Fludarabini phosphas
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.7.7 - 1
04/2013:1781
FLUDARABINI PHOSPHAS Fludarabin-foszfát
C10H13FN5O7P Mr 365,2 [75607-67-9] DEFINÍCIÓ 2-Fluor-9-(5-O-foszfono-β-D-arabinofuranozil)-9H-purin-6-amin. Tartalom: 97,0–102,0% (vízmentes anyagra). SAJÁTSÁGOK Küllem: fehér vagy csaknem fehér, kristályos, nedvszívó por. Oldékonyság: vízben kevéssé oldódik; dimetilformamidban bőségesen oldódik; vízmentes etanolban alig oldódik. AZONOSÍTÁS Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24). Összehasonlítás: CRS fludarabin-foszfáttal. VIZSGÁLATOK Az oldat külleme. Az oldat tiszta legyen (2.2.1). Színe nem lehet erősebb, mint a BS5 szín– mértékoldaté (2.2.2, II. módszer). 50 mg anyagot 5,0 ml R dimetilformamidban ultrahangos kezeléssel oldunk. Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): +10,0 és +14,0 között (vízmentes anyagra). 0,100 g anyagot ultrahangos kezeléssel R vízzel 20,0 ml-re oldunk. Rokon vegyületek. Folyadékkromatográfia (2.2.29): a normalizációs eljárást alkalmazzuk. Az oldatokat közvetlenül felhasználás előtt készítjük. Vizsgálati oldat. 20 mg vizsgálandó anyagot ultrahangos kezeléssel 50 ml R vízben oldunk, majd az oldatot R vízzel 100,0 ml-re hígítjuk.
Fludarabini phosphas
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.7.7 - 2
Összehasonlító oldat (a). 20 mg CRS fludarabin-foszfátot ultrahangos kezeléssel 50 ml R vízben oldunk, majd az oldatot R vízzel 100,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (b). 20 mg vizsgálandó anyagot ultrahangos kezeléssel 20 ml 0,1 M sósavban oldunk, majd az oldatot 15 percen át 80 °C-os vízfürdőben melegítjük, ezután szobahőmérsékletűre hűtjük, megkeverjük, és R vízzel 100,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (c). Az a) összehasonlító oldat 1,0 ml-ét R vízzel 100,0 ml-re hígítjuk. Ezen oldat 1,0 ml-ét R vízzel 20,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat (d): 5 mg CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt fludarabint (D-, E- és Fszennyezőt tartalmaz) ultrahangos kezeléssel 10 ml R vízben oldunk, majd az oldatot R vízzel 25,0 mlre hígítjuk. Üres oldat: 0,02 M sósav. A.
A fludarabin-foszfát előtt eluálódó szennyezők.
Oszlop: –
méretei: l = 0,15 m, Ø = 4,6 mm,
–
állófázis: R kromatográfiás célra szánt, utókezelt, oktadecilszililezett szilikagél (5 μm),
Mozgófázis: R metanol (60 térfogatrész) és 1,36 g/l töménységű R kálium-dihidrogén-foszfát (940 térfogatrész) elegye. Áramlási sebesség: 1 ml/perc. Detektálás: spektrofotométerrel, 260 és 292 nm-en. Injektálás: 10–10 μl vizsgálati oldat, a), b) és c) összehasonlító oldat. Kromatografálási idő: a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő főcsúcs retenciós idejének 4,5szerese. Szennyezők azonosítása: az A- és B-szennyező azonosításához 292 nm-nél (292 nm-nél sokkal nagyobb a jel, mint 260 nm-nél) a b) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk; a C-szennyező azonosításához a CRS fludarabin foszfáthoz mellékelt kromatogramot és az a) összehasonlító oldat kromatogramját használjuk. Relatív retenciók fludarabin-foszfátra (retenciós ideje kb. 9 perc) vonatkoztatva: A-szennyező kb. 0,26; B-szennyező kb. 0,34; C-szennyező kb. 0,42. Rendszeralkalmasság: b) összehasonlító oldat 292 nm-en: –
csúcsfelbontás: legalább 2,0, az A-szennyező és a B-szennyező között.
Követelmények: 260 nm-en: – korrekciós faktorok: a következő szennyezők mennyiségének kiszámításához csúcsterületeiket szorozzuk a megfelelő korrekciós faktorral: A-szennyező 4,0; B-szennyező 2,5; Cszennyező 1,9. –
A-szennyező: legfeljebb 0,8%;
–
C-szennyező: legfeljebb 0,4%;
–
B-szennyező: legfeljebb 0,2%;
–
a fludarabin-foszfát előtt eluálódó egyéb szennyezők: egyenként legfeljebb 0,1%; – a fludarabin foszfát előtt eluálódó, egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezők egyenként: legfeljebb 0,10%.
– elhanyagolási határ: a c) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,05%), és a fludarabin-foszfát után eluálódó valamennyi csúcs. B. A fludarabin-foszfát után eluálódó szennyezők.
Fludarabini phosphas
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.7.7 - 3
A vizsgálat körülményei megegyeznek az A. pontban leírtakkal, a következő eltérésekkel. Mozgófázis: R metanol (200 térfogatrész) és 1,36 g/l töménységű R kálium-dihidrogén-foszfát (800 térfogatrész) elegye. Detektálás: spektrofotométerrel, 260 nm-en. Injektálás: 10–10 μl vizsgálati oldat, c) és d) összehasonlító oldat. Kromatografálási idő: a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő főcsúcs retenciós idejének nyolcszorosa. Szennyezők azonosítása: a D-, E- és F-szennyező csúcsait a CRS rendszeralkalmassági vizsgálatra szánt fludarabinhoz mellékelt kromatogram és a d) összehasonlító odattal kapott kromatogram segítségével azonosítjuk. Relatív retenciók a fludarabin-foszfátra (retenciós ideje kb. 2,5 perc) vonatkoztatva: D-szennyező kb. 1,5; E-szennyező kb. 1,9; F-szennyező kb. 2,5. Rendszeralkalmasság. d) összehasonlító oldat: – csúcsfelbontás legalább 5,0, a fludarabin foszfát és a D-szennyező csúcsa között. Követelmények: – korrekciós faktorok: a következő szennyezők mennyiségének kiszámításához csúcsterületeiket szorozzuk a megfelelő korrekciós faktorral: D-szennyező 0,5; E-szennyező 0,6; F-szennyező 1,8; –
E-szennyező: legfeljebb 0,2%;
–
F-szennyező: legfeljebb 0,2%;
–
D-szennyező: legfeljebb 0,15%;
–
egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezők egyenként: legfeljebb 0,10%.
– elhanyagolási határ: a c) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,05%), és a fludarabin-foszfát előtt eluálódó valamennyi csúcs. Az A. pont szerinti vizsgálat során a fludarabin-foszfát előtt eluálódó összes szennyező, eltekintve az A-, a B- és a C-szennyezőtől, valamint a B. pont szerinti vizsgálat során a fludarabin-foszfát után eluálódó összes szennyező, eltekintve a D-, az E- és az F-szennyezőtől: legfeljebb 0,5%. Az A. pont szerinti vizsgálat során a fludarabin-foszfát előtt és a B. pont szerinti vizsgálat során a fludarabin-foszfát után eluálódó összes szennyező: legfeljebb 2,0%. Etanol (2.4.24 , „A” rendszer): legfeljebb 1,0%. Nehézfémek (2.4.8/A): legfeljebb 20 ppm. 1,0 g anyagot 10 ml R vízben melegítés közben oldunk. Lehűlés után az oldatot R ammónia–oldattal – lakmuszpapírt alkalmazva indikátorként – enyhén meglúgosítjuk. Ezután az oldat pH-ját R hígított ecetsavval 3,0–4,0-re állítjuk be, majd térfogatát R vízzel 20 ml-re egészítjük ki. Ezen oldat 12 ml-ét vizsgáljuk. Az összehasonlító oldatot R ólom–mértékoldattal (1 ppm Pb) készítjük. Víztartalom (2.5.12): legfeljebb 3,0%. Az igen finom porrá dörzsölt anyag 0,200 g-ját 15 ml R vízmentes metanollal kb. 15 másodpercig keverjük, mielőtt a titrálást megkezdjük. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Folyadékkromatográfia (2.2.29) a „Rokon vegyületek” vizsgálat A. pontja szerint, a következő módosításokkal. Vizsgálati oldat. 24,0 mg vizsgálandó anyagot ultrahangos kezeléssel 50 ml R vízben oldunk, majd az oldatot R vízzel 100,0 ml-re hígítjuk. Az oldat 25,0 ml-ét a mozgófázissal 100,0 ml-re hígítjuk.
Fludarabini phosphas
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.7.7 - 4
Összehasonlító oldat: 24,0 mg CRS fludarabin-foszfátot ultrahangos kezeléssel 50 ml R vízben oldunk, majd az oldatot R vízzel 100,0 ml-re hígítjuk. Az oldat 25,0 ml-ét a mozgófázissal 100,0 ml-re hígítjuk. Detektálás: spektrofotométerrel, 260 nm-en. Injektálás: 10 μl. A százalékos C10H13FN5O7P-tartalmat a CRS fludarabin-foszfát deklarált tartalma alapján számoljuk ki. ELTARTÁS
Légmentesen záró tartályban, fénytől védve, 2–8 °C-on. SZENNYEZŐK Egyedi határértékhez kötött (specifikált) szennyezők: A, B, C, D, E, F. Egyéb kimutatható szennyezők: (a következő szennyezők a cikkely valamelyik vizsgálatával kimutathatók, ha bizonyos határon felüli mennyiségben vannak jelen. Határértéküket az egyéb/egyedi határértékhez nem kötött (nem specifikált) szennyezőkre vonatkozó általános követelmény és/vagy a Gyógyszeranyagok (2034) általános cikkely előírásai határozzák meg. Ezért ezeket a szennyezőket nem szükséges a megfelelés bizonyítása céljából azonosítani. Lásd még a Gyógyszeranyagok szennyezésvizsgálata (5.10.) című általános fejezetet): G, H, I, J.
A. 6-amino-9-(5-O-foszfono-β-D-arabinofuranozil)-9H-purin-2-ol,
B. 6-amino-7H-purin-2-ol,
C. 9-(3,5-di-O-foszfono-β-D-arabinofuranozil)-2-fluor-9H-purin-6-amin,
Fludarabini phosphas
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.7.7 - 5
D. 2-fluor-7H-purin-6-amin,
E. 9-β-D-arabinofuranozil-2-fluor-9H-purin-6-amin,
F. 2-etoxi-9-(5-O-foszfono-β-D-arabinofuranozil)-9H-purin-6-amin,
G. 9-(2-klór-2-dezoxi-5-O-foszfono-β-D-arabinofuranozil)-2-fluor-9H-purin-6-amin,
H. 9-(2,5-anhidro-β-D-arabinofuranozil)-2-fluor-9H-purin-6-amin.
I.
9-(5-O-foszfono-β-D-arabinofuranozil)-9H-purin-2,6-diamin,
J. 2-metoxi-9-(5-O-foszfono-β-D-arabinofuranozil)-9H-purin-6-amin,
