EFEK ANTIFUNGI PERASAN KULIT JERUK PURUT (Citrus hystrix) TERHADAP PERTUMBUHAN Trichophyton mentagrophytes. SECARA in vitro SKRIPSI

perpustakaan.uns.ac.id

digilib.uns.ac.id

EFEK ANTIFUNGI PERASAN KULIT JERUK PURUT (Citrus hystrix) TERHADAP PERTUMBUHAN Trichophyton mentagrophytes SECARA in vitro

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

ESTI RAHMAWATI SURYANINGRUM G0007064

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2011 commit to user


digilib.uns.ac.id

PENGESAHAN SKRIPSI Skripsi dengan judul : Efek Antifungi Perasan Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix) terhadap Pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes Secara In Vitro Esti Rahmawati Suryaningrum, G0007064, Tahun 2011 Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta Pada hari Senin , tanggal 17 Januari 2011 Pembimbing Utama Murkati, dr., M. Kes, Sp.ParK NIP : 19501224 197603 2 001

(..............................................)

Pembimbing Pendamping Yulia Sari, S.Si., M.Si NIP : 19800715 200812 2 001

(..............................................)

Penguji Utama Ruben Dharmawan, dr., Ir., Ph.D NIP : 19511120 198601 1 001

(..............................................)

Penguji Pendamping Sulistyo Santosa, dr NIP : 19451129 197612 1 001

(...............................................) Surakarta,

Ketua Tim Skripsi

Muthmainah, dr., M.Kes. NIP : 196607021998022001

Januari 2011

Dekan FK UNS

Prof.Dr. A.A. Subijanto, dr., MS. commit to user NIP : 194811071973101003 i


digilib.uns.ac.id

PERNYATAAN

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta,

Januari 2011

Esti Rahmawati Suryaningrum NIM : G0007064

commit to user

ii


digilib.uns.ac.id

ABSTRAK

Esti Rahmawati Suryaningrum, G0007064, 2011. Efek Antifungi Perasan Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix) terhadap Pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes Secara in vitro. Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Tujuan : Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya efek antifungi perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro. Metode : Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorium kuasi dengan teknik random sampling. Subyek penelitian menggunakan biakan Trichophyton mentagrophytes pada Sabouraud Dextrose Agar plate. Penelitian menggunakan 6 kelompok perlakuan, yaitu akuades sebagai kontrol negatif, perasan kulit jeruk purut dengan konsentrasi 70%, 80%, 90% dan 100%, serta flukonazol 25 µg sebagai kontrol positif. Hasil diameter zona hambatan yang dihasilkan dianalisis menggunakan uji Kruskal Wallis dan uji Mann Whitney dengan a = 0,05. Hasil : Hasil uji Kruskal Wallis menunjukkan adanya perbedaan diameter zona hambat pada semua kelompok perlakuan. Dari hasil uji Mann Whitney didapat kesimpulan adanya perbedaan diameter zona hambat antara semua kelompok pasangan kelompok, kecuali antara kelompok perasan kulit jeruk purut konsentrasi 90% dengan kelompok perasan kulit jeruk purut konsentrasi 100%. Simpulan : Perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) mempunyai efek antifungi terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro.

Kata kunci : Efek Antifungi, Perasan Kulit Jeruk Purut, Trichophyton mentagrophytes

commit to user

iii


digilib.uns.ac.id

ABSTRACT

Esti Rahmawati Suryaningrum, G0007064, 2011. In Vitro Antifungal Effect of Leather Lime Juice (Citrus Hystrix) on The Growth of Trichophyton mentagrophytes. Faculty of Medicine, Sebelas Maret University, Surakarta. Objective : The aim of this research was to know in vitro antifungal effect of leather lime juice (Citrus hystrix) on the growth of Trichophyton mentagrophytes. Methods : This research is a laboratorium experimental kuasi with random sampling technique. The subject of this research was Trichophyton mentagrophytes on Sabouraud Dextrose Agar plate. This research used 6 treatment groups, there were aquades as negative control, leather lime juice with concentration 70%, 80%, 90% and 100%, and also flukonazol 25 µg as positive control. The inhibition zone diameter that resulted was analyzed by Kruskal Wallis test and then continued with Mann Whitney test at a = 0,05 Results : The result of Kruskal Wallis test showed that there was inhibition zone diameter difference in all groups. The result of Mann Whitney test showed that there was inhibition zone diameter difference between all pair groups, except between leather lime juice concentration 90% group and leather lime juice concentracion 100% group. Conclusion : Leather lime juice (Citrus hystrix) has in vitro antifungal effect on the growth of Trichophyton mentagrophytes.

Keywords : Antifungal effect, Leather lime juice, Trichophyton mentagrophytes

commit to user

iv


digilib.uns.ac.id

PRAKATA Puji syukur kepada Tuhan Yesus Kristus atas segala kasih dan karunia yang dilimpahkanNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Efek Antifungi Perasan Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix) terhadap Pertumbuhan Trichophyton mentagrophtes secara in vitro”. Skripsi ini disusun guna memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Kedokteran di Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan bantuan dari semua pihak. Untuk itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu hingga terselesaikannya skripsi ini, yaitu: Berkat segala bimbingan dan bantuan, penulis dapat menyelesaikan skripsi ini, yaitu : 1. Prof. Dr. A.A. Subijanto, dr., MS, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. 2. Muthmainah, dr., M.Kes, selaku Ketua Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret, Surakarta. 3. Murkati, dr., M. Kes, Sp.ParK, selaku Pembimbing Utama yang telah menyediakan waktu untuk memberikan bimbingan dan saran bagi penulis. 4. Yulia Sari, S.Si., M.Si, selaku Pembimbing Pendamping yang telah memberikan bimbingan, saran dan motivasi bagi penulis. 5. Ruben Dharmawan, dr., Ir., Ph.D, selaku Penguji Utama yang telah memberikan saran, nasehat, dan melengkapi kekurangan penulisan skripsi ini. 6. Sulistyo Santosa, dr, selaku Penguji Pendamping yang telah memberikan saran, nasehat, dan melengkapi kekurangan dalam penulisan skripsi ini. 7. Bagian skripsi Fakultas Kedokteran UNS, yang telah berkenan memberikan informasi dan bimbingan dalam penyusunan skripsi ini. 8. Dosen dan Staf Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran UNS. 9. Bapak Jatmiko dan Ibu Yuli yang membantu penelitian penulis di Laboratorium Mikrobiologi Universitas Setia Budi Surakarta. 10. Bapak, Ibu, Mbak Dhian yang telah memberikan banyak dukungan, doa dan semangat bagi penulis untuk menyelesaikan skripsi ini. 11. Teman teman penulis: Tya, Brigitta, Priska, Galuh, Joice, Andreas, Charina, Anggi, Monika, Tiur, Fatna, Andra, Rani, Senda, Endah, dan teman teman lain yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu. Terima kasih atas bantuan, dorongan semangat, motivasi, dukungan doa, dan saran yang telah diberikan. 12. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang telah membantu dalam penyusunan skripsi ini. Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari sempurna. Sehingga saran dan kritik yang membangun sangat penulis harapkan. Semoga hasil penelitian ini dapat bermanfaat bagi pembaca. Tuhan memberkati. Surakarta,

Januari 2011

commit to user Esti Rahmawati Suryaningrum v


digilib.uns.ac.id

DAFTAR ISI hal. PRAKATA ...................................................................................................... v DAFTAR ISI ................................................................................................... vi DAFTAR TABEL ........................................................................................... viii DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... ix DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xi BAB I PENDAHULUAN ............................................................................ 1 A. Latar Belakang Masalah.............................................................. 1 B. Perumusan Masalah .................................................................. 4 C. Tujuan Penelitian ....................................................................... 4 D. Manfaat Penelitian ..................................................................... 4 BAB II LANDASAN TEORI ...................................................................... 5 A. Tinjauan Pustaka ....................................................................... 5 B. Kerangka Pemikiran .................................................................. 22 C. Hipotesis .................................................................................... 23 BAB III METODE PENELITIAN ................................................................ 24 A. Jenis Penelitian .......................................................................... 24 B. Lokasi Penelitian ........................................................................ 24 C. Subjek Penelitian ....................................................................... 24 D. Teknik Sampling ........................................................................ 24 E. Identifikasi Variabel Penelitian…………………………………. 24 F. Definisi Operasional Variabel Penelitian .................................... 25 G. Rancangan Penelitian …………………………......................... 28 H. Alat dan Bahan Penelitian ........................................................... 30 I. Cara Kerja ................................................................................... 31 J. Analisis Data……......................................................... .............. 39 BAB IV HASIL PENELITIAN ..................................................................... 41 A. Data Hasil Penelitian ................................................................. 41 B. Analisis Data ............................................................................. 44 BAB V PEMBAHASAN ............................................................................. 47 BAB VI SIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 51 A. Simpulan ................................................................................... 51 B. Saran .......................................................................................... 51 DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 52 LAMPIRAN

commit to user

vi


digilib.uns.ac.id

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Rerata Diameter Zona Hambat Tricophyton mentagrophytes pada Uji Pendahuluan ............................................................................ 41 Tabel 2 Rerata Diameter Zona Hambat Tricophyton mentagrophytes Dari Tiga Kali Perasan ............................................................................ 42 Tabel 3 Ringkasan Hasil Uji Mann Whitney ................................................ 45

commit to user

vii


digilib.uns.ac.id

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Gambar 2. Gambar 3. Gambar 4. Gambar 5.

Skema Kerangka Pemikiran .................................................... 22 Skema Uji Pendahuluan ........................................................... 28 Skema Uji Penelitian ................................................................ 29 Diagram Rerata Diameter Zona Hambat Masing-Masing Kelompok Perlakuan Pada Uji Pendahuluan .......................... 42 Diagram Rerata Diameter Zona Hambat Masing-Masing Kelompok Perlakuan Pada Uji Penelitian ............................... 43

commit to user

viii


digilib.uns.ac.id

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Tabel Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Trichophyton mentagrophytes pada Uji Pendahuluan Lampiran 2. Tabel Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Trichophyton mentagrophytes Perasan I Lampiran 3. Tabel Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Trichophyton mentagrophytes Perasan II Lampiran 4. Tabel Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Trichophyton mentagrophytes Perasan III Lampiran 5. Hasil Uji Normalitas Kolmogorof Smirnof dan Uji homogenitas Levene Test Lampiran 6. Hasil Uji Non Parametrik Kruskal Wallis Lampiran 7. Hasil Uji Mann Whitney Lampiran 8. Tabel Chi-square Lampiran 9. Foto Hasil Penelitian Lampiran 10. Surat Ijin Telah Melakukan Penelitian

commit to user

ix

1 digilib.uns.ac.id


BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah Infeksi jamur superfisialis (mikosis superfisialis) pada kulit termasuk penyakit yang paling sering dijumpai di dunia. Angka insidensi pada tahun 1998 yang tercatat melalui Rumah Sakit Pendidikan Kedokteran di Indonesia sangat bervariasi, dimulai dari persentase terendah sebesar 4,8 persen (Surabaya) hingga persentase tertinggi sebesar 82,6 persen (Surakarta) dari seluruh kasus infeksi jamur superfisialis (Adiguna, 2001). Perkembangan infeksi jamur di Indonesia terutama karena udara lembab dan tingkat kesehatan yang kurang, baik karena lingkungan padat penduduk atau sosial ekonomi yang rendah (Isselbacher et al., 1999). Pada penyakit kulit karena infeksi jamur superfisial, seseorang terkena penyakit tersebut oleh karena kontak langsung dengan jamur tersebut, atau benda-benda yang sudah terkontaminasi oleh jamur, atau pun kontak langsung dengan penderita (Nasution, 2005). Dermatofitosis merupakan salah satu jenis mikosis superfisialis. Dermatofitosis adalah penyakit pada jaringan yang mengandung zat tanduk, misalnya stratum korneum pada epidermis, rambut, kuku yang disebabkan golongan jamur dermatofita (Djuanda, 2000). Salah satu golongan jamur dermatofita adalah Trichophyton mentagrophytes. Golongan jamur dermatofita mempunyai sifat mencernakan keratin. Salah satu sifat keratofilik masih banyak sifat yang sama di antara dermatofita, commit to user

2 digilib.uns.ac.id


misalnya sifat faali, taksonomis, antigenic, kebutuhan zat makanan untuk pertumbuhannya, dan penyebab penyakit (Djuanda, 2000). Selain itu, terjadinya infeksi berulang sangat mengganggu penderita baik dari segi psikososial dan ekonomi (Nurjanti, 2006). Obat

antifungi

mempunyai

kemampuan

untuk

menghambat

pertumbuhan jamur dengan diikuti kecepatan pengelupasan kulit (Isselbacher et al., 1999). Akan tetapi pemakaian obat antifungi masih banyak kendalanya, diantaranya biaya obat yang mahal dan tidak semua daerah tersedia, serta resistensi terhadap obat akibat pemakaian yang tidak adekuat seperti pengobatan dosis tinggi waktu singkat, intermitten, dan dosis rendah jangka lama (Hapson dan Rahmawati, 2008). Pemilihan obat alternatif antifungi dari herbal ini karena beberapa alasan. Pertama, obat-obat alamiah ini lebih aman dan diyakini kurang memberikan efek samping jika dibanding obat-obat farmasetik, kalaupun ada efek samping munculnya lambat (Herman, 2001). Juga untuk mengatasi fungi yang telah resisten terhadap beberapa obat farmasetik. Pemanfaatan bahan tumbuh-tumbuhan untuk tujuan pengobatan penyakit kulit akibat jamur dikenal juga oleh nenek moyang kita, umumnya pemakaiannya

berdasarkan

pengalaman. Oleh karena itu, penilaian dan

pengkajian khasiatnya secara ilmiah perlu dilakukan baik secara in vitro maupun in vivo (Sundari dan Winarno, 2001). Salah satu tanaman tradisional yang diharapkan dapat digunakan untuk pengobatan dermatofitosis adalah kulit jeruk purut. Kandungan utama kulit jeruk adalah pektin dan minyak atsiri. Kandungan pektin dalam kulit jeruk commit to user

3 digilib.uns.ac.id


berkisar 15-25% dari berat kering. Sedangkan kandungan minyak atsiri dalam kulit buah jeruk sekitar 70-92% (Prabasari, 2009). Daun, kulit dan buah jeruk purut juga mengandung senyawa minyak atsiri, tetapi kadar minyak atsiri yang paling tinggi terdapat pada bagian kulit buah (Mardiyati, 2008). Komponen utama dalam minyak atsiri kulit jeruk purut yang berfungsi sebagai antifungi adalah senyawa limonene (29,2%) dan β-pinene (30,6%). Selain minyak atsiri, kulit jeruk purut juga mengandung senyawa saponin dan metabolit sekunder seperti flavonoid, kumarin, dan steroid triterpenoid. Saponin dan flavonoid merupakan golongan terbesar dari fenol. Jawetz (1992) menyatakan bahwa fenol dan persenyawaan dari fenolik merupakan unsur antikuman yang kuat pada konsentrasi yang biasa digunakan (larutan air 1 – 2%). Fenol dan derivatnya dapat menimbulkan denaturasi protein. Saponin diketahui memiliki sifat antimikroba, sedangkan flavonoid mampu merusak membran mikroba (Volk dan Wheeler, 1988). Berdasarkan uraian di atas penulis melakukan penelitian untuk mengetahui bagaimana efek antifungi perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro. B. Perumusan Masalah Apakah perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) mempunyai efek antifungi

dan

berapa

konsentrasi

optimalnya

Trichophyton mentagrophytes secara in vitro?

commit to user

terhadap

pertumbuhan

4 digilib.uns.ac.id


C. Tujuan Penelitian 1. Tujuan Umum Mengetahui adanya efek antifungi perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro. 2. Tujuan Khusus Mengetahui konsentrasi optimal perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro. D. Manfaat Penelitian 1. Manfaat Teoritis Memiliki data bahwa perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) memiliki

efek

antifungi

terhadap

pertumbuhan

Trichophyton

mentagrophytes secara in vitro 2. Manfaat Aplikatif Sebagai informasi kepada peneliti selanjutnya untuk dilakukan uji pra klinik perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes yang terbukti sebagai kandidat antifungi secara in vitro.

commit to user

5 digilib.uns.ac.id


BAB II LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka 1. Jeruk Purut (Citrus hystrix) a. Klasifikasi Tanaman Kingdom

: Plantae

Subkingdom

: Tracheobionta

Super Divisi

: Spermatophyta

Divisi

: Magnoliophyta

Kelas

: Magnoliopsida

Sub Kelas

: Rosidae

Ordo

: Sapindales

Family

: Rutaceae

Genus

: Citrus

Spesies

: Citrus hystrix

(Dalimartha, 2005) b. Nama daerah Sumatera: unte mukur, unte pangir (Batak), lemau purut, lemau sarakan (Lampung), lemao puruik (Minangkabau), dema kafalo (Nias). Jawa: limau purut, jeruk wangi, jeruk purut (Sunda, Jawa). Bali: jeruk linglang, jeruk purut. Flores: mude matang busur, mude nelu. Sulawesi: ahusi lepea (Seram), lemo puru (Bragi.s). Maluku: Munte kereng commit to user

6 digilib.uns.ac.id


(Alf'uru), usi ela (Amhoh), lemo jobatai, wama faleela (Halmahera) (Dalimartha, 2005). c. Morfologi Tanaman Pohonnya rendah atau perdu, namun bila dibiarkan tumbuh alami dapat mencapai ketinggian 12 m. Batang yang tua berbentuk hijau tua, berbentuk bulat, polos, atau berbintik-bintik. Tata letak tajuk tanaman tidak beraturan dan cabang-cabangnya rapat. Dahan dan rantingrantingnya bersudut tajam, berwarna hijau tua, berbintik-bintik, dan berduri di ketiak daun. Duri-durinya pendek, kaku, hitam, ujungnya coklat, dan panjangnya 0,2 cm – 1,0 cm. Letak daun jeruk purut terpencar atau silih berganti dan bertangkai agak panjang serta bersayap lebar. Bentuk daun terbagi dua (Bernard T., 2005) bulat telur, ujungnya tumpul, berbau sedap, mengkilap, dan berwarna hijau kekuning-kuningan.

Tanaman

jeruk

purut

berbunga

majemuk

(Rukmana, 2003). Bernard T. (2005) menyebutkan daun jeruk purut memiliki panjang 8-12 cm dan lebar 3-5 cm. Bunganya terletak di ketiak daun atau di ujung tangkai, tajuk bunga berjumlah 4-5 lembar, dan benang sari berjumlah 24 – 30 helai. Buah jeruk purut berbentuk bulat sampai bundar, ukurannya kecil, kulit buah tidak rata, rasanya asam dan berbau sedap (Rukmana, 2003). d. Kandungan Kimia Jeruk Purut Jeruk purut memiliki rasa agak asin dan pahit. Beberapa bahan kimia yang terkandung dalam jeruk purut diantaranya daun minyak atsiri 1,0-1,5%, steroid triterpenoid, minyak atsiri dengan kandungan commit to user

7 digilib.uns.ac.id


sitrat 2,0-2,5% (Hariana, 2007), senyawa metabolit sekunder yaitu kumarin, flavonoid, steroid, fenolik dan minyak atsiri (Setiawan, 2000). Senyawa metabolit sekunder merupakan senyawa kimia yang umumnya mempunyai kemampuan bioaktivitas dan berfungsi sebagai pelindung tumbuhan tersebut dari gangguan hama penyakit untuk tumbuhan itu sendiri ataupun lingkungannya (Lenny, 2006). Kulit buah jeruk purut mengandung saponin dan tanin 1 % (Hariana, 2007). Berdasarkan uji fitokimia yang dilakukan pada kulit buah jeruk purut banyak terdapat senyawa golongan kumarin, juga adanya senyawa lain yaitu flavonoid dan steroid. Flavonoid yang terdapat pada jeruk purut antara lain narirutin, naringin, hesperidin, neohesperidin, nobiletin, dan tangeretin (Ogawa K, et al., 2001). Daunnya mengandung vitamin E dengan konsentrasi 398,3 mg/kg (Ling SL dan Mohamed S., 2001). Senyawa kumarin yang berasal dari buah jeruk purut juga telah dilaporkan oleh Murakami (1999). Senyawa utama yang terkandung dalam minyak kulit buah adalah βpinene

(30,6%),

limonene

(29,2%)

dan

sabinene

(22,6%).

Sedangkan α-terpeneol (15.8%), β-pinene (15.1 %) dan limonene (9.1 %) adalah senyawa utama dalam minyak buah (Ibrahim,et al., 1996). e. Khasiat dan Penggunaan Jeruk purut merupakan buah yang dikenal luas oleh masyarakat Indonesia, dan memiliki banyak kegunaan. Baik daun maupun buahnya banyak dimanfaatkan sebagai obat tradisional. Bagian daun commit to user

8 digilib.uns.ac.id


biasanya digunakan untuk mengatasi badan letih dan lelah setelah sakit berat dan juga untuk penyedap masakan. Sedangkan kulit buah jeruk purut digunakan sebagai obat bisul, panas dalam, radang kulit, radang payudara, kulit bersisik dan kulit mengelupas (Dalimartha, 2000). Buah jeruk purut juga sering digunakan untuk mengatasi influenza, badan

terasa

lelah,

dan

mewangikan

rambut

(Dalimartha,

2005). Selain itu kulit buah jeruk purut digunakan untuk penyedap masakan, pembuatan kue, sebagai manisan (Setiadi dan Parmin, 2004), dan sebagai stimulan (Dalimartha, 2005). Efek farmakologik jeruk purut diantaranya anti-spasmodik dan antiseptik (Hariana, 2007). f. Kandungan Antifungi pada Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix) Kulit jeruk nipis mengandung minyak atsiri, saponin, kumarin, flavonoid, dan steroid triterpenoid, yang masing-masing mempunyai efek sebagai antifungi. 1) Minyak atsiri senyawa golongan ini terdiri atas senyawa monoterpena, sedangkan stearoptena adalah senyawa hidrokarbon teroksigenasi umumnya berwujud padat. Stearoptena ini umumnya terdiri atas senyawa turunan oksigen dari terpena (Agusta, 2002). Manfaat minyak atsiri secara umum terhadap tumbuhan itu sendiri adalah Ditinjau dari segi fisika, minyak atsiri mengandung dua golongan senyawa, yaitu oleoptena dan stearoptena. Oleoptena dalah bagian hidrokarbon dalam minyak atsiri dan berwujud cair. Umumnya sebagai alat pertahanan diri agar tidak dimakan hewan commit to user

9 digilib.uns.ac.id


(hama). Namun sebaliknya, minyak atsiri juga berfungsi sebagai penarik serangga untuk membantu proses penyerbukan (Agusta, 2000). Untuk pengobatan manusia sebagai antibakteri dan antifungi, serta penolak nyamuk (Agusta, 2002). Minyak atsiri jeruk purut mengandung kandungan kimia βpinene dan limonene. Senyawa β-pinene telah terbukti mempunyai efek antifungi dengan cara menghambat sintesis DNA, RNA, dinding polisakarida dan ergosterol membran sel (Xia Z, 1999). Sedangkan,

hasil

penelitian

Hassanzadeh,

et

al.

(2009)

membuktikan bahwa senyawa limonene mempunyai kemampuan untuk menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans dan Aspergillus niger. 2) Saponin Saponin mengandung gugus gula terutama glukosa, galaktosa, xylosa, rhamnosa atau methilpentosa yang berikatan dengan suatu aglikon hidrofobik (sapogenin) berupa triterpenoid, steroid atau steroid alkaloid. Aglikon dapat mengandung satu atau lebih ikatan C-C tak jenuh. Rantai oligosakarida umumnya terikat pada posisi C3 (monodesmosidic), tetapi beberapa saponin mempunyai gugus gula tambahan pada C26 atau C28 (bidesmosidic). Struktur saponin yang sangat kompleks terjadi akibat bervariasinya struktur aglikon, sifat dasar rantai dan posisi penempelan gugus gula pada aglikon (Faure, 2002). commit to user

10 digilib.uns.ac.id


Saponin diketahui mempunyai efek sebagai antimikroba, antifungi dan melindungi tanaman dari serangan serangga. Saponin mempunyai tingkat toksisitas yang tinggi melawan fungi. Aktivitas fungisida terhadap Trichoderma viride telah digunakan sebagai metode untuk mengindetifikasikan saponin. Mekanisme kerja saponin sebagai antifungi berhubungan dengan interaksi saponin dengan membran sterol (Morrissey, 1999). 3) Kumarin Kumarin adalah suatu metabolit dari tumbuhan yang sering dijumpai sebagai glikosidal. Kumarin mungkin juga berupa senyawa jadian yang terbentuk karena hidrolisis asam glikosil-ohidroksi sinamat secara enzimatik dan kemudian segera terjadi siklikasi menjadi lakton, tepatnya lakton asam-o-hidroksisinamat. Hampir semua kumarin alam mempunyai oksigen (hidroksil atau alkosil) pada C-7. Pada posisi lain dapat pula teroksigenasi dan sering pula terdapat rantai samping alkil (Robinson, 1991). Aktivitas antifungi dan anti bakteri pada senyawa kumarin telah dibuktikan pada percobaan Wardakhan dan Nadia (2007). Pada percobaan ini dibuktikan bahwa kumarin mempunyai aktivitas antibakteri pada bakteri gram negatif (Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa), dan gram positif (Bacillus subtilis dan Bacillus cereus) dan juga aktivitas antifungi terhadap Candida albicans. 4) Flavonoid

commit to user



Flavonoid terdapat pada hampir seluruh tanaman tingkat tinggi sebagai metabolit sekunder dengan fungsi proteksi yang tinggi dalam melindungi jaringan tanaman dari kerusakan akibat radiasi ultraviolet, melindungi tanaman dari infeksi, serta berperan penting pada fotosintesis, transfer energi, respirasi, dan biosintesis komponen toksik (Middleton, 2000). Senyawa ini merupakan zat warna merah, biru, ungu atau kuning yang ditemukan dalam tumbuh-tumbuhan. Malik, dkk (2007) telah melakukan uji aktivitas antijamur senyawa flavonoid secara in vitro menggunakan tiga jenis biakan jamur

Candida

albicans,

Epidermophyton

flocosum

dan

Microsporum gypseum dengan metode difusi agar menggunakan cakram kertas. Dari penelitian tersebut didapatkan kesimpulan bahwa flavonoid juga mempunyai efek antifungi. 5) Steroid (Steroid Triterpenoid) Terpena merupakan suatu golongan hidrokarbon yang banyak dihasilkan oleh tumbuhan dan terutama terkandung pada getah dan vakuola selnya. Pada tumbuhan, senyawa-senyawa golongan terpena dan modifikasinya, terpenoid, merupakan metabolit sekunder. Terpena dan terpenoid menyusun banyak minyak atsiri yang dihasilkan oleh tumbuhan (Lenny, 2006). Salah satu tipe terpenoid adalah triterpenoid. Triterpenoid, contohnya lanosterol, merupakan bahan dasar bagi senyawasenyawa steroid. Steroid merupakan senyawa bioaktif yang commit to user



bermanfaat bagi kesehatan tubuh. Triterpenoid memiliki atom C30. Senyawa ini tersebar luas dalam damar, gabus dan kutin tumbuhan (Lenny, 2006). Tumbuhan yang mengandung senyawa Triterpenoid mempunyai nilai ekologi karena senyawa ini bekerja sebagai anti fungi, insektisida,

anti

pemangsa,

anti

bakteri

dan

anti

virus

(Robinson,1991). 2. Trichophyton mentagrophytes a. Klasifikasi Kingdom : Fungi Divisi

: Eumycophyta

Kelas

: Deuteromycetes

Bangsa

: Melanconiales

Suku

: Moniliaceae

Genus

: Trichophyton

Spesies

: Trichophyton mentagrophytes

(Ananthanarayan dan Paniker, 2000) b. Morfologi Divisi ini memiliki ciri hifa bersekat, reproduksi dengan cara aseksual menggunakan konidiospora, sedangkan reproduksi seksual belum diketahui sehingga jamur kelas ini disebut jamur imferfekti. Pada biakan Trichophyton mentagrophytes membentuk koloni dan konidia yang khas, koloninya dapat berbentuk seperti kapas sampai granular, memiliki kelompok mikronidia yang terbentuk sferis commit to user



menyerupai buah anggur, terdapat mikronidia yang menyerupai kapas tapi jarang ditemukan (Jawetz et al., 2004). Makronidia

berbentuk

panjang

seperti

pensil,

sedangkan

mikronidia lecil, berdinding tipis, dan berbentuk lonjong dan terletak pada konidiofora yang pendek dan tersusun secara satu persatu atau berkelompok pada sisi hifa (Srisasi, 2003). Genus Trichophtyon memiliki dinding tipis, makronidia halus dan mikronidia banyak (Talaro K dan Talaro A, 1999). Trichophyton mentagrophytes bisa tumbuh baik pada media Sabouraud Dextrose Agar pada suhu kamar (Jawetz et al., 2004). c. Habitat Jamur Trichophyton adalah dermatofita yang habitatnya di tanah, manusia, dan hewan. Terutama pada daerrah yang beriklim tropis dan basah. Berdasarkan afinitasnya, genus Trichophyton dibagi menjadi geofilik (hidup di tanah), antropofilik (hidup pada tubuh manusia), dan zoofilik (hidup pada hewan). Sedangkan Trichophyton mentagrophytes adalah jamur antropofilik dan zoofilik (Jawetz et al., 2004). d. Patogenesis Infeksi Trichophyton menyebabkan timbulnya bercak melingkar dan berbatas tegas yang tertutup dengan sisik atau gelembung kecil atau dikenal dengan istilah ring worm atau tinea. Trichophyton paling sering menyebabkan Tinea capitis, Tinea favosa, Tinea corporis, Tinea imbrikata, Tinea kruris, Tinea manus dan pedis, Tinea unguinum. commit to user



1) Tinea kapitis Tinea kapitis adalah kelainan pada kulit dan rambut kepala yang disebabkan oleh spesies dermatofita. Dermatofitosis ini umumnya menyerang anak prapubertas. Jamur menyerang stratum korneum dan masuk ke folikel rambut yang selanjutnya akan menyerang bagian luar atau sampai ke bagian dalam rambut, bergantung pada spesiesnya (Daili, dkk., 2005). Kelainan ini dapat ditandai dengan lesi bersisik, kemerah-merahan, alopesia dan kadang kadang terjadi gambaran klinis yang lebih berat, yang disebut kerion (Djuanda, 2000) Di dalam klinik, tinea kapitis dapat dilihat sebagai 3 bentuk yang jelas (Madani, 2000): a) Grey patch ringworm Grey patch ringworm merupakan tinea kapitis yang biasanya disebabkan oleh genus microsporium dan sering ditemukan pada anak-anak. Penyakit mulai dengan papul merah yang kecil di sekitar rambut. Papul ini melebar dan membentuk bercak, yang menjadi pucat dan bersisik. Keluhan penderita adalah rasa gatal. Warna rambut menjadi abu-abu dan tidak berkilat lagi Semua rambut di daerah tersebut terserang oleh jamur sehingga terbentuk alopesia setempat. Tempat-tempat ini terlihat sebagai grey patch. Pada pemeriksaan dengan lampu Wood dapat dilihat fluoresensi commit to user



hijau kekuning-kuningan pada rambut yang sakit melampaui batas-batas grey patch tersebut. b) Kerion Kerion merupakan reaksi peradangan yang berat pada tinea kapitis, berupa pembengkakan yang menyerupai sarang lebah dengan serbukan sel radang yang padat disekitarnya. Bila penyebabnya Microsporium canis dan Microsporium gypseum, pembentukan kerion ini lebih sering dilihat. Terlihat agak kurang bila penyebabnya Tricophyton tonsurans, dan sedikit sekali bila penyebabnya adalah Trichophyton violaceum. Kelainan ini dapat menimbulkan jaringan parut yang berakibat alopesia yang menetap. Parut yang menonjol kadang-kadang dapat terbentuk. c) Black dot ringworm Black

dot

ringworm

terutama

disebabkan

oleh

Trichophyton tonsurans dan Trichophyton violaceum. Rambut yang terkena infeksi patah, tepat pada muara folikel, dan yang tertinggal adalah ujung rambut yang penuh spora. Ujung rambut yang hitam di dalam folikel rambut ini memberikan gambaran khas yaitu black dot. 2) Tinea kruris Tinea kruris lebih sering terjadi pada laki-laki dan jarang pada wanita. Tepi eritematosa yang berskuama pelan-pelan menjalar ke bawah paha bagian dalam, dan meluas ke arah belakang ke daerah commit to user



perineum

dan

gluteus.

Penyebabnya

biasanya

adalah

Epidermophyton flocossum, kadang-kadang dapat juga disebabkan oleh Trichophyton rubrum (Madani, 2000). Kelainan kulit yang tampak pada sela paha merupakan lesi berbatas tegas. Peradangan pada tepi lebih nyata daripada daerah tengahnya. Bila penyakit ini menjadi menahun, dapat berupa bercak hitam disertai sedikit sisik. Erosi dan keluarnya cairan biasanya akibat garukan (Madani, 2000). 3) Tinea korporis Tinea korporis merupakan dermatofitosis pada kulit tubuh tidak berambut (glabrous skin). Menurut Madani (2000) penyebab tersering

penyakit

ini

adalah

Trichophyton

rubrum

dan

Trichophyton mentagrophytes. Kelainan yang dilihat dalam klinik merupakan lesi bulat atau lonjong, berbatas tegas terdiri atas eritema, skuama, kadang kadang dengan daerah vesikel dan papul di tepi. Daerah tengahnya biasanya lebih tenang. Kadang kadang terlihat erosi dan krusta akibat garukan. Lesi pada umumnya merupakan bercak terpisah satu dengan yang lain (Brown dan Burns, 2005). Pada kasus dermatofitosis dengan gambaran klinis tidak khas, diagnosis pasti ditegakkan dengan melakukan pemeriksaan penunjang berupa pemeriksaan kulit dengan larutan KOH 10-20 % (Daili et al., 2005). commit to user



4) Tinea imbrikata Tinea imbrikata merupakan bentuk khas tinea korporis yang disebabkan oleh Trichophyton concentrium. Tinea imbrikata mulai dengan bentuk papul berwarna coklat, yang perlahan-lahan menjadi besar. Stratum korneum bagian tengah terlepas dari dasarnya dan melebar. Proses ini setelah beberapa waktu mulai lagi dari bagian tengah, sehingga terbentuk lingkaran skuama yang konsentris (Daili et al., 2005). 5) Tinea favosa Tinea favosa adalah infeksi jamur kronis, terutama oleh Trichophyton

schoenleini,

Trichophyton

violaceum

dan

Microsporum gypseum. Penyakit ini biasanya dimulai di kepala sebagai titik kecil di bawah kulit yang berwarna merah kuning dan berkembang menjadi krusta berbentuk cawan (skutula) dengan berbagai ukuran. Tinea favosa pada kulit dapat dilihat sebagai kelainan kulit papulovesikel dan papuloskuamosa, disertai kelainan kulit berbentuk cawan yang khas yang kemudian menjadi jaringan parut. Biasanya dapat tercium bau tikus (mousy odor) pada para penderita favus. Kadang kadang penyakit ini dapat menyerupai dermatitis seboroika (Daili et al., 2005). 6) Tinea manus dan pedis Tinea pedis disebut juga Athlete’s foot atau “Ring worm of the foot”. Penyakit ini sering menyerang orang-orang dewasa yang banyak bekerja di tempat basah seperti tukang cuci, pekerjacommit to user



pekerja di sawah atau orang-orang yang setiap hari harus memakai sepatu yang tertutup seperti anggota tentara. Keluhan subjektif bervariasi mulai dari tanpa keluhan sampai rasa gatal yang hebat dan nyeri bila ada infeksi sekunder (Madani, 2000). Ada 3 bentuk Tinea pedis: a) Bentuk intertriginosa Keluhan yang tampak berupa maserasi, skuamasi serta erosi, di celah-celah jari terutama jari IV dan jari V. Hal ini terjadi disebabkan kelembaban di celah-ceIah jari tersebut membuat jamur-jamur hidup lebih subur. Bila menahun dapat terjadi fisura yang nyeri bila kena sentuh. Bila terjadi infeksi dapat menimbulkan selulitis atau erisipelas disertai gejala-gejala umum. b) Bentuk hiperkeratosis Disini lebih jelas tampak ialah terjadi penebalan kulit disertai sisik terutama ditelapak kaki, tepi kaki dan punggung kaki. Bila hiperkeratosisnya hebat dapat terjadi fisura-fisura yang dalam pada bagian lateral telapak kaki. c) Bentuk vesikuler subakut Kelainan-kelainan yang timbul dimulai pada daerah sekitar antar jari, kemudian meluas ke punggung kaki atau telapak kaki. Tampak ada vesikel dan bula yang terletak agak dalam di bawah kulit, diserta perasaan gatal yang hebat. Bila vesikelvesikel ini pecah akan meninggalkan skuama melingkar yang commit to user



disebut collorette. Bila terjadi infeksi akan memperhebat dan memperberat keadaan sehingga dapat terjadi erisipelas. Semua bentuk yang terdapat pada Tinea pedis, dapat terjadi pada Tinea manus, yaitu dermatofitosis yang menyerang tangan. Penyebab utamanya ialah Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes, dan Epidermofiton floccosum. 7) Tinea unguium (Onikomikosis) Penyakit ini dapat dibedakan dalam 3 bentuk tergantung jamur penyebab dan permulaan dari dekstruksi kuku. Subinguinal proksimal bila dimulai dari pangkal kuku, Subinguinal distal bila di mulai dari tepi ujung dan leukonikia trikofita bila di mulai dari bawah kuku. Permukaan kuku tampak suram tidak mengkilat lagi, rapuh dan disertai oleh subungual hiperkeratosis. Dibawah kuku tampak adanya detritus yang banyak mengandung elemen jamur (Madani, 2000). Onikomikosis ini merupakan penyakit jamur yang kronik sekali, penderita minta pertolongan dokter setelah menderita penyakit ini setelah beberapa lama, karena penyakit ini tidak memberikan keluhan subjektif, tidak gatal, dan tidak sakit. Kadang-kadang penderita baru datang berobat setelah seluruh kukunya sudah terkena penyakit. Penyebab utama adalah Trichophyton rubrum dan Trichophyton mentagrophytes (Madani,2000).

commit to user



3. Flukonazol a. Pengertian Flukonazol adalah antifungi derivat trazol yang digunakan untuk pengobatan infeksi jamur baik superfisialis maupun sistemik. Bersifat larut dalam air dan alkohol serta di bawah nama dagang Difulcan atau Trican (Tjay dan Rahardja, 2002) b. Farmakodinamika Flukonazol adalah inhibitor terhadap enzim yang bergantung pada sitokrom P-450, 14-demethylase sehingga menghambat biosintesis ergosterol. Pengurangan ergosterol, yang merupakan sterol utama yang terdapat di dalam membran sel jamur, dan akumulasi sterol-sterol yang mengalami metilase menyebabkan terjadinya perubahan sejumlah fungsi sel yang berhubungan dengan membran (Mertesacker, 2006) c. Farmakokinetik Flukonazol diserap sempurna melalui saluran cerna tanpa dipengaruhi oleh adanya makanan atau keasaman lambung. Obat ini tersebar rata ke dalam cairan tubuh juga dalam sputum dan saliva. Kadarnya dalam cairan cerebrosponal 50%-90% kadar plasma. Ikatan dengan protein plasma 11%-12%. Kadar puncak 4-8 µg dicapai setelah beberapa kali pemberian 100 mg. Metabolisme di hepar mencapai 11%. Waktu paruh eliminasi 25 jam sedangkan ekskresi melalui ginjal mencapai melebihi 90% klirens ginjal (Katzung, 1998).

commit to user



d. Indikasi dan Kontraindikasi Obat antifungi ini selain dapat digunakan untuk mengobati kandidiasis mikosa dan kandidiosis kutan juga efektif untuk perawatan berbagai jenis gangguan dermatosis dan pytyriasis versikolor yang dapat diberikan secara oral dan parenteral (Mertesacker, 2006). Kontraindikasi obat ini, yaitu pada penderita yang hipersensitif terhadap flukonazol atau antifungi lain golongan azol dan yang mempunyai resiko aritmia jantung (Katzung, 1998). e. Dosis dan cara pemberian Flukonazol tersedia untuk pemakaian peroral dalam kapsul yang mengandung 50 mg dan 150 mg. Dosis yang disarankan 100-400 mg perhari. Dosis untuk infeksi kulit yang resisten atau pada indikasi profilaksis yaitu 150-300 mg per minggu. Pada infeksi sistemik atau berat digunakan dosis 50-600 mg perhari dan untuk infeksi yang darurat seperti meningitis karena jamur diberikan dosis 800 mg perhari. Dosis untuk anak-anak yaitu 6-12 mg/kg/hari (Tjay dan Rahardja, 2002; Katzung, 1998).

commit to user



B. Kerangka Pemikiran

Perasan kulit jeruk purut mengandung minyak atsiri, saponin, flavonoid, kumarin, dan steroid triterpenoid

Mendenaturasi protein membran sel Trichophyton mentagrophytes

Kerusakan membran sel Trichophyton mentagrophytes

Variabel luar terkendali - Umur jamur - Jumlah sampel - Kuman kontaminan - Suhu inkubasi

Terjadi hambatan pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes

Gambar 1. Skema Kerangka Pemikiran

commit to user



C. Hipotesis Perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) mempunyai efek antifungi terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro.

commit to user



BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium kuasi. B. Subjek Penelitian Biakan Trichophyton mentagrophytes yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas Setia Budi Surakarta C. Lokasi Penelitian Laboratorium Mikrobiologi Universitas Setia Budi Surakarta D. Teknik Sampling Pengambilan sampel untuk pembuatan media subkultur dilakukan secara random, yaitu dengan mengambil koloni jamur Trichophyton mentagrophytes dalam Saboraud Dextrose Agar Slant E. Identifikasi Variabel 1. Variabel bebas

: a. konsentrasi perasan kulit jeruk purut b. flukonazol 25 µg

2. Variabel tergantung

: zona hambatan

3. Variabel luar yang terkendali : a. Umur jamur b. Jumlah koloni Trichophyton mentagrophytes c. Kuman kontaminan d. Suhu inkubasi commit to user



F. Definisi Operasional Variabel Penelitian 1. Variabel bebas : a. Konsentrasi perasan kulit jeruk purut Air perasan berwujud larutan dalam air dan mengandung seluruh komponen senyawa dalam tumbuhan segarnya. Jumlah air perasan sebanding dengan material awal, dan hanya bahan yang tidak terlarut yang tetap tinggal (Nopianti, 2008 cit Voigt, 1995). Perasan kulit jeruk purut didapatkan dengan cara melumatkan kulit jeruk purut dan menyaringnya dua kali. Penyaringan pertama dilakukan dengan saringan plastik yang dilapisi kain, kemudian penyaringan berikutnya dengan kertas saring untuk mendapatkan hasil perasan air yang bagus dan tanpa endapan. Air hasil saringan dianggap konsentrasi 100%. Skala pengukuran yang digunakan adalah skala interval. Konsentrasi perasan kulit jeruk purut yang digunakan dalam uji pendahuluan adalah konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%. Hal ini mengacu pada penelitian yang telah dilakukan oleh Hidayah dan Subakir (2010) mengenai efektifitas air perasan buah jeruk purut pada konsentrasi 25% terhadap pertumbuhan Malassezia sp. Berdasarkan hasil uji pendahuluan, maka pada uji penelitian menggunakan konsentrasi perasan kulit jeruk purut 70%, 80%, 90%, dan 100%. Uji penelitian diulang sebanyak 3 kali dengan perasan kulit jeruk purut yang berbeda. Hal ini dilakukan untuk memperkecil penyimpangan kualitas perasan yang dapat mempengaruhi hasil penelitian. commit to user



b. Flukonazol 25 µg Flukonazol adalah obat antifungi derivat triazol yang digunakan sebagai kontrol positif. Flukonazol dengan merek dagang diflucan yang mengandung 50 mg flukonazol. Flukonazol yang digunakan sebesar 25 µg karena sudah terbukti sebagai obat antifungi. Skala ukuran variabel ini adalah nominal. 2. Variabel tergantung : Variabel tergantung pada penelitian ini adalah zona hambatan. Zona hambatan merupakan daerah lingkaran jernih melingkar yang terbentuk karena efek antifungi terhadap pertumbuhan jamur Trichophyton mentagrophytes.

Diameter

diukur

dalam

milimeter

menggunakan

penggaris. Zona hambatan yang sesungguhnya adalah rerata dari jumlah diameter terbesar dan diameter terkecil zona hambatan. Skala ukuran variabel ini adalah rasio. 3. Variabel luar terkendali a. Umur Jamur Umur jamur dapat dikendalikan dengan subkultur Trichophyton mentagrophytes yang berumur 5 hari pada Sabouraud Dextrose Agar. b. Jumlah Koloni Trichophyton mentagrophytes Penanaman jamur menggunakan standar Mc. Farland. Standar Mc Farland ini dipakai agar diperoleh jumlah koloni jamur yang seragam sebelum ditanam pada Saboraud Dextrose Agar. 0,5 standar Mr Farland terdiri dari 1x107 sampai 1x108 koloni /mL (Quelab, 2005). commit to user



c. Kuman kontaminan Kuman kontaminan adalah tumbuhnya kuman lain yang dapat terkontaminasi pada Sabouraud Dextrose Agar. Tumbuhnya kuman ini dapat dikendalikan dengan memberi kloramfenikol (Mansjoer et al, 2000). Setiap 1000 ml Sabouraud Dextrose Agar cair memerlukan 400 mg kloramfenikol (Bridson, 1998). d. Suhu inkubasi Suhu yang dipakai untuk inkubasi jamur. Jamur diinkubasi pada suhu kamar selama 4 hari.

commit to user



G. Rancangan Penelitian 1. Uji Pendahuluan Biakan Trichophyton mentagrophytes diinokulasikan pada media Sabouroud Dextrosa Agar (5 cawan Petri)

Dibuat 4 sumuran dengan diameter 6 mm pada setiap cawan untuk pemberian perlakuan

Kontrol (+) Flukonazol 25 µg

Perasan kulit jeruk purut dengan konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%

Kontrol (-) Akuades

Diinkubasikan selama 4 hari pada suhu kamar

Diameter zona hambat diukur

Gambar 2. Skema Uji Pendahuluan

commit to user



2. Uji Penelitian Biakan Trichophyton mentagrophytes diinokulasikan pada media Sabouroud Dextrosa Agar (7 cawan Petri)

Dibuat 5 sumuran dengan diameter 6 mm pada setiap cawan untuk pemberian perlakuan

Kontrol (+) Flukonazol 25 µg

Perasan kulit jeruk purut dengan konsentrasi 70%, 80%, 90%, dan 100%. Masingmasing diulang 5 kali

Kontrol (-) Akuades

Diinkubasikan selama 4 hari pada suhu kamar

Diameter zona hambat diukur

Uji Kruskal Wallis

Uji Mann Whitney

Gambar 3. Skema Uji Penelitian

Catatan: Uji penelitian diulang sebanyak 3 kali dengan perasan kulit jeruk purut yang berbeda. Hal ini dilakukan untuk memperkecil penyimpangan commit to user kualitas perasan yang dapat mempengaruhi hasil penelitian.



H. Alat dan Bahan 1. Alat Penelitian a. Cawan Petri dengan diameter 10 cm b. Oshe kolong c. Tabung reaksi d. Beaker glass e. Alat pembuat sumuran berdiameter 6 mm f. Pipet g. Mikropipet h. Penggaris i. 0,5 standar Mc Farland j. Autoklaf k. Lampu spiritus l. Kertas saring m. Saringan plastik n. Blender 2. Bahan Penelitian a. Biakan Trichophyton mentagrophytes b. Sabouroud Dextrose Agar (SDA) c. Perasan kulit jeruk purut d. Akuades e. Diflucan yang mengandung 50 mg flukonazol 1 kapsul f. Alkohol 96% g. NaCl 0,9%

commit to user



h. Kloramfenikol I. Cara Kerja 1. Uji Pendahuluan a. Tahap Persiapan 1) Perasan Kulit Jeruk Purut Mencuci

bersih

jeruk

purut

terlebih

dahulu

dengan

menggunakan air mengalir, tujuannya untuk menghilangkan kotoran yang menempel. Kemudian merendamnya di dalam alkohol 96% agar jeruk purut lebih steril dan bebas dari kontaminasi. Mengupas jeruk purut untuk diambil bagian kulitnya saja. Selanjutnya melumatkan 100 gram irisan kulit jeruk purut tersebut menggunakan blender dengan dicampur 100 ml akuades. Hasil dari proses pelumatan kemudian diperas dan disaring dua kali. Penyaringan pertama dilakukan dengan saringan plastik yang dilapisi kain, kemudian penyaringan berikutnya dengan kertas saring untuk mendapatkan hasil perasan air yang bagus dan tanpa endapan. Air hasil saringan dianggap konsentrasi 100%. 2) Pembiakan Trichophyton mentagrophytes Biakan jamur diperoleh dari laboratorium Mikrobiologi Universitas Setia Budi Surakarta. Trichophyton mentagrophytes yang diperoleh merupakan biakan subkultur 5 hari dalam Sabouraud Dextrosa Agar Slant.

commit to user



b. Tahap Uji Pendahuluan 1) Persiapan preparat obat flukonazol 25 µg Preparat flukonazol yang dipakai adalah Diflucan. Satu kapsul Diflucan mengandung 50 mg flukonazol. Satu kapsul flukonazol 50 mg dilarutkan dengan 100 ml akuades. Pengenceran ini adalah pengenceran pertama. ó 50 mg dlm 100 ml ó 0,5 mg/ 1 ml ó 500 µg/ 1 ml Kemudian dengan rumus : N1 · V1

= 25 · 100

V1 N1 V2

= 5 ml

N2

= N2 · V2

500 · V1 V1

= = =

Volume yang tersedia Kadar flukonazol awal Volume yang akan digunakan = Kadar flukonazol akhir

Jadi, untuk mendapatkan kadar flukonazol 25 µg, 5 ml dari hasil pengenceran pertama dilarutkan ke dalam 100 ml akuades (V2). Zona sensitivitas flukonazol 25 µg berdasarkan standar yang ada adalah sebagai berikut: Flukonazol

:

≥ 19 mm

= sensitif

:

13 – 18 mm

= intermediate

:

≤ 12

= resisten

(Barry & Brown, 1996) 2) Pembuatan Sabouraud Dextrose Agar Menyiapkan Sabouraud Dextrose Agar bubuk 10 gram kemudian menambahkannya dengan akuades 150 ml, lalu commit to user



memanaskan sambil mengaduk sampai tercampur homogen. Menambahkan kloramfenikol pada media cair untuk mencegah tumbuhnya kuman kontaminan. Setiap 1000 ml Sabouraud Dextrose Agar cair memerlukan 400 mg kloramfenikol, maka: Kloramfenikol yang diperlukan untuk 150 ml Sabouraud Dextrose Agar =

150 ml x 400mg = 60 mg 1000 ml

Setiap 250 mg kloramfenikol dilarutkan dalam 10 ml NaCl 0,9%. Maka: NaCl 0,9% yang diperlukan = 60 mg x 10 ml = 2,4 ml 250 mg (Bridson, 1998) Jadi memerlukan 60 mg kloramfenikol untuk melarutkan dalam 2,4 ml NaCl 0,9%. Kemudian setelah itu mensterilkan media cair yang telah ditambah larutan kloramfenikol dengan autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit bersama dengan peralatan penelitian lain yang dibutuhkan. Menuangkan Sabouraud Dextrosa Agar cair dalam 5 cawan Petri yang telah disterilkan dan membiarkan sampai dingin. 3) Pembuatan suspensi dan inokulum Trichophyton mentagrophytes Mengambil biakan Trichophyton mentagrophytes dengan menggunakan oshe steril kemudian memasukkan ke dalam larutan NaCl 0,9% sampai mencapai kekeruhan yang ekivalen dengan 0,5 standart Mc Farland. Menginokulasikan sampel cair Trichophyton commit to user



mentagrophytes sebanyak 0,2 ml ke dalam tiap-tiap cawan Petri yang berisi Sabouraud Dextrose Agar. Menggoyang agar untuk meratakan sampel Trichophyton mentagrophytes. 4) Pengenceran perasan kulit jeruk purut Mengencerkan hasil perasan kulit jeruk purut yang telah disiapkan saat tahap persiapan uji pendahuluan. Perasan diencerkan dengan akuades sehingga diperoleh konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%. Penentuan konsentrasi tersebut berdasar dari hasil penelitian yang telah dilakukan oleh Hidayah dan Subakir (2010) mengenai efektifitas air perasan buah jeruk purut 25% terhadap pertumbuhan Malassezia sp. Pembuatan perasan konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100% tersebut berasal dari pengenceran air perasan konsentrasi 100%. Adapun cara pengencerannya menurut Ahmad (1996) sebagai berikut: - Perasan konsentrasi 20% berasal dari 20 ml (perasan konsentrasi 100%) + akuades 100ml. - Perasan konsentrasi 40% berasal dari 40 ml (perasan konsentrasi 100%) + akuades 100ml. - Perasan konsentrasi 60% berasal dari 60 ml (perasan konsentrasi 100%) + akuades 100ml. - Perasan konsentrasi 80% berasal dari 80 ml (perasan konsentrasi 100%) + akuades 100ml. - Perasan konsentrasi 100% merupakan perasan asli yang tidak perlu diencerkan commit to user



5) Memberi perlakuan ke dalam 5 cawan Petri dengan perasan kulit jeruk purut, akuades, flukonazol 25 µg Langkah pertama dalam tahap ini adalah membuat 4 sumuran berdiameter 6 mm pada masing-masing cawan Petri. Pada masingmasing sumuran diisi 0,05 ml akuades sebagai kontrol negatif, 0,05 ml flukonazol 25 µg sebagai kontrol positif, dan 0,05 ml perasan kulit jeruk purut dengan konsentrasi berbeda-beda, yaitu 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%. Selanjutnya diinkubasi pada suhu kamar selama 4 hari. Setelah diinkubasi, dilakukan pengukur diamater daerah yang bening (zona hambatan) dengan menggunakan penggaris melewati pusat sumuran. 2. Uji Penelitian a. Tahap Persiapan 1) Perasan Kulit Jeruk Purut Mencuci

bersih

jeruk

purut

terlebih

dahulu

dengan

menggunakan air mengalir, tujuannya untuk menghilangkan kotoran yang menempel. Kemudian merendamnya di dalam alkohol 96% agar jeruk purut lebih steril dan bebas dari kontaminasi. Mengupas jeruk purut untuk diambil bagian kulitnya saja. Selanjutnya melumatkan 100 gram irisan kulit jeruk purut tersebut menggunakan blender dengan dicampur 100 ml akuades. Hasil dari proses pelumatan kemudian diperas dan disaring dua kali. Penyaringan pertama dilakukan dengan saringan plastik yang commit to user



dilapisi kain, kemudian penyaringan berikutnya dengan kertas saring untuk mendapatkan hasil perasan air yang bagus dan tanpa endapan. Air hasil saringan dianggap konsentrasi 100%. 2) Pembiakan Trichophyton mentagrophytes Memperoleh biakan jamur diperoleh dari laboratorium Mikrobiologi Universitas Setia Budi Surakarta. Trichophyton mentagrophytes yang diperoleh merupakan biakan subkultur 5 hari dalam Sabouraud Dextrosa Agar Slant. b. Tahap Uji Penelitian 1) Penentuan besar ulangan Dihitung dengan rumus Federer (n-1) (t-1) > 15 Keterangan n : besar ulangan t : jumlah kelompok perlakuan Karena pada penelitian ini menggunakan 6 kelompok perlakuan, maka : (n-1) (t-1) > 15 (n-1) (6-1) > 15 5n > 20 n>4 Jadi, untuk setiap kelompok, jumlah pengulangan harus lebih dari 4. Dalam penelitian ini menggunakan 5 kali ulangan dalam setiap kelompok.

commit to user



2) Pembuatan Sabouraud Dextrose Agar Menyiapan Sabouraud Dextrose Agar bubuk 13 gram dan menambahkan akuades 200 ml, lalu memanaskan sambil mengaduk

sampai

tercampur

homogen.

Menambahkan

kloramfenikol pada media cair untuk mencegah tumbuhnya kuman kontaminan. Setiap 1000 ml Sabouraud Dextrose Agar cair memerlukan 400 mg kloramfenikol, maka: Kloramfenikol yang diperlukan untuk 150 ml Sabouraud Dextrose Agar =

200 ml x 400mg = 80 mg 1000 ml

Setiap 250 mg kloramfenikol dilarutkan dalam 10 ml NaCl 0,9%, Maka: NaCl 0,9% yang diperlukan = 80 mg x 10 ml = 3,2 ml 250 mg (Bridson, 1998) Jadi diperlukan 80 mg kloramfenikol dilarutkan dalam 3,2 ml NaCl 0,9%. Kemudian mensterilkan media cair yang telah ditambah larutan kloramfenikol dengan autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit bersama dengan peralatan penelitian lain yang dibutuhkan. Menuangkan Sabouraud Dextrosa Agar cair dalam 5 cawan Petri yang telah disterilkan dan membiarkan sampai dingin.

commit to user



3) Pembuatan suspensi dan inokulum Trichophyton mentagrophytes Memperoleh biakan jamur dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas Setia Budi Surakarta. Trichophyton mentagrophytes yang diperoleh merupakan biakan sub kultur 5 hari dalam Sabouraud Dextrose Agar miring. Mengambil biakan dengan menggunakan oshe steril kemudian memasukkan ke dalam larutan NaCl 0,9% sampai mencapai kekeruhan yang ekivalen dengan 0,5 standart Mc Farland. Menginokulasikan sampel cair Trichophyton mentagrophytes sebanyak 0,2 ml ke dalam tiap-tiap cawan petri yang berisi Sabouraud Dextrose Agar. Menggoyang agar untuk meratakan sampel Trichophyton mentagrophytes. 4) Pengenceran perasan kulit jeruk purut Mengencerkan hasil perasan kulit jeruk purut yang telah disiapkan pada saat tahap persiapan uji pendahuluan sehingga diperoleh konsentrasi 70%, 80%, 90% dan 100%. 5) Memberi perlakuan ke dalam 7 cawan Petri dengan perasan kulit jeruk purut, akuades dan flukonazol 25 µg Langkah pertama dalam tahap ini adalah membuat 5 sumuran berdiameter 6 mm pada masing-masing cawan Petri. Pada masingmasing sumuran diisi 0,05 ml akuades sebagai kontrol negatif, 0,05 ml flukonazol 25 µg sebagai kontrol positif, dan 0,05 ml perasan kulit jeruk purut dengan konsentrasi 70%, 80%, 90%, 100%. Selanjutnya diiinkubasi pada suhu kamar selama 4 hari. Setelah diinkubasi, dilakukan pengukuran diamater daerah yang bening commit to user



(zona hambatan) dengan menggunakan penggaris melewati pusat sumuran. Mengulang tahap penelitian poin a dan b dengan perasan kulit jeruk purut yang berbeda. Pengulangan perasan dilakukan sebanyak 3 kali. J. Analisis Data Data dianalisis dengan menggunakan uji statistik non parametrik, yaitu uji Kruskal Wallis dilanjutkan dengan Mann Whitney. Uji Kruskal Wallis adalah uji untuk menentukan apakah terdapat perbedaan antar kelompok yang diuji (α = 0,05). Hipotesis: H0 : Tidak ada perbedaan antar kelompok perlakuan H1 : Ada perbedaan antar kelompok perlakuan. Pengambilan keputusan: Jika probabilitas > 0.05 maka H0 diterima Jika probabilitas < 0.05 maka H0 ditolak Uji Mann Whitney digunakan untuk membandingkan rerata diameter zona hambatan antar kelompok sehingga dapat diketahui kelompok mana yang berbeda secara signifikan atau tidak dengan kelompok lain (α = 0,05). Hipotesis: H0 : Tidak ada perbedaan antara kelompok yang dibandingkan. H1 : Ada perbedaan antara kelompok yang dibandingkan.

commit to user



Pengambilan keputusan: Jika probabilitas > 0.05 maka H0 diterima Jika probabilitas < 0.05 maka H0 ditolak Data diolah dengan menggunakan Statistical Producy and Service Solution (SPSS) 16,00 for Windows (Budiarto, 2002).

commit to user



BAB IV HASIL PENELITIAN

A. Hasil Penelitian Dari uji pendahuluan yang dilakukan sebelum uji penelitian, diperoleh data sebagai berikut : Tabel 1. Rerata Diameter Zona Hambat Trichophtyon mentagrophytes pada Uji Pendahuluan Perlakuan Akuades (kontrol negatif) Flukonazol 25 µg (kontrol positif) Perasan kulit jeruk purut 20% Perasan kulit jeruk purut 40% Perasan kulit jeruk purut 60% Perasan kulit jeruk purut 80% Perasan kulit jeruk purut 100%

Rerata Diameter Zona Hambat (mm)* 6 37,2 14 15 13 22,5 19

Sumber data : Primer, Desember 2010 Keterangan: * Pengukuran diameter zona hambat termasuk diameter sumuran 6 mm

Data selengkapnya dapat dilihat dalam lampiran 1. Dari Tabel 1 di atas dapat dibuat grafik yang menggambarkan rerata diameter zona hambatan pada masing-masing perlakuan.

commit to user


Diameter Zona Hambat (mm)


37,2

40 35 30 22,5

25

19

20

15

14

15 10

13

6

5 0 Akuades

Perasan Kulit Perasan Kulit Perasan Kulit Perasan Kulit Perasan Kulit Jeruk Purut Jeruk Purut Jeruk Purut Jeruk Purut Jeruk Purut 20% 40% 60% 80% 100%

Flukonazol 25ug

Kelompok Perlakuan

Gambar 4. Diagram Rerata Diameter Zona Hambat (mm) Masing-Masing Kelompok Perlakuan pada Uji Pendahuluan Pada uji penelitian, konsentrasi perasan kulit jeruk purut yang digunakan adalah 70%, 80%, 90%, dan 100%. Dilakukan pengulangan percobaan sebanyak 3 kali dengan perasan kulit jeruk purut yang berbeda. Hasil masingmasing penelitian dapat dilihat pada lampiran 2, 3, dan 4. Adapun rerata hasil penelitian eksperimental laboratorium efek antifungi perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) terhadap pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro pada Sabouraud Dextrose Agar adalah sebagai berikut: Tabel 2. Rerata Diameter Zona Hambat Trichophyton mentagrophytes Dari Tiga Kali Perasan Diameter Zona Hambat (mm) Akuades

Rerata Perasan Kulit Jeruk Purut*

Flukonazol

70%

80%

90%

100%

25 µg

Perasan I

6

13,4

20

21,8

21,4

26,4

Perasan II

6

13,2

18,6

22,2

21

25

Perasan III

6

12,4

20

21

23

25

Rerata

6

13

19,5

21,7

21,8

25,5

Sumber data : Primer, Desember 2010 *Keterangan: Pengukuran diameter zona hambat termasuk diameter sumuran 6 mm

commit to user



Dari tabel 2 di atas dapat dibuat diagram yang menggambarkan zona hambatan perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) terhadap Trichophyton

Diameter Zona Hambat (mm)

mentagrophytes secara in vitro pada masing-masing kelompok perlakuan.

30

25,5

25

21,8

Perasan Kulit Jeruk Purut 90%


19,5

20 13

15 10

21,7

6

5 0 Akuades



Flukonazol 25ug

Kelompok Perlakuan

Gambar 5. Diagram Rerata Diameter Zona Hambat (mm) Masing-Masing Kelompok Perlakuan pada Uji Penelitian

Pada diagram di atas dapat dilihat adanya perbedaan rata-rata diameter zona hambatan pada masing-masing kelompok perlakuan. Semakin tinggi konsentrasi perasan yang digunakan, semakin besar zona hambatan yang terbentuk. Kelompok perlakuan dengan menggunakan akuades (kontrol negatif) tidak menunjukkan adanya zona hambatan. Sedangkan kelompok perlakuan dengan flukonazol 25 µg (kontrol positif) menunjukkan rata-rata diameter zona hambatan 25,5 mm terhadap Tricophyton mentagrophytes.

commit to user



B. Analisis Data Uji normalitas data dilakukan dengan menggunakan uji KolmogorovSmirnov (lampiran 5). Didapatkan nilai signifikansi diatas 0.05 yang menunjukkan bahwa data terdistribusi normal. Setelah itu, homogenitas data diuji menggunakan Levene Test (lampiran 5), didapatkan nilai signifikansi dibawah 0.05, maka data dinyatakan tidak homogen. Data terdistribusi normal tetapi tidak homogen, maka syarat untuk uji one way ANOVA tidak terpenuhi. Sehingga digunakan uji homolognya, yaitu uji Kruskal Wallis yang kemudian dilanjutkan dengan uji Mann Whitney. Data diolah dengan program Statistical Product and Service Solution (SPSS) 16.0 for Windows. 1. Uji Kruskal Wallis Dari hasil yang diperoleh, terdapat perbedaan antara keenam kelompok perlakuan. Dari uji statistik Kruskal Wallis (lampiran 6) dengan tingkat kemaknaan (α) 0.05, diperoleh nilai t hitung 16.222 dan nilai t tabel (lampiran 8) 11.070. Maka diketahui bahwa nilai t hitung lebih besar dari nilai t tabel yang menunjukkan hipotesis nihil (H0) ditolak dan hipotesis alternatif (H1) diterima. Jadi, terdapat perbedaan diameter zona hambatan antara keenam kelompok perlakuan dengan nilai probabilitas 0.006, lebih kecil dari 0.05. 2. Uji Mann Whitney Uji Mann Whitney digunakan untuk membandingkan seberapa jauh perbedaan rerata diameter zona hambatan antar kelompok perlakuan. Berikut adalah ringkasan hasil Uji Mann Whitney dari lampiran 6: commit to user



Tabel 3. Ringkasan Hasil Uji Mann Whitney Kelompok Akuades

Flukonazol 25 µg

Perasan kulit jeruk purut 70% Perasan kulit jeruk purut 80% Perasan kulit jeruk purut 90% Perasan kulit jeruk purut 100% Flukonazol 25 µg Perasan kulit jeruk purut 70% Perasan kulit jeruk purut 80% Perasan kulit jeruk purut 90% Perasan kulit jeruk purut 100% Perasan Kulit Perasan kulit jeruk Jeruk purut 70% purut 80% Perasan kulit jeruk purut 90% Perasan kulit jeruk purut 100% Perasan Kulit Perasan kulit jeruk Jeruk purut 80% purut 90% Perasan Kulit Perasan kulit jeruk Jeruk purut 80% purut 100% Perasan Kulit Perasan kulit jeruk Jeruk purut 90% purut 100%

Nilai P 0.034

Tingkat Kemaknaan Bermakna

0.037

Bermakna

0.034

Bermakna

0.037

Bermakna

0.037

Bermakna

0.046

Bermakna

0.046

Bermakna

0.046

Bermakna

0.046

Bermakna

0.046

Bermakna

0.050

Bermakna

0.050

Bermakna

0.046

Bermakna

0.046

Bermakna

1.000

Tidak Bermakna

Sesuai hasil uji Mann Whitney di atas, dapat diketahui bahwa : a. Terdapat perbedaan antara diameter zona hambat kelompok akuades (kontrol negatif) dengan flukonazol 25 µg (kontrol positif). Antara akuades dengan perasan kulit jeruk purut pada seluruh tingkat konsentrasi (70%, 80%, 90%, dan 100%) juga terdapat perbedaan diameter zona hambat. commit to user



b. Terdapat perbedaan antara diameter zona hambat kelompok flukonazol 25 µg (kontrol positif) dengan perasan kulit jeruk purut pada seluruh tingkat konsentrasi (70%, 80%, 90%, dan 100%). c. Didalam kelompok perasan kulit jeruk purut sendiri, terdapat perbedaan antara diameter zona hambat konsentrasi 70% dengan konsentrasi 80%, 90% dan 100%; serta antara diameter zona hambat konsentrasi 80% dengan konsentrasi 90% dan 100%. Akan tetapi tidak terdapat perbedaan antara diameter zona hambat konsentrasi 90% dengan konsentrasi 100%.

commit to user



BAB V PEMBAHASAN

Sebelum dilakukan penelitian, dilakukan uji pendahuluan terlebih dahulu. Uji pendahuluan digunakan untuk menentukan konsentrasi perasan kulit jeruk purut yang akan digunakan dalam penelitian. Uji pendahuluan dimulai dengan konsentrasi perasan kulit jeruk purut 20% karena mengacu pada penelitian yang telah dilakukan oleh Hidayah dan Subakir (2010) mengenai efektifitas air perasan buah jeruk purut 20% terhadap pertumbuhan Malassezia sp. Penelitian tersebut bertujuan untuk mengetahui efektivitas air perasan jeruk purut 25% dibandingkan ketokonazol 2% terhadap pertumbuhan Malassezia sp. pada ketombe. Sampel dari penelitian tersebut adalah biakan (+) Malassezia sp. pada Sabouraud Dextrose Agar olive oil. Biakan (+) Malassezia sp. tersebut diencerkan sesuai dengan standar McFarland 0,5 dan diambil 0,1 cc untuk ditanamkan pada Sabouraud Dextrose Agar olive oil dengan air perasan jeruk purut 25% dan Sabouraud Dextrose Agar olive oil dengan ketokonazol 2%. Media dimasukkan ke dalam inkubator pada suhu 37°C selama 24-48 jam, kemudian diamati pertumbuhan Malassezia sp. Berdasarkan hasil penelitian, dari 30 cawan biakan (+) Malassezia sp. pada Sabouraud Dextrose Agar olive oil dengan air perasan jeruk purut 25%, 21 cawan dinyatakan pertumbuhan Malassezia sp. (+) dan 9 cawan dinyatakan pertumbuhan Malassezia sp. (-). Sedangkan dari 30 cawan biakan (+) Malassezia sp. pada Sabouraud Dextrose Agar olive oil dengan ketokonazol 2%, 2 cawan commit to user



dinyatakan pertumbuhan Malassezia sp. (+) dan 28 cawan dinyatakan pertumbuhan Malassezia sp. (-). Hasil penelitian tersebut menunjukkan bahwa konsentrasi perasan jeruk purut sebesar 25% sudah mampu memberikan efek sebagai antifungi. Atas dasar tersebut, maka perasan kulit jeruk purut dalam penelitian ini digunakan konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%. Uji pendahuluan juga melibatkan flukonazol 25 µg sebagai kontrol positif untuk memperkirakan konsentrasi perasan kulit jeruk purut yang mampu menyamai diameter zona hambatan yang dihasilkan kontrol positif.

Kontrol

positif yang digunakan dalam penelitian ini adalah flukonazol 25 µg karena sudah terbukti sebagai obat antifungi. Flukonazol merupakan derivat triazol yang efektif untuk perawatan berbagai jenis gangguan dermatofitosis (Mertesacker, 2006). Dari hasil uji pendahuluan, didapatkan hasil bahwa perasan kulit jeruk purut memiliki zona hambatan maksimal pada konsentrasi 80%, yaitu sebesar 22,5 mm. Atas dasar tersebut, konsentrasi perasan kulit jeruk purut yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah 70%, 80%, 90%, dan 100%. Akan tetapi pada konsentrasi maksimal 80%, perasan jeruk purut tetap tidak mampu menyamai diameter zona hambatan yang dihasilkan oleh flukonazol 25 µg yaitu sebesar 37,2 mm. Pada tahap uji penelitian, dilakukan dilakukan 3 kali penelitian dengan menggunakan perasan jeruk purut yang berbeda. Kemudian dari ketiga hasil tersebut diambil rata-rata yang menunjukkan hasil akhir dari penelitian. Hal ini dilakukan untuk memperkecil penyimpangan kualitas perasan yang dapat mempengaruhi hasil penelitian.

commit to user



Kelompok perlakuan dengan flukonazol 25 µg (kontrol positif) memiliki perbedaan yang signifikan terhadap perasan kulit jeruk purut pada seluruh tingkat konsentrasi (70%, 80%, 90%, dan 100%). Akan tetapi zona hambatan yang terbentuk pada semua kelompok perlakuan lebih kecil dibandingkan dengan zona hambatan flukonazol 25 µg. Dilihat dari rerata hasil penelitian pada tabel 2, perasan kulit jeruk purut konsentrasi 70% menghasilkan zona hambatan sebesar 13 mm, konsentrasi 80% menghasilkan zona hambatan 19,5 mm, konsentrasi 90% dengan zona hambatan 21,7 mm, dan konsentrasi 100% menghasilkan zona hambatan sebesar 21,8 mm. Sedangkan flukonazol 25 µg mampu menghasilkan diameter zona hambatan sebesar 25,5 mm. Hal ini menunjukkan bahwa efek antifungi perasan kulit jeruk purut konsentrasi 70%, 80%, 90% dan 100% lebih kecil dibandingkan flukonazol 25 µg. Terdapat perbedaan yang signifikan antara perasan kulit jeruk purut konsentrasi 70% dengan konsentrasi 80%, 90% dan 100%; serta antara konsentrasi 80% dengan konsentrasi 90% dan 100%. Akan tetapi pada kelompok perlakuan perasan kulit jeruk purut konsentrasi 90% terdapat perbedaan yang tidak signifikan terhadap konsentrasi 100%. Zona hambatan yang terbentuk pada konsentrasi 90% sebesar 21,7 mm, sama dengan zona hambatan yang terbentuk pada konsentrasi 100% yaitu sebesar 21,8 mm. Sehingga kedua kelompok perlakuan menunjukkan daya hambat yang setara terhadap Tricophyton mentagrophytes. Zona hambatan yang terbentuk pada semua kelompok perlakuan perasan kulit jeruk purut menunjukkan bahwa terdapat efek antifungi pada kelompok perlakuan tersebut. Terdapat perbedaan zona hambatan yang terbentuk pada commit to user



masing-masing konsentrasi. Semakin tinggi konsentrasi perasan yang digunakan, semakin besar zona hambatan yang terbentuk. Zona hambatan dapat terbentuk pada perlakuan dengan perasan kulit jeruk purut karena di dalam perasan tersebut mengandung berbagai senyawa, seperti minyak atsiri, saponin, flavonoid, kumarin, dan steroid triterpenoid. Senyawa senyawa inilah yang memberikan efek antifungi terhadap jamur Trichophyton mentagrophytes.

commit to user



BAB VI SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan Dari penelitian yang telah dilakukan, dapat diambil kesimpulan bahwa perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) mempunyai efek antifungi dan pada konsentrasi 100% memiliki daya hambat optimal dalam pertumbuhan Trichophyton mentagrophytes secara in vitro. B. Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengisolasi senyawa aktif yang terkandung dalam perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix) yang paling berpengaruh

dapat

menghambat

pertumbuhan

mentagrophytes.

commit to user

jamur

Trichophyton

EFEK ANTIFUNGI PERASAN KULIT JERUK PURUT (Citrus hystrix) TERHADAP PERTUMBUHAN Trichophyton mentagrophytes. SECARA in vitro SKRIPSI

Recommend Documents