0.000 R-Sq(adj) = 63.9%

MS 34414 377

F 91.17

P 0.000

Unusual Observations Obs Minggu Avy Fit SE Fit Residual St Resid 47 11.0 239.40 198.73 4.50 40.67 2.15R 52 12.0 166.00 205.61 5.09 -39.61 -2.11R R denotes an observation with a large standardized residual. Durbin-Watson statistic = 2.36880

Normplot of Residuals for Avy

Residuals vs Fits for Avy Residuals Versus the Fitted Values


(response is Avy)

(response is Avy) 50

99

40 90

30

80

20

70

Residual

Percent

95

60 50 40 30

10 0 -10

20

-20

10

-30

5

-40 1

-50

-25

0 Residual

25

50

120

130

140

150

160 170 Fitted Value

180

190

200

210

58

Lampiran 11. Grafik regresi konsumsi pakan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu. 90.00

80.00

70.00

y pakan Av = 0.0247x + 72.077

y pakan AvY = -0.5512x + 76.979

R 2 = 0.0001

R2 = 0.0456

Konsumsi Pakan (g)

60.00

50.00

40.00

30.00

20.00

10.00

0.00 0

2

4

6

8

10

12

14

Minggu pakan Av

pakan Avy

Linear (pakan Av)

Linear (pakan Avy)

Lampiran 12. Grafik regresi bobot badan tikus pada pemberian 27% A.villosa (Av) dan 27% A.villosa + Yeast (AvY) selama 12 minggu. 300.00

250.00

Bobot Badan (g)

200.00

y BB Av = 6,0298x + 136,21 y BB AvY = 6,8754x + 123,1

R2 = 0,6427

R2 = 0,6458 150.00

100.00

50.00

0.00 0

2

4

6

8

10

Minggu BB Av

BB Avy

Linear (BB Av)

Linear (BB Avy)

12

14

PENGARUH PENAMBAHAN YEAST PADA PEMBERIAN LAMTORO MERAH (Acacia villosa) TERHADAP HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS (Rattus rattus) DEWI HIDAYATI

Recommend Documents