Parasit. H un «. t. 227-2:«. 1971
lnszekticidek hatása az egerek atkakórjára
CONSTANTIN Miklós Semmelweis Orvostudományi Egyetem. Orvos-Radiológiai Akadémiai Tanszéki Kutatócsoport. Budapest
Régóta gond a laboratóriumi egerek atkainváziójának a leküzdése (l,
2 , 3 , 4 , 5)« Intézetünk egérállományában i s nagy kárt,15-20
%-os elhullást o k o z o t t az ektoparazitózis. 19^5-ben Prágából négy beltenyésztett, e r e d e t i l e g a Jackson L a (A,C57Bl/10Sn,
boratory-ból származó egértörzseket importáltunk BIO.LP, C B A / T 6 T 6 ) ;
v a l a m e n n y i ektoparazitával
Több b u d a p e s t i intézet nak vizsgálata tenyészet
konvencionálisan t a r t o t t
fertőzött
volt.
egérállományá
során a z t t a p a s z t a l t u k , hogy minden megvizsgált
ektorparazitával fertőzött v o l t .
e l l e n e védekezni,
Ahol nem próbáltak
az állatok ellenálló-képességének
m i a t t o l y a n mérvű fertőzöttség m u t a t k o z o t t ,
csökkenése
hogy néhány h e l y e n
a tenyésztést l e k e l l e t t állitani. Célunk az v o l t , hogy megfelelő eljárást dolgozzunk k i a Myocop tes musculinus Az állatokról
és a Myobia m u s c u l i leküzdésére. izolált acarinák,
részben
( l . ábra)
m u s c u l i n u s n a k , ( 2 . ábra) részben Myobia m u s c u l i n a k Watson ( 1 9 6 I )
szerint,
bizonyultak.
e két a t k a f a j főként laboratóriumi ege
r e k e n f o r d u l elő. A Mus musculus lő e g y e d e i n a l i g talált
Myocoptes
és M i c r o t u s a g r e s t i s vadon é-
Myocoptest,
Myobiát p e d i g
egyet sem.
(Az MTA Orvos-Radiológiai Akadémiai Tanszéki Kutatócsoport köz leménye, igazgató: Dr. ZSEBŐK Zoltán e g y e t e m i tanár.)
1. és 2. ábra Myobia m u s c u l i és Myocoptes m u s c u l i n u s 3» ábra A szőrszálon lévő p e t e , nap a l a t t éri e l ) .
atka
( a kikelő nympha az
ivarérett k o r t 14
4. ábra A szempillák tövében elhelyezkedő myobiák 5. ábra K i l e n c hónapos C57BL/10LP egéren pörkösödés és hámfosztott t e rület, amely a lapockatájról i n d u l t k i . 6. ábra A c u t i s b a n gyulladásos reakció, a középen károsodott szőrtüsző maradványai láthatók, v a l a m i n t egy fénytörő képlet, amely f e l tehetően a p a r a z i t a egy d a r a b j a 7. ábra A bőrgyulladások zavarják a transzplantátumok értékelését, sok e s e t b e n lehetetlenné t e s z i k .
sőt
Pig. 1 A d u l t Myobia m u s c u l i m i t e Pig. 2 A d u l t Myocoptes m u s c u l i n u s Pig. 3 Ovum a t t a c h i n g days). Pig. 4
to hair
mite
(development
t o a d u l t stage
t a k e s 14
Myobia m u s c u l i m i t e s s e t t l e d a t t h e base of t h e e y e l a s h e s Pig. 5 Scab f o r m a t i o n and e p i t h e l i a l e r o s i o n proceeding from t h e r e g i o n o f t h e shoulder b l a d e o f a C57BL/10LP mouse, 9 months o l d Pig. 6 I n f l a m m a t o r y c e l l u l a r r e a c t i o n i n t h e c o r i u m . Note r e m n a n t s o f damaged h a i r f o l l i c l e i n t h e c e n t r e and t h e r e f r a c t i l e body which perhaps r e p r e s e n t s a p o r t i o n o f a p a r a s i t e . Pig. 7 Cutaneous changes r e l a t e d t o a c a r i n o s i s i n t e r f e r e w i t h , o r even exclude, the o b j e c t i v e e v a l u a t i o n of h o s t - g r a f t r e a c t i o n s .
6. ábra
A betegség; leirása Megfigyeléseink s z e r i n t az egereken található atkák mennyisége az életkorral arányosan növekszik. Az újszülött az anyától már a n e g y e d i k napon fertőződhet. Az egyhónapos egéren az atkák na gyobb mennyiségben, csak az áll a l a t t , a szem körül ( 3 . és 4. ábra) és a fül mögött találhatók. Az idős állatok ektoparazitózisát lapockatáji szőrhullás, bőrmegvastagodás, pörkösödés és hámfosztott területek megjelenése j e l l e m z i (5 » ábra). E l e i n t e nyugtalanság, vakaródzás, fogyás m u t a t k o z i k , k i f e j l e t t állatokon a párzás, fogamzás elmarad, majd. szőrritkulás j e l e n t k e z i k . A szőr fényét v e s z t i ( a károsodott f a g g y u m i r i g y e k elég t e l e n működésének következménye). A későbbiek folyamán a v a k a ródzás m i a t t hámsérülések k e l e t k e z n e k , amelyek csak r i t k a e s e t ben gyógyulnak, gyakrabban másodlagos fertőzés következtében kifekélyesednek és az állat e l i s p u s z t u l h a t . Ezek a tünetek az állatházunkban t a r t o t t egértörzseken a követ kező sorrendben rendben):
jelentkeztek
C5TB1/10 Sn,
(valószínűleg
érzékenységi
sor
majd koizogén törzsén a B10.LP-én, e z t
követte az A, és végül a CBA/T6T6 törzs. Szövettani m e t s z e t e t készítettünk egy 4 hónapos h i m BIO.LP egér bőréből ( 6 . ábra), az irharétegben körülirt területen gyulladá sos reakció észlelhető. Az elváltozás közepén súlyosan károso d o t t szőrtüsző maradványai, v a l a m i n t egy erősen fénytörő képlet látható, amely feltehetően a p a r a z i t a egy alkotórésze. Körülöt t e i g e n erős l e u c o c y t e s reakció látható, amely az elváltozást- a környezetétől elhatárolja. A lobgát körül nagyszámú tágult k a pilláris látszik. A hám e r e a k t i v f o l y a m a t fölött erősen elvé k o n y o d o t t , k i s területen t e l j e s e n e l p u s z t u l t , szabályos réteg zettsége nem ismerhető f e l .
Anyag és módszer Az állatok tenyésztése és tartása Vizsgálatainkat az állatházunkban tenyésztett az Ustav E x p e r i mentálni B i o l o g i e a G e n e t i k y , CSAV (Prága)-ból importált A, CBA/T6T6, C57Bl/10Sn és BIO.LP egereken végeztük. Az állatokat konvencionális körülmények között, polipropilén és M a c r o l o n do bozokban, puhaforgács almon t a r t o t t u k , préselt egér- és p a t kánytápot, v a l a m i n t v i z e t ad l i b . f o g y a s z t o t t a k . A ketreceket hetenként fertőtlenítettük, a takarmányt beszállításkor etilén o x i d d a l , az almot hőléggel sterilizáltuk.A helyiség mesterséges szellőztetésével 21 + 3°C hőmérsékletet és 60 +15, - 1 0 % r e l a t i v páratartalmat biztosítottunk. A helyiség szerény természetes világítását 14/10 - világosság/sötétség ritmusú mesterséges fénnyel egészítettük k i . A tenyésztés a " t r a f f i c - l i g h t " r e n d s z e r b e n , a párositás monogám módszerrel történt, az anyák 19 napig szoptattak. Vizsgálati anyagok a ) Bayer 9010 folyadék, összetétele
ismeretlen.
(Bayer) b ) T e t o c i d folyadék: HCH- , — i z o m e r , HCH egyéb i z o m e r , s p i r . conc. ( C h i n o i n ) c) Malathion
por: 0 , 0 - d i m e t i l - S - ( l , 2 - d i k a r b e t o x i - e t i l ) ditiofoszfát. ( I C I ) d) P y r a c t o n e emulzió: conc. e x t r a k t u m , amely 5% p y r e t r u mot és 2,5% B u c a r p o l a t o t t a r t a l m a z . Bucarpol a t p i p e r o n i l s a v dietilén-glikol mono n-butil-éterrel a l k o t o t t észtere.(Stefford A l l e n et Sons) A vizsgálati t e r v 1. Az a c a r i c i d anyag i n v i t r o megkeresése; 2. I n v i v o vizsgálata; 3. Égértoxicitásának megállapítása; t o x i k u s adagjának a fogam zásra, párzásra és vemhességre g y a k o r o l t hatása.
1 . táblázat Az a c a r i c i d e k i n v i t r o hatása Myobia m u s c u l i k i f e j l e t t egyedeinek élettartamára ( I n v i t r o e f f e c t o f a c a r i c i d p r e p a r a t i o n s on l i f e span o f a d u l t Myobia m u s c u l i specimens)
A vizsgált anyag Insekticides
Bayer Bayer
9010 9010
Tetocid Tetocid
Alkalmazott conc. (%) A p p l i e d con centration
0,5 1 1 2
Malathion Malathion
1
Pyractone
0,05 0,5
Pyractone Pyractone Pyractone
4
1
3
Atkák száma Initial mite counts
30 30 30 30 30 30 30 30
30 30
Az él 5 atkák száma a kezelés utáni (Humbers o f m i t e s s u r v i v i n g - ) 6. 8. 10. 7. 4. 5. 9. órában ( -hours a f t e r t r e a t m e n t )
2.
. 3.
30 30
30
17
17
30
28
28
14 28
14 21
26
26
26
26
30 30
30
30
30 -
30
-
-
-
30 30 -
-
-
-
-
11
-
11.
12.
12
12
17 11
15
12
12
12.
11
11
11
11
7
7
21
21
21
21
18
18
18
15 29 30
15 29 30 -
15 29
11
8
8
-
29 30 -
29 30 -
29 30
-
15 29 30 -
-
-
-
-
-
-
-
-
-
30
-
I n v i t r o vizsgálatok A négyféle vizsgálati anyagnak az imágókra g y a k o r o l t "knock down" hatását operációs mikroszkóp a l a t t vizsgáltuk. A Myocopt e s t m i n d e g y i k anyag 2-6 óra a l a t t elpusztította, ezért a t o vábbi vizsgálatokat csak a Myobiával végeztük. Megszámoltuk i n v i t r o körülmények között, hány Myobia p u s z t u l t e l óránként, a különböző koncentrációjú a c a r i c i d anyagok hatására. Az eredmé n y e k e t az 1 . táblázat i s m e r t e t i . I n v i v o vizsgálatok Az a c a r i c i d e k hatását a dózis függvényében, 5 hónapos e g e r e k e n vizsgáltuk. Az e g e r e k e t előbb 38°C-os c s a p v i z b e mártottuk, hogy szőrzetük és bőrük kissé l e t i s z t u l j o n . I n n e n az állatokat a k i választott rovarirtószereknek c s a p v i z z e l készitett különféle töménységű oldatába, majd előzőleg sterilizált műanyag k e t r e c b e infralámpa alá helyeztük. A fürdetést három naponként öt a l k a lommal ismételtük meg. Az atkákat-csak a 12.naptól kezdve v i z s gáltuk, számitva a r r a , hogy ez idő a l a t t a petéből k i k e l t egye dek i s e l p u s z t u l n a k . Az acarinák, i l l . petéik számát élő, a l t a t o t t egereken állapí t o t t u k meg. A bőr t e l j e s felületét operációs mikroszkóp a l a t t gondosan átvizsgáltuk. Az eredményeket a 2. táblázatban m u t a t j u k be.
Az i n s z e k t i c i d e k toxicitása Az a l k a l m a z o t t i n s z e k t i c i d e k e t az koncentrációban a l k a l m a z t u k .
előző kísérletben
használt
6 hónapos, összesen 110 e g e r e t három naponként öt a l k a l o m m a l fürdettük a kiválasztott a c a r i c i d készítményben. Az elhullást az utolsó fürdetési naptól számitott 30. n a p i g figyeltük. E l hullást kizárólag a T e t o c i d 2%-os és a P y r a c t o n e 3%-os tömény ségű oldatából való fürdetés esetén észleltünk ( 2 - 2 egér).
2. táblázat Table 2 Az a c a r i c i d e k i n v i v o hatása a Myobia m u s c u l i előfordulási gyakoriságára ( E f f e c t o f a c a r i c i d p r e p a r a t i o n s on Myobia m u s c u l i i n f e c t i o n o f mice as assessed by m i t e counts)
A vizsgált anyag Prepara tion
Bayer 9010 Bayer 9010 Tetocid Tetocid Malathion Malathion Pyractone Pyractone Pyractone Pyractone
Alkalma z o t t conc. m Applied conc. 0,5 1 1
2 1 2 0,05 0,5 1 3
Az atkák száma a kezelés utáni (Numb er o f m i t e s on the
Állat szám
17
17 17 17 15 15 20 17 20 20
12.
15.
18.
21.
+++ ++ +++ +++ ++++ ++++ + +
+++ ++ ++++ ++++ ++++ ++++
++++ +++ ++++ ++++ ++++ ++++
++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
-
--
-
-
-
-
—
—
-
-
-
—
—
—
30. 50. 24. n a p o n day a f t e r t r e a t m e n t )
-
++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
-
—
70
100.
++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++
-
-
--
--
—
—
Jelmagyarázat : (Symbols u s e d ) + = 1 Myobia, vagy ha 12.nap után petét i s találtunk, ( l Myobia f o u n d o r c o r r e s p o n d i n g number o f ova s t i l l p r e s e n t a f t e r 12 d a y s ) ++ = 2 Myobia, vagy ha 12.nap után petét i s találtunk. ( 2 Myobia f o u n d or c o r r e s p o n d i n g number o f ova s t i l l p r e s e n t a f t e r 12 d a y s ) +++ = 3 Myobia, vagy ha 12.nap után petét i s találtunk. ( 3 Myobia f o u n d or c o r r e s p o n d i n g number o f ova s t i l l p r e s e n t a f t e r 12 d a y s ) ++++ = 4 Myobiánál több, vagy ha a 12.nap után petét i s találtunk, (more t h a n 4 Myobia f o u n d or c o r r e s p o n d i n g number o f ova s t i l l p r e s e n t a f t e r 12 d a y s )
28 hónapon keresztül kísértük f i g y e l e m m e l a hatásosnak n y u l t P y r a c t o n e - n a l k e z e l t egerek szaporodását.
bizo
a ) Yemhességük 10-15. napján k e z e l t anyák 16 h e t e s k o r u k b a n 5-7 újszülöttet f i a l t a k . Az eredmény m e g f e l e l a tenyészet átla gának. b ) Öt a l k a l o m m a l fertőtlenített egerekből 20 nőstényt 20-20 himmel párosítottunk, amelyekből 15 vemhes l e t t . c ) Az anya 6-24- órás újszülöttek között sem váltott k i e g y e t l e n elhullást sem. (Újszülöttek kezelésére 0,05 %-os higitás i s elegendő v o l t : 50 alomból végzett előzetes vizsgálataink u g y a n i s a z t bizonyították, hogy a 4 naposnál f i a t a l a b b ege r e k n e k csak 1 %-án található Myobia, Myocoptes p e d i g e g y e t l e n e s e t b e n sem.)
Megbeszélés
A kísérletben s z e r z e t t t a p a s z t a l a t o k mennyi
egerét a
nyomán állatházunk
megadott módon kezeltük.
vala
Az atkátlanitás óta
e l t e l t két és fél év a l a t t u j a b b atkás fertőzöttség nem
jelent
kezett. I s m e r e t e s , hogy a környezeti tényezők megváltoztatásával az a t kás fertőzöttség tünetei súlyosbodhatnak. I g y p l . kísérletben t a r t o t t egereken a fertőzéssel szemben v i s z o n y l a g r e z i s z t e n s törzsek állatain i s röntgen-besugárzás, C o r t i s o n - vagy c y t o s t a t i c s kezelés hatására a tünetek gyorsabban fejlődnek k i . Külö nösen azok a beavatkozások váltanak k i súlyos tüneteket,amelyek az állatok általános állapotát rontják. A tünetek természetesen a kísérleteket i s zavarják, sőt annak értékelhetőségét megaka dályozzák ( p l . transzplantátumok esetében)(7.ábra). A 2. táblázatból kitűnik, hogy a Bayer 9010-es anyagnak, a Te t o c i d - ( C h i n o i n ) - n a k , v a l a m i n t a M a l a t h i o n ( i C l ) - n a k a Myobiákra g y a k o r o l t hatása nem kielégítő. Amig az i n v i t r o vizsgá-
lat
eredményei
alapján ( l . táblázat) már
i s 100%-osnak vehető
a Pyractone
a d d i g az i n v i v o vizsgálat s z e r i n t
(Allen)
a 0,5%-os higitásban "knock-down" hatása,
( 2 . táblázat) csak az 1,0 %-
os higitás alkalmazása nyújt kellő biztonságot. A P y r a c t o n e os emulziójának
használatakor 20 egér
közül kettő
3%-
elhullott.
Összefoglalás A Myocoptes m u s c u l i n u s és a Myobia m u s c u l i által o k o z o t t e k t o parazitózis k l i n i k a i tüneteinek súlyossági s o r r e n d j e a vizsgált négy beltenyészett egértörzsön a következő v o l t : a legsúlyosab ban j e l e n t k e z e t t a C57Bl/10Sn és a BIO.LP törzsön, majd k i s e b b mértékben az A és CBA/T6T6 törzsön. Öt hónapos egereken különböző i n s z e k t i c i d anyagok, Bayer 9010, T e t o c i d ( C h i n o i n ) , M a l a t h i o n ( I C I ) , Pyractone ( A l l e n ) külön böző dózisait a l k a l m a z t a a szerző. A Myocoptes-imágókat minde g y i k preparátum 2-6 óra a l a t t elpusztította, a Myobiákkal szem ben egyedül a P y r a c t o n e v o l t hatásos. Amig az i n v i t r o vizsgá l a t b a n a Pyractone "knock-down" hatása a Myocoptesre már 0,5 %-os higitásban i s t e l j e s értékűnek m u t a t k o z o t t , a d d i g i n v i v o csak az 1 %-os higitás nyújtott kellő biztonságot. A P y r a c t o n e 3 %-os emulziójának használatakor 20 egér közül 2 e l h u l l o t t . 28 hónapon át zelt
kisérte f i g y e l e m m e l a szerző a P y r a c t o n e - n a l k e
egerek vemhességét és szaporodását, semmiféle kárositó h a
tást nem észlelt.
CONSTANTIN, M.: Effect of Insecticides to Acarinose of Mice
I n b r e d mice o f s t r a i n s CBA/T6T6, A, C57Bl/10Sn, and BIO.LP were f o u n d t o have a c a r i n o s i s due t o Myocoptes m u s c u l i n u s musculi mites,
with clinical pictures
o f s e v e r i t y i n t h e above r i s i n g variation of strain
o r Myobia
d i f f e r i n g i n the degree
sequence r e l a t e d v e r y l i k e l y t o
sensitivity.
T r i a l of f o u r d i f f e r e n t i n s e c t i c i d e s (Bayer compound 9 0 1 0 ) , Te tocid
(Chinoin),
f e r e n t dose
Malathion ( I C I ) ,
l e v e l s was
the f o u r preparations
(Allen)
at dif
mice 5 months o l d . A l l
k i l l e d t h e imago stages o f Myocoptes mus
c u l i n u s w i t h i n 2-6 h o u r s , against
Pyractone
c a r r i e d o u t *on
Myobia m u s c u l i .
b u t e x c l u s i v e l y P y r a c t o n e was a c t i v e
While
against
Myocoptes m u s c u l i n u s i n
v i t r o P y r a c t o n e d e v e l o p e d 100 % knock-down e f f e c t a t 0.5 % con centration, i n vivo a a similar effect.
1 % concentration
was r e q u i r e d t o o b t a i n
A t a 3 % l e v e l , P y r a c t o n e k i l l e d 2 o f 20 m i
ce, b u t i n t h e a p p l i e d t h e r a p e u t i c c o n c e n t r a t i o n t e r f e r e with i n insemination
and
i t d i d not i n
reproduction, neither d i d i t
damage t h e newborn.
As shown i n T a b l e 2,
the acaricid effects
Bayer 9010,
( C h i n o i n ) , and M a l a t h i o n ( I C I ) were i n
Tetocid
s u f f i c i e n t f o r t h e e r a d i c a t i o n o f Myobia. len)
was 100 %
effektive i n vitro at
developed a s i m i l a r tion.
effect i n vivo
of the
preparations
While Pyractone ( A l
0.! % c o n c e n t r a t i o n , i t
(Table
2 ) at 1 % c o n c e n t r a
Irodalom 1. BERESPORD-JONES, W. P.: simplex
Occurrence
o f t h e mite Psorergates
i n m i c e . - A u s t . V e t . J. , 41, 289-290. 1965.
2. COOK, R.: M u r i n e mange. C o n t r o l o f M. m u s c u l i n u s and M. mus c u l i i n f e s t a t i o n s . - B r i t . V e t . J . , 109, 113. 1953. 3. DAVIS, R.:
C o n t r o l o f t h e m y o c o p t i c mange m i t e ,
m u s c u l i n u s ( K o c h ) on l a b o r a t o r y mice.
Myocoptes
- J . Econ. E n t . , 5 0 .
695. 1957. 4. HESTON, W.E. : P a r a s i t e s . I n s B i o l o g y o f t h e l a b o r a t o r y mouse. . 375-76, 1956. 5. MADDEN", A. H. - TOZLOSKI, A. H. - SWEETMAN, H.L. : C o n t r o l o f Myobia m u s c u l i ( S c h r a n k ) and Myocoptes m u s c u l i n u s (Koch) on L a b o r a t o r y mice. - J. Econ. E n t . , 47, 442-44. 1954. 6. SOPTLY, A.: P r o d u c t i o n o f s p e c i f i c - f r e e r a t s and mice by t w o methods.
- J . I n s t . Anim. Techn. , 19_, 1. 1968.
7. WATSON, D. P.:
The e f f e c t o f t h e m i t e Myocoptes
musculinus
(C.L. Koch 1840) on t h e s k i n o f t h e w h i t e l a b o r a t o r y mouse and i t s c o n t r o l . - P a r a s i t o l o g y , 5_1_, 373-78. 1961.
Érkezett: 1971. május 2.
CONSTANTIN Miklós Orvos-Radiológiai Akadémiai Tanszéki Kutatócsoport Budapest V I I I . , Üllői u t 78.
