„Praktické aspekty ve výuce analytické chemie“ Reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/15.0283
1
VALIDACE V ANALYTICKÉ CHEMII Ing. Lenka Jarmarová UNIVIT s.r.o. Uničov
2
Definice validace Validace = ověřování (prověřování)
Validace je proces, jehož cílem je demonstrovat a dokumentovat kvalitu analytické metody stanovením definovaných kritérií a měřením hodnot těchto kritérií.
3
Definice podle ČSN EN ISO 9000 : 2006 Validace = potvrzení prostřednictvím poskytnutí objektivních důkazů, že požadavky na specifické zamýšlené použití nebo na specifickou aplikaci byly splněny.
4
K čemu vlastně validace je? Slouží ke statistickému prokázání spolehlivosti celé analytické metody včetně obslužného analytického systému, kdy proces získávání a zpracování experimentálních dat má významný vliv na konečný analytický výsledek.
5
Validace ve farmacii - proč validovat • Vyžadují to kontrolní orgány. • Zajistíme tak že vyráběná léčiva splňují požadavky jakosti, bezpečnosti a účinnosti. • Ochrana konečného uživatele. • Ochrana vlastní firmy. 6
Kdy je třeba provést validaci? • Při zavedení nové metody. • Při převodu již validované metody (např. zavedení metody stanovení publikované v Českém lékopise). • Při kontrole způsobilosti systému. • Při změně jakéhokoliv kritéria definovaného ve stávající validaci – revalidace systému. 7
Druhy validací
• Interní (vnitřní) validace • Externí (vnější) validace
8
Druhy validací Interní (vnitřní) validace Průzkumová, jejímž cílem je na omezeném počtu vzorků stanovit zda je zvolená analytická metoda vhodná a je možné provést plnou validaci. Validace při převodu metody Používá se při zavedení publikované validované analytické metody (např. publikované v ČL, nebo validované v jiné 9 laboratoři).
Druhy validací Externí (vnější) validace Zahrnuje interní validaci společně s validací metody srovnáním výsledků metody z více laboratoří (mezilaboratorní porovnávací zkoušky) a zahrnuje výpočet reprodukovatelnosti metody.
10
Jak postupovat při validaci • Nejprve je třeba vybrat vhodnou analytickou metodu. Zdlouhavý proces získávání informací (ČL, publikace, databáze). Testování a adaptabilita metody na daný vzorek, dané podmínky a jejich optimalizace. Interní validace (průzkumová, plná, validace při převodu metody) nebo externí validace. 11
Jak postupovat při validaci • Sestavení validačního protokolu.
Slouží jako analytický předpis k provedení validace, výsledkem je validační zpráva. Obsah validačního protokolu: o stručnou charakteristiku postupu (oblast použití metody, princip postupu, chemické reakce a interakce stanovované složky, rozmezí obsahů stanovované složky, princip měření a 12 jednotky)
Jak postupovat při validaci o roztoky, činidla a pomocné chemikálie (chemická čistota použitých chemikálií, jejich úprava a čištění, příprava rozpouštědel, činidel a pomocných chemikálií, stabilita a koncentrace) o validační parametry (které validační parametry mají být provedeny a jakým způsobem) 13
Jak postupovat při validaci o na základě validační zprávy vznik analytického předpisu obsahuje důležité informace k provedení analytické zkoušky (princip, použité chemikálie, pomůcky zařízení, postup přípravy roztoků, vzorků a způsob vyhodnocení výsledků)
14
VLASTNÍ VALIDACE
15
Vlastní validace Výběr validačních parametrů Základní kritérium jak získat dostatek údajů, aby bylo možné posoudit, zda jsou metoda či systém vhodné pro zamýšlený účel.
16
Obsah validační zprávy
• Úvod • Princip • Přístroje, zařízení a ostatní vybavení • Použité chemikálie, standardy (interní standard a jeho navázání na referenční materiál) • Příprava roztoků a vzorků • Podmínky měření • Vyhodnocení výsledků 17
Obsah validační zprávy • Test způsobilosti systému • Linearita a rozsah • Mez stanovitelnosti, mez detekce • Selektivita • Preciznost Opakovatelnost Reprodukovatelnost Mezilehlá preciznost • Správnost, výtěžnost • Robustnost
18
Úvod • Specifikovat co bude validováno. • Na jaké koncentrační úrovni analytu ve vzorku. • Jakou metodou (např. HPLC, AAS, …..).
19
Princip Co je principem stanovení, např. nějaká reakce, derivatizace, …… .
20
Přístroje, zařízení a ostatní vybavení • Přístroje a zařízení (třepačka, váhy, titrátor, …….). • Nádobí, filtry, pomůcky, … . U kritických parametrů je dobré přesně specifikovat použitý typ pomůcky (př. zkreslení výsledků měření vyloučením nežádoucí látky do vzorku) 21
Použité chemikálie, standardy • Chemikálie (dané čistoty) • Standardy Přesná specifikace. Standardů je celá řada, problémem je farmacie – standardy EDQM (European Directorate for the Quality of Medicines). Farmacie – vysoká cena standardů (EDQM).
22
Použité chemikálie, standardy • Standardy Externí Má deklarovaný obsah a je dodáván s certifikátem tzv. CRS (certifikovaný referenční standard). Interní Vzniká navázáním na externí CRS.
23
Použité chemikálie, standardy Externí standardy standardy Definice podle ISO/IEC 30:1992 Referenční standard (RM) Materiál nebo látka, jejíž jedna nebo více hodnot vlastností je dostatečně homogenní a dobře stanovená, aby mohl(a) být použit(a) ke kalibraci přístroje, posouzení měřicí metody nebo k přiřazení hodnot materiálům.
Certifikovaný referenční materiál (CRM)
Referenční materiál doprovázený certifikátem, jehož jedna nebo více vlastností jsou certifikovány postupem, který vytváří návaznost na správnou realizaci jednotky, v níž jsou hodnoty vlastností vyjádřeny, a jehož každá certifikovaná hodnota je doprovázena nejistotou na 24 uvedené hladině spolehlivosti.
Použité chemikálie, standardy Navázání interního standardu na CRS Tab. 1; Referenční standard THF (EDQM) %
navážka (mg/50ml)
koncentrace
průměr A (mV/s)
PŘÍLOHA
st THF (EDQM)-1
99,1
24,2
0,4840
1250,847
5-7
st THF (EDQM)-2
99,1
24,2
0,4840
1239,887
8-10
Tab. 2; Interní standard THF obsah THF (g/kg) navážka léčivá (mg/50ml látka THF OB)
koncentrace (mg/ml)
průměr A (mV/s)
průměr průměr přepočítáno přepočítáno obsahu THF obsahu THF na standard na standard (g/kg) (%) 1 2
PŘÍLOHA
THF-1
24,0
0,4800
1239,710
990,36
999,12
994,74
99,47
11-13
THF-2
24,0
0,4800
1259,797
1006,41
1015,3
1010,86
101,09
14-16
THF-3
24,0
0,4800
1248,445
997,34
1006,16
1001,75
100,17
17-19
THF-4
24,0
0,4800
1241,476
991,77
1000,54
996,16
99,62
20-22
THF-5
24,0
0,4800
1241,419
991,73
1000,49
996,11
99,61
23-25
THF-6
24,0
0,4800
1256,925
1004,11
1012,99
1008,55
100,86
26-28
průměr
996,95
1005,77
1001,36
100,14
25
RSD (%)
0,69
0,69
0,69
0,69
Příprava roztoků a vzorků Podrobný popis přípravy jak roztoků, tak vzorků.
26
Podmínky měření Přesná specifikace parametrů Typ detektoru, vlnová délka, teplota, HPLC (průtok, vlnová délka, objem nástřiku, doba analýzy, kolona, izokratická X gradientová eluce, ….)
27
Vyhodnocení výsledků • V jakých jednotkách uvádět výsledek. • Jak se dospělo k výsledku (početní operace).
28
Test způsobilosti systému Ověřuje se, zda systém pracuje správně a spolehlivě. •Hodnotícím kritériem je relativní směrodatná odchylka (RSD) výsledků nejméně 6 opakovaných měření.
29
Test způsobilosti systému Hodnocení testu způsobilosti u HPLC - RSD plochy píku 6 opakovaných nástřiků stejného vzorku - kapacitní poměr - účinnost kolony - rozlišení píků hlavní látky a nečistoty - asymetrie píku (tailing faktor).
30
Test způsobilosti systému Test způsobilosti TL-P:
31
Test způsobilosti tylosin-fosfát
32
Test způsobilosti systému Nadefinované parametry pro validaci: • Rozlišení píku TL-P vzhledem k předchozímu píku nečistoty R1,2 ≥ 1,5. • Asymetrie píku (tailing faktor) 0,8 ≤ ta ≤ 1,4. • Kapacitní poměr k ≥ 1,5. • Relativní směrodatná odchylka plochy píku TL-P šesti opakovaných nástřiků RSD ≤ 2,0 %. • Účinnost kolony pro TL-P: N ≥3 000.
33
Test způsobilosti systému Stanovení amoxicilinu – test pH MF CF = 0,9 ml/min; λ = 230 nm; fosfátový pufr pH 5; MF ACTN/fosf. pufr (4/96)
tr = 4,0 min ta = 0,89 (0,8 ≤ ta ≤ 1,4) k = 2,19 (k ≥ 1,5) N = 8 827 R1,2 = 1,2 (R1,2 ≥ 1,5)
34
Test způsobilosti systému Stanovení amoxicilinu – test pH MF CF = 0,9 ml/min; λ = 230 nm; fosfátový pufr pH 3,6; MF ACTN/fosf. pufr (4/96)
t = 5,5 min tr r= 5,5 min t = 1,40 (0,8 ≤ ta ≤ 1,4) taa= 1,40 (0,8 ≤ ta ≤ 1,4) k = 4,51 (k ≥ 1,5) k = 4,51 (k ≥ 1,5) N = 26 280 N = 26 280 R1,2 = 3,9 (R1,2 ≥ 1,5) R1,2 = 3,9 (R1,2 ≥ 1,5)
35
Test způsobilosti systému Stanovení amoxicilinu – test pH MF CF = 0,9 ml/min; λ = 230 nm; fosfátový pufr pH 6,5; MF ACTN/fosf. pufr (4/96)
tr = 5,0 min ta = 1,40 (0,8 ≤ ta ≤ 1,4) k = 4,01 (k ≥ 1,5) N = 25 892 R1,2 = 7,0 (R1,2 ≥ 1,5)
36
Test způsobilosti systému Stanovení AMOX– změna poměru složek v MF CF = 1,0 ml/min; λ = 230 nm; fosfátový pufr pH 6,5; MF ACTN/fosf. pufr (1/99)
tr = 8,3 min ta = 1,12 (0,8 ≤ ta ≤ 1,4) k = 7,29 (k ≥ 1,5) N = 32 467 R1,2 = 11,85 (R1,2 ≥ 1,5)
37
Test způsobilosti systému Stanovení AMOX– změna poměru složek v MF CF = 1,0 ml/min; λ = 230 nm; fosfátový pufr pH 6,5; MF ACTN/fosf. pufr (2/98)
tr = 6,0 min ta = 1,19 (0,8 ≤ ta ≤ 1,4) k = 4,98 (k ≥ 1,5) N = 29 738 R1,2 = 8,86 (R1,2 ≥ 1,5)
38
Test způsobilosti systému Stanovení AMOX– změna poměru složek v MF CF = 1,0 ml/min; λ = 230 nm; fosfátový pufr pH 6,5; MF ACTN/fosf. pufr (4/96)
tr = 5,8 min ta = 1,32 (0,8 ≤ ta ≤ 1,4) k = 4,76 (k ≥ 1,5) N = 26 437 R1,2 = 0,59 (R1,2 ≥ 1,5)
39
Linearita a rozsah • Rozsah V praxi má kalibrační závislost obecně sigmoidní charakter, přičemž na počátku (v blízkosti 0) a při vysokých koncentracích limituje k rovnoběžce s osou koncentrace → volba pracovního lineárního rozsahu 40
Linearita a rozsah • Rozsah
41
Linearita a rozsah Zjištění rozsahu • Změřit závislost analytického signálu na koncentraci v nejširším možném intervalu koncentrací včetně slepého pokusu. • Grafické zobrazení závislosti. • Na základě subjektivní úvahy zvolíme předpokládanou lineární oblast. 42
Linearita a rozsah • Ve zvolené lineární oblasti metodu znovu experimentálně kalibrujeme, přičemž uvažujeme vliv matrice a kalibrujeme při optimální kombinaci významných faktorů. • Počet kalibračních vzorků je minimálně 5.
43
Linearita a rozsah • Linearita Definice: Linearita je definována jako schopnost metody poskytnout v daném rozsahu přijatelnou lineární korelaci mezi výsledky a koncentrací analytu ve vzorku. Linearita je chápána jako přímková závislost jedné veličiny (signál) na druhé nezávisle proměnné (koncentraci).
44
Linearita a rozsah • Zajištění lineární části kalibrační závislosti se provádí s využitím regresní diagnostiky. • Po vyhodnocení získáme přímkový regresní model y = a + bx • Předpoklad linearity je splněn, když korelační koeficient závislosti signálu na koncentraci je R ≥ 0,99. 45
Linearita a rozsah Je třeba zařadit (vypustit) linearitu do validačního programu? Pokud je správnost (accuracy, výtěžnost) pro všechny hladiny „vyhovující“ je metoda zcela lineární. Záleží na posouzení jednotlivých autorit. 46
Mez stanovitelnosti, mez detekce • Mez detekce (Limit of Detection = LOD) Mez detekce odpovídá koncentraci, pro kterou je analytický signál statisticky významně odlišný od šumu. V separačních metodách se mez detekce vyjadřuje jako trojnásobek šumu základní linie. 47
Mez stanovitelnosti, mez detekce • Mez stanovitelnosti (Limit of Quantification = LOQ) Odpovídá koncentraci, při které je přesnost stanovení taková, že dovoluje kvantitativní vyhodnocení. V separačních metodách se mez stanovitelnosti vyjadřuje jako desetinásobek šumu základní linie. 48
Mez stanovitelnosti, mez detekce V obou případech LOD a LOQ je nutné uvést způsob výpočtu (jinak hodnoty LOD a LOQ ztrácí smysl). Farmacie – využití převážně separačních metod → pro výpočet LOD a LOQ se používá kalibrační přímky nebo šumu.
49
Mez stanovitelnosti, mez detekce Pro měření šumu se u separačních metod používá slepého vzorku (čisté matrice). Mez stanovitelnosti je součástí linearity. U reálných matric vzorků dochází ke snížení jak LOQ, tak LOD.
50
51
Mez stanovitelnosti, mez detekce Příklad matrice krmné směsi - stanovení obsahu THF (tR = 5,4 min)
52
Mez stanovitelnosti, mez detekce Příklad matrice krmné směsi - stanovení obsahu THF (tR = 5,4 min)
53
Selektivita Definice Selektivita (ekvivalentní termín pro specificitu) je definována jako schopnost metody poskytnout kvantitativní i kvalitativní složení vzorku i v přítomnosti interferujících látek (matrice)
54
Selektivita • Selektivita se mění s obsahem analytu (množstvím, koncentrací) a někdy i v závislosti na nastavení parametru metody (souvislost s robustností). • Do jisté míry je selektivita závislá na instrumentální technice → pro každý použitý systém je třeba vypracovat individuální plán prokazování selektivity. 55
Selektivita Testování selektivity Porovnává se: • vzorek matrice, • vzorek bez přítomnosti matrice a analytu (rozpouštědlo), • kalibrační standard o relevantní koncentraci. 56
Selektivita Matrice (stanovení TL-P; t = 10,4 min) R
57
Selektivita Extrakční roztok (stanovení TL-P; t = 10,4 min) R
58
Selektivita Kalibrační standard TL-P (stanovení TL-P; t = 10,4 min) R
59
Selektivita Mobilní fáze (stanovení TL-P; t = 10,4 min) R
60
Selektivita Mobilní fáze + extrakční roztok + standard TL-P
61
Selektivita Projev interference - analytický signál neodpovídá stanovovanému analytu, ale tento signál je superponován signálem rušivé složky (čistota signálu). Prokazování selektivity Stanoví se velikost a rozptyl signálů pozadí (matrice i rozpouštědla) a jejich významnost vzhledem k výsledku kalibračního standardu. 62
Selektivita Je-li velikost pozadí signálu pocházejícího z rozpouštědla nebo matrice statisticky významná je třeba ji odstranit.
63
Selektivita Zdroje interferencí • Z rozpouštědla
(kontaminace rozpouštědla, absorbance rozpouštědla při dané λ, nádobí atd.)
• Z matrice (Eliminace interference: předseparací vzorku, optimalizací extrakce, atd.)
64
Preciznost Definice Preciznost analytického postupu vyjadřuje těsnost shody (stupeň rozptylu) mezi řadou měření získanou z opakovaného vzorkování stejného homogenního vzorku za předepsaných podmínek.
65
Preciznost Preciznost měření je používána k definování opakovatelnosti měření, mezilehlé preciznosti měření a reprodukovatelnosti měření.
66
Preciznost Preciznost měření je zpravidla vyjádřena číselně mírami nepreciznosti, jako například směrodatnou odchylkou, rozptylem nebo variačním koeficientem za specifikovaných podmínek měření.
67
Preciznost - opakovatelnost Opakovatelnost metody je definována jako těsnost shody mezi navzájem nezávislými výsledky zkoušek získanými za podmínek opakovatelnosti.
68
Preciznost - opakovatelnost Podmínka opakovatelnosti měření zahrnuje: •stejný postup měření, •stejný obslužný personál, •stejný měřící systém (vybavení), •stejné pracovní podmínky a stejné místo, •stejnou laboratoř, •opakování v krátkém časovém úseku. 69
Preciznost - opakovatelnost
Opakovatelnost je vlastností metody, ne výsledku.
70
Preciznost - opakovatelnost Ukazatel opakovatelnosti r, je hodnota, pod níž bude s pravděpodobností 95 % ležet absolutní hodnota rozdílu dvou výsledků zkoušek provedených za podmínek opakovatelnosti. Mez opakovatelnosti se pak vypočítá jako 2,8 - násobek směrodatné odchylky výsledků. 71
Preciznost - opakovatelnost Směrodatná odchylka • Směrodatná odchylka platí pro danou koncentrační hladinu. • Musí být přesně specifikovaný pracovní postup (rozklad vzorku, ředění, rozpuštění, extrakce, instrumentální měření….) → v případě jakékoliv změny v pracovním postupu je nutná revalidace. • Dostatečný počet vzorků.
72
Preciznost - opakovatelnost
73
Preciznost - mezilehlá preciznost Podmínka mezilehlé preciznosti měření zahrnuje: •stejná metoda •stejná laboratoř •opakování v dlouhém časovém období (dlouhodobá opakovatelnost) 74
Preciznost - reprodukovatelnost Podmínka reprodukovatelnosti měření zahrnuje: •různá místa (laboratoře) •různé pracovníky •různý (nebo stejný) měřicí systém •stejný postup měření. Příklad: mezilaboratorní testy.
75
Preciznost - reprodukovatelnost Mez reprodukovatelnosti R je hodnota, pod níž bude s pravděpodobností 95 % ležet absolutní hodnota rozdílu dvou výsledků zkoušek provedených za podmínek reprodukovatelnosti. Mez reprodukovatelnosti se pak vypočítá jako 2,8 - násobek směrodatné odchylky výsledků. 76
Preciznost - reprodukovatelnost
77
Správnost (přesnost) Definice Správnost je definována jako těsnost shody získané hodnoty s jeho skutečnou přijatou referenční hodnotou. → statisticky významný rozdíl mezi získanou a skutečnou hodnotou.
78
Správnost (přesnost) Hodnotí se přítomnost či nepřítomnost náhodné soustavné složky chyby otestováním velikosti rozdílu nebo soustavnosti znaménka mezi hodnotu dáno a nalezeno srovnáním s referenčním materiálem.
79
Výtěžnost Definice Výtěžnost je podíl mezi množstvím analytu získaného analytickou metodou k přijaté referenční hodnotě. Je mírou účinnosti dané metody.
80
Výtěžnost Akceptační kriteria • Pozor na dostatečný (ne příliš velký) počet paralelních opakování k určení směrodatné odchylky pro danou koncentrační hladinu • Průměrná výtěžnost pro danou koncentrační hladinu se musí pohybovat mezi 95 % a 105 %.
81
Výtěžnost • Srovnávací vzorky musí pokrývat celý koncentrační obsah analytu a koncentrační hladina odpovídá většinou 50 % až 200 % nominální koncentrace analytu ve vzorku. • Obvykle se volí minimálně 3 koncentrační hladiny (lepší ale 5 koncentračních hladin).
82
Výtěžnost Příklad Tři koncentrační hladiny (75, 100, 125 %) obsahu THF pro přípravek UNI-TIAMULIN 45 % plv. a.u.v.
83
84
Robustnost Definice Schopnost metody poskytovat přijatelné výsledky měření i v případě, že dojde k malým odchylkám od měřicího postupu či složení vzorku. Udává její spolehlivost při běžném používání.
85
Robustnost Definice mírné odchylky (parametru)? Nebyla stanovena žádná kritéria – vychází se z nejistot měření nebo předpisů (např. Ph. Eur., JP, USP). Výsledek robustnosti •Informace jaké parametry metody jsou kritické a vyžadují kontrolu (pH, teplota, atd.). •Výsledkem může být interval parametrů metody, ve kterém metoda poskytuje nejmenší chyby měření. 86
Robustnost Stanovení robustnosti: matematicko-statistickým postupem se zjišťuje, jak je analytický signál závislý na malých změnách parametrů, charakterizujících analytický postup.
87
Robustnost Při ověřování robustnosti existují dva zásadní přístupy k tomuto problému: •Univariační (jednorozměrná) analýza dat •Multivariační (vícerozměrná) analýza dat
88
Robustnost • Univariační (jednorozměrná) analýza dat Mění se jeden parametr (faktor) v čase a ostatní parametry (faktory) zůstávají fixní a sleduje se jak ovlivní výsledek. Poté se experiment zopakuje s dalším parametrem – tzv. přístup OFAT (One Factor At Time). 89
Robustnost • Multivariační (vícerozměrná) analýza dat Změní se více proměnných v čase a sleduje se, jak ovlivní výsledek (časově méně náročné, dovoluje pozorovat jak se ovlivňují jednotlivé parametry ale některé efekty mohou zůstat skryty). 90
Robustnost Kdy provádět robustnost metody? • Nejpozději na počátku validace • Nejlépe na konci vývoje metody nebo v průběhu optimalizace metody
91
Validace Dále musí obsahovat: •Přílohy (grafy, výpočtové tabulky) •Certifikáty k referenčním a interním standardům
92
Instrumentání validace Celý systém měřidla respektive jednotlivé komponenty musí být zvalidovány.
93
Validace ve farmacii Řada komplikací
•Validace a identifikace nečistot Existují CRS kvality EDQM pro identifikaci. Buď obsahují pouze jednu látku, nebo jsou směsné.
94
Validace ve farmacii • Pro některé nečistoty je třeba změřit validační parametry, které se už stanovovaly u hlavní látky. (Linearita a rozsah, opakovatelnost, mezilehlá preciznost, reprodukovatelnost, správnost,…..). Časově náročné (například správnost by měla být hodnocena na vzorku spikovaném známým obsahem nečistoty a to na 3 koncentračních hladinách) 95
Validace ve farmacii • Pro stanovení některých validačních parametrů (linearita, LOD, LOQ, selektivita, preciznost) pro nečistoty je vhodná validace normalizační metodou Podmínka - všechny látky se musí separovat
96
Validace ve farmacii • Stabilita vzorků
Zjišťuje se vliv, doby extrakce, stání, teploty, světla, času Příklad stanovení chlortetracyklinu hydrochloridu (vliv světla a času).
97
Validace ve farmacii Stabilita chlortetracyklinu hydrochloridu
98
EVROPSKÝ LÉKOPIS
99
Evropský lékopis • Vydává ho Evropský direktorát pro jakost léčiv a péči o zdraví (European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare – EDQM), sídlem ve Štrasburku. • Za přípravu Ph. Eur. zodpovídá Evropská lékopisná komise.
100
Evropský lékopis • Obsahuje texty týkající se látek, pomocných látek a přípravků pro farmaceutické a chemické použití, zvířecího, humánního nebo rostlinného původu, homeopatických přípravků, antibiotik, lékových forem a balení.
101
Evropský lékopis • Lékopisné články se používají ve 37 členských státech. • Internetové stránky EDQM www.edqm.eu • Zabezpečuje zavádění a monitorování všech referenčních standardů potřebných pro lékopisné články. 102
Evropský lékopis Došlo k radikální změně farmaceutického trhu – globalizace trhu → probíhá harmonizace mezi třemi největšími světovými lékopisy (Evropským lékopise, Japonským lékopisem a Lékopisem Spojených států amerických)
103
Evropský lékopis Cíl Evropského lékopisu Podpora veřejného zdraví. Pro koho je Ph. Eur. určen • Oprávněné autority. • Pro ty, kteří se zabývají výrobou, distribucí a kontrolou jakosti léčivých přípravků nebo jejich složek. 104
ČESKÝ LÉKOPIS
105
Český lékopis Co je to ČL • Je základní farmaceutické dílo normativního charakteru s celostátní závazností, které přispívá k zajištění bezpečných, účinných a jakostních léčiv. • Závaznost používání ČL je dána zákonem o léčivech. A není již vydáván formou vyhlášky.
106
Český lékopis • V průběhu platnosti ČL vychází také jeho doplňky jejichž závaznost je vyhlašována ve Věstníku Ministerstva zdravotnictví. • Lékopis je využíván a platí pro podniky a pracovníky více ministerstev (zdravotnictví, zemědělství a průmyslu). • Historie Českého lékopisu navazuje na historii Československých lékopisů. 107
Český lékopis Kdo vydává ČL
• Ministerstvo zdravotnictví České republiky. • MZČR spolupracuje s Evropskou lékopisnou komisí, jejímž členem je Česká republika od roku 1998. • Nyní je platný ČL 2009 a doplněk k ČL 2015 108
Český lékopis Jak vypadá? • tištěná knižní forma
• elektronická forma
109
Český lékopis Co obsahuje • Je tvořen tzv. Evropskou částí a Národní částí. • Evropská část je přeložený příslušný evropský lékopis včetně doplňků. • Národní část tvoří naše vlastní články a statě (týkající se specifických českých záležitostí). 110
Český lékopis Lékopis je rozdělen do 3 částí:
• obecná část - analytické a kontrolní metody • tabulky - určené zejména pro lékárenskou praxi • speciální část - články k jednotlivým léčivým a pomocným látkám, lékovým formám a léčivým přípravkům. 111
Český lékopis Články ve speciální části mají latinské názvy, které jsou u léčivých látek mezinárodními nechráněnými názvy. V článcích jsou dále uvedeny názvy v češtině a angličtině, dále pak (u chemických látek) chemické vzorce, systematické názvy, fyzikálněchemické vlastnosti (např. vzhled, skupenství, teplota tání apod.). Následují zkoušky totožnosti, čistoty a metody stanovení obsahu.
112
Český lékopis - obsah EVROPSKÁ ČÁST • Obecné statě a obecné články • Všeobecné zásady 1. Zkušební metody 2. Obaly a obalový materiál 3. Zkoumadla 4. Obecné texty NÁRODNÍ ČÁST • Obecné statě • Speciální část • Léčivé přípravky • Vaty
113
ČL - Evropská část Obecné statě 1. Všeobecné zásady • Obecná ustanovení Jsou definovány významy pojmů používané v ČL: přístroje a postupy vodní lázeň sušení, žíhání zkoumadla rozpouštědla a další.
114
ČL - Evropská část Obecné statě 1. Všeobecné zásady
• Značky a symboly Jsou zde vysvětleny veškeré značky a symboly použité v ČL (TT, TV, A, m.j., λ, atd.) • Jednotky mezinárodní soustavy (SI) použité v ČL a vztahy k jiným jednotkám
115
ČL - Evropská část Obecné statě 2. Zkušební metody
• Přístroje a jiné pomůcky ke zkoušení (kapátka, UV lampy, síta, atd.) • Fyzikální a fyzikálně-chemické metody Je zde popsán obecný princip dané metody, postup u jednotlivých metod, vyhodnocování výsledků, struční popis validačních parametrů, atd. U jednotlivých metod se tato část liší. 116
ČL - Evropská část Obecné statě 2. Zkušební metody
• Fyzikální a fyzikálně-chemické metody Příklad:
- Popsání měření viskozity na jednotlivých viskozimetrech. - Potenciometrické titrace – jak se stanoví bod ekvivalence. - AAS – je zde popsán jak princip, tak z čeho se běžně přístroj skládá, druhy atomizace vzorku(plamenová, elektrotermická met., met. studených par a hydridová met.), popis eliminace interference, volba operačních podmínek, doporučení (nádobí), postup stanovení (metoda přímé kalibrace či standardního přídavku) a výpočet. 117 Je zde také stručný postup validace metody.
ČL - Evropská část Obecné statě a obecné články 2. Zkušební metody • Zkoušky totožnosti Obsahuje: - popis zkoušek totožnosti iontů a funkčních skupin, - totožnost mastných olejů tenkovrstvou chromatografií - pachu, atd.
118
ČL - Evropská část Obecné statě 2. Zkušební metody • Limitní zkoušky Popis zkoušek pro určení totožnosti zbytkových látek, které jsou používány při výrobě léčiv. • Stanovení obsahu Příklady stanovení: peroxidové číslo, vápníku, vody, nukleové kyseliny, atd. • Biologické zkoušky Jsou zde popsány zkoušky na sterilitu, mykobakterie, zkouška na bakteriální endotoxiny, atd. 119
ČL - Evropská část Obecné statě 2. Zkušební metody • Metody stanovení účinnosti Obsahuje metody stanovení účinnosti různých vakcín, lidského proteinu C,S a dalších.
120
ČL - Evropská část Obecné statě 2. Zkušební metody
• Mikrobiologické stanovení účinnosti antibiotik. • Farmakologické metody Popis stanovení např. zbytku pesticidů, čísla hořkosti, stanovení silic v rostlinných drogách, atd. • Metody farmaceutické technologie Týká se především zkoušek léčivých přípravků jako jsou: - zkouška rozpadavosti tablet - obsahová stejnoměrnost jednodávkových lékových forem - jemnost prášků 121 - zkoušky disoluce atd.
ČL - Evropská část Obecné statě 3. Obaly a obalový materiál Zabývá se: • Používanými materiály pro výrobu obalů pro farmaceutické použití. Materiály jsou definovány z hlediska obsahu (například polymeru), nejvyšších přípustných obsahů přísad pro zlepšení vlastností materiálu. • Zkouškami totožnosti materiálů • Zkouškami čistoty materiálu • Vlastnostmi materiálu (rozpustnost, měkkost při určitých teplotách,...) Je dáno v čem je materiál rozpustný, při jaké teplotě měkne, popřípadě jakou barvou hoří v 122 plameni.
ČL - Evropská část Obecné statě 4. Zkoumadla - Jsou zde specifikována zkoumadla použitá při lékopisných metodách. (registrační číslo látek CAS , minimální čistota, TT, TV, relativní molekulová hmotnost,...) - obsahuje základní látky pro odměrnou analýzu a přípravu odměrných roztoků
123
ČL - Evropská část Obecné statě 5. Obecné texty Obsahuje: • obecné texty ke sterilitě (metody přípravy sterilních výrobků, biologické indikátory pro sterilizaci další) • Obecné texty k technologii vakcín (hodnocení bezpečnosti veterinárních vakcín a imunosér, kontrola nečistoty v látkách, zbytková rozpouštědla, …)
124
ČL - Evropská část Obecné články Dále pak ČL obsahuje
• Obecné články Definují dané pojmy, obsahují zkoušky na čistotu, totožnost. Uvádějí stanovení obsahu, podmínky skladování a další. (týká se to např. rostlinných drog, imunosér, tinktur...) • Obecné články lékových forem - Definují pojmy jako např. inhalační přípravky, oční kapky, šumivé granule, sirupy a další - dále je uvedeno skladování, označování, 125 zkoušení a opatření týkající se výroby.
ČL - Evropská část Obecné články Dále pak ČL obsahuje
• Články (Monografie) Vakcíny pro humánní a veterinární použití Imunoséra pro humánní a veterinární použití Radiofarmaceutické přípravky Homeopatické přípravky Obsahují definice, zkoušky na čistotu, zkoušky totožnosti, zkoušky účinnosti, označování, všeobecné ustanovení 126
ČL - Evropská část Obecné články Dále pak ČL obsahuje
•Chirurgická šicí vlákna pro použití u člověka a u zvířat. Obsahuje definice, zkoušky vláken, jejich skladování, balení a označování. •Vaty Podobné jako u vláken.
127
ČL – Národní část Obecné články
Podobná jako Evropská část lékopisu. Obsahuje národní specifika.
128
Český lékopis
Ukázka monografie ČL
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
139
140
DĚKUJI ZA POZORNOST
141
