PENGARUH PEMBERIAN JUS BUNCIS (Phaseolus vulgaris L.) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI GLUKOSA SKRIPSI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PENGARUH PEMBERIAN JUS BUNCIS (Phaseolus vulgaris L.) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI GLUKOSA

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Mmperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Ludwina Dearesthea Onevita NIM: 128114041

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016


PENGARUH PEMBERIAN JUS BUNCIS (Phaseolus vulgaris L.) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI GLUKOSA

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Mmperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Ludwina Dearesthea Onevita NIM: 128114041

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016

i




PERSEMBAHAN

Hakuna Matata, it means no worry for the rest of your days. It’s all-problem-free-philosophy. //The Lion King

Skripsi ini kupersembahkan untuk: Tuhan Yesus yang senantiasa memberkati dan memberikan kelancaran dalam setiap detik hidupku. Papa Nicolaus Bambang Wijanarko, Mama Eurelia Maria Dewi Perwani Rakyattiningtyas, Adik Wilfrid Nicholasiva Farrel Dhanesvara, Yullieus Novian Paramarthantio, S.Kg., keluarga besar R.B.P.A. Kinanto J.M., sahabat dan teman-teman yang selalu mendampingi, memberikan semangat, motivasi, dan menyertai dengan doa.

iv




PRAKATA

Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat yang dilimpahkan terutama dalam proses penyusunan skripsi berjudul “Pengaruh Pemberian Jus Buncis (Phaseolus vulgaris L.) Terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Jantan Galur Wistar yang Terbebani Glukosa”, sehingga dapat terselesaikan dengan baik. Penyusunan skripsi ini juga tak lepas dari doa dan dukungan berbagai pihak dari awal, pertengahan, hingga akhir. Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1. Ibu Yunita Linawati, M.Sc., Apt., selaku dosen pembimbing skripsi atas kemurahan hati dan kesabarannya dalam membimbing, memberi masukan, dan arahan kepada penulis. 2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt., yang telah bersedia menjadi dosen penguji skripsi serta memberikan kritik dan saran demi kemajuan skripsi ini. 3. Bapak Christianus Heru Setiawan, M.Sc., Apt., yang telah bersedia menjadi dosen penguji skripsi serta memberikan kritik dan saran demi kemajuan skripsi ini. 4. Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt., selaku kepala laboratorium farmasi yang telah memberikan pengarahan dan izin penggunaan fasilitas laboratorium selama penelitian skripsi berlangsung. 5. Bapak Djoko Santoso, M.Si., selaku dosen Departemen Biologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada yang telah bersedia membantu penulis dalam melakukan determinasi tanaman uji.

vii


6. Pak Heru, Pak Kayat, Pak Parjiman, dan semua laboran farmasi yang telah bersedia membantu jalannya penelitian skripsi ini. 7. Papa Nicolaus Bambang Wijanarko, Mama Eurelia Maria Dewi Perwani Rakyattiningtyas, Nuriani, Abel Sava, Wilfrid Nicholasiva Farrel Dhanesvara, Yullieus Novian Paramarthantio S.Kg., yang selalu memberikan dorongan, semangat, motivasi, dan doa selama proses penyusunan skripsi. 8. Niall James Horan, Cintya Aurora Diah Nastiti, Pasthika Dirda Mayantya, Dian Putri Gupitasari, S.K.H., Wulan Dari Sirait, Johanes Sirait, Inggarestu Pradiptaningtyas, Prisca Nadya Verina Djala, S.Farm., Eunike Lystia Florentien Kelana Jeversoon, S.Farm., Sina Susanti, S.Farm., Januaritha Dara Nastiandari, S.Farm., Mila Karmila Sri Setiomulyo, S.Farm., Martinus Fuji Haryoko, S.Pd., Nicolaus Deka Alvian Putra Pradana, sebagai sahabat dan keluarga kedua yang terus memotivasi untuk menyelesaikan penyusunan skripsi ini. 9. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang turut membantu selama penyusunan skripsi ini berlangsung Penulis menyadari bahwa skripsi ini tidaklah sempurna, oleh karena itu kritik

dan saran

yang

membangun

sangat diharapkan

untuk menjadi

pengembangan ilmu pengetahuan dan acuan bagi penelitian selanjutnya. Akhir kata, penulis mengucapkan terima kasih dan semoga skripsi ini memberikan manfaat di kehidupan mendatang. Yogyakarta, Penulis

viii


DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL ..............................................................................

i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING.......................................

ii

HALAMAN PENGESAHAN .................................................................

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN ..............................................................

iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ..................................................

v

LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ................................

vi

PRAKATA .............................................................................................

vii

DAFTAR ISI ..........................................................................................

ix

DAFTAR TABEL ..................................................................................

xiii

DAFTAR GAMBAR ..............................................................................

xiv

DAFTAR LAMPIRAN ...........................................................................

xv

INTISARI ...............................................................................................

xvi

ABSTRACT .............................................................................................

xvii

BAB I. PENGANTAR ...........................................................................

1

A. Latar Belakang...........................................................................

1

1. Permasalahan .........................................................................

3

2. Keaslian Penelitian.................................................................

3

3. Manfaat Penelitian .................................................................

4

B. Tujuan Penelitian .......................................................................

5

1. Tujuan Umum ........................................................................

5

2. Tujuan Khusus .......................................................................

5

ix


BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .....................................................

6

A. Diabetes Mellitus .......................................................................

6

1. Definisi ..................................................................................

6

2. Gejala ....................................................................................

6

3. Klasifikasi ..............................................................................

7

4. Diagnosis ...............................................................................

9

B. Metabolisme Karbohidrat...........................................................

9

C. Buah Buncis ..............................................................................

12

1. Uraian Tanaman.....................................................................

12

2. Taksonomi .............................................................................

13

3. Kandungan Tanaman .............................................................

13

D. Glibenklamid .............................................................................

14

E. Metode Uji Efek Antidiabetes ....................................................

15

1. Metode Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO) .........................

15

2. Metode Uji Perusakan Pankreas .............................................

16

3. Metode Resistensi Insulin ......................................................

16

F. Metode Penetapan Kadar Glukosa Darah ...................................

16

1. Metode Kondensasi dengan Gugus Amina .............................

16

2. Metode Enzimatik ..................................................................

17

3. Metode Oksidasi-Reduksi ......................................................

17

G. Landasan Teori ..........................................................................

17

H. Hipotesis....................................................................................

18

x


BAB III. METODE PENELITIAN .........................................................

19

A. Jenis dan Rancangan Penelitian..................................................

19

B. Variabel dan Definisi Operasional..............................................

19

1. Variabel Utama ......................................................................

19

2. Variabel Pengacau .................................................................

19

3. Definisi Operasional ..............................................................

20

C. Bahan dan Alat Penelitian ..........................................................

20

1. Bahan Penelitian ....................................................................

20

2. Alat Penelitian .......................................................................

21

D. Tata Cara Penelitian ...................................................................

22

1. Determinasi Tanaman ............................................................

22

2. Pengumpulan Bahan Uji.........................................................

22

3. Pembuatan Jus Buncis ............................................................

22

4. Perhitungan Dosis Pemberian Jus Buncis ...............................

22

5. Preparasi Bahan .....................................................................

23

6. Orientasi Waktu Pemberian Glibenklamid .............................

24

7. Orientasi Waktu Pemberian Jus Buncis ..................................

25

8. Pengelompokkan dan Perlakuan Hewan Uji ...........................

25

9. Penetapan Kadar Glukosa Darah dengan Metode GOD-PAP..

28

E. Analisis Hasil ............................................................................

28

BAB VI. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................

29

A. Hasil Determinasi Tanaman .......................................................

29

B. Hasil Percobaan Pendahuluan ....................................................

29

xi


1. Penetapan Waktu Pemberian Glibenklamid ............................

29

2. Penetapan Dosis Sediaan Jus Buncis ......................................

31

3. Penetapan Waktu Pemberian Jus Buncis ................................

32

C. Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Jus Buncis .......................

32

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN..................................................

39

A. Kesimpulan................................................................................

39

B. Saran .........................................................................................

39

DAFTAR PUSTAKA .............................................................................

40

LAMPIRAN ...........................................................................................

42

BIOGRAFI PENULIS ............................................................................

61

xii


DAFTAR TABEL Tabel I.

Kriteria Penegakan DM ......................................................

9

Tabel II.

Kandungan Gizi per 100 gram Buncis.................................

14

Tabel III.

Isi Reagen GOD-PAP .........................................................

21

Tabel IV.

Keseragaman Bobot Tablet .................................................

24

Tabel V.

Volume Pengukuran Kadar Glukosa Darah .........................

28

Tabel VI.

Hasil UTGO dan Perhitungan Selisih Nilai LDDK0-240 Suspensi Glibenklamid Dosis 0,45mg/kgBB .......................

Tabel VII.

30

Data Kadar Glukosa Darah Rata-Rata dan LDDK0-240 Tiap Kelompok Perlakuan ..................................................

34

Tabel VIII. Hasil Uji Post Hoc-Scheffe LDDK0-240 Glukosa Darah Tikus yang Terbebani Glukosa .....................................................

xiii

36


DAFTAR GAMBAR Gambar 1.

Sekresi Insulin Akibat Peningkatan Kadar Glukosa Dalam Darah..................................................................................

11

Gambar 2.

Tanaman Buncis .................................................................

12

Gambar 3.

Struktur Glibenklamid ........................................................

15

Gambar 4.

Flowchart Pengelompokkan dan Perlakuan Hewan Uji .......

27

Gambar 5.

Reaksi Enzimatik Glukosa dengan Reagen GOD-PAP ........

33

Gambar 6.

Kurva Hubungan Antara Waktu dan Rerata Kadar Glukosa Darah..................................................................................

xiv

35


DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1.

Surat Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance) .......

43

Lampiran 2.

Surat Keterangan Determinasi Tanaman ..........................

44

Lampiran 3.

Bahan dan Alat Penelitian ................................................

45

Lampiran 4.

Preparasi Bahan ...............................................................

46

Lampiran 5.

Hasil Rangkaian Uji Statistik LDDK0-240: Penetapan Waktu Pemberian Glibenklamid ......................................

Lampiran 6.

Hasil Rangkaian Uji Statistik LDDK0-240: Orientasi Dosis Pemberian Jus Buncis ............................................

Lampiran 7.

50

52

Hasil Rangkaian Uji Statistik LDDK0-240: Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Jus Buncis ....................................

55

Lampiran 8.

Leaflet Reagen GOD-PAP ...............................................

58

Lampiran 9.

Leaflet Glibenklamid .......................................................

60

xv


INTISARI Diabetes Mellitus (DM) merupakan suatu penyakit insufisiensi insulin karena menurunnya produksi insulin atau resistensi insulin. Penggunaan obat antidiabetik oral memiliki efek samping serta efek jangka panjang yang kurang menguntungkan. Oleh karena itu, penggunaan obat tradisional sebagai terapi DM sangat dianjurkan. Buncis (Phaseolus vulgaris L.) merupakan tanaman yang secara empiris banyak digunakan di Indonesia sebagai terapi pendamping diabetes. Kandungan buncis yang berperan sebagai agen antidiabetes adalah βsitosterol dan sigmasterol. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian jus buncis terhadap kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah menggunakan 30 ekor tikus putih jantan galur Wistar terbagi dalam enam kelompok. Kelompok I diberi CMC 1% b/v, kelompok II diberi glibenklamid 0,45mg/kgBB dan pembebanan glukosa, kelompok III diberi CMC 1% b/v dan pembebanan glukosa, kelompok IV, V, dan VI diberi jus buncis dengan peringkat dosis 22,5, 50,85, dan 115,05g/kgBB, serta pembebanan glukosa. Semua perlakuan diberikan per oral. Efek hipoglikemik jus buncis diuji dengan metode Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO). Kadar glukosa darah diukur pada menit ke-0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, dan 240 menggunakan metode enzimatik GOD-PAP. Data LDDK0-240 tiap kelompok dianalisis secara statistik menggunakan metode Kolmogorov Smirnov dilanjutkan dengan One Way ANOVA dan uji Post-Hoc Scheffe bertaraf kepercayaan 95%. Hasil analisis menunjukkan bahwa jus buncis (Phaseolus vulgaris L.) dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa. Dosis jus buncis yang dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa adalah 22,5g/kgBB, 50,85g/kgBB, 115,05g/kgBB. Kata Kunci: jus buncis (Phaseolus vulgaris L.), glibenklamid, penurunan kadar glukosa darah, UTGO, GOD-PAP

xvi


ABSTRACT Diabetes Mellitus (DM) is an insulin insufficiency disease due to decreased production of insulin or insulin resistance. The use of oral antidiabetics has few side effects and harmful long term effects. Therefore, the use of traditional medicine as a treatment for DM patients is highly recommended. Beans (Phaseolus vulgaris L.) have been widely used in Indonesia as a complementary therapy for diabetes patients. Beans contain some chemical compounds which have the antidiabetic effect, such as flavonoids, β-sitosterol and sigmasterol. This study aimed to determine the effect of bean juice to decrease blood glucose levels of Wistar male rats burdened by glucose. This research was experimental study with randomized controlled design using 30 Wistar male rats which are divided into six groups. Group I was treated with CMC 1% w/v, group II was treated with glibenclamide 0,45mg/kgBW and glucose loading, group III was treated with CMC 1% w/v and glucose loading, group IV, V, and VI were given 22.5, 50.85, and 115.05g/kgBW doses of bean juice, and glucose loading. All treatments are administered orally. The hypoglycemic effect of bean juice was tested by the Oral Glucose Tolerance Test (OGTT) method. Blood glucose levels were determined at minute 0, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, and 240 using GOD-PAP enzymatic method. AUC0-240 for each group was statistically analyzed using the Kolmogorov-Smirnov method followed by One Way ANOVA and Post-Hoc Scheffe 95% confidence level. The analysis showed that bean juice has the ability to decrease blood glucose levels. Bean juice at 22.5g/kgBW, 50.85g/kgBW, 115.05g/kgBW dose can reduce blood glucose levels. Keywords: bean juice (Phaseolus vulgaris L.), glibenclamide, lowering blood glucose levels, OGTT, GOD-PAP

xvii


BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Diabetes Melitus (DM) didefinisikan sebagai suatu penyakit atau gangguan metabolisme kronis yang ditandai dengan tingginya kadar gula darah disertai dengan gangguan metabolisme karbohidrat, lipid dan protein sebagai akibat insufisiensi fungsi insulin. Insufisiensi fungsi insulin dapat disebabkan oleh gangguan atau defisiensi produksi insulin oleh sel-sel beta Langerhans kelenjar pankreas, atau disebabkan oleh kurang responsifnya sel-sel tubuh terhadap insulin (Depkes RI, 2006). Menurut World Health Organization (WHO), prevalensi DM secara global akan meningkat kurang lebih dua kali lipat dari 171 juta orang pada tahun 2000 menjadi 366 juta pada tahun 2030 dengan jumlah kematian sekitar 3,2 juta setiap tahunnya. Indonesia menduduki peringkat keempat sebagai negara dengan jumlah penderita DM terbanyak di dunia, dengan perkiraan prevalensi DM mencapai 21,3 juta orang pada tahun 2030 (Wild, Roglic, Green, Sicree, dan King, 2004). Setengah dari jumlah penderita DM tidak menyadari bahwa dirinya mengidap DM karena pada umumnya gejala DM tidak terlalu tampak sampai terjadinya komplikasi. Komplikasi yang umum terjadi pada penderita DM antara lain jantung koroner dan penyumbatan pembuluh darah (Soegondo, 2005). Tingginya prevalensi DM di Indonesia dan kasus komplikasi yang parah mendorong adanya usaha-usaha penelitian untuk mengembangkan terapi yang sudah ada ataupun menemukan agen terapi baru yang lebih unggul baik dari segi keamanan, efektivitas, maupun ekonomi.

1

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI 2

Terapi pengobatan DM yang paling sering dilakukan adalah penggunaan obat antidiabetik oral, seperti glibenklamid. Glibenklamid merupakan obat golongan sulfonilurea yang memiliki cara kerja merangsang sekresi insulin dari sel-sel β Langerhans di pankreas (Syarif, Ascobat, Setiabudy, Estuningtyas, Setiawati, dan Sunaryo, 2009). Glibenklamid memiliki efek samping seperti timbulnya alergi, mual, muntah, diare, gangguan susunan saraf pusat dan mata. Selain itu, konsumsi glibenklamid dalam jangka panjang berpotensi menyebabkan hipoglikemik, yaitu keadaan dimana kadar glukosa darah berada pada keadaan di bawah normal. Dengan adanya efek samping serta efek jangka panjang penggunaan obat antidiabetik oral, WHO merekomendasikan penggunaan obat tradisional dalam pencegahan dan pengobatan penyakit di negara-negara berkembang (Gunawan, 2007). Penggunaan obat tradisional untuk mengatasi masalah kesehatan bukanlah hal yang baru di Indonesia. Salah satu aplikasinya adalah pemanfaatan tanaman sebagai agen antidiabetes. Berbagai tanaman telah ditemukan memiliki aktivitas antidiabetes, termasuk diantaranya adalah buncis (Phaseolus vulgaris L.). Dalam buku berjudul “Miracle of Vegetables” yang disusun oleh Rizki (2013), dikatakan bahwa penambahan buncis sebanyak 600 gram/hari dalam diet selama 7 hari menunjukkan terjadinya penurunan kadar glukosa darah hingga 14% pada penderita diabetes, sedangkan buncis dalam bentuk ekstrak juga dapat menurunkan kadar glukosa darah pada kelinci diabetes terinduksi aloksan sampai 30%. Kandungan aktif buncis yang berperan dalam proses menekan tingkat kadar gula dalam darah adalah zat β-sitosterol dan stigmasterol. Kedua zat tersebut


berperan dalam merangsang pankreas untuk menghasilkan insulin tanpa menyebabkan terjadinya hipoglikemik. Menurut Rizki (2013), secara empiris, masyarakat Indonesia mengonsumsi 250 gram buncis dalam bentuk jus dengan volume 150 mL. Konsumsi buncis diharapkan dapat menjadi terapi pendamping bagi penderita DM yang menjalani terapi obat-obatan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian jus buncis terhadap penurunan glukosa darah tikus jantan galur Wistar dengan metode Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO). 1. Permasalahan a. Apakah jus buncis (Phaseolus vulgaris L.) dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa? b. Berapakah dosis jus buncis (Phaseolus vulgaris L.) yang dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa? 2. Keaslian Penelitian Penelitian yang menggunakan tanaman buncis yang sudah dilakukan, diantaranya: a. Pari dan Venkateswaran (2003) melakukan penelitian mengenai pengaruh pemberian ekstrak air buncis (Phaseolus vulgaris L.) terhadap kadar glukosa darah ekor tikus terinduksi streptozotocin. Hasil penelitian yang diperoleh yaitu pemberian 200mg/kgBB ekstrak air buncis dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus. b. Kurniawati, Sutrisna, dan Wahyuni (2012) melakukan penelitian mengenai pengaruh pemberian ektrak etanol 70% buncis (Phaseolus vulgaris L.)


terhadap kadar glukosa darah kelinci jantan yang dibebani glukosa. Hasil penelitian yang diperoleh yaitu pemberian 200, 300, dan 450 mg/kgBB ekstrak etanol 70% buncis dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus. c. Luka, Ollatunde, Tijjani, dan Olisa-Enewe (2013) melakukan penelitian mengenai pengaruh pemberian ekstrak buncis (Phaseolus vulgaris L.) terhadap kadar glukosa darah tikus terinduksi aloksan. Hasil penelitian yang diperoleh yaitu pemberian 400mg/kgBB ekstrak buncis dapat memberikan efek antidiabetik pada tikus. Perbedaan dengan penelitian yang telah dilakukan terletak pada hewan uji, yaitu tikus jantan galur Wistar, jenis sediaan yang digunakan, yaitu jus buncis, dan metode induksi yang digunakan, yaitu pembebanan glukosa. Sejauh penelusuran pustaka oleh penulis, penelitian mengenai efek pemberian jus buncis terhadap kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa belum pernah dilakukan. 3. Manfaat Penelitian a. Manfaat Teoritis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai jus buncis sebagai obat tradisional yang mampu menurunkan kadar glukosa darah. b. Manfaat Praktis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan tambahan pengetahuan kepada masyarakat pada umumnya dan penderita DM pada khususnya tentang pemanfaatan buncis untuk menurunkan kadar glukosa darah.


B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan Umum Mengetahui pengaruh pemberian jus buncis terhadap kadar glukosa darah. 2. Tujuan Khusus a. Mengetahui pengaruh jus buncis terhadap penurunan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa. b. Mengetahui dosis jus buncis yang dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa.


BAB II Penelaahan Pustaka A. Diabetes Mellitus 1. Definisi Diabetes Mellitus (DM) yang umumnya dikenal sebagai kencing manis didefinisikan sebagai suatu penyakit atau gangguan metabolisme kronis yang ditandai dengan tingginya kadar gula darah disertai dengan gangguan metabolisme karbohidrat, lipid, dan protein sebagai akibat insufisiensi fungsi insulin. Insufisiensi fungsi insulin dapat disebabkan oleh gangguan atau defisiensi produksi insulin oleh sel-sel beta Langerhans kelenjar pankreas, atau disebabkan oleh kurang responsifnya sel-sel tubuh terhadap insulin (Depkes RI, 2006). 2. Gejala Penyakit DM ditandai dengan adanya gejala klasik ‘trio-P’, yaitu: a. Poliuria (banyak berkemih) Kadar glukosa darah pada pasien dengan defisiensi insulin umumnya melampaui 120mg/dL. Setelah kadar glukosa darah >180mg/dL, taraf maksimal reabsorbsi glukosa pada tubulus renalis akan dilampaui, dan glukosa akan diekskresikan ke dalam urin (glukosuria). Glukosa bersifat diuresis osmotik, sehingga diuresis sangat meningkat disertai dengan hilangnya elektrolit (Syahputra, 2003). b. Polidipsi (banyak minum) Banyaknya elektrolit yang hilang bersamaan dengan urin menyebabkan terjadinya dehidrasi dan kekurangan elektrolit pada penderita DM. Terjadinya

6


dehidrasi menimbulkan rasa haus pada penderita DM dan badan berusaha untuk mengatasinya dengan banyak minum air (Handoko dan Suharto, 1995). c. Polifagi (banyak makan) Penderita DM mengalami kekurangan pasokan glukosa dalam sel-sel tubuh, meskipun kadar glukosa dalam darah tinggi. Pemenuhan kebutuhan glukosa dalam sel dilakukan dengan ekskresi cadangan glukosa, yang diiringi dengan hilangnya empat kalori untuk tiap gram glukosa yang diekskresi. Tubuh menerima sinyal terkait rasa lapar akibat berkurangnya cadangan glukosa dan kalori dalam tubuh. Hal inilah yang menyebabkan timbulnya rasa lapar pada penderita DM (Lanywati, 2001). 3. Klasifikasi Menurut American Diabetes Association (2010), DM diklasifikasikan menjadi 4 tipe, antara lain: a. Diabetes Mellitus Tipe 1 (DMT1) DMT1 umumnya terjadi karena kerusakan sel-sel β Langerhans yang disebabkan oleh reaksi autoimun yang menyebabkan defisiensi sekresi insulin, dan ada juga yang bersifat idiopatik (tidak diketahui dengan jelas penyebabnya). Sekresi glukagon yang berlebihan juga ditemukan pada penderita DMT1, dimana pada kondisi normal, hiperglikemia akan menurunkan sekresi glukagon. Pada kasus DMT1 sekresi glukagon tetap tinggi seiring terjadinya hiperglikemia, sehingga memperparah kondisi hiperglikemia. Walaupun bentuk diabetes ini kebanyakan terjadi pada anak-anak dan remaja, namun tipe ini dapat terjadi juga pada semua umur. Biasanya penderita DMT1 diberi insulin eksogen untuk


memperbaiki

katabolisme,

mencegah

ketoasidosis,

dan

menurunkan

hiperglukagonemia, serta menurunkan kadar glukosa darah. b. Diabetes Mellitus Tipe 2 (DMT2) DMT2 merupakan suatu penyakit akibat ketidakmampuan tubuh untuk merespon dengan wajar terhadap aktivitas insulin yang dihasilkan oleh pankreas (resistensi insulin). Penderita DMT2 mengalami kerusakan sel beta pankreas yang disebabkan oleh adanya oksidasi radikal bebas, yang menyebabkan penurunan sekresi hormon insulin, baik dari segi jumlah maupun kualitas. DMT2 merupakan jenis diabetes yang paling sering ditemukan, diperkirakan 90% dari seluruh penderita DM di Indonesia. Sebagian besar DMT2 disebabkan oleh gaya hidup yang tidak sehat seperti konsumsi junk food, minuman beralkohol, dan jarang berolahraga. Penderita DMT2 tidak membutuhkan insulin untuk pengobatan. c. Diabetes Mellitus Gestasional (DMG) DMG merupakan nama lain dari DM dalam masa kehamilan. DMG merupakan suatu kondisi kehamilan normal yang disertai dengan peningkatan resistensi insulin, yang umumnya dijumpai pada trimester kedua atau ketiga. Faktor risiko GDM yang utama yaitu faktor genetik dan obesitas. Wanita yang memiliki sejarah keluarga positif DM, dianjurkan untuk menjalani skrining pada minggu 24-48 usia kehamilannya. Deteksi awal ini sangat penting karena dapat mengurangi angka kelahiran bayi abnormal dan kematian bayi. d. Diabetes Mellitus Bentuk Lain DM bentuk lain merupakan diabetes yang berkaitan dengan penyakitpenyakit lain seperti penyakit eksokrin pankreas, defek genetik fungsi sel beta,


defek genetik fungsi insulin, endokrinopati, penyakit akibat obat atau zat kimia, infeksi, imunologi, dan sindrom genetik. 4. Diagnosis Diagnosis DM dapat ditegakkan berdasarkan penemuan gejala-gejala klasik diabetes (poliuria, polidipsia, dan polifagia) dan hiperglikemia yang ditunjukkan dengan pengukuran kadar glukosa darah sewaktu > 200 mg/dL atau glukosa darah puasa ≥126 mg/dL. Selain pengukuran kadar glukosa darah, International Diabetes Federation (IDF) merekomendasikan tes HbA1c sebagai penegak diagnosis DM pada tahun 2012. Hasil tes positif DM ditunjukkan dengan ketetapan nilai HbA1c ≥ 6,5%. Diagnosis DM juga dapat dilakukan berdasarkan kadar glukosa darah pada UTGO seperti pada Tabel I berikut ini. Tabel I. Kriteria Penegakan Diagnosis DM Kadar glukosa darah Kadar glukosa darah puasa (mg/dL) 2 jam setelah makan (mg/dL) <110 <140 Normal 110-125 Pra-diabetes: 140-199 IFG atau IGT Diabetes ≥126 ≥200 Keterangan: Pra-diabetes

IFG IGT

: kondisi dimana kadar gula darah seseorang berada diantara kadar normal dan diabetes, lebih tinggi daripada normal tetapi tidak cukup tinggi untuk dikategorikan ke dalam DM. Ada dua kondisi pra-diabetes, yaitu: : Impaired Fasting Glucose, keadaan dimana kadar glukosa darah puasa seseorang 110-125 mg/dL; : Impaired Glucose Tolerance, keadaan dimana kadar glukosa darah seseorang pada UTGO berada di atas normal tetapi tidak cukup tinggi untuk dikategorikan ke dalam kondisi diabetes. Diagnosa IGT ditetapkan apabila kadar glukosa darah seseorang 2 jam setelah mengkonsumsi 75 gram glukosa per oral berada antara 140-199 mg/dL.

(Merentek, 2006) B. Metabolisme Karbohidrat Pencernaan karbohidrat sudah dimulai sejak makanan masuk ke dalam mulut; makanan dikunyah agar dipecah menjadi bagian-bagian kecil, sehingga


luas permukaan kontak dengan enzim pencernaan juga lebih besar. Karbohidrat akan diuraikan menjadi molekul yang lebih sederhana dengan bantuan enzim amilase. Penguraian ini berkaitan dengan penyerapan karbohidrat dalam bentuk disakarida pada usus halus. Disakarida kemudian diubah ke dalam bentuk glukosa untuk selanjutnya memasuki fase metabolisme. Setelah melalui dinding usus halus, glukosa akan diangkut menuju ke hepar. Apabila jumlah karbohidrat yang dimakan melebihi kebutuhan tubuh, sebagian karbohidrat akan diikat di dalam hati dan disimpan dalam bentuk glikogen untuk mempertahankan kadar glukosa darah dalam batas normal. Kapasitas pembentukan glikogen memiliki batas maksimum 350 gram, selebihnya karbohidrat akan diubah menjadi lemak dan disimpan di jaringan lemak (Merentek, 2006). Glukosa di dalam tubuh berperan sebagai bahan bakar proses metabolisme dan sumber energi utama bagi kerja otak. Glukosa digunakan untuk mensintesis molekul ATP (adenosine triphosphate). Tubuh yang memerlukan energi akan melakukan pembakaran glukosa yang diambil dari dalam aliran darah. Kadar gula darah akan diisi kembali oleh glikogen dalam hati dan dalam kebutuhan besar disusul dengan mobilisasi lemak (Merentek,2006). Regulasi glukosa darah selain tergantung pada glukagon dan lemak, juga dipengaruhi oleh adanya hormon insulin (Gambar 1). Kadar glukosa darah akan segera meningkat setelah makan dan akan menurun saat tidak ada asupan makanan. Hormon insulin berperan dalam mencegah terjadinya fluktuasi glukosa yang signifikan. Hormon insulin disekresikan oleh sel β pankreas ketika kadar glukosa darah meningkat (setelah makan). Sekresi insulin berlangsung dalam dua


fase, yaitu early peakk (fase 1) yang terjadi pada 3-10 menit pertam tama setelah makan, memanfaatkan n insulin yang disimpan dalam sel β pankreas as, dan fase lanjut (fase 2) yang terja rjadi 20 menit setelah stimulasi glukosa (Merentek tek, 2006). Sekresi insulin terjadi te saat kadar glukosa darah meningkat dan an sinyalnya ditangkap oleh sel β pankreas pa melalui glucose transporter 2 (GLUT22). Glukosa kemudian dibawa ke dalam da sel dan mengalami fosforilase menjadii glukosa-6fosfat (G6P) dengan ban antuan enzim glukokinase. G6P akan mengalam mi glikolisis menjadi asam piruvat. t. Proses glikolisis juga menghasilkan ATP, ya yang dalam jumlah besar akan me menutup kanal kalium. Penumpukan kalium dalam sel mengakibatkan depolaris risasi sel sehingga menyebabkan terbukanya kana nal kalsium. Kalsium akan masuk ke k dalam sel dan insulin akan dilepaskan kee dalam sel (Merentek, 2006).

Gambar 1. Sekresi Insu sulin Akibat Peningkatan Kadar Glukosa Dala alam Darah (Mahendra ra, Tobing, Krisnatuti, Alting, 2008)


C. Buncis 1. Uraian Tanaman Buncis (Gambar 2) dikenal dengan nama latin Phaseolus vulgaris L. Buncis merupakan tanaman berhari pendek (pada fase pembungaan tanaman ini memerlukan penyinaran matahari dengan jumlah kurang dari dua belas jam setiap harinya), oleh karena Gambar 2. Tanaman Buncis (Amin, 2014)

itu

tanaman

buncis

mudah

dikembangkan di Indonesia. Tanaman buncis

merupakan tumbuhan yang memiliki dua tipe pertumbuhan, yakni tegak dan merambat. Tanaman buncis tipe tegak memiliki tinggi 35-40 cm dari permukaan tanah, sedangkan tipe merambat batangnya dapat mencapai 2,5-3,5 m. Tanaman buncis terdiri atas akar, batang, bunga, daun, buah serta biji. Akar tanaman buncis merupakan akar tunggang, akar cabang, dan akar serabut. Batangnya tidak berkayu, tidak keras, dan umumnya berbuku-buku. Buncis memiliki bunga yang berukuran besar dan mudah terlihat. Bunga tersebut berwarna putih, merah jambu, atau ungu. Daun buncis beranak daun-tiga dan menyirip, berbentuk jorong segitiga dan bersifat majemuk tiga. Bakal buah buncis berbentuk panjang bulat atau panjang pipih. Polong buncis muda berwarna putih hijau muda segar kekuningan sedangkan yang tua berwarna kecoklatan (Amin, 2014).


2. Taksonomi Kingdom

: Plantae

Sub Kingdom

: Tracheobionta

Divisi

: Spermathophyta

Super Divisi

: Angiospermae

Kelas

: Dicotyledonae

Sub Kelas

: Calyciflorae

Ordo

: Leguminales

Famili

: Papilionaceae

Sub Famili

: Papilionoideae

Genus

: Phaseolus

Spesies

: Phaseolus vulgaris L.

(Amin, 2014).

3. Kandungan Tanaman Buah buncis memiliki kandungan kimia pada biji dan kulitnya. Biji buncis mengandung

glukoprotein,

tripsin

inhibitor,

hemaglutinin,

β-sitosterol,

stigmasterol, kampesterol, alantonin, dan inositol. Kulit buncis mengandung leukopelargonidin,

leukosianidin,

leukodelpinidin,

kuersetin,

pelargonidin,

sianidin, kaempferol, petunidin, delfinidin, malvidin, dan mirsetin (Dalimartha, 2003). Adanya kandungan senyawa flavonoid, seperti misalnya kuersetin, memiliki dua peranan penting dalam pencegahan DM. Senyawa flavonoid dapat berperan sebagai antioksidan berfungsi untuk melindungi sel β pankreas dari kerusakan akibat radikal bebas sekaligus sebagai α-amylase inhibitor (Judge dan Sevensson, 2006). Senyawa fitosterol berupa β-sitosterol dan stigmasterol


berfungsi sebagai agen antidiabetes yang dapat merangsang sekresi insulin dari pankreas (Setyadhini, 2006). Selain kandungan kimia, buncis juga memiliki kandungan gizi yang baik. Buncis merupakan sayuran yang cocok bagi orang yang ingin menjaga asupan kalorinya, dimana setiap 100 gram buncis hanya mengandung 35 kalori dengan kandungan protein dan serat yang cukup tinggi. Kandungan gizi per 100 gram buncis dapat dilihat pada Tabel II berikut ini. Tabel II. Kandungan Gizi per 100 Gram Buncis Kandungan Gizi Jumlah 35 kal Energi 2,4 g Protein 0,2 g Lemak 7,7 g Karbohidrat 6,5 g Kalsium 1,2 g Serat 4,4 g Fosfor 1,1 g Zat besi 630 µg Vitamin A 0,08 mg Vitamin B1 0,1 mg Vitamin B2 0,7 mg Vitamin B3 19 mg Vitamin C 89 g Air (Waluyo dan Djuariah, 2013) D. Glibenklamid Glibenklamid (Gambar 3) merupakan obat antidiabetik oral golongan sulfonilurea generasi II yang sering disebut sebagai insulin secretagogue. Mekanisme kerja glibenklamid adalah merangsang sekresi insulin dari sel ßpankreas pulau Langerhans dengan menutup kanal ion K+. Penutupan kanal ini menyebabkan terjadinya depolarisasi membran serta membukanya kanal ion Ca2+.


Dengan terbukanya kana nal ion Ca2+ maka terjadi pasokan ion Ca2+ ke dalam da sel βpankreas dan mendorong ng insulin keluar menuju sel (Syarif, 2009).

Gambar 3.. Struktur Glibenklamid (Depkes RI, 1995)

Dosis awal pem emberian glibenklamid adalah sebesar 5 mg/ha /hari setelah makan dan maksimum um 15 mg/hari (Royal Pharmaceutical Socie iety, 2011). Penggunaan

glibenklam lamid

dapat

menimbulkan

efek

hipoglikem emia

yang

berlangsung selama 12-24 12 jam, sehingga penggunaannya cukup 1 kkali dalam sehari. Efek samping yang ya dapat terjadi adalah alergi, mual, muntah, h, diare, dan gangguan susunan saraf af pusat dan mata (Sustraini, Alam, Hadibroto, 200 005). E Metode Uji Efek Antidiabetes E. Uji efek antidiab abetes dapat dilakukan dengan tiga metode, yaitu: u: 1. Metode Uji Tolerans nsi Glukosa Oral (UTGO) Toleransi glukos osa adalah kemampuan tubuh untuk menggunaka kan glukosa dalam tubuh. Kadar gluk lukosa darah akan naik dengan pemberian glukosa sa 1 g/kgBB secara oral. Puncak kad adar glukosa terjadi dalam setengah atau 1 jam m dan akan kembali normal setelah h 22-3 jam (Depkes RI, 2006). Prinsip UTGO adalah a pemberian glukosa terhadap hewan uji ji yang telah dipuasakan selama 10-16 16 jam, kemudian diambil darahnya sebanyak 0,5 ml untuk


mengukur kadar glukosa awal. Hewan uji kemudian dibebani larutan glukosa monohidrat secara peroral. Pengambilan darah diulangi sesuai dengan interval waktu yang ditentukan (Adam, 2000). 2. Metode Uji Perusakan Pankreas Metode ini dilakukan dengan memberikan diabetogen yang dapat menyebabkan kerusakan pada pankreas hewan uji sehingga terkondisi seperti penderita DM. Diabetogen yang banyak digunakan antara lain aloksan dan streptozotosin. Prinsip dari metode ini adalah induksi diabetes yang diberikan pada hewan uji dengan injeksi diabetogen secara intravena (Permatasari, 2008). 3. Metode Resistensi Insulin Metode ini biasanya dilakukan dengan menggunakan spontaneous diabetic rats (tikus biobreeding, WBN/KOB, dan Goto-Kakizaki) yang merupakan tikus non-obesitas yang mengalami resistensi insulin. Akan tetapi, metode ini belum dapat diterapkan di Indonesia karena ketersediaan hewan uji ini masih jarang. Penggunaan hewan uji yang lebih umum digunakan di Indonesia yaitu Wistar Fatty Rat (WFR), yang dikembangkan dengan pemberian asupan glukosa/sukrosa dan pakan tinggi kalori dalam waktu jangka panjang (Ghani, DeFronzo, 2010). F. Metode Penetapan Kadar Glukosa Darah Menurut Widowati, Dzulkarnain, dan Sa’roni (1997) penetapan kadar glukosa darah dapat dilakukan dengan 3 metode, yaitu: 1. Metode Kondensasi dengan Gugus Amina Prinsip dari metode ini adalah pengondensasian aldosa dengan ortotoluidin dalam suasana asam dengan pemanasan. Adanya glukosa ditunjukkan


dengan perubahan warna larutan menjadi hijau. Intensitas warna yang dihasilkan berbanding lurus dengan kadar glukosa darah terukur. 2. Metode Enzimatik Kadar glukosa darah dapat diukur secara enzimatik, menggunakan enzim glukosa oksidase (GOD). Glukosa akan dioksidasi menjadi asam glukoronat disertai dengan pembentukan hidrogen peroksida (H2O2). Adanya enzim peroksidase (POD) akan mendorong H2O2 untuk membebaskan oksigen yang akan mengoksidasi akseptor kromogen (aminoantipirin dan fenol) menghasilkan warna merah. Kadar glukosa darah ditentukan berdasarkan intensitas warna yang terbentuk. 3. Metode Oksidasi-Reduksi Pada metode ini, terjadi proses oksidasi dengan menggunakan oksidan ferrisiamida. Oksida akan direduksi menjadi ferrosiamida oleh glukosa dalam suasana basa dengan pemanasan. Kelebihan ferri pada larutan dititrasi secara iodometri. G. Landasan Teori DM merupakan suatu penyakit atau gangguan metabolisme kronis yang ditandai dengan tingginya kadar glukosa darah disertai dengan gangguan metabolisme karbohidrat, lipid, dan protein sebagai akibat insufisiensi fungsi insulin. Terapi DM menggunakan obat antidiabetik oral dapat menimbulkan efek samping dan efek jangka panjang yang kurang menguntungkan. Pada tahun 2003, WHO merekomendasikan penggunaan obat tradisional untuk menyembuhkan atau mencegah penyakit kronis, dengan tujuan meminimalisir efek samping dan efek


jangka panjang. Buncis (Phaseolus vulgaris L.) merupakan salah satu tanaman yang memiliki daya hipoglikemik. Mekanisme utama penurunan kadar glukosa darah oleh buncis adalah β-sitosterol serta sigmasterol sebagai stimulan sel β pankreas dalam sekresi insulin. H. Hipotesis Jus buncis (Phaseolus vulgaris L.) dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa.


BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Jenis penelitian yang dilakukan adalah jenis penelitian eksperimental murni, yaitu penelitian dengan melakukan percobaan terhadap kelompok perlakuan dan dibandingkan dengan kelompok kontrol yang tidak dikenai perlakuan. Penelitian ini dikerjakan dengan rancangan acak lengkap pola searah, yaitu cara menetapkan sampel dalam kelompok perlakuan dan kelompok kontrol dengan pengacakan agar setiap sampel punya peluang yang sama untuk dapat dikategorikan dalam kelompok perlakuan maupun kelompok kontrol. Penelitian dilakukan secara lengkap yaitu dalam penelitian terdapat kelompok kontrol normal, kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif, dan kelompok perlakuan. Pola searah ditunjukkan dengan adanya perlakuan yang sama pada kelompok perlakuan, yaitu pemberian jus buncis (Phaseolus vulgaris L.) B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel utama a. Variabel bebas. Dosis jus buncis (Phaseolus vulgaris L.) b. Variabel tergantung. Kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar. 2. Variabel pengacau a. Variabel pengacau terkendali 1) Subjek uji

: tikus putih

2) Jenis kelamin

: jantan

3) Galur spesies subjek uji : Wistar

19


4) Berat badan subjek uji

: 150-200 gram

5) Umur subjek uji

: 2-3 bulan

6) Jalur pemberian

: peroral

b. Variabel pengacau tak terkendali. 1) Variabel biologis hewan uji yaitu proses absorbsi, distribusi, metabolisme, dan eliminasi hewan uji terhadap pemberian jus buncis. 2) Kondisi patofisiologis hewan uji. 3. Definisi operasional a. Jus buncis adalah potongan buah buncis yang dijus dalam air putih menggunakan blender kemudian disaring sehingga dihasilkan jus buncis. b. Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO) merupakan suatu metode penetapan kadar glukosa dengan cara memberikan beban glukosa terhadap tikus dengan larutan glukosa monohidrat secara oral dengan dosis 1,75 g/kgBB. c. LDDK0-240 kadar glukosa dalam darah adalah besaran yang menggambarkan jumlah kadar glukosa dalam darah pada rentang waktu menit ke-0 sampai menit ke-240 yang dihitung menggunakan metode trapezoid. C. Bahan dan Alat Penelitian 1. Bahan Penelitian a. Hewan uji. Tikus putih jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan, berat badan 150200 gram diperoleh dari Bantul, Yogyakarta. b. Bahan uji. Buncis, diperoleh dari Condong Catur, Yogyakarta. c. Senyawa pembanding. Glibenklamid 5 mg (Indofarma).


d. Pereaksi untuk pengukuran kadar glukosa. Reagen GOD-PAP (Glucose GOD FS* oleh DiaSys®, Jerman). Tabel III. Isi reagen GOD-PAP Isi Jumlah Phosphat buffer (pH 7,5) 250 mmol/L Phenol 5 mmol/L 4-aminoantipyrine 0,5 mmol/L Glucose oxidase (GOD) ≥ 10 kU/L Peroxidase (POD) ≤ 1 kU/L Standard 100 mg/dL (5,5 mmol/L) (DiaSys, 2014) e. Lain-lain 1) EDTA sebagai antikoagulan 2) Glukosa monohidrat p.a. dengan dosis 1,75 g/kgBB sebagai bahan untuk UTGO 3) Aquadest 4) Aquabidest sebagai blanko pada pengukuran kadar glukosa darah 5) CMC 1% sebagai kontrol normal dan pelarut glibenklamid 2. Alat Penelitian a. Seperangkat alat gelas (Beaker glass, labu ukur, gelas ukur, pengaduk) b. Jarum suntik (injeksi peroral) c. Pipa kapiler hematokrit d. Tabung effendorf e. Tabung reaksi f. Mikropipet 100µL, 1000µL g. Glassfin dan pipet volum h. Hot plate


i. Sentrifuge j. MicroVitalab-200 k. Alat timbang elektrik l. Vortex m. Blender n. Penyaring o. Stopwatch D. Tata Cara Penelitian 1. Determinasi tanaman Determinasi dilakukan dengan mencocokkan kesamaan buah buncis yang dibeli dengan ciri-ciri yang terdapat dalam buku taksonomi dan determinasi oleh ahli determinan sehingga diperoleh surat keterangan determinasi. Determinasi dilakukan di Bagian Biologi Farmasi, Unit II Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta oleh Bapak Djoko Santoso, M.Si. 2. Pengumpulan bahan uji Buncis yang digunakan diperoleh dari Condong Catur Yogyakarta. 3. Pembuatan jus buncis Jus buncis dibuat dengan mencampurkan 250 gram potongan buah buncis dan 100 mL air yang diblender dan disaring, sehingga didapatkan jus buncis (volume 150 mL). 4. Perhitungan dosis pemberian jus buncis Konsentrasi konsumsi jus buncis untuk manusia dewasa (70 kg) adalah 250 gram buncis dalam 100 mL air diblender dan disaring untuk satu kali minum


(150 mL). Dosis untuk tikus didapat dari konversi empiris manusia ke tikus, sehingga diperoleh dosis sebesar 22,5g/kgBB. Dosis ini ditetapkan sebagai dosis terendah. Selanjutnya dilakukan penentuan peringkat dosis untuk dosis tengah dan dosis tertinggi. Dosis tertinggi ditentukan dengan melihat konsentrasi maksimum jus buncis yang masih dapat masuk ke dalam spuit injeksi oral tanpa memberikan penyumbatan dan konsentrasi maksimum jus buncis yang tidak menyebabkan kematian pada hewan uji, diperoleh hasil 115,05g/kgBB. Dosis tengah didapatkan dengan mencari faktor peringkat terlebih dahulu, dengan rumus

=

,

dimana n adalah jumlah kelompok peringkat dosis jus buncis, D3 adalah dosis tertinggi jus buncis dan D1 adalah dosis terendah jus buncis. Diperoleh nilai f sebesar 2,26. Dosis tengah dihitung dengan cara mengalikan dosis terendah jus buncis dengan faktor peringkat, sehingga diperoleh dosis sebesar 50,85g/kgBB (Lampiran 4d). 5. Preparasi bahan a. Pembuatan larutan stok glukosa p.a 15,0% b/v. Glukosa monohidrat p.a ditimbang sebanyak 3,75 gram dilarutkan dalam aquadest panas dalam labu takar 25,0 mL sampai tanda batas. b. Pembuatan larutan CMC 1% b/v. CMC ditimbang sebanyak 1 gram dan dilarutkan dengan akuades dalam labu ukur 100 mL hingga batas tanda. c. Penentuan keseragaman bobot tablet glibenklamid. Timbang 20 tablet glibenklamid secara acak, hitung dan catat masing-masing bobotnya. Saat penimbangan, tidak boleh ada lebih dari dua tablet yang masing-masing bobotnya menyimpang dari bobot rata-rata, dengan persentase penyimpangan


lebih besar daripada harga yang ditetapkan pada kolom A, dan tidak satu tabletpun

menyimpang

dari

bobot

rata-ratanya,

dengan

persentase

penyimpangan lebih besar dari harga yang ditetapkan pada kolom B (Tabel IV) Tabel IV. Keseragaman Bobot Tablet Penyimpangan bobot rata-rata (%) Bobot rata-rata A B 15 30 ≤ 25 mg 10 20 26-150 mg 7,5 15 151-300 mg 5 20 > 300 mg (Depkes RI, 1979) d. Pembuatan suspensi glibenklamid 0,1125 mg/mL. Timbang sebanyak 20 tablet glibenklamid dan gerus hingga homogen. Timbang 25 mg serbuk glibenklamid, larutkan dengan CMC 1% dalam labu takar 10 mL sampai batas tanda sebagai larutan stok glibenklamid. Supensi glibenklamid dengan konsentrasi 0,1125 mg/mL dibuat dengan mengambil 0,45 mL larutan stok, larutkan dengan aquadest dalam labu ukur 10 mL hingga batas tanda. e. Penentuan dosis glibenklamid. Dosis glibenklamid untuk manusia 70 kgBB yaitu 5 mg, sehingga dosis untuk tikus yaitu: faktor konversi manusia ke tikus = 0,018 5 mg × 0,018 = 0,09mg/200gBB = 0,45mg/kgBB 6. Orientasi waktu pemberian glibenklamid Orientasi dilakukan dengan menggunakan dua belas ekor tikus yang terbagi menjadi 3 kelompok, yaitu kelompok 15, 30, dan 45 menit sebelum UTGO. Masing-masing kelompok terdiri dari empat ekor tikus, dimana dua ekor


tikus mendapat perlakuan kontrol positif (suspensi glibenklamid 0,45mg/kgBB dan pembebanan glukosa 0,45mg/kgBB) dan dua ekor tikus mendapat perlakuan kontrol negatif (CMC 1% b/v dan pembebanan glukosa 0,45mg/kgBB). Semua pemberian dilakukan dilakukan secara peroral kemudian dilakukan UTGO dengan memberikan larutan glukosa monohidrat 15% b/v dosis 1,75 mg/kgBB. Pengambilan darah dilakukan sesaat sebelum UTGO sebagai menit ke0 dan pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, dan 240 setelah UTGO. Selanjutnya dilakukan pengukuran kadar glukosa darah dengan metode GODPAP dan dibuat kurva UTGO serta perhitungan harga LDDK0-240. Penentuan waktu pemberian glibenklamid berdasarkan pada nilai LDDK0-240 kontrol positif terkecil. 7. Orientasi waktu pemberian jus buncis Penetapan waktu pemberian jus buncis mengikuti waktu yang diperoleh dari hasil orientasi penetapan waktu pemberian glibenklamid. 8. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji Penelitian ini mengikuti rancangan acak lengkap pola searah, yaitu tiga puluh ekor tikus dibagi secara acak menjadi 6 kelompok, masing-masing terdiri dari lima ekor. Tiap hewan uji diadaptasikan dalam laboratorium dengan kondisi yang sama, jauh dari kebisingan dan dihindarkan dari stress selama 7 hari. Sebelum diberi perlakuan, masing-masing kelompok dipuasakan selama 10-16 jam dengan tetap diberi minum ad libitum, lalu diberi perlakuan sebagai berikut: a. Kelompok I yaitu pemberian CMC 1% b/v (kontrol normal).


b. Kelompok II yaitu pemberian glibenklamid 0,45 mg/kgBB dan pembebanan glukosa monohidrat p.a 15% b/v dosis 1,75 mg/kgBB (kontrol positif). c. Kelompok III yaitu pemberian CMC 1% b/v dan pembebanan glukosa monohidrat p.a 15% b/v dosis 1,75 mg/kgBB (kontrol negatif). d. Kelompok IV yaitu pemberian jus buncis dosis 22,5g/kgBB dan pembebanan glukosa monohidrat p.a 15% b/v dosis 1,75 mg/kgBB. e. Kelompok V yaitu pemberian jus buncis dosis 50,85g/kgBB dan pembebanan glukosa monohidrat p.a 15% b/v dosis 1,75 mg/kgBB. f. Kelompok VI yaitu pemberian jus buncis dosis 115,05g/kgBB dan pembebanan glukosa monohidrat p.a 15% b/v dosis 1,75 mg/kgBB. Masing-masing kelompok kemudian diambil darahnya sebagai menit ke-0. UTGO dilakukan dengan memberikan larutan glukosa monohidrat p.a 15% b/v dosis 1,75mL/kgBB. Waktu pemberian jus buncis disesuaikan dengan hasil orientasi pemberian glibenklamid. Semua perlakuan dilakukan secara per oral. Pengambilan cuplikan darah dilanjutkan untuk menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, dan 240 setelah UTGO. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan metode GOD-PAP, dibuat kurva UTGO dan perhitungan harga LDDK0-240 (Gambar 4).


30 ekor tikus

Kelompok I (n=5)

Kelompok II (n=5)

Kelompok III (n=5)

Kelompok IV (n=5)

injeksi per oral CMC 1% b/v

injeksi per oral suspensi glibenklamid 0,45mg/kgBB

injeksi per oral CMC 1% b/v

injeksi per oral jus buncis 22,5g/kgBB

Kelompok V (n=5)

Kelompok VI (n=5)



Pengambilan cuplikan darah menit ke-0 selang waktu antara pengambilan cuplikan darah dengan UTGO (pembebanan glukosa) menyesuaikan hasil penetapan waktu pemberian glibenklamid Injeksi per oral glukosa monohidrat 15% b/v dosis 1,75mg/kgBB Pengambilan cuplikan darah menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240 (setelah UTGO) Sentrifugasi selama 30 menit, 3000 rpm Peracikan blanko dan sampel Vortex Operating time 20 menit Pengukuran kadar glukosa darah pada microVitalab 200 Keterangan: Kelompok dengan kotak perlakuan berwarna biru aqua (kelompok II, III, IV, V, dan VI) diberikan pembebanan glukosa monohidrat 15% b/v dosis 1,75mg/kgBB, sedangkan kelompok dengan kotak perlakuan berwarna putih (kelompok I) tidak diberikan pembebanan glukosa.

Gambar 4. Flowchart Pengelompokkan dan Perlakuan Hewan Uji


9. Penetapan kadar glukosa darah dengan metode GOD-PAP Darah tikus diambil pada waktu-waktu yang telah ditentukan melalui carvenous sinus (belakang mata) sebanyak 0,5 mL ditampung dalam effendorf yang telah diberi EDTA dan disentrifuge selama 30 menit dengan kecepatan 3000 rpm. Plasma diambil, dimasukkan dalam tabung reaksi, ditambahkan reagen, divortex dan diukur kadar gula darahnya menggunakan microVitalab pada λ 500 nm. Kadar glukosa dinyatakan dalam mg/dL. Pengukuran kadar glukosa dilakukan di laboratorium Fisiologi-Biokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Tabel V. Volume Pengukuran Kadar Glukosa Darah Bahan Sampel (mL) Standar (mL) Blanko (mL) 0,01 Supernatan 0,01 Larutan baku glukosa 1 1 1 Pereaksi GOD-PAP (DiaSys, 2014) E. Analisis Hasil Data LDDK0-240 glukosa darah setiap kelompok dianalisis secara statistik, diawali dengan uji distribusi dan uji homogenitas menggunakan uji Kolmogorov Smirnov. Apabila distribusi termasuk normal dan variansinya homogen (p > 0,05) maka dilanjutkan dengan analisis One Way ANOVA dan uji Post Hoc Test Scheffe dengan tingkat kepercayaan 95%. Apabila distribusi tidak normal dan nilai LDDK0-240 memiliki variansi yang berbeda (p < 0,05) maka dilakukan uji Kruskal Wallis dan dilanjutkan uji Mann Whitney dengan tingkat kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan tiap kelompok apakah bermakna (p<0,05) atau tidak bermakna (p>0,05).


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil Determinasi Tanaman Pada penelitian ini dilakukan determinasi tanaman uji berupa tanaman buncis (Phaseolus vulgaris L,) dengan tujuan untuk memastikan bahwa tanaman yang digunakan adalah benar tanaman buncis. Buncis yang diperoleh dari Condong Catur, Yogyakarta, kemudian dideterminasi di Bagian Biologi Farmasi, Unit II Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta oleh Bapak Djoko Santoso, M.Si. Bagian tanaman yang digunakan untuk determinasi meliputi akar, batang, daun, buah, dan bunga. Determinasi dilakukan hingga tingkat spesies dan hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa bahwa tanaman yang dideterminasi adalah benar tanaman buncis (Phaseolus vulgaris L.) (Lampiran 2). B. Hasil Percobaan Pendahuluan 1. Penetapan waktu pemberian glibenklamid Tujuan dilakukannya penetapan waktu pemberian glibenklamid adalah untuk melihat pengaruh selang waktu pemberian glibenklamid terhadap daya penurunan glukosa darah, agar pada saat uji toleransi glukosa oral (UTGO) dengan pembebanan larutan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v, glibenklamid dapat memberikan efek penurunan kadar glukosa darah yang optimal. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah UTGO yaitu uji yang memberikan gambaran mengenai kenaikan kadar glukosa darah secara cepat

29


setelah pembebanan glukosa. Metode ini juga memberikan gambaran mengenai efek penurunan kadar glukosa darah secara cepat oleh obat atau zat yang memiliki efek menurunkan kadar glukosa darah karena glukosa cepat dimetabolisme. Kelemahan dari UTGO adalah metode ini hanya dapat menggambarkan kenaikan kadar glukosa darah yang bersifat sementara. Untuk itu perlu dilakukan uji lanjutan dengan menggunakan metode uji efek antidiabetes yang lain seperti uji perusakan pankreas atau metode resistensi insulin, dimana hewan uji dapat terindikasi DM secara permanen. Waktu pemberian glibenklamid pada hewan uji didasarkan pada penurunan harga luas daerah dibawah kurva dari menit ke-0 sampai menit ke-240 (LDDK0-240), dimana waktu pemberian yang dipilih merupakan waktu pemberian yang memiliki nilai LDDK0-240 kontrol positif paling kecil. Tabel VI. Hasil UTGO dan Perhitungan Selisih Nilai LDDK0-240 Rata-Rata Suspensi Glibenklamid Dosis 0,45mg/kgBB Selang waktu LDDK0-240 Rata-Rata(mg.menit/dL) Selisih LDDK0-240 pemberian (mg.menit/dL) Kontrol negatif Kontrol positif suspensi (CMC 1% b/v) (glibenklamid glibenklamid dosis sebelum UTGO 0,45mg/kgBB) 33000,0 21701,5 11298,5 15 32951,5 17783,0 15168,5 30 33907,5 20483,0 13424,5 45

Tabel VI menunjukkan bahwa glibenklamid pada menit ke-30 sebelum UTGO memiliki nilai LDDK0-240 kontrol positif paling kecil (17783,0 mg.menit/dL) bila dibandingkan dengan menit ke-15 (21701,5 mg.menit/dL) dan menit ke-45 (20483,0 mg.menit/dL), sehingga waktu pemberian glibenklamid yang digunakan adalah 30 menit sebelum UTGO.


2. Penetapan dosis sediaan jus buncis Penetapan dosis sediaan jus buncis bertujuan untuk menentukan dosis yang optimal dalam memberikan penurunan kadar glukosa darah namun tidak memberikan efek letal pada hewan uji. Penggunaan jus buncis secara empiris adalah 250 gram buncis dijus dalam 100 mL air dan disaring, sehingga didapatkan konsentrasi 250g/150mL. Orientasi dosis dilakukan menggunakan peringkat dosis yang diperoleh dari konversi empiris manusia 70 kg ke tikus 200 gram. Dosis yang diperoleh digunakan sebagai peringkat dosis tertinggi, kemudian diturunkan masing-masing 1,5x untuk peringkat dosis kedua dan ketiga. Diperoleh peringkat dosis 10 g/kgBB, 15 g/kgBB, dan 22,5 g/kgBB. Hasil orientasi menunjukkan bahwa dosis I (10 g/kgBB) dan dosis II (15 g/kgBB) belum memberikan efek penurunan kadar glukosa darah yang signifikan terhadap kontrol positif (Lampiran 6), sehingga dilakukan penyesuaian dosis lanjutan. Dosis empiris manusia (22,5g/kgBB) kemudian dijadikan dosis terendah (dosis I). Peringkat dosis tertinggi (dosis III) ditentukan dengan mencari konsentrasi maksimum jus yang masih bisa masuk ke dalam spuit injeksi oral tanpa memberikan penyumbatan terhadap spuit dan tidak memberikan efek letal pada hewan uji. Diperoleh konsentrasi maksimum sebesar 1150g/150mL dan dilakukan perhitungan dosis dengan rumus D × BB = C × V, maka didapatkan dosis tertinggi sebesar 115,05g/kgBB. Dosis tengah didapatkan dengan menghitung faktor peringkat berdasarkan rumus f =

, dimana f adalah

faktor peringkat, n adalah jumlah kelompok dosis, D3 adalah dosis tertinggi, dan


D1 adalah dosis terendah. Dari hasil perhitungan diperoleh nilai f sebesar 2,26. Dosis tengah kemudian dihitung dengan mengalikan dosis terendah (dosis I) dengan faktor peringkat. Diperoleh dosis tengah sebesar 50,85g/kgBB. 3. Penetapan waktu pemberian jus buncis Pemberian jus buncis mengikuti waktu yang ditetapkan pada penetapan waktu pemberian glibenklamid, yaitu 30 menit sebelum UTGO (Lampiran 5). C. Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Jus Buncis Hewan uji dikelompokkan dan diberi perlakuan seperti pada Gambar 4. Semua perlakuan diberikan secara per oral. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan menggunkan instrument microVitalab-200 dengan metode enzimatis yaitu menggunakan reagen GOD-PAP pada λ 500 nm. Reagen GOD-PAP berisi dapar fosfat 250 mmol/L, fenol 5 mmol/L, 4-amino antipirin 0,5 mmol/L, glukosa oksidase (GOD) ≥10ku/L, dan peroksidase (POD) ≥10ku/L. Prinsip reaksinya adalah adanya GOD akan mengkatalisis oksidasi glukosa menjadi asam glukonat dan hidrogen peroksida. Glukosa akan bereaksi dengan reagen GOD-PAP dan akan membentuk kompleks kuinonimin yang berwarna merah muda. Pembentukan

kompleks

kuinonimin

memerlukan

waktu

inkubasi

(operating time) selama 20 menit pada suhu ruang agar terjadi reaksi yang optimum antara glukosa dengan enzim yang terdapat dalam reagen GOD-PAP. Selama waktu inkubasi, terjadi perubahan warna dari bening menjadi merah muda yang kemudian dilakukan pembacaan kadar pada microVitalab. Hasil pembacaan kadar dapat dilihat pada Tabel VII dan Gambar 6.


Gambar 5. Reakzi Enzimatik Antara Glukosa dengan Reagen GOD-PAP (Barham dan Trinder, 1972). Tabel VII menunjukkan nilai rata-rata kadar glukosa darah dan nilai LDDK0240

masing-masing kelompok perlakuan. Nilai LDDK0-240 dari tiap kelompok

dihitung menggunakan metode trapezoid. LDDK

t −t × C + C 2

= +

Keterangan: t C LDDKto-tn

t −t 2

+

× C + C

t −t × C + C 2 + … !

= waktu (menit) = konsentrasi zat dalam darah (mg/mL) = luas daerah di bawah kurva dari waktu ke-0 sampai ke-n

Kelompok I memiliki nilai LDDK0-240 (19503,0) paling kecil dibandingkan kelompok lainnya. Hal ini dikarenakan kelompok I hanya diberi CMC 1% b/v, dimana CMC 1% b/v tidak memiliki efek terapeutik yang dapat meningkatkan atau menurunkan kadar glukosa darah. Kelompok II (20862,0) memiliki nilai LDDK0-240 yang lebih tinggi daripada kelompok I (19503,0) namun lebih rendah daripada kelompok III (28206,0). Hal ini menunjukkan bahwa kelompok II dapat menurunkan kadar


glukosa darah. Hewan uji pada kelompok II diberikan suspensi glibenklamid, dimana glibenklamid merupakan obat hipoglikemik oral golongan sulfonilurea yang memiliki efek menurunkan kadar glukosa darah dengan menstimulasi sekresi insulin pada sel ß pankreas, sehingga kadar glukosa yang diperoleh mendekati kadar normal. Tabel VII. Data Kadar Glukosa Darah Rata-Rata dan LDDK0-240 ± SD Tiap Kelompok Perlakuan (n=5) Waktu I II III IV V VI (menit) 0 79,8 79,6 87,6 79,4 78,6 79,0 15 81,4 110,4 127,8 109,4 108,8 107,2 30 81,4 115,4 138,2 129,4 128,2 127,4 45 80,6 104,6 132,2 119,0 118,0 117,2 60 81,0 101,2 126,8 109,8 108,4 107,4 90 81,4 92,0 122,6 99,8 98,0 96,6 120 81,4 84,0 118,0 89,6 87,4 85,8 180 81,6 76,0 112,0 80,0 77,6 70,4 240 81,0 64,4 102,4 71,8 72,2 48,6 19503,0 ± 20862,0 ± 28206,0 ± 22413,0 ± 22048,5 ± 20727,0 ± LDDK0-240 177,292 337,775 507,329 675,304 1107,913 851,285 Keterangan: I : Kontrol normal (CMC 1% b/v) II : Kontrol positif (suspensi glibenklamid dosis 0,45mg/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) III : Kontrol negatif (CMC 1% b/v + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) IV : Sediaan uji dosis I (jus buncis dosis 22,5g/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) V : Sediaan uji dosis II (jus buncis 50,85g/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) VI : Sediaan uji dosis III (jus buncis 115,05g/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v)

Kelompok III (28206,0) memiliki nilai LDDK0-240 yang paling tinggi dari semua kelompok. Hal ini dikarenakan hewan uji pada kelompok III diberi CMC 1% serta pembebanan glukosa monohidrat, dimana CMC 1% tidak memiliki efek untuk menaikkan atau menurunkan kadar glukosa darah.


Kelompok II (20862,0) (2 memiliki nilai LDDK0-240 yang leb ebih rendah daripada kelompok IV (22413,0) ( dan V (22048,0), namun memiliki nila ilai LDDK0240

yang sama dengann kelompok VI (20727,0). Hal ini menunjukk kkan bahwa

kelompok IV dan V meemiliki efek penurunan kadar glukosa darah, na namun tidak sebaik glibenklamid. Efe fek penurunan kadar glukosa darah pada kelomppok IV dan V dapat dilihat dari nilai nil LDDK0-240 kelompok IV (22413,0) dan V (22048,5) yang lebih rendah dari aripada nilai LDDK0-240 kelompok III (28206,0 ,0). Adanya kesamaan nilai LDDK0--240 kelompok II dan VI menandakan bahwa kel elompok VI memiliki efek penurunan an kadar glukosa darah yang sama dengan gliben enklamid.

Kadar glukosa darah (mg/dL)

160 140 120 Kelompo pok I

100

Kelompo pok II

80

Kelompo pok III

60

Kelompo pok IV

40

Kelompo pok V

20

Kelompo pok VI

0 0

15

30

45

60

90 120 180 240

Waktu (menit)

ubungan Antara Waktu dan Rerata Kadar ar Glukosa Gambar 6. Kurva Hu Darah Keterangan: MC 1% b/v) I : Kontrol normal (CM II : Kontrol positif (su suspensi glibenklamid dosis 0,45mg/kgBB + pembeba banan glukosa monohidrat p.a dosis sis 15,0% b/v) III : Kontrol negatif (CM MC 1% b/v + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 115,0% b/v) IV : Sediaan uji dosis I ((jus buncis dosis 22,5g/kgBB + pembebanan glukosa mo monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) hidrat p.a dosis V : Sediaan uji dosis II ((jus buncis 50,85g/kgBB + pembebanan glukosa monohid 15,0% b/v) VI : Sediaan uji dosis III II (jus buncis 115,05g/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat mo p.a dosis 15,0% b/v)


Data LDDK0-240 kemudian dianalisis menggunakan uji statistik (Lampiran 7). Untuk mengetahui normal atau tidaknya distribusi data, dilakukan uji normalitas dengan Kolmogorov-Smirnov. Hasil uji normalitas data menunjukkan bahwa data memiliki distribusi yang normal dengan nilai p=0,125 (p>0,05). Uji kemudian dilanjutkan dengan Test of Homogeneity of Variances untuk mengetahui homogenitas data, apakah ada perbedaan nilai LDDK0-240 yang bermakna dari masing-masing kelompok perlakuan. Hasil pengujian homogenitas data menunjukkan nilai p=0,199 (p>0,05) yang berarti bahwa variansi data LDDK0-240 homogen. Dari kedua hasil uji tersebut diatas, uji dapat dilanjutkan menggunakan One Way ANOVA. Hasil uji One Way ANOVA menunjukkan nilai p=0,000 (p<0,05) yang kemudian dilanjutkan dengan Post Hoc Scheffe untuk mengetahui pasangan kelompok yang berbeda secara signifikan. Tabel VIII. Hasil Uji Post Hoc Scheffe LDDK0-240 Glukosa Darah Tikus yang Terbebani Glukosa 1 2 3 4 5 6 BTB BB BB BB BTB 1 BTB BB BTB BTB BTB 2 BB BB BB BB BB 3 BB BTB BB BTB BTB 4 BB BTB BB BTB BTB 5 BTB BTB BB BTB BTB 6 Keterangan: 1 : Kontrol normal (CMC 1% b/v) 2 : Kontrol positif (suspensi glibenklamid dosis 0,45mg/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) 3 : Kontrol negatif (CMC 1% b/v + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) 4 : Sediaan uji dosis I (jus buncis dosis 22,5g/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) 5 : Sediaan uji dosis II (jus buncis 50,85g/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) 6 : Sediaan uji dosis III (jus buncis 115,05g/kgBB + pembebanan glukosa monohidrat p.a dosis 15,0% b/v) TBB : Berbeda tidak bermakna (p>0,05) BB : Berbeda Bermakna (p<0,05)


Hasil uji Post Hoc Scheffe pada Tabel VIII menunjukkan bahwa sediaan uji dosis I, II, dan III berbeda bermakna terhadap kontrol negatif. Hal ini menunjukkan bahwa sediaan uji memiliki kemampuan untuk menurunkan kadar glukosa darah. Sediaan uji dosis I dan sediaan uji dosis II berbeda tidak bermakna dengan kontrol positif namun berbeda bermakna dengan kontrol normal. Hal ini menunjukkan bahwa jus buncis dosis I (22,5g/kgBB) dan dosis II (50,85g/kgBB) mampu menurunkan kadar glukosa darah tikus sebaik glibenklamid namun belum dapat menurunkan kadar glukosa darah hingga mencapai normal. Sediaan uji dosis III berbeda tidak bermakna dengan kontrol normal dan kontrol positif. Hal ini menunjukkan bahwa jus buncis dosis III (115,05g/kgBB) mampu menurunkan kadar glukosa darah tikus sebaik glibenklamid hingga mencapai kadar normal. Sediaan uji dosis I, II, dan III menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna. Hal ini berarti bahwa ketiga peringkat dosis tersebut sama-sama dapat menurunkan kadar glukosa darah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa buncis (Phaseolus vulgaris L.) dapat digunakan untuk menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa. Namun demikian, perlu dilakukan perhitungan ED50 Menurut Jannah, Sudarma, dan Andayani (2013), senyawa yang bertanggung jawab dalam menurunkan kadar glukosa darah adalah β-sitosterol dan stigmasterol yang termasuk dalam golongan fitosterol. β-sitosterol dan stigmasterol dapat merangsang pelepasan insulin dengan menghambat kerja glukosa-6-fosfatase,


yang di dalam hati merupakan enzim utama untuk konversi karbohidrat menjadi gula darah. Wahyuntari (2011) dalam penelitiannya yang berjudul “Penghambat

α-Amilase: Jenis, Sumber, dan Potensi Pemanfaatannya Dalam Kesehatan” menyebutkan bahwa buncis memiliki kandungan flavonoid yang berfungsi sebagai penghambat enzim α-amilase. Enzim ini memegang peranan penting dalam pemecahan karbohidrat kompleks, seperti pati. Beberapa menit setelah asupan pati, akan terjadi hiperglikemia, karena pemecahan pati yang begitu cepat. Penghambatan α-amilase berpengaruh terhadap metabolisme di dalam saluran pencernaan, antara lain memperlambat penyerapan dan pemecahan karbohidrat yang dapat mengurangi konsentrasi glukosa plasma.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan 1. Jus buncis dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa. 2. Jus buncis dosis 22,5g/kgBB, 50,85g/kgBB, dan 115,05g/kgBB dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus jantan galur Wistar yang terbebani glukosa. B. Saran Berdasarkan penelitian yang dilakukan, dapat dilakukan pengembangan mengenai: 1. Penelitian efek jus buncis dalam menurunkan kadar glukosa darah dengan metode uji efek antidiabetes yang lain, misalnya uji perusakan pankreas atau metode resistensi insulin. 2. Penelitian mengenai ED50 buncis sebagai agen antidiabetik.

39


DAFTAR PUSTAKA Adam, M.F., 2000, Klasifikasi dan Kriteria Diagnosis Diabetes Mellitus yang Baru, Majalah Cermin Dunia Kedokteran No. 127, Jakarta, hal. 37-39. American Diabetes Association, 2010, Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus, Diabetes Care, Vol. 33, 562-569. Amin, M. N., 2014, Sukses Bertani Buncis: Sayuran Obat Kaya Manfaat, Garudhawaca, Jakarta, hal. 25-30. Barham, D., Trinder, D., 1972, An Improved Color Reagen for Determination of Blood Glucose by the Oxydase System. Analist 97, pp. 142-145. Dalimartha, S., 2004, Atlas Tumbuhan Obat Indonesia, Trubus Agriwidya, Bogor. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2006, Pharmaceutical Care Untuk Penyakit Diabetes Mellitus, Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan Klinik, Jakarta, hal. 4-12. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi III, Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta, hal. 1086. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta, hal. 411. DiaSys Diagnostic System GmbH, 2014, Glucose GOD FS Diagnostic Reagent for Quantitive In Vitro Determination of Glucose in Serum or Plasma on Photometric Systems, DiaSys Diagnostic System GmbH, Germany, pp. 12. Ghani, A., DeFronzo, R., 2010, Pathogenesis of Insulin Resistance In Skeletal Muscle, J Biomed and Biotech, pp. 1-19. Gunawan, S. G., 2007, Farmakologi dan Terapi, Edisi 5, Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta. Handoko, T., Suharto, B., 1995, Insulin, Glukagon, dan Antidiabetik Oral, dalam Ganiswara, Farmakologi dan Terapi, Edisi 4, Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, hal. 469, 471. International Diabetes Federation, 2012, Global Guideline for Type 2 Diabetes, International Diabetes Federation, Belgium, ppl. 9-10. Jannah, H., Sudarma, I. M., Andayani, Y., 2013, Analisis Senyawa Fitosterol Dalam Ekstrak Buah Buncis (Phaseolus vulgaris L.), Journal of Chemistry Progress, 6(2), 70-75. Judge, N., Svensson, B., 2006, Review Proteinaceous Inhibitor of Carbohydrate Active Enzymes in Cereals: Implication in Agriculture, Cereal Processing, and Nutrition, Journal of Science Food Agricultural, 0022-5142. Kurniawati, D., Sutrisna, E. M., Wahyuni, A. S., 2012, Uji Penurunan Kadar Glukosa Darah Oleh Ekstrak Etanol 70% Daun Buncis (Phaseolus vulgaris L.) Pada Kelinci Jantan yang Dibebani Glukosa, Biomedika, 4(1), 1-8. Lanywati, E., 2001, Diabetes Mellitus: Penyakit Kencing Manis, Kanisius, Yogyakarta, hal.7-8. Luka, C. D., Olatunde, A., Tijjani, H., Ollisa-Enewe, I. A., 2013, Effect of Aqueous Extract of Phaseolus vulgaris L. (Red Kidney Beans) On Alloxan-Induced Diabetic Wistar Rats, International Journal of Science Inventions Today, 2(4), 292-301. 40


Mahendra, B., Tobing, A., Krisnatuti, D., Alting, B. Z. A., 2008, Care Yourself Diabetes Mellitus, Penebar Plus, Jakarta, hal. 8-9. Merentek, E., 2006, Resistensi Insulin Pada Diabetes Mellitus Tipe 2, Majalah Cermin Dunia Kedokteran No. 150, Jakarta, hal. 38-39. Pari, L., Venkateswaran, S., 2003, Effect of An Aqueous Extraact of Phaseolus vulgaris On The Properties of Tail Tendon Collagen of Rats with Streptozotocin-Induced Diabetes, Brazillian Journal of Medical and Biological Research, 36: 861-870. Permatasari, A. A., 2008, Uji Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Ekstrak Ethanol 70% Buah Jambu Biji (Psidium guajava L.) pada Kelinci Jantan Lokal, Skripsi, Universitas Muhammadiyah, Surakarta. Royal Pharmaceutical Society, 2011, British National Formulary 61, Pharmaceutical press, London, p. 428. Setyadhini, T. E., 2006, Diabetes: Penemuan Baru Memerangi Diabetes Melalui Diet Golongan Darah, B First Bentang Pustaka, Yogyakarta, hal. 45-46. Soegondo, S., 2005, Penatalaksanaan Diabetes Mellitus Terpadu: Diagnosis dan Klasifikasi Diabetes Mellitus Terkini, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, hal. 18. Suryo, J., 2004, Rahasia Herbal Penyembuh Diabetes, B First Bentang Pustaka, Yogyakarta, hal. 4. Sustraini, L., Alam, S., Hadibroto, I., 2006, Diabetes, Gramedia, Jakarta, hal. 8-9. Syahputra, M. H. D., 2003, Diabetik Ketoasidosis, http://library.usu.ac.id/download/fk/biokimia-syahputra2.pdf, diakses tanggal 15 Desember 2015. Syarif, A., Ascobat, P., Setiabudy, R., Estuningtyas, A., Setiawati, A., Sunaryo, R., 2009, Farmakologi dan Terapi, Balai Penerbit FKUI, Jakarta, hal. 490. Rizki, F., S.Gz., 2013, The Miracle of Vegetables, Cetakan Pertama, PT Agromedia Pustaka, Jakarta, hal. 45, 46, 49. Wahyuntari, B., 2011, Penghambat α-Amilase: Jenis, Sumber, dan Potensi Pemanfaatannya Dalam Kesehatan, Jurnal Teknologi dan Industri Pangan, 22(2), 197-201. Waluyo, N., Djuariah, D., 2013, Varietas-Varietas Buncis (Phaseolus vulgaris L.) yang Telah Dilepas oleh Balai Penelitian Tanaman Sayuran, IPTEK Tanaman Sayuran, no. 2. Widowati, L., Zulkarnaen, B., Sa’roni, 1997, Tanaman Obat untuk Diabetes Mellitus, Majalah Cermin Dunia Kedokteran, No.116, Jakarta, hal. 53-60.. Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R., dan King, H., 2004, Global Prevalence of Diabetes: Estimates for the Year 2000 and Proections for 2030, Diabetes Care, 27(5):1047-53. Winarsi, H., 2010, Protein Kedelai dan Kecambah: Manfaatnya Bagi Kesehatan, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, hal. 170-171. World Health Organization, 2003, Fifty-Sixth World Health Assembly: Traditional Medicine, Report by the Secretariat, pp. 1-4.

41


LAMPIRAN

42


Lampiran 1. Surat Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance)

Lampiran 2. Surat Keterangan Determinasi Tanaman

43


Lampiran 2. Surat Keterangan Determinasi Tanaman

44


Lampiran 3. Bahan dan Alat Penelitian

Tikus jantan galur Wistar

Buncis

Blender

Timbangan analitik

Sentrifuge

microVitalab

45


Lampiran 4. Preparasi Bahan a. Pembuatan larutan stok glukosa monohidrat p.a 15%b/v Penimbangan Bobot kertas

= 0,4008 gram

Bobot kertas + glukosa monohidrat

= 4,1511 gram

Bobot kertas + sisa

= 0,4010 gram

Bobot glukosa monohidrat

= 3,7501 gram

Pembuatan larutan stok 3,7501 gram glukosa monohidrat dilarutkan dalam aquadest panas pada labu takar 25 mL sampai batas tanda. Diperoleh konsentrasi larutan glukosa monohidrat sebesar 15,0004%. b. Keseragaman bobot tablet glibenklamid 5 mg Tablet ke1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Bobot (mg) 202 201 203 200 206 201 202 201 200 204 Rata-rata

Tablet ke11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

Bobot (mg) 203 193 200 202 205 198 198 198 196 200 200,65

Berdasarkan ketentuan pada Tabel IV (halaman 26), tablet dengan bobot ratarata 151-300 mg memiliki penyimpangan rata-rata tablet sebesar 7,5% pada kolom A dan 15% pada kolom B.

46


Bobot maksimal penyimpangan kolom A 7,5% × 200,65 mg = 15,04875 mg 200,65 mg ± 15,04875 mg = 185,60 - 215,69 mg Bobot maksimal penyimpangan kolom B 15% × 200,65 mg = 30,0975 mg 200,65 mg ± 30,0975 mg = 170,55 - 230,74 mg Dari hasil perhitungan penyimpangan bobot, tidak ada satupun tablet yang keluar dari range kolom A maupun kolom B. Hal ini menunjukkan bahwa tablet glibenklamid memiliki bobot yang seragam. c. Pembuatan suspensi glibenklamid 0,1125 mg/mL D × BB = C × V 0,45mg/kgBB × 200 g = C × 0,8 mL C = 0,1125mg/mL Bobot rata-rata tablet glibenklamid = 200,65 mg Tiap tablet mengandung 5 mg zat aktif glibenklamid sehingga serbuk yang harus ditimbang untuk mendapatkan 25 mg zat aktif adalah: 25 mg × 200,65 mg = 1003,25 mg 5 mg Sejumlah 1003,25 mg serbuk glibenklamid dilarutkan dalam CMC 1% b/v pada labu ukur 10 mL sebagai larutan induk dengan konsentrasi 0,25%. Suspensi glibenklamid konsentrasi 0,1125 mg/mL diperoleh dengan cara: C1 × V1 = C2 × V2 2,5mg/mL × V1 = 0,1125 mg/mL × 10 mL V1 = 0,45 mL

47


0,45 mL suspensi induk dilarutkan dalam aquadest pada labu ukur 10 mL hingga batas tanda. d. Penentuan dosis pemberian jus buncis 1. Orientasi dosis pemberian jus buncis Konsentrasi konsumsi jus buncis untuk manusia dewasa (70 kg) adalah 250 gram buncis dalam 100 mL air diblender dan disaring untuk satu kali minum (150 mL). Faktor konversi dosis manusia (70 kg) ke tikus (200g) yaitu 0,018, sehingga dosis untuk tikus 200 gram sebagai berikut: 0,018 × 250 g = 4,5g/200gBB Dosis untuk tikus 1 kg:

× 4,5 g = 22,5g/kgBB

Dosis 22,5g/kgBB ditetapkan sebagai dosis tertinggi, selanjutnya dilakukan penentuan peringkat dosis untuh dosis tengah dan dosis terendah dengan cara menurunkan dosis tertinggi 1,5x untuk mendapatkan dosis tengah dan menurunkan 1,5x lagi untuk mendapatkan dosis terendah. Dosis tengah =

22,5g/kgBB = 15g/kgBB 1,5

Dosis terendah =

15g/kgBB = 10g/kgBB 1,5

2. Penetapan dosis pemberian jus buncis Dari perolehan dosis untuk tikus 1 kg (22,5g/kgBB) dilakukan penentuan peringkat dosis untuk dosis tengah dan dosis tertinggi. Dosis tertinggi ditentukan dengan melihat konsentrasi maksimum jus buncis yang masih dapat masuk ke dalam spuit injeksi oral tanpa memberikan

48


penyumbatan dan konsentrasi maksimum jus buncis yang tidak menyebabkan kematian pada hewan uji. Perhitungan peringkat dosis tertinggi: C3 =

1150 g = 7,67 g/mL 150 mL

D3 × BB = C3 × V

D3 × 200 g = 7,67g/mL × 3 mL

D3 = 23,01g/200gBB = 115,05g/kgBB

Perhitungan faktor peringkat untuk penentuan dosis tengah: f= Keterangan: f = faktor peringkat n = jumlah kelompok dosis D1 = dosis terendah D3 = dosis tertinggi

f=

(

,*+

(

)*+

D3 D1

115,05g/kgBB 22,5g/kgBB

= -5,1 = 2,26 .

D2 = D1 × f = 22,5g/kgBB × 2,26 = 50,85g/kgBB

49


Lampiran 5. Hasil Rangkaian Uji Analisis Statistik LDDK0-240: Penetapan Waktu Pemberian Glibenklamid

50


51


Lampiran 6. Hasil Rangkaian Uji Analisis Statistik LDDK0-240: Orientasi Dosis Pemberian Jus Buncis One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test N Normal Parameters a,b

LDDK 30 21954,50 2661,195 ,157 ,157 -,128 ,858 ,454

Mean Std. Deviation Absolute Positive Negative

Most Extreme Differences Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed)

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.

ONEWAY Descriptives LDDK

N Kontrol Normal Kontrol Positif Kontrol Negatif Dosis I Dosis II Dosis III Total

5 5 5 5 5 5 30

Mean 19597,50 19812,00 27129,00 22413,00 22048,50 20727,00 21954,50

Std. Deviation 392,731 549,413 413,705 675,304 1107,913 851,285 2661,195

Std. Error 175,635 245,705 185,015 302,005 495,474 380,706 485,866

95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 19109,86 20085,14 19129,81 20494,19 26615,32 27642,68 21574,50 23251,50 20672,84 23424,16 19669,99 21784,01 20960,79 22948,21

Minimum 19245 18938 26670 21465 20303 19290 18938

Maximum 20235 20265 27668 23175 22980 21390 27668

Test of Homogeneity of Variances LDDK Levene Statistic 1,641

df1

df2 5

Sig. ,187

24

ANOVA LDDK

Between Groups Within Groups Total

Sum of Squares 1,9E+008 12141743 2,1E+008

df 5 24 29

Mean Square 38647020,00 505905,938

52

F 76,392

Sig. ,000


POST HOC TESTS Multiple Comparisons Dependent Variable: LDDK Scheffe

(I) Perlakuan Kontrol Normal

Kontrol Positif

Kontrol Negatif

Dosis I

Dosis II

Dosis III

(J) Perlakuan Kontrol Positif Kontrol Negatif Dosis I Dosis II Dosis III Kontrol Normal Kontrol Negatif Dosis I Dosis II Dosis III Kontrol Normal Kontrol Positif Dosis I Dosis II Dosis III Kontrol Normal Kontrol Positif Kontrol Negatif Dosis II Dosis III Kontrol Normal Kontrol Positif Kontrol Negatif Dosis I Dosis III Kontrol Normal Kontrol Positif Kontrol Negatif Dosis I Dosis II

Mean Difference (I-J) -214,500 -7531,500* -2815,500* -2451,000* -1129,500 214,500 -7317,000* -2601,000* -2236,500* -915,000 7531,500* 7317,000* 4716,000* 5080,500* 6402,000* 2815,500* 2601,000* -4716,000* 364,500 1686,000* 2451,000* 2236,500* -5080,500* -364,500 1321,500 1129,500 915,000 -6402,000* -1686,000* -1321,500

Std. Error 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847 449,847

*. The mean difference is significant at the .05 level.

53

Sig. ,999 ,000 ,000 ,001 ,313 ,999 ,000 ,000 ,003 ,543 ,000 ,000 ,000 ,000 ,000 ,000 ,000 ,000 ,984 ,039 ,001 ,003 ,000 ,984 ,167 ,313 ,543 ,000 ,039 ,167

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -1842,88 1413,88 -9159,88 -5903,12 -4443,88 -1187,12 -4079,38 -822,62 -2757,88 498,88 -1413,88 1842,88 -8945,38 -5688,62 -4229,38 -972,62 -3864,88 -608,12 -2543,38 713,38 5903,12 9159,88 5688,62 8945,38 3087,62 6344,38 3452,12 6708,88 4773,62 8030,38 1187,12 4443,88 972,62 4229,38 -6344,38 -3087,62 -1263,88 1992,88 57,62 3314,38 822,62 4079,38 608,12 3864,88 -6708,88 -3452,12 -1992,88 1263,88 -306,88 2949,88 -498,88 2757,88 -713,38 2543,38 -8030,38 -4773,62 -3314,38 -57,62 -2949,88 306,88


HOMOGENEOUS SUBSETS LDDK a

Scheffe

Perlakuan Kontrol Normal Kontrol Positif Dosis III Dosis II Dosis I Kontrol Negatif Sig.

N 5 5 5 5 5 5

1 19597,50 19812,00 20727,00

Subset for alpha = .05 2 3

20727,00 22048,50

,313

22048,50 22413,00

,167

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

54

4

,984

27129,00 1,000


Lampiran 7. Hasil Rangkaian Uji Analisis Statistik LDDK0-240: Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Jus Buncis One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test N Normal Parameters a,b Most Extreme Differences

LDDK 30 22293,25 2923,474 ,215 ,215 -,152 1,177 ,125

Mean Std. Deviation Absolute Positive Negative

Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed) a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Descriptives LDDK

N Kontrol Normal Kontrol Positif Kontrol Negatif Dosis I Dosis II Dosis III Total

5 5 5 5 5 5 30

Mean 19503,00 20862,00 28206,00 22413,00 22048,50 20727,00 22293,25

Std. Deviation 177,292 337,775 507,329 675,304 1107,913 851,285 2923,474

Std. Error 79,287 151,058 226,885 302,005 495,474 380,706 533,751

95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound 19282,86 19723,14 20442,60 21281,40 27576,07 28835,93 21574,50 23251,50 20672,84 23424,16 19669,99 21784,01 21201,61 23384,89

Minimum 19305 20565 27728 21465 20303 19290 19290

Maximum 19695 21323 28815 23175 22980 21390 28815

Test of Homogeneity of Variances LDDK Levene Statistic 1,599

df1

df2 5

Sig. ,199

24

ANOVA LDDK

Between Groups Within Groups Total

Sum of Squares 2,4E+008 11244398 2,5E+008

df 5 24 29

Mean Square 47321965,88 468516,563

55

F 101,004

Sig. ,000


POST HOC TESTS

56


HOMOGENEOUS SUBSETS LDDK a

Scheffe

Perlakuan Kontrol Normal Dosis III Kontrol Positif Dosis II Dosis I Kontrol Negatif Sig.

N 5 5 5 5 5 5

1 19503,00 20727,00 20862,00

Subset for alpha = .05 2 3 20727,00 20862,00 22048,50

,120

20862,00 22048,50 22413,00

,138

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

57

4

,054

28206,00 1,000


Lampiran 8. Leaflet Reagen GOD-PAP A

58


59


Lampiran 9. Leaflet Glibenklamid

60


BIOGRAFI PENULIS Skripsi berjudul “Pengaruh Pemberian Jus Buncis (Phaseolus vulgaris L.) Terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Jantan Galur Wistar yang Terbebani Glukosa” ini ditulis oleh Ludwina Dearesthea Onevita. Penulis lahir di Semarang, 4 Mei 1994 dan merupakan anak kedua dari empat bersaudara pasangan Nicolaus Bambang Wijanarko dan Eurelia Maria Dewi Perwani Rakyattiningtyas. Penulis mulai menginjakkan kaki di bangku sekolah Play Group Putra Persada Klaten (19971998) dan melanjutkan pendidikan di TK Maria Assumpta Klaten (1998-2000). Pada tahun 2000 penulis menempuh pendidikan di SD St. Th. Marsudirini 77 Salatiga hingga tahun 2006 dan melanjutkan tingkat menengah pertama di SMPN 1 Salatiga (2006-2009). Selepas dari pendidikan menengah pertama, penulis meneruskan pendidikan di SMA Stella Duce 1 Yogyakarta pada tahun 2009-2012. Penulis kemudian menempuh pendidikan sarjana strata satu di Fakultas Farmasi Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2012. Selama masa kuliah, penulis aktif dalam beberapa kegiatan antara lain organis Paduan Suara Dosen dan Karyawan Universitas Sanata Dharma Yogyakarta “Driyarkara”, anggota Divisi Bandzen Tiga Hari Temu Akrab Farmasi (TITRASI) 2014, serta perwakilan Fakultas Farmasi Sanata Dharma Yogyakarta dalam acara The 13th IPSF Asia-Pacific Pharmaceutical Symposium di Kuala Lumpur, Malaysia pada tahun 2014.

61

PENGARUH PEMBERIAN JUS BUNCIS (Phaseolus vulgaris L.) TERHADAP KADAR GLUKOSA DARAH TIKUS JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI GLUKOSA SKRIPSI

Recommend Documents