Máte rádi kuřata??? Jiří Hanika Ústav chemických procesů AV ČR, v. v. i., Praha
1
Domácí chov ?
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
2
Velkochov ?
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
3
Budoucí rodinný oběd pro 4 ?
10 000 000 lidí si pochutná na více než 150 000 000 kuřat ročně !!! Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
4
Nepoživatelné kuřecí odpady druhotné suroviny ?
•Peří: KERATIN ? •Chrupavky : KOLAGEN ? •„Separát“: BIO-PLYN ? Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
5
Keratin: Nepoživatelná bílkovina druhotná surovina nutričních aminokyselin ?
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
6
Stříhané odpadní peří
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
7
Kolagen: Nepoživatelná bílkovina druhotná surovina nutričních aminokyselin ?
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
8
Kolagen and Keratin Hydrolytické štěpení peptidových vazeb proteinů a esterových vazeb lipidů na směs nutričně ceněných aminokyselin a monoglycerolů, resp. mastných kyselin; využití hydrolyzátů: • Kolagen – želatina: potravinové doplňky pro regeneraci chrupavek a pokožky (dermatologické krémy). • Keratin: ceněné nutrienty pro zálivky a ochranu před stresem rostlin, recyklace biogenních prvků v zemědělské výrobě. Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
9
Poznatky o keratinu v peří • peří = 5-7% hmotnosti kuřat • peří = cca 91% protein (keratin), 1% lipidů a 8% voda • keratin má semikrystalickou strukturu – vláknitou krystalickou fázi (a-šroubovicová proteinová mikrovlákna s menším množstvím b-skládaného listu) spojenou amorfní proteinovou maticí • průměrná Mw 60 - 10 kDa • vysoký obsah Cys (cca 9%) a to zejména ve strukturách b-skládaného listu s obtížnou rozložitelností Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
10
Pozorované účinky proteinových hydrolyzátů na rostliny Nárůst biomasy (rostliny či plodů) Zvýšení hladiny sekundárních metabolitů (vit. C, fenolické l.) Zvýšení příjmu živin (N, K, mikroživiny jako Fe, Zn, Cu) ale i snížení (Fe) význam chelatace!
Zvýšení intenzity fotosyntézy (např. díky zvýšení koncentrace fotosyntetických pigmentů) Regulace transpirace (otevření průduchů) Fytohormonům-podobná aktivita (auxin, gibberellin..) Zvýšení odolnosti rostlin vůči stresu (teplota, sucho, škůdci)
Zvýšení mikrobiální aktivity (CFU, enzym. aktivity, změny populace půdních baktérií i epifytů) Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
11
Tlaková hydrolýza proteinů z kuřecího odpadu v přítomnosti CO2
alanin
cystein
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
12
Experimenty Kuřecí chrupavky & peří Rabbit, a. s., Trhový Štěpánov
Tlaková hydrolýza ÚCHP AV ČR, v. v. i. Praha
Analýza produktů VŠCHT FPBT Praha (HPLC/MS)
Aplikační testy ECOFUEL, s. r. o., Praha
BÚ AV ČR, v. v. i. Průhonice AGRA, a. s., Střelské Hoštice Rabbit, a. s., Trhový Štěpánov Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
13
Tlakové zařízení pro hydrolýzu bílkovin v přítomnosti CO2
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
14
PODMÍNKY HYDROLÝZY Hydrolýza v kyselém prostředí Aplikace tlakového oxidu uhličitého a vody Jednoduchá separace reakčního produktu Čtvrtprovozní autoklávové testy: • Objem autoklávu 2.5 lt • Frekvence míchání 1 Hz • Teplota 105 - 120 o C • Tlak 10 – 20 bar • Reakční doba 5 – 6 hod Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
15
Časový průběh experimentu Hydrolýza peří 16.2.2016 2
160
1,8
140
1,6 120 100
1,2 1
80
0,8
60
Teplota [°C]
Tlak [MPa]
1,4
0,6 40 0,4 20
0,2 0
0
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
16
Filtrace hydrolyzátu peří
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
17
Produkty hydrolýzy peří Test 16.2.2016; 101 g mražené peří; 1 lt vody T = 126,6 oC; P = 1,76 MPa; t = 5 h
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
18
Úvodní testy hydrolýzy peří 0,400 0,350
a.u. 0,300 0,250 0,200
peri1_
peri2_
0,150 0,100 0,050 0,000
T (oC) P (bar) čas (h) konverze zbytek (%) Test 1
105
20
5
62.5
3.6
Test 2
112
11
2
29.8
4.8
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
19
Vliv tlaku na hydrolýzu keratinu Konverze (%) 70
60
50
40
30
20
10
0 0
5
10
15
20
25
Tlak (bar)
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
20
Zbytek po hydrolýze peří
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
21
Ověření analytické metody Elementární analýza tuhého zbytku a zastoupení prvků v aminokyselinách v hydrolyzátu Prvek
Zbytek (% wt.)
Aminokysel.(% wt.)
C
46,7
43,98
*
H
7,64
7,56
**
N
12
13,99
*
S
1,18
2,73
?
O
32,48
31,74
**
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
22
Vliv podmínek hydrolýzy Test
Tlak (MPa)
Peří (g/l)
Teplota Konver pH Asp (oC) -ze na hydroly (mg/l) AK (-) -zátu
P1
0,47
62,9
129
0,0442
4,7
618,55
P2
1,87
70,3
129
0,0828
4,3
108,93
P3
1,89
92,462
132
0,1632
6,2
58,51
PA VZ1 VZ2
1,85 0,40 0,32
71,923 69,6 68,4
131 109 117
0,1179 0,0351 0,0380
6,2 n.a. 6
39,11 277,87 58,33
Heterogenita suroviny – podíl brk versus chmýří v peří Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
23
Distribuce aminokyselin v hydrolyzátu peří 1000,00
mg/lt 100,00
P1 10,00
P2 P3 PA
1,00
0,10
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
24
Vliv konverze na sumu AK, kyselinu asparagovou resp. alanin 2500,00
a.u.
2000,00
Asp Ala Suma
1500,00
1000,00
Lineární (Asp)
Lineární (Ala)
500,00
Lineární (Suma) 0,00 0,976
0,978
0,98
0,982
0,984
0,986
0,988
0,99
0,992
0,994
0,996
Konverze hydrolýzy peří Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
25
Distribuce aminokyselin v hydrolyzátu; 8.12.2015 mg/lt
Násada: 149 g / 1 lt Teplota 135 C; Tlak 0,56 MPa; Doba reakce 5 h Konverze peří : 45,5% Konverze na AK: 2,7 %
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
26
SOUHRN Otevřené problémy: • Heterogenita suroviny – podíl brk versus chmýří v peří. • Přenos dat do poloprovozního měřítka (autokláv 25 lt). • Optimalizace podmínek a izolace kyseliny asparagové z hydrolyzátu. • Zpracování dalších odpadů ze živočišné výroby (srsti zvířat, koželužny). Produkty hydrolýzy mají perspektivní použití v řadě aplikací: • Zvlhčování kompostů, recyklace biogenních prvků. • Ochranné postřiky rostlin (stres suchem, slunečním světlem…). • Nutrinutriční přísady do krmiv zvířat. • Nutrienty pro kultivaci řas. Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
27
PODĚKOVÁNÍ Studie je součástí Strategie AV21 „Špičkový výzkum ve veřejném zájmu“ a projektu "Centrum Kompetence pro výzkum Biorafinace“ podpořeného Technologickou agenturou ČR (BIORAF - No. TE01020080) .
Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
28
Vliv teploty na hydrolýzu peří Konverze hydrolýzy
1
0,995
0,99
0,985
0,98 113
113,5
114
114,5
115
115,5
116
116,5
117
117,5
118
prům. Teplota (oC) Centrum kompetence pro výzkum biorafinací BIORAF
29