Lavandulae aetherolaeum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.8 - 1
07/2010:1338
LAVANDULAE AETHEROLEUM Levendulaolaj DEFINÍCIÓ A Lavandula angustifolia Miller (Lavandula officinalis Chaix) virágzó ágvégződéseiből vízgőzdesztillációval előállított illóolaj. SAJÁTSÁGOK Küllem: színtelen vagy halványsárga, tiszta folyadék. Szag: komplex; linalil-acetátra emlékeztető. AZONOSÍTÁS Első azonosítás: B. Második azonosítás: A. A. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat. A vizsgálandó anyag 20 µl-ét 1 ml R toluolban oldjuk. Összehasonlító oldat. 10 µl R linaloolt, 10 µl R cineolt és 10 μl R linalilacetátot 1 ml R toluolban oldunk. Lemez: R VRK szilikagél lemez (5-40 μm) [vagy R VRK szilikagél lemez (210 μm)]. Kifejlesztőszer: R etil-acetát – R toluol (5+95 V/V). Felvitel: 10 µl [vagy 2 μl], 10 mm-es [vagy 6 mm-es] sávok formájában. Kifejlesztés: 10 cm-es [vagy 8 cm-es] fronttávolság eléréséig. Szárítás: levegőn. Előhívás: R ánizsaldehid–oldattal történő bepermetezés után a lemezt 5–10 percig 100–105 °C-on melegítjük. A kromatogramokat nappali fényben haladéktalanul értékeljük. Értékelés: az összehasonlító oldat és a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő zónák sorrendje a következő ábrán látható. A vizsgálati oldat kromatogramján a linalil-acetát zónája felett, egészen az oldószerfrontig, más, ibolyásvörös vagy zöldesbarna zónák is megjelennek.
Lavandulae aetherolaeum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.8 - 2 A lemez teteje ibolyásvörös vagy zöldesbarna zóna
————
————
linalil-acetát: ibolyaszínű vagy barna színű zóna
ibolyaszínű vagy barna színű zóna (linalilacetát) ibolyásvörös zóna
––––––––
––––––––
1,8-cineol: ibolyásbarna zóna
esetleg egy halvány ibolyásbarna zóna (1,8cineol)
linalool: ibolyaszínű vagy barna színű zóna
ibolyaszínű vagy barnaszínű zóna (linalool) halvány sárgásbarna zóna néhány, nem elkülönülő zóna
Összehasonlító oldat
Vizsgálati oldat
B. A„Kromatográfiás profil” vizsgálat során kapott kromatogramokat értékeljük. Értékelés: a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő jellegzetes csúcsok – retenciós idejüket tekintve – egyezzenek meg az összehasonlító oldat kromatogramján megjelenő, megfelelő csúcsokkal. VIZSGÁLATOK Relatív sűrűség (2.2.5): 0,878–0,892. Törésmutató (2.2.6): 1,455–1,466. Optikai forgatóképesség (2.2.7): –12,5° és –6,0° között. Savszám (2.5.1): legfeljebb 1,0. A vizsgálandó anyag 5,0 g-jának az előírt oldószerelegy 50 ml-ével készült oldatát vizsgáljuk. Kromatográfiás profil. Gázkromatográfia (2.2.28); a normalizációs eljárást alkalmazzuk. Vizsgálati oldat. 200 μl vizsgálandó anyagot R heptánnal 10,0 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat (a). 5 μl R limonént, 5 μl R cineolt, 5 μl R 3-oktanont, 5 mg R kámfort, 40 μl R linaloolt, 50 μl R linalil-acetátot, 10 μl R terpinen-4-olt, 5 μl R lavandulil-acetátot, 5 μl R lavandulolt és 5 mg R α-terpineolt R heptánnal 10 ml-re oldunk.
Lavandulae aetherolaeum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.8 - 3
Összehasonlító oldat (b). 5 μl R limonént R heptánnal 50,0 ml-re oldunk. Az oldat 0,5 ml-ét R heptánnal 5,0 ml-re hígítjuk. Oszlop: −
anyaga: kvarcüveg;
−
méretei: l = 60 m, Ø = 0,25 mm;
−
állófázis: R makrogol 20 000 (filmvastagság 0,25 µm).
Vivőgáz: R kromatográfiás célra szánt hélium. Áramlási sebesség: 1,5 ml/perc. Mintaáram-elosztási arány: 1:50 Hőmérséklet:
Oszlop
Idő (perc)
Hőmérséklet (°C)
0 – 15
70
15 – 70
70 → 180
Injektor
220
Detektor
220
Detektálás: lángionizációval. Injektálás:1 μl. Elúciós sorrend: az a) összehasonlító oldat készítésénél megadott sorrend; regisztráljuk az anyagok retenciós idejét. Rendszeralkalmasság: a) összehasonlító oldat: −
csúcsfelbontás: legalább 1,4, a terpinen-4-ol és a lavandulil-acetát között.
Az a) összehasonlító oldat kromatogramja alapján megállapított retenciós idők felhasználásával azonosítjuk az a) összehasonlító oldat összetevőit a vizsgálati oldat kromatogramján. Meghatározzuk az azonosított komponensek százalékos mennyiségét. A százalékos határértékek: −
limonén: legfeljebb 1,0%,
−
1,8-cineol: legfeljebb 2,5%,
−
3-oktanon: 0,1–5,0%,
−
kámfor: legfeljebb 1,2%,
−
linalool: 20,0–45,0%,
−
linalil-acetát: 25,0–47,0%,
Lavandulae aetherolaeum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.8 - 4
−
terpinen-4-ol: 0,1–8,0%,
−
lavandulil-acetát: legalább 0,2%,
−
lavandulol: legalább 0,1%,
−
α-terpineol: legfeljebb 2,0%.
−
elhanyagolási határ: a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,05%).
Királis tisztaság. Gázkromatográfia (2.2.28). Vizsgálati oldat. 0,02 g vizsgálandó anyagot R pentánnal 10 ml-re oldunk. Összehasonlító oldat. 10 µl R linaloolt (amely (R)-linalool és (S)-linalool elegye), 5 mg R borneolt és 10 µl R linalil-acetátot (amely (R)-linalil-acetát és (S)-linalilacetát elegye), R pentánnal 10 ml-re oldunk. Oszlop: −
anyaga: kvarcüveg,
−
méretei: l = 25 m, Ø = 0,25 mm,
−
állófázis: R királis kromatográfia céljára szánt, módosított β-ciklodextrin (filmvastagság 0,25 µm).
Vivőgáz: R kromatográfiás célra szánt hélium. Áramlási sebesség: 1,3 ml/perc. Mintaáram-elosztási arány: 1:30. Hőmérséklet:
Oszlop
Idő (perc)
Hőmérséklet (°C)
0 – 65
50 → 180
Injektor
230
Detektor
230
Detektálás: lángionizációval. Injektálás: 1 µl. Elúciós sorrend: (R)-linalool, (S)-linalool, borneol, (R)-linalil-acetát, (S)-linalilacetát; a borneol – a vizsgálati körülményektől és az oszlop állapotától függően – vagy az (S)-linalool előtt, vagy az (S)-linalool után eluálódik. Rendszeralkalmasság: összehasonlító oldat: −
csúcsfelbontás: legalább 5,5, az (R)-linalool és az (S)-linalool között; legalább 2,9, az (S)-linalool és a borneol között; legalább 2,0, az (R)-linalil-acetát és az (S)-linalil-acetát között.
Lavandulae aetherolaeum
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.8 - 5
Egy-egy (S)-enantiomer százalékos mennyiségét a következő kifejezés segítségével számítjuk ki: 100
AS , AS + AR
ahol AS = a megfelelő (S)-enantiomer csúcsterülete, AR = a megfelelő (R)-enantiomer csúcsterülete. Követelmények: −
(S)-linalool: legfeljebb 12%;
−
(S)-linalil-acetát: legfeljebb 1%.
ELTARTÁS 25 °C-ot meg nem haladó hőmérsékleten.
