Levonorgestrelum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 1
01/2014:0926
LEVONORGESTRELUM Levonorgesztrel
C21H28O2 [797-63-7]
Mr 312,5
DEFINÍCIÓ 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on. Tartalom: 98,0–102,0% (szárított anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér, kristályos por. Oldékonyság: vízben gyakorlatilag nem oldódik; diklórmetánban mérsékelten oldódik; etanolban (96%) kevéssé oldódik. AZONOSÍTÁS A. Fajlagos optikai forgatóképesség (lásd Vizsgálatok). B. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS levonorgesztrellel. VIZSGÁLATOK Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): –35 és –30 között. 0,200 g anyagot R diklórmetánnal 20,0 ml-re oldunk. Rokon vegyületek. A.
A-, B-, H-, K-, M-, O-, S-, U-szennyezők. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Oldószerelegy: R kromatográfiás célra szánt víz – R1 acetonitril (30+70 V/V) Vizsgálati oldat. 10,0 mg vizsgálandó anyagot ultrahang segítségével 7 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 10,0 ml-re hígítjuk.
Levonorgestrelum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 2
Összehasonlító oldat (a). 5 mg CRS 1 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelt (amely A-, H-, K-, M-, O- és S-szennyezőt tartalmaz) ultrahang segítségével 3,5 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R vízzel 5,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 1,0 ml vizsgálati oldatot az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítunk. Ezen oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 10,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). 5,0 mg CRS levonorgesztrel-B-szennyezőt 35 ml R1 acetonitrilben oldunk, és az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (d). 5,0 mg CRS noretiszteront (U-szennyező) 35 ml R1 acetonitrilben oldunk, és az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk.
Oszlop: – méretei: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm; – állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt, beágyazott poláros csoportokat tartalmazó, oktilszililezett szilikagél (5 μm); – hőmérséklet: 30 °C. Mozgófázis: –
A-mozgófázis: R1 acetonitril – R kromatográfiás célra szánt víz (40+60 V/V);
– B-mozgófázis: R1 acetonitril; Idő (perc)
A-mozgófázis (%V/V)
B-mozgófázis (%V/V)
0 – 50
100 → 20
0 → 80
Áramlási sebesség: 0,7 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel 215 nm-en; az O-szennyező vizsgálatához pedig 200 nm-en. Injektálás: 50 μl. Szennyezők azonosítása: az A-, H-, K-, M- és S-szennyező azonosítására a CRS 1 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelhez mellékelt kromatogramot és az a) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk 215 nm-en, az O-szennyező azonosításához pedig 200 nm-en; a B-szennyező azonosítására a c) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; az U-szennyező azonosítására a d) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók a levonorgesztrelre (retenciós ideje kb. 20 perc) vonatkoztatva: H-szennyező kb. 0,5; U-szennyező kb. 0,8; K-szennyező kb. 0,85; A-szennyező kb. 0,91; M-szennyező kb. 0,95; Oszennyező kb. 1,16; B-szennyező kb. 1,26; S-szennyező kb. 1,9. Rendszeralkalmasság: – jel/zaj viszony: legalább 60, a b) összehasonlító oldat kromatogramján megjelenő főcsúcsra számolva; –
hegy-völgy arány: legalább 3,0, ahol Hp = az M-szennyezőnek megfelelő csúcs alapvonaltól mért magassága és Hv = az M-szennyező csúcsát az A-szennyező csúcsától elválasztó görbeszakasz minimumának az alapvonaltól mért távolsága. A százalékos tartalmi értékek kiszámolása: – korrekciós faktorok: a szennyezők mennyiségének számításához csúcsterületüket a következő korrekciós tényezővel szorozzuk: A-szennyező = 0,4; M-szennyező = 3,1; Oszennyező = 2,6;
–
B-szennyező: a c) összehasonlító oldat B-szennyező koncentrációját vesszük alapul;
Levonorgestrelum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 3
–
U-szennyező: a d) összehasonlító oldat U-szennyező koncentrációját vesszük alapul;
–
bármely más szennyező: a d) összehasonlító oldat U-szennyező koncentrációját vesszük alapul; Követelmények:
− A- B- és K-szennyező: egyenként legfeljebb 0,3%; − O-szennyező 200 nm-en: legfeljebb 0,3%; − M-, S- és U-szennyező: egyenként legfeljebb 0,2%; − U-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a d) összehasonlító oldat kromatogramján a megfelelő csúcs területének kétszerese (0,2%); − H-szennyező: legfeljebb 0,15%; − egyedi határértékhez nem kötött (nem-specifikált) szennyezők: egyenként legfeljebb 0,10%; − szennyezők összesen, az O-szennyező kivételével: legfeljebb 1,0%; − jelentési határérték: 0,05%. B.
V-, W-szennyezők. Folyadékkromatográfia (2.2.29). Oldószerelegy: R kromatográfiás célra szánt víz – R1 acetonitril (30+70 V/V) Vizsgálati oldat. 10,0 mg vizsgálandó anyagot ultrahang segítségével 7 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 10,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (a). 5 mg CRS 2 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelt (amely V- és W-szennyezőt tartalmaz) 3,5 ml R1 acetonitrilben oldunk, majd az oldatot R vízzel 5,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 5,0 mg CRS etinilesztradiolt ultrahang segítségével 35 ml R1 acetonitrilben oldunk, és az oldatot R kromatográfiás célra szánt vízzel 50,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 3,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk.
Oszlop: – méretei: l = 0,15 m, Ø = 4,6 mm; állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt, oktilszililezett szilikagél (3 μm);
–
– Mozgófázis: –
A-mozgófázis: R1 acetonitril – R kromatográfiás célra szánt víz (40+60 V/V);
– B-mozgófázis: R kromatográfiás célra szánt víz – R acetonitril (10+60 V/V); Idő (perc)
A-mozgófázis (%V/V)
B-mozgófázis (%V/V)
0–1
92
8
1–3
92 → 82
8 → 18
3–6
82
18
6 – 16
82 → 60
18 → 40
16 – 21
60 → 0
40 → 100
21 – 32
0
100
Áramlási sebesség: 1 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel 20 nm-en. Injektálás: 50 μl.
Levonorgestrelum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 4
Szennyezők azonosítása: a V- és W-szennyező azonosítására a CRS 2 rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt levonorgesztrelhez mellékelt kromatogramot és az a) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók a levonorgesztrelre (retenciós ideje kb. 12 perc) vonatkoztatva: W-szennyező kb. 0,9; V-szennyező kb. 1,9. Rendszeralkalmasság: a) összehasonlító oldat –
csúcsfelbontás: legalább 2,8 a W-szennyező és a levonorgesztrel csúcsai között. A százalékos tartalmi értékek kiszámolása: – bármely szennyező esetében a b) összehasonlító oldat etinilesztradiol koncentrációját vesszük alapul; Követelmények:
–
W-szennyező: legfeljebb 0,3%;
–
V-szennyező: legfeljebb 0,15%;
Szárítási veszteség (2.2.32): legfeljebb 0,5%. Az anyag 1,000 g-ját szárítószekrényben, 105 °C-on szárítjuk. Szulfáthamu (2.4.14): legfeljebb 0,1%. Az anyag 1,0g-ját vizsgáljuk. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Az anyag 0,200 g-ját 45 ml R tetrahidrofuránban oldjuk. Az oldatot R ezüst-nitrát 100 g/l-es oldatának 10 ml-ével elegyítjük. 1 perc elteltével az elegyet, potenciometriás végpontjelzést alkalmazva (2.2.20), 0,1 M nátrium-hidroxid–mérőoldattal titráljuk. Üres kísérletet is végzünk. 1 ml 0,1 M nátrium-hidroxid–mérőoldattal 31,25 mg C21H28O2 egyenértékű. ELTARTÁS Fénytől védve. SZENNYEZŐK Egyedi határértékhez kötött (specifikált) szennyezők: A, B, H, K, M, O, S, U, V, W. Egyéb kimutatható szennyezők (a következő szennyezők a cikkely valamelyik vizsgálatával kimutathatók, ha bizonyos határon felüli mennyiségben vannak jelen. Határértéküket az egyéb/egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezőkre vonatkozó általános követelmény és/vagy a Gyógyszeranyagok (2034) általános cikkely előírásai határozzák meg. Ezért ezeket a szennyezőket nem szükséges a megfelelés bizonyítása céljából azonosítani. Lásd még a Gyógyszeranyagok szennyezésvizsgálata (5.10.) című általános fejezetet): C, D, G, I, J, L, N, P, Q, R, T.
Levonorgestrelum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 5
A. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregna-4,8(14)-dién-20-in-3-on,
B. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-én-20-in-3-on,
C. 13-etil-3-etinil-18,19-dinor-17α-pregna-3,5-dién-20-in-17-ol,
D. 13-etil-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-17-ol (3-dezoxolevonorgesztrel),
G. 13-etil-6α,17-dihidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (6α-hidroxilevonorgesztrel),
H. 13-etil-6β,17-dihidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (6β-hidroxilevonorgesztrel),
Levonorgestrelum
I.
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 6
13-etil-10,17-dihidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (10-hidroxilevonorgesztrel),
J. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-4-én-20-in-3,6-dion (6-oxolevonorgesztrel),
K. 13-etil-17β-dihidroxigon-4-én-3-on (18-metilnandrolon),
L. 13-etilgon-4-én-3.17-dion (levodion),
M.
13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregna-4,6-dién-20-in-3-on (Δ6-levonorgesztrel),
Levonorgestrelum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 7
N. 13-etilgon-5(10)-én-3,17-dion (Δ5(10)-levodion),
O. 13-etil-17-hidroxi-5α-metoxi-18,19-dinor-17α-pregn-20-in-3-on (4,5-dihidro-5α-metoxilevonorgesztrel),
P. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregn-5-én-20-in-3-on (Δ5-levonorgesztrel),
Q. 13-etil-3-metoxigona-2,5(10)-dién-17β-ol,
R. 13-etil-3-metoxigona-2,5(10)-dién-17-on,
Levonorgestrelum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur. 8.0- 8
S. 13-etil-3-metoxi-18,19-dinor-17α-pregna-3,5-dién-20-in-17-ol,
T. 13-etil-3-metoxi-18,19-dinor-17α-pregna-2,5(10)-dién-20-in-17-ol,
17-hidroxi-19-nor-17α-pregn-4-én-20-in-3-on (noretiszteron).
13-etil-3-metoxi-18,19-dinor-17α-pregna-1,3,5(10)-trien-20-in-17-ol,
W. 13-etil-17-hidroxi-18,19-dinor-17α-pregna-5,7,9-trien-20-in-3-one.
