Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Obsah pĜednášky statická filtrace – základní pojmy dynamická filtrace – základní pojmy filtrace bunČk diafiltrace roztoku vysokomolekulárního produktu centrifugace
Down-stream procesy v biochemické výrobČ
pĜednáška obsahuje pĜHGHYãtPWHFKQRORJLHSRXåtYDQp ve firmČ Contipro Ing. Jaroslav Pavlík CPN spol. CPN, l s r.o. oddČlení poloprovozu
2
biomasa [ ferm. médium
Inaktivace bunČk QHåiGRXFtQiUĤVWELRPDV\PLPRIHUPHQWRU SURGXNWY\UREHQêSĜLVWDQGDUGQtFKSRGPtQNiFK VQD]ãtþištČQt
produkt extracelulární dalšímu zpracování podléhá fermentaþní médium
]PČQDI\]LNiOQČFKHPLFNêFKSDUDPHWUĤ
3
4
biomasa [ ferm. médium
biomasa [ ferm. médium produkt extracelulární dalšímu zpracování podléhá fermentaþní médium
produkt intracelulární dalšímu zpracování podléhá biomasa
stĜLåQp napČtí
nezbytná dezintegrace bunČk … specializovaná pĜednáška 6
5
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
DFF
Filtrace
filtrace za konstantního tlaku
2 základní typy uspoĜádání: nátok
tl k tlak
statická filtrace = filtrace typu „dead-end“ DFF (direct flow filtration)
prĤtok filtrátu
filtrace s konstantním prĤtokem
dynamická filtrace TFF (tangential flow filtration) filtrát
7
tlak
prĤtok filtrátu
8
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
DFF
TFF
doporuþXMHVHWHKG\NG\åSRåDGRYDQiVORåND]ĤVWiYi YHILOWUiWX ILOW ILOWUDFHEXQČk E Čk RGVWUDĖRYiQtSHYQêFKQHþLVWRW sterLOL]DþQt W LOL þ t ILOWUDFH ILOW
prĤtok permeátu
permeát
'p na membránČ
nátok
retentát
permeát át
9
10
Filtrace bunČk
TFF SRXåLWt ]DNRQFHQWURYiYiQtSHYQêFKþiVWLF GLDILOWUDFH ]DKXãĢRYiQtþLVWpKRUR]WRNX
hloubková filtrace (membrána dodaná od výrobce) filtry ve formČ desek a modulĤ
filtraþní média: perlit, celulózová vlákna, diatomická hlinka, syntetické polymery…
11
12
Filtrace bunČk
Filtrace bunČk hloubková filtrace þástice se zachycují pĜi prĤchodu pĜes 3D strukturu
hloubková filtrace (s naplavenou filtraþní membránou) PRåQRVWQDSODYHQtÄSUHFRDWLQJX³YUHF\NOX smísení filtrovaného média s filtraþním materiálem
nejdĜív hrubá filtrace (10 – 20 Pm) v dalších krocích jemnČjší (1 Pm) SUHFRDWLQJGLDWRPLWSHUOLWFHOXOy]D« 14
13
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Filtrace bunČk
Filtrace bunČk hloubková filtrace (s naplavenou filtraþní membránou) PRåQRVWQDSODYHQtÄSUHFRDWLQJX³YUHF\NOX smísení filtrovaného média s filtraþním materiálem
SUHFRDWLQJGLDWRPLWSHUOLWFHOXOy]D«
hloubková filtrace (s naplavenou filtraþní membránou) filtrace filtrovaného média s filtraþním materiálem vhodné v pĜípadČ lepivého produktu
filtraþní materiál stejný jako u precoatingu 15
16
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Filtrace bunČk
Filtrace bunČk
hloubková filtrace (s naplavenou filtraþní membránou) filtrace filtrovaného média s filtraþním materiálem
17
hloubková filtrace (s naplavenou filtraþní membránou) filtrace filtrovaného média s filtraþním materiálem
po filtraci následuje zpČtná regenerace filtraþního elementu 18
Filtrace bunČk
Filtrace bunČk výhody hloubkové filtrace: PpGLDVYHONêPPQRåVWYtPELRPDV\ Y\VRNRYLVNy]Qt PpGLD
výhody náplavové filtrace: levnČjší oproti modulĤm ménČ pracné oproti deskovému filtru
nevýhody: vysoké náklady (moduly) pracné (deskové filtry)
nevýhody: prašné relativnČVORåLWp]DĜt]HQtQiGUåHþerpadla…) ]DQiSODYRYRXILOWUDFtWpPČĜYåG\QiVOHGXMHSRMLVWQi filtrace 19
20
Filtrace bunČk
Filtrace bunČk membránové filtry nejþastČji ve formČ filtraþních svíþek GHNODURYDQiDEVROXWQt]iGUåþástic porozity 0,2 Pm – 1,2 Pm materiál: PES, PVDF, PP, PTFE, estery celulózy
membránové filtry nejþastČji ve formČ filtraþních svíþek GHNODURYDQiDEVROXWQt]iGUåþástic porozity 0,2 Pm – 1,2 Pm materiál: PES, PVDF, PP, PTFE, estery celulózy
pojistná ji t á filt filtrace ILOWUDFHPpGLDVPDOêPPQRåVWYtPSHYQpIi]H
plnČ l Č validovatelné lid t l é Ĝešení Ĝ š í
22
21
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Cross-flow procesy
TFF velké þástice jsou zakoncentrovávány v retentátu, zatímco malé procházejí skrz membránu
proces
tl k tlak
porozita it
pĜíklad ĜtNO G pouåLWt åLWt ]DFK\FHQp VORåN\
mikrofiltrace
< 2 bar
> 0,1 0 1 Pm
mikroorganismy viry mikroorganismy,
ultrafiltrace
1 – 10 bar
0,01 – 0,1 P Pm
rozpustné makromolekuly
nanofiltrace
5 – 50 bar
0,001 – 0,01 Pm
vícemocné soli
reverzní osmóza
10 – 150 bar
0,0001 – 0,001 Pm
jednomocné soli
permeát
nátok
retentát
permeát 23
24
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Diafiltrace
Diafiltrace
Qt]NRPROHNXOiUQtVORåN\SURFKi]HMtVNU]PHPEUiQX Y\VRNRPROHNXOiUQtSURGXNWMH]DGUåRYiQYUHWHQWiWX
Qt]NRPROHNXOiUQtVORåN\SURFKi]HMtVNU]PHPEUiQX Y\VRNRPROHNXOiUQtSURGXNWMH]DGUåRYiQYUHWHQWiWX UR]S
retentát
8)PRGXO
retentát
8)PRGXO SHUPHiW
SHUPHiW 25
26
Volba membrány
Diafiltrace produkt neobsahuje témČĜåiGQpQt]NRPROHNXOiUQt neþistoty M nutné je W p optimali]RYDt WL OL WG dobu E GL diafiltrace ILOW &)8 (CFU, niNOady… iNO G UR]S
UHWHQWiW
UF modul SHUPHiW
materiál membrány: keramické Al2O3, TiO2 kompozitní membrány polymerní polysulfon, polyethersulfon regenerovaná celulóza fluoropolymery kompozitní membrány
N 27
28
Polymerní membrány
Keramické membrány
výhody: QLåãtSRĜizovací náklady ãLURNiãNiODSURGXNWĤ
výhody: teplotní odolnost chemická stabilita mechanická odolnost GHOãtåLYRWQRVW
30
29
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
UspoĜádání UF membrán
MWCO dĤOHåLWêSDUDPHWUPROHFXODU ZHLJKW FXWRII OiWN\RWpWR0:]ĤVWiYiYUHWHQWiWX YROtVHPLQLPiOQČ[PHQãt0:&2 KRGQRWDXGDQiYêUREFHPMHMHQRULHQWDþQt VWDQRYHQDQDUHIHUHQþQtSRO\PHU3(* VNXWHþQp0:&2RYOLYĖXMt WYDUPROHNXO\VWXSHĖK\GUDWDFHSRODULWDQiERM MHGQRWND'D JPRO UR]VDKQDEt]HQtFK0:&2'D ± N'D
3 základní ákl d í ttypy vhodné h d é pro diafiltraci di filt i spirálnČ vinuté moduly
32
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
UspoĜádání UF membrán
UspoĜádání UF membrán
3 základní ákl d í ttypy vhodné h d é pro diafiltraci di filt i spirálnČ vinuté moduly výhody: nízké poĜizovací náklady jednoduchá výmČna modulu jednoduchá konstrukce housingu modulu QLåãtWODNRYi]WUiWDQDPRGXOX
3 základní ákl d í ttypy vhodné h d é pro diafiltraci di filt i deskové membrány (flat sheet)
33
34
UspoĜádání UF membrán
UspoĜádání UF membrán
3 základní ákl d í ttypy vhodné h d é pro diafiltraci di filt i ultrafiltraþní kazety
3 základní ákl d í ttypy vhodné h d é pro diafiltraci di filt i deskové membrány (flat sheet) výhody: Qt]Ni]iGUå zpracovávání velmi viskózních roztokĤ lepší þistitelnost od pevných þástic nevýhody: velmi pracná výmČna membrán
35
36
Další vlastnosti membrán
UspoĜádání UF membrán
další d lší vlastnosti, l t ti kt které é ovlivní li í volbu lb vhodné h d é membrány: bá selektivita membrány
3 základní ákl d í ttypy vhodné h d é pro diafiltraci di filt i ultrafiltraþní kazety výhody: jednoduchá výmČna modulu nízké ztráty produktu Qt]Ni]iGUå vyšší teplotní a chemická odolnost
membránová adsorpce dĤOHåLWiYSĜípadČ zpracovávání látek s vysokým pomČrem cena/gram (enzymy, syntetické peptidy) provedení membrány tl šĢk distanþní tloušĢka di t þ í mĜtåe Ĝtå (spacer) ) viskozita, memb. plocha, cross-flow… prĤmyslový x sanitární design 38
37
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Hnací síla
DĤOHåLWpSDUDPHWU\8) SURRSWLPiOntIunNþQRVWXOWUDILOWUXMHQH]E\WnpYKRGnČ WL iO t I Nþ W OW ILOW M E W p K G Č ]YROLWW\WRSDUDPHWU\
h hnací í síla íl ultrafiltrace: lt filt TMP (trans-membrane (t b pressure)) rozp.
retentát t tát
KQDFtVtODSURFHVXWODNRYpSRPČU\QDPHPEUiQČ) XUþuMHSUĤWRNSHUPHiWXYêNRQPHPEUiQ\) þ M ĤW N iW êN Ei NĜtåRYêWRNFURVVIORZ) NĜtå êW N IO ) ]DEUDĖXMHU\FKOpPX]DQiãHQtPHPEUiQ\
UF modul permeát
39
40
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Hnací síla
Hnací síla
h hnací í síla íl ultrafiltrace: lt filt TMP (trans-membrane (t b pressure)) rozp.
h hnací í síla íl ultrafiltrace: lt filt TMP (trans-membrane (t b pressure)) 3)HHG 35HWHQWDWH 703 33HUPHDWH
retentát t tát
UF modul permeát
41
42
Hnací síla
Hnací síla h hnací í síla íl ultrafiltrace: lt filt TMP (trans-membrane (t b pressure)) QiWRN
UHWHQWiW
7ODN
þí vyšší þím šší TMP, TMP tím tí vČtší Čtší vzniká iká gelová l á vrstva t QiWRN
UHWHQWiW
7ODN 3UĤPČUQêWODN
3UĤPČUQêWODN
*HORYi YUVWYD PHPEU HPEUi iQD
PHPEUiQD
,QWHQ]LWDWRNXSHUPHiWXSURGXNW
,QWHQ]LWD WRNX SHUPHiWX YRGD ,QWHQ]LWDWRNXSHUPHiWXYRGD 43
44
Cross-flow
Cross-flow vhodná h d áh hodnota d t cross-flow fl zamezíí tvorbČ t bČ gelové l é vrstvy t
nátok
vhodná h d áh hodnota d t cross-flow fl zamezíí tvorbČ t bČ gelové l é vrstvy t
nátok
retentát
retentát
permeát
permeát
s rostoucím cross-flow roste tlaková ztráta na modulu nesmí být pĜekroþen maximální rozdíl tlakĤ na membránČ udávaný výrobcem 46
45
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Další parametry ovlivĖující UF
Cross-flow vhodná h d áh hodnota d t cross-flow fl zamezíí tvorbČ t bČ gelové l é vrstvy t
nátok
retentát
permeát
Y\ããtFURVVIORZ]QDPHQiY\ããtSRåDGDYN\QDþerpadlo velká energetická nároþnost 47
vlastnosti l t ti filt filtrovaného éh materiálu: t iál viskozita výkon membrány klesá s rostoucí viskozitou roste s rostoucí koncentrací produktu klesá s teplotou iontová síla v prĤbČhu diafiltrace klesá mĤåHYêUD]QČ ovlivnit tvar molekul, a tím jejich chování h á í
48
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
ZahuštČní
ZahuštČní
pĜHGVSUHMRYêPVXãHQtPVUiåHQtPMHYČtšinou vhodné produkt zahustit na vyšší koncentraci rozp.
pĜHGVSUHMRYêPVXãHQtPVUiåHQtPMHYČtšinou vhodné produkt zahustit na vyšší koncentraci
retentát
retentát
UF modul
UF modul permeát
permeát 49
50
Další zpracování
ZahuštČní pĜHGVSUHMRYêPVXãHQtPVUiåHQtPMHYČtšinou vhodné produkt zahustit na vyšší koncentraci
rozprašovací (sprejová) sušárna … viz další pĜednáška VUDåHQtRUJDQLFNêPUR]SRXãWČGOHP HWKDQROLVRSURSDQRO
retentát
UF modul permeát 51
52
Zpracování biomasy
Další zpracování
produkt je intracelulární
nové rozpuštČní a pĜHVUiåHQt usušení v jiném druhu sušárny
je nutné oddČlit buĖky z média buĖky nesmí uvíznout v hloubkovém filtru nebo být smíchány í há s filtraþním filt þ í médiem édi
54
53
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Zpracování biomasy
Zpracování biomasy cross-flow mikrofiltrace analogie se zahušĢováním pomocí UF PXVtWRXPRåQLW]SUDFRYiYDQêSURGXNWDEXQČþná kultura
filtraþní centrifugace f ferm.médium édi
retentát
médium zbavené biomasy
0)PRGXO SHUPHiW IHUPPpGLXP
55
56
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Zpracování biomasy
Zpracování biomasy
v pĜípadČ viskózního þi lepivého produktu se plachetka velmi rychle zalepí f ferm.médium édi
sedimentaþní centrifugace s kontinuálním odtahem média pomocí tzv. Pitotovy t bi trubice ferm.médium
médium zbavené biomasy y
médium zbavené biomasy 57
58
Další zpracování
Dezintegrace biomasy sediment se pĜevede do jiné nádoby, kde se biomasa dezintegruje pĜednáška Ĝ d ášk zítra… ít
59
dezintegrovaná biomasa se: zfiltruje
zdiafiltruje Y\VUiåtSURP\MH usuší
60
Další zpracování
Další zpracování
dezintegrovaná biomasa se: odstĜedí ponechá se sediment sediment se promyje a usuší
dezintegrovaná biomasa se: promyje rozpustí a zfiltruje Y\VUiåt usuší
62
61
Autor prezentace: Ing. Jaroslav Pavlík
Sušení druhá þást pĜednášky…
DČkuji za pozornost
63