Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Terpenoid Dari Fraksi M 17 Ekstrak Metilena Klorida Kulit Batang Tumbuhan Kasturi (Mangifera casturi)

P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop “Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5” | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Terpenoid Dari Fraksi M 17 Ekstrak Metilena Klorida Kulit Batang Tumbuhan Kasturi (Mangifera casturi) (Isolation

and Identification Terpenoide from The M 17 Fraction Of Methylene Chloride Bark Extracts of Kasturi) Budi Prayitno1*; Kholifatu Rosyidah2; & Maria Dewi Astuti2 1STKIP

PGRI Banjarmasin FMIPA Universitas Lambung Mangkurat Jl. Sultan Adam Komp H Iyus 18 , Banjarmasin 70121

2Kimia

*Corresponding email: [email protected] ABSTRAK Penelitian tentang isolasi senyawa terpenoid dari fraksi M 17 ekstrak metilen klorida telah dilakukan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengisolasi dan karakterisasi struktur senyawa hasil isolasi berdasarkan spekstroskopi UV, IR dan 1H- NMR. Pemisahan fraksi M 17 menggunakan Kromatografi Vakum Cair (KVC) menghasilkan 16 vial yang digabung berdasarkan pola noda yang sama menjadi enam fraksi, yaitu A, B, C, D, E, dan F. Fraksi E dipilih dan diuji kemurniannya dengan KLT tiga sistem eluen dan KLT dua dimensi, diperoleh 20 mg senyawa murni berupa padatan berwarna putih. Data spektrum inframerah menunjukkan adanya gugus –OH, –CH alifatik, –C=O, C=C dan C–O. Spektrum 1HNMR menunjukkan pola triterpenoid sikloartan yang positif dibuktikan dengan uji Liebermann-Burchard. Hasil analisis diduga senyawa 1 adalah senyawa (23-E)-27-nor-3β-hidroksisikloart-23-en-25-on. Kata kunci: Mangifera casturi, triterpenoid, sikloartan PENDAHULUAN

menyumbangkan satu atau lebih elektron

Keanekaragaman tumbuhan di Indonesia sangat

kepada radikal bebas, sehingga radikal bebas

memungkinkan untuk ditemukannya beraneka

tersebut menjadi tidak aktif (Gordon, 1990).

jenis senyawa kimia berupa metabolit sekunder

Penelitian tentang senyawa antioksidan eksogen

seperti

terpenoida,

alami terus berkembang. Antioksidan alami

saponin, dan sebagainya. Tumbuhan-tumbuhan

dalam makanan yang sudah dikenal,seperti

tersebut

asam askorbat, β-karoten dan α-tokoferol

alkaloida, potensial

flavonoida, untuk

diteliti

dan

dikembangkan oleh para peneliti Indonesia

mampu mencegah

perkembangan

dalam rangka pencarian obat atau bahan baku

penyakit

obat (Fitrya et al., 2010). Salah satu penelitian

tumbuhan yang kaya akan senyawa-senyawa

yang banyak dilakukan adalah penelitian untuk

yang aktif antioksidan adalah genus Mangifera.

mencari senyawa antioksidan yang efektif.

Penelitian pada kulit batang Mangifera indica

Antioksidan adalah senyawa kimia yang dapat

menunjukkan

(Reynertson,

2007).

kandungan

berbagai

Salah

senyawa

satu

aktif 390


antioksidan seperti asam askorbat, β-karoten

(MeOH), dan etil asetat (EtOAc). Pelarut organik

dan senyawa fenolat (Ribeiro, 2007). Selain itu

pro analitik (pa) yaitu kloroform (CHCl3) dan

M. indica juga mengandung polifenol, triterpen,

metanol.

flavonoida, fitosterol, serta elemen-elemen kecil

Whatman 40, plat KLT silika gel Merck 60

lainnya, seperti glukosilsanton, yang berfungsi

GF254 0,25 mm ukuran 20 x 20 cm dengan

sebagai antiviral, antitumor, antidiabetes dan

alumunium sebagai penyangga fasa diam, silika

antioksidan (Rivera et al., 2008).

gel Merck 60 GF254, silika gel

Kasturi (M. casturi) memiliki kekerabatan

mesh), larutan penampak noda 1,5% serium

dengan M. indica, sehingga diharapkan kasturi

sulfat, DPPH, dan vitamin C.

juga mengandung metabolit sekunder yang

Pelaksanaan Penelitian

sama atau hampir sama. Penelitian sebelumnya

a) Fraksinasi dan Pemurnian Senyawa

Alumunium

foil,

kertas

saring

G 60 (60-70

yang telah dilakukan, serbuk kasar batang

Proses pemisahan senyawa dilakukan

kasturi dimaserasi dengan metilena klorida

dengan menggunakan KVC yang berdiameter 2

(MTC). Ekstrak MTC

cm.

tersebut, kemudian

Sebanyak

20

gram

silika

gel

yang

dilakukan pemisahan dengan KVC menggunakan

sebelumnya dioven selama 1,5 jam dimasukkan

eluen n-heksana: etilasetat (EtOAc) dalam

kedalam KVC dan divakum, kemudian dilakukan

berbagai perbandingan, sehingga diperoleh 24

elusi dengan n-heksana sebanyak tujuh kali agar

fraksi yaitu fraksi M1-M24. Senyawa dari fraksi

padat dan tidak retak. Fraksi M 17 dibuat

M6

senyawa

impreg dengan cara dilarutkan dalam 2 ml

terpenoida, dan senyawa dari fraksi gabungan

pelarut aseton, kemudian diteteskan ke dalam 1

M12 dan M13 diduga sebagai golongan fenolat

gram silika gel 60 diaduk sampai homogen dan

(Rosyidah &Ariyani, 2009). Penelitian ini akan

kering. Impreg dimasukkan di atas kolom KVC

melakukan isolasi senyawa aktif fraksi M 17

yang telah siap pakai, kemudian dielusi dengan

ekstrak

pelarut yang sesuai. Elusi diawali dengan

dan

M15

MTC

diduga

kulit

sebagai

batang

kasturi

dan

mengkarakterisasinya.

pelarut non polar sebanyak 30 ml kemudian

METODE PENELITIAN

dihisap dengan pompa vakum. Elusi dilanjutkan

Alat

dengan kombinasi pelarut dengan polaritas

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini

meningkat, sesuai hasil KLT.

adalah spektofotometer UV Varian Conc. 100,

Semua fraksi yang diperoleh setelah

seperangkat alat gelas, alat destilasi, penguap

proses elusi pada KVC diamati dengan KLT.

putar vakum merk Buchi, oven merk Mammert

Setiap fraksi ditotolkan pada plat KLT sesuai

type U 40, neraca analitik Ohaus Item no. E 121

urutan, kemudian dielusi dengan eluen yang

40, chumber, tabung reaksi dan kolom KVC

digunakan untuk KVC. Setelah kering dapat

(diameter kolom = 2 cm), erlenmenyer, lampu

diamati di bawah lampu UV. Setelah itu

UV, IR, dan 1H-NMR.

disemprot

Bahan

Selanjutnya Bahan-bahan yang digunakan dalam

penelitian ini adalah Fraksi M 17 dari penelitian sebelumya, pelarut organik teknis metilena

klorida

(MTC),

aseton,

dengan

larutan

dipanaskan

serium dalam

sulfat. oven.

Penggabungan fraksi dilakukan berdasarkan pola kromatogram KLT.

n-heksana,

Uji kemurnian dilakukan dengan KLT

metanol

sampai tampak satu noda pada minimal tiga 391


sistem eluen. Selain itu, uji kemurnian juga

adalah pelarut dengan perbandingan tersebut.

dilakukan dengan KLT dua dimensi yang apabila

Proses elusi dilakukan dengan sistem elusi

murni akan menampakkan satu noda.

bergradien, sehingga mula-mula yang digunakan

b) Penentuan Struktur Senyawa Murni

untuk elusi adalah n-heksana hingga etil asetat.

Analisis

struktur

senyawa

murni

Elusi dilanjutkan dengan kepolaran meningkat

dilakukan dengan analisis hasil spektoskopi UV,

mulai dari campuran n-heksana:etil asetat,

IR dan 1H-NMR. Hasil analisis akan didapatkan

kemudian etil asetat. Perbandingan campuran

bebarapa spektra sehingga dapat dilakukan

yang digunakan untuk elusi, yaitu 9,5:0,5; 9:1;

pengolahan data untuk menentukan struktur

8,5:1,5; 8:2; 7,5: 2,5; 7:3 dan 6:4.

dugaan senyawa murni.

Fraksi hasil KVC kemudian dianalisis dengan menggunakan KLT dengan eluen n-heksana:etil

HASIL DAN DISKUSI

asetat (8:2). Fraksi yang sama digabungkan

a. Fraksinasi, Isolasi dan Pemurnian Senyawa

berdasarkan pola kromatogram.

Penelitian sebelumnya oleh Rosyidah dan

Berdasarkan pola kromatogram maka

Ariyani (2009), sebanyak 2,5 kg serbuk kasar

fraksi yang digabungkan, yaitu fraksi A yang

batang kasturi dimaserasi langsung dengan

terdiri atas vial 1 sampai 5 dengan Rf 0,7, fraksi

MTC. Hasil maserasi disaring dan dievaporasi

B yang berasal dari vial 6 dengan Rf 0,6, fraksi C

sehingga diperoleh ekstrak MTC sebanyak 37

terdiri atas vial 7 dan 8 dengan Rf 0,5, fraksi D

gram.

pemisahan

terdiri atas vial 9 dan 10 dengan dua noda,

dengan KVC menggunakan eluen n-heksana: etil

masing-masing memiliki Rf 0,3 dan Rf 0,2, fraksi

asetat (EtOAc) sehingga diperoleh 24 fraksi

E terdiri atas vial 11 dan 12 dengan Rf 0,2 dan

yaitu fraksi M1-M24. Pada penelitian ini akan

fraksi F terdiri atas vial 13, 14, 15, dan 16

dilakukan isolasi senyawa aktif dari fraksi M 17.

dengan Rf 0,07. Fraksi A, B dan C memiliki

Ekstrak

MTC

Fraksinasi

dilakukan

dengan

massa yang sedikit yaitu ± 5 mg, fraksi D

menggunakan kromatografi kolom cair (KVC).

memiliki massa 152,7 mg, fraksi E bermassa

Hal pertama kali yang dilakukan adalah mencari

100 mg dan fraksi F sebesar 604,8 mg. Fraksi

eluen yang sesuai untuk KVC. Pencarian eluen

yang dianalisis selanjutnya adalah fraksi E, hal

yang sesuai diawali dengan menggunakan

ini karena fraksi E memiliki pola noda yang

metanol, kloroform,

n-heksana,

lebih sederhana dan massa yang cukup untuk

aseton, dan MTC , kemudian dilakukan variasi

pemisahan selanjutnya. Fraksi E menghasilkan

perbandingan berbagai pelarut tersebut untuk

endapan putih pada wadah vialnya.

mendapatkan pola pemisahan yang paling baik.

Fraksi E terbagi dua yaitu yang berasal dari vial

Pola pemisahan senyawa dari fraksi M 17 dilihat

11 dan vial 12 yang selanjutnya vial 11 disebut E

dari pola pemisahan noda pada KLT.

1 dan vial 12 sebagai E 2. Endapan tersebut

Pola

kromatogram

dilakukan

etil asetat,

17,

berupa bubuk putih yang dapat terbentuk

menunjukkan pola pemisahan yang terbaik

kembali jika dilarutkan dalam n-heksana:etil

adalah

asetat (7:3), atau yang lebih polar. Endapan

n-heksana:etil

KLT

fraksi

asetat

(7:3)

M

karena

menunjukkan pola pemisahan senyawa yang

tersebut

dicuci

dengan

aseton

untuk

lebih banyak. Oleh karena itu, eluen yang

meminimalisasi senyawa yang ikut terikat pada

digunakan untuk elusi senyawa pada KVC 392


endapan.

Endapan

tersebut

kemudian

Spektrum

UV

menggunakan

prinsip

dipisahkan dan dianalisis selanjutnya.

antaraksi gelombang elektromagnetik dengan

Analisis selanjutnya dilakukan uji kemurnian

molekul senyawa yang berhubungan dengan

dengan menggunakan sistem tiga eluen dan KLT

energi transisi antara transisi elektron π → π*

dua

dan n → π*. Panjang gelombang UV bergantung

dimensi.

berdasarkan

Pemilihan

eluen

kepolarannya,

dilakukan

selain

itu

jika

pada mudahnya promosi elektron dari suatu

senyawa tersebut telah murni akan memberikan

senyawa.

noda tunggal dalam eluen apapun. Sistem tiga

menimbulkan spektra UV. Senyawa 1 dianalisis

eluen yang berbeda yang dipilih, yaitu eluen n-

dengan spektrofotometer UV menggunakan

heksana:etil asetat (7:3), n-heksana:aseton (7:3)

pelarut metanol. Pelarut ini dipilih karena

dan metilen klorida:aseton (8:2). Hasilnya

metanol merupakan pelarut organik yang dapat

menunjukkan noda tunggal. Hasil kromatogram

melarutkan

KLT dua dimensi menggunakan pelarut n-

nonpolar walaupun dalam jumlah terbatas

heksana:etil asetat (8:2) dan n-heksana:aseton

terhadap kelarutan senyawa tertentu.

(7:3) juga menunjukkan noda tunggal.

Spektrum UV Senyawa 1 menunjukkan adanya

Senyawa dari endapan fraksi E 1 tersebut

puncak maksimum pada panjang gelombang (λ)

kemudian disebut Senyawa 1 pada analisis

216

selanjutnya. Senyawa yang diperoleh memiliki

maksimum (λmax) pada 216 nm merupakan

berat ± 20 mg. Hasil KLT dua dimensi dan

puncak khas untuk karbonil-α,β- tak jenuh (-

sistem tiga eluen menunjukkan bahwa senyawa

C=C-C=O) dan diena terkonjugasi (-C=C-C=C-)

pada endapan tersebut tampak sebagai noda

dengan adanya transisi elektron

tunggal. Oleh karena itu, senyawa tersebut telah

(Silverstein,

murni dan dapat dilakukan analisis struktur

spektrum UV ini menunjukkan bahwa Senyawa

dengan menggunakan spektrometer UV, IR dan

1 terdapat gugus karbonil-α,β-tak jenuh (-C=C-

H-NMR dan uji antioksidan dengan radikal

C=O) atau diena terkonjugasi (-C=C-C=C-) dan

DPPH.

gugus karbonil (-C=O) (Sastrohamidjojo, 2001).

b. Penentuan Struktur Senyawa 1

Puncak-puncak spektrum UV dapat dilihat pada

a) Analisis ultraviolet (UV)

nm

Tipe-tipe

senyawa

dalam

transisi

baik

pelarut

1991).

elektron

polar

maupun

metanol.

Puncak

akan

Puncak

π →

serapan

π* pada

Gambar 3.

b

a

O C

C b

C

C

C

R

Gambar 3. Spektrum UV Senyawa 1

393


b) Analisis spektroskopi inframerah Spektrum IR Senyawa 1 menunjukkan adanya pita serapan pada bilangan gelombang

1;1031 cm-1; dan 668 cm-1. Pola spektrum IR Senyawa 1 dapat dilihat pada Gambar 4 di bawah ini.

3382 cm-1; 2939 cm-1; 2872cm-1; 1688 cm-1; 1642 cm-1; 1457 cm-1; 1373 cm-1; 1258 cm-

Gambar 4. Spektrum IR Senyawa 1

Pita serapan pada bilangan gelombang 3382 cm1 menunjukkan adanya vibrasi ulur gugus hidroksi (OH). Kedua serapan tersebut mengindikasikan adanya gugus hidroksi (OH) yang terikat pada atom karbon. Munculnya vibrasi ulur C-H alifatik pada 2939 cm-1 dan 2872 cm-1 memberi petunjuk kemungkinan adanya gugus metil (CH3) dan metilena (CH2). Data ini diperkuat dengan adanya vibrasi tekuk C-H pada bilangan gelombang 1457 cm-1 dan 1373 cm-1 yang mengindikasikan adanya gugus gem dimetil sebagai ciri khas senyawa triterpenoid. Adanya karbon ikatan rangkap (C=C) seperti ditunjukkan oleh spektrum UV diperkuat oleh data spektrum IR dengan adanya vibrasi ulur (C=C) pada bilangan gelombang 1642 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil (C=O) pada 1688 cm-1. Spektrum IR adanya vibrasi ulur (C=C) dan vibrasi ulur karbonil (C=O) ini mirip seperti senyawa (22-E)-25,26,27-trinor-3βhidroksisikloart-22-en-24-al yang memiliki vibrasi ulur (C=C) pada bilangan gelombang 1635 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil (C=O) pada 1695 cm-1 yang berdekatan (Chiang, et al., 2001). Data UV dan IR menunjukkan Senyawa 1 memiliki gugus hidroksil, karbon ikatan rangkap

(C=C), karbonil (C=O), gugus metilena (CH2), gugus metil (CH3) dan tidak memiliki bilangan gelombang untuk (=C-H) aromatik pada 30003100 cm-1. c. Analisis spektroskopi 1H-NMR Spektroskopi 1H-NMR berguna untuk menunjukkan posisi proton (H) pada struktur Senyawa 1. Spektrum 1H-NMR ini menunjukkan adanya enam metil muncul pada δH 1,84 (3H, s), 0,96 (6H, s), 0,80 (3H, s) dan 0,90 (3H, t, J= 6.45) ppm, terdapat proton yang ciri khas untuk metilen siklopropana, yaitu pada δH 0,33 dan 0,55 (2H,d, J=3,9) ppm. Puncak dengan geseran kimia δH 3,33 (1H, m) ppm menunjukkan adanya proton metin karbinol. Spektrum ini memiliki kesamaan dengan beberapa contoh senyawa triterpenoid, seperti 27-nor-3βhidroksi-25-oksosikloartan, (22-E)-25,26,27trinor-3β-hidroksisikloart-22-en-24-al (Chiang, et al., 2001) dan (23-E)-27-nor-3βhidroksisiklo-23-en-25-on (Zhang, et al., 2002). Spektrum 1H-NMR Senyawa 1 dapat dilihat pada Gambar 5 di bawah ini.

394


Gambar 5. Spektrum 1H-NMR Senyawa 1 Kemiripan

spektrum

1H-NMR

Senyawa

1

menit. Uji ini positif untuk triterpenoid jika

dengan beberapa struktur triterpenoid di atas

terbentuk warna merah (Kristanti, et al., 2004).

perlu dilakukan uji untuk membuktikan apakah

Uji kualitatif Senyawa 1 dengan pereaksi

Senyawa 1 juga termasuk senyawa triterpenoid.

Liebermann-Burchard

d. Uji Liebermann-Burchard

senyawa tersebut adalah triterpenoid dengan

Uji Liebermann-Burchard dilakukan dengan melarutkan sampel dalam kloroform hingga

menunjukkan

bahwa

terbentuknya senyawa warna merah jingga seperti pada Gambar 6.

larut sempurna. Larutan tersebut kemudian ditambahkan asam asetat anhidrat dan asam sulfat pekat, dikocok dan didiamkan selama 15

(a)

Sebelum penambahan pereaksi LiebermannBurchard

(b)Setelah penambahan pereaksi LiebermannBurchard

Gambar 6. Hasil uji Liebermann-Burchard

395


e) Struktur dugaan Senyawa 1

27-nor-3β-hidroksi-25-oksosikloartan,

Data hasil analisis spektrum UV, IR dan 1H-NMR

serta

dilanjutkan

dengan

Liebermann-Burchard

menunjukkan

Senyawa

senyawa

1

adalah

(22-E)-

25,26,27-trinor-3β-hidroksisikloart-22-en-24-al

uji

(Chiang, et al., 2001) dan (23-E)-27-nor-3β-

bahwa

hidroksisikloart-23-en-25-on

(Zhang,

et

al.,

triterpenoid.

2002), karena memiliki pola spektrum 1H-NMR

Triterpenoid ini mengandung gugus karbonil-

dan IR yang hampir sama, selain itu juga

α,β-tak jenuh, hidroksil dan siklopropana yang

didukung oleh spektrum UV. Struktur ketiga

terdapat pada Senyawa 1. Hasil studi literatur,

senyawa tersebut seperti pada Gambar 7.

senyawa ini diduga salah satu dari triterpenoid O

H

O

OH

OH

(a) 27-nor-3β-hidroksi-25-oksosikloartan

(b) (22-E)-25,26,27-trinor-3βhidroksisikloart-22-en-24-al O

HO

(c) (23-E)-27-nor-3β-hidroksisikloart-23-en-25-on Gambar 7. Beberapa triterpeniod sikloartan Ketiga senyawa di atas memperlihatkan bahwa triterpenoid tersebut terdiri atas 30 atom

karbon yang membentuk cincin utama. Sistem penomorannya seperti Gambar 8.

21 18 12 11

19

10

9

5 6

23

27 25 26

16 15

8 7

24

17

14

2 3 4

20

13

1

H

22

30

HO

29

28

Gambar 8. Sistem penomoran pada triterpenoid sikloartan

396


Perbandingan pola spektrum

1H-NMR

ketiga

bawah ini.

senyawa di atas dapat dilihat pada Tabel 1 di Tabel 1. Perbandingan 1H-NMR ketiga sikloartan dengan Senyawa 1 H

27-nor-3β-hidroksi-25oksosikloartan

(1)

(22-E)-25,26,27-trinor-3β-

(23-E)-27-nor-3β-

hidroksisikloart-22-en-24-al

hidroksisikloart-23-en-

(1)

25-on (2)

Senyawa 1

1 2 3

3.26 (1H,dd, J= 10.8, 4.0)

3.27 dd (1H,m, 10.8, 44)

3.26 (dd, J=11, 4.2)

3.23 (1 H, m)

1.28a)

1.28a)

1.48a)

1.52a)

11

1.95a), 1,20a)

2.02 (1H,m), 1.14a)

12

1.60a)

1.64a)

1.30a)

1.31a)

17

1.55a)

1.74a)

18

0,93 (3H,s)

1.01 (3H,s)

0.97 (3H,s)

0.96 (3H,s)

19

0.31 (1Ha,d, J=4)

0.33(1Ha,d,J=4, Ha)

0.32 (1Ha, d, J=4.2)

0.33 (1Ha,d, J=3.9)

0.51 (1Hb, d, J=4)

0.55 (1H,d,J=4, Hb)

0.54 (1Hb,d, J=4.2)

0,55 (1Hb ,d, J=3,9).

1.20-1,40a)

2,4 (1H, m)

4 5 6 7 8 9 10 2.12 (1H, m)

13 14 15 16

20

1.75a)

2.25 (1H,m)

397


21

0.85(3H, d, J=5.2)

1.07 (3H.d, J=6.4)

22

1.20-1.40a)

6.07 (1H,dd, 15.6, 8.8)

23

1.58a)

6.04 (1H, dd, J=15.6, 7.6)

0.88 (3H, d, J=6.5)

0.90 (3H, t, J= 6.45)

6.78 (1H, ddd, J=15.6,

6.90 (1H, t, J= 7.75, 6.9)

8.7, 6.2) 6.05 (d, J=15.8) 24

2.37 (1H, m)

9.46 (1H, d, J=7,6)

25 2.33 (3H,s) 26

2.11 (3H,s)

1.84 (3H, s)

27 0.95 (3H,s) 28

0.94 (3H,s)

0.95 (3H,s)

29

0.78 (3H,s)

0.79 (3H,s)

30

0.86 (3H,s)

0.89 (3H,s)

0.96 (3H, s) 0.79 (3H,s) 0.80 (3H, s) 0.87 (3H,s) 0.89 (3H, s)

a) =overlap, s=singlet, d=doblet, t=triplet dan m=multiplet. (1)Chiang, et al. (2001) dan (2) Zhang, et al. ( 2002)

Perbandingan antara 1H-NMR Senyawa 1

1642 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil (C=O) pada

dan ketiga senyawa di atas menunjukkan bahwa

1688 cm-1 seperti pada senyawa (22-E)-

pola spektrum Senyawa 1 memiliki kemiripan

25,26,27-trinor-3β-hidroksisikloart-22-en-24-al

dengan ketiganya. Hal ini menunjukkan bahwa

mengandung

senyawa satu termasuk golongan triterpenoid

memiliki vibrasi ulur (C=C) pada bilangan

sikloartan. Ciri khas golongan ini adalah adanya

gelombang 1635 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil

geseran kimia δH 0,33 dan 0,55 ppm, masing-

(C=O) pada 1695 cm-1 (Chiang, et al., 2001).

masing doblet dan terdiri satu proton, untuk

Spektrum IR menunjukkan Senyawa 1 juga

proton-proton C-19. Kesamaan adanya lima

memiliki gugus hidroksil dengan bilangan

gugus metil (CH3) yaitu proton-proton dari C-

gelombang 3382 cm-1, karbon ikatan rangkap

18, C-21, C- 28, C-29 dan C-30, yaitu pada

(C=C), karbonil (C=O), gugus metilena (CH2),

geseran kimia δH 0,81; 0,89; 0,90; 0,96 (15H,

gugus metil (CH3). Oleh karena itu, dari ketiga

5X3); 1,84 (3H, s) ppm. Senyawa 1 juga memiliki

senyawa pembanding di atas, senyawa yang

kesamaan yaitu adanya gugus hidroksil yang

memiliki gugus karbonil-α,β-tak jenuh adalah

terletak pada C-3 dengan ditandai oleh adanya

(22-E)-25,26,27-trinor-3β-hidroksisikloart-22-

geseran proton tunggal (proton metin karbinol)

en-24-al dan (23-E)-27-nor-3β-hidroksisikloart-

dan multiplet pada δH 3,2 ppm.

23-en-25-on. Spektrum 1H-NMR Senyawa 1

gugus

karbonil-α,β-tak

jenuh,

Spektrum UV menunjukkan bahwa Senyawa

tidak menunjukkan adanya geseran kimia untuk

1 mengandung gugus karbonil-α,β-tak jenuh.

proton aldehida dari senyawa (22-E)-25,26,27-

Hal ini dibenarkan oleh spektrum IR adanya

trinor-3β-hidroksisikloart-22-en-24-al

vibrasi ulur (C=C) pada bilangan gelombang

9,46), selain itu juga senyawa (22-E)-25,26,27-

(δH

398


trinor-3β-hidroksisikloart-22-en-24-al,

tidak

µg/ml (5,9 µM). Keaktivan ini lebih tinggi

memiliki proton-proton untuk C-26, sedangkan

daripada asam betulinat, asam ursolat dan asam

pada

1

betulonat yang memiliki CC50 berturut-turut

menunjukkan adanya geseran kimia untuk

sebesar 16,4 µg/ml (36,0 µM), 7,2 µg/ml (15,8

proton C-26 (δH 1,84,s, ppm).

µM)) dan 47,7 µg/ml (105,1 µM) dan IC50

spektrum

1H-NMR

Senyawa

Hasil analisis Senyawa 1 berdasarkan spektrum

UV,

IR

dan

1H-NMR

memiliki

kesamaan dengan senyawa (23-E)-27-nor-3β-

berturut-turut sebesar 14,8 µg/ml (32,5 µM), 6,7 µg/ml (17,7 µM) dan 9,7 µg/ml (21,4 µM) (Zhang, et al., 2002).

hidroksisikloart-23-en-25-on. Oleh karena itu, dapat

disimpulkan

merupakan

Senyawa

senyawa

penelitian tanaman

seperti ini M.

pada

yang

Gambar

menunjukkan casturi

diduga

KESIMPULAN

(23-E)-27-nor-3β-

hidroksisikloart-23-en-25-on struktur

1

diduga

memiliki

Kesimpulan yang dapat diperoleh dari penelitian

ini

adalah

hasil

isolasi

dan

7c.

Hasil

karakterisasi dengan spektrum UV, IR dan 1H-

bahwa

pada

NMR menunjukkan senyawa tersebut diduga

mengandung

senyawa (23-E)-27-nor-3β-hidroksisikloart-23-

(23-E)-27-nor-3β-hidroksisikloart-23-en-25-on yang termasuk kedalam golongan terpenoid.

en-25-on seperti pada Vatica cinera (Zhang, et al.,2002) dan Ficus microcarpa (Chiang, et al.,

UCAPAN TERIMAKASIH

2001).

Ucapan terimakasih diberikan kepada laboran

Studi literatur terhadap senyawa (23-E)-27nor-3β-hidriksisikloart

23-en-25-on

menunjukkan bahwa senyawa ini memiliki

dari lab instrumentasi Kimia FMIPA Unesa dan LIPI

puspitek

Serpong

untuk

analisis

spektroskopi UV-Vis dan NMR.

aktivitas sitotoksik (CC50) yaitu sebesar 5,4 µg/ml (12,7 µM) dan memiliki aktivitas anti-HIV (IC50) sebesar 21% penghambatan pada 2,5 DAFTAR PUSTAKA Chiang, Y.M., J.K. Su, Y.H. Liu, & Y.H. Kuo. 2001. New Cyclopropyl-Triterpenoids from the Aerial Roots of Ficus microcarpa. Journal Chem. Pharm. Bull. 49(5) 581—583 (2001). Fitrya, L. Anwar & E. Novitasari. 2010. Isolasi Senyawa Fenolat dari Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Tumbuhan Gandaria. Jurnal Kimia. Vol. 13, No. 1. Gordon, M.H. 1990. The Mechanism of Antioxidants Action in Vitro. Di dalam: B.J.F. Hudson, editor. Food Antioxidants. Elsivier Applied Science. London Hanani, E., A. Mun’im., & R. Sekarini. 2005. Identifikasi Senyawa Antioksidan dalam Spons Callyspongia sp dari Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian. 2 (3) : 127-133. N’Guessan, J.D.N., A.P.Bidié, B.N.Lenta, B. Weniger, P. André, & F. Guédé-Guina. 2007. In vitro Assays for Bioactivity-guided Isolation of Antisalmonella and Antioxidant Compound in Thonningia sanguinea

flowers. African Journal of Biotechnology. Vol. 6, No.14 : 1685-1689. Reynertson, K.A. 2007. Phitochemical Analysis of Bioactive Constituents from Edible Myrtaceae Fruit, Dessertation. The City University of New York. New York. Rivera D.G., I.H. Balmaseda, A.A. Leon, B.C. Hernandez, L.M. Montiel, G.G. Garrido, S. Cuzzocrea, & R.D. Hernandez. 2006. Anti-allergic properties of Mangifera indica L. extract (Vimang) and contribution of its glucosylxanthone mangiferin. Journal of Pharmacy and Pharmacology 58: 385392. Ribeiro, S.M.R. 2007. Antioxidants in Mango (Mangifera indica L.) Pulp. Journal Plant Foods for Human Nutrition 62:13-17. Rosyidah, K., & D. Ariyani. 2009. Karakterisasi Senyawa-sennyawa fenolat Berkhasiat Sitotoksik

399


dari Batang Kasturi (Mangifera casturi). Laporan Penelitian. FMIPA Universitas Lambung Mangkurat. Banjarbaru. Siska. 2010. Karakterisasi Struktur dan Uji Aktivitas Antioksidan Senyawa Fenolat dari Kulit Batang Tumbuhan Binjai (Mangifera caesia). FMIPA UNLAM. Banjarbaru. Zhang, H.J., G.T. Tan, V.D. Hoang, N.V. Hung, N.M. Cuong, D.D. Soejarto, J.M. Pezzuto, & H. H. S. Fong. 2002. Natural Anti-HIV Agents. Part IV. AntiHIV Constituents from Vatica cinerea. Journal of Institute of Chemistry, National Center for Science and Technology.

400

Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Terpenoid Dari Fraksi M 17 Ekstrak Metilena Klorida Kulit Batang Tumbuhan Kasturi (Mangifera casturi)

Recommend Documents