Buletin Veteriner Udayana Vol. 2 No.1. :1-9 ISSN : Pebruari 2010

Buletin Veteriner Udayana ISSN : 2085-2495

Vol. 2 No.1. :1-9 Pebruari 2010

DETEKSI HISTOLOGIK KESEMBUHAN LUKA PADA KULIT PASCA PEMBERIAN DAUN MENGKUDU (Morinda Citrofilia Linn) (The Histological Detection of Skin Wound after Treatment With Mengkudu Leaves (Morinda citrifolia Linn.) Ni Ketut Suwiti Lab. Histologi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana E-mail : [email protected] ABSTRAK Telah dilakukan penelitian deteksi kesembuhan luka pada kulit mencit (Mus musculus) pasca pengobatan daun mengkudu (Morinda citrifolia Linn.) dengan metode histologis, yakni melakukan pengamatan terhadap struktur mikroskopis.Untuk mengetahui kesembuhan luka, dibuat sediaan histologi kulit setiap minggu. Terhadap sampel dilakukan fiksasi, dehidrasi dan embedding dalam parafin selanjutnya dilakukan pemotongan dengan mikrotom ketebalan 4 – 5µ. Selanjutnya dibuat sediaan histologis dengan metode pewarnaan Harris-Haematoxilin-Eosin. Pengamatan terhadap struktur histologi dilakukan dengan mikroskop cahaya binokulerpembesaran450X.Hasil penelitian menunjukkan pada minggu ke empat struktur histologi kulit telah normal dengan adanya lapisan epidermis,. Dermis dan hipodermis. Pada lapisan epidermis ditemukanepitel squomus komplek, folikel rambut,jaringan ikat dengan pembuluh darah arteri dan vena dan jaringan lemak Kata kunci :Mus musculus, Morinda citrifolia Linn , struktur mikroskopis, Haematoxilineosin, Epidermis, Dermis, Hipodermis. ABSTRACT A study to detect the microscopic structure of skin wound in mice (Mus musculus) after treatment with mengkudu leaves (Morinda citrifolia Linn.), by histological methods, has been carried out. In this study were detected the level of wound healing every weeks. The samples were collected from skin with was given incision injury. The tissue samples were fixed, dehydrated and embedded in paraffin and 4 – 5 µ. sections. Harris-HaematoxilinEosin staining method, using to identified of histological structure.Microscopic analysis was performed using a binocular light microscope (450X). The study showed that, histological structure of normaly skin we deteted in fourth weeks ware composed by epidermis, dermis and hipodermis tissue. We observed for the presence ofthe ephitelial squomous complexs, hairfollicles, connective tissue with vein and arteriole and adipose tissue. Keywords: Mus musculus, Morinda citrifolia Linn , structur- microscopis, Haematoxilineosin, Epidermis, Dermis, Hipodermis.

1


Vol. 2 No.1. :1-9 Pebruari 2010 satu hanya mengenai epidermis luar dan

PENDAHULUAN

secara klinis tampak sebagai daerah Luka adalah kerusakan anatomi, keadaan

pemisahan

jaringan

hiperemia dan eritema. Luka derajat dua

karena

mengenai lapisan epidermis yang lebih

kekerasan atau trauma (Marzoeki, 1993).

dalam dan sebagian dermis serta disertai

Keparahan luka tergantung dari besarnya

lepuh, basah atau edema. Luka derajat

trauma yang diterima oleh jaringan (Pavletic,

1992).

Ditinjau

tiga mengenai semua lapisan epidermis

dari

dan dermis serta biasanya secara klinis

penyebabnya dibedakan atas dua yaitu luka

iris dan

luka

bakar.Luka

tampak sebagai luka kering, seringkali

iris

vena

merupakan luka yang disebabkan oleh

luka

licin,

tidak

dan

dapat

terlihat dari permukaan kulit (Sabiston,

benda tajam. Luka ini memiliki sifat : tepi-tepi

mengalamikoagulasi

1987).

terdapat

hubungan antara jaringan dan tidak ada

Percepatan

kesembuhan

luka

jaringan nekrosa (Marzoeki, 1993).Luka

dilakukan dengan cara mempertemukan

iris dapat ditemukan pada luka insisi

kedua sisi luka, pemberian obat-obatan

akibat pembedahan,kesembuhannya lebih

seperti salep antibiotik, dibalut dengan

cepat dansedikit jaringan nekrosis pada

teknik

tepi-tepi luka keadaan yang berlawanan

hidrogel (Thomas, 1997; Fossum, 1997)

ditemukan

atau

gunting,

pada

luka

elektroscalpel

menggunakan atau

laser

tertentu

dengan

seperti

teknik

menggunakan

vakum

(tenaga

negatif) di atas luka dalam beberapa

(Fossum, 1997).

menit (Thomas, 2001). Selain cara di atas kesembuhan luka dapat dilakukan dengan

Luka

bakar

pada

dasarnya

menggunakan obat tradisional.

merupakan fenomena pemindahan panas, meskipun

sumber

panasnya

dapat

Pengobatan

cara

bervariasi.Akibat akhir yang ditimbulkan

tradisional

berupa kerusakan jaringan kulit, bahkan

mendapatkan kesembuhan akhir-akhir ini

pada keadaan cedera multisistemik dapat

banyak digunakan. Salah satunya adalah

menyebabkan gangguan yang serius pada

pengobatan

paru-paru, ginjal dan hati. Efek sistemik

mengkudu.Mengkudu

dan mortalitas yang disebabkan karena

citrifolia Linn.)

luka bakar sangat ditentukan oleh luas

untuk pengobatan karena diyakini dapat

dan dalamnya kulit yang terkena luka

meningkatkan

(Ollstein, 1996).

menormalkan tekanan darah, antikanker, antitumor,

Luka bakar dibedakan menjadi : derajat

sebagai

dengan alternatif

dengan

banyak

daya

analgesik,

untuk

menggunakan (Morinda dimanfaatkan

tahan

tubuh,

antiradang,

antibakteri, dan mengatur siklus energi

satu, dua dan derajat tiga. Luka derajat 2



tubuh (Tadjudin dan Iswanto, 2002). Oleh

diulang 5 kali dan pengamatan histologis

karena itu mengkudu sering digunakan

dilakukan setiap minggu selama empat

sebagai obat batuk, asma, tuberculosis,

minggu. Sampel berupa kulit difiksasi

gangguan

pernapasan,

dengan formalin, selanjutnya dilakukan

tenggorokan,

sakit

gigi,

radang sariawan,

pembuatan

preparat

histologis

cacingan, diare, radang usus, radang

dilakukan

sendi, keram saat menstruasi, datang

metode Hematoxylin-Eosin(HE).

dan

pewarnaandengan

bulan tidak lancar, membantu kesehatan Metode

saat hamil dan persalinan, penghilang rasa sakit kepala, kencing manis, maupun

Pembuatan bubuk daun mengkudu.

sebagai campuran makanan (Bangun dan Sarwono, 2002). Sejauh ini pemanfaatan

Daun mengkudu yang akan dibuat

mengkudu diatas sebatas pada buahnya,

sediaan kering adalah daun mengkudu

sehingga menarik untuk diteliti apakah

segar pucuk kedua. Pembuatan sediaan

bagian

daun mengkudu dilakukan dengan cara

lain

dari

mengkudu

dapat

dimanfaatkan sebagai obat.

sebagai

berikut,

daun

mengkudu

dihilangkan kadar airnya dengan dioven Selain buahnya, daun dari tanaman tersebut

diyakini

memiliki

pada suhu 100oC sampai kering. Daun

banyak

mengkudu yang telah kering kemudian

manfaat tetapi belum mendapat perhatian,

digerus

sehingga penelitian ini menarik untuk

menggunakan

mortir.

Hasil

gerusan diayak menggunakan saringan

dilakukan. Sampai saat ini belum ada

untuk

penelitian yang mengungkapkan khasiat

memperoleh

sediaan

daun

mengkudu yang berupa bubuk.Kemudian

daun mengkudu, terutama pengaruhnya

dibuat konsentrasi bubuk daun mengkudu

terhadap kesembuhan jaringan kulit yang

75% dengan mencampurkan 75 gr daun

mengalami luka.

mengkudu pada 25 gram vaselin.

METODE PENELITIAN

Pembuatan luka pada kulit mencit.

Materi Penelitian

Luka bakar dibuat pada bagian dorsal mencit. Sebelum dilukai rambut pada

Penelitian menggunakan 40 ekor

kulit dihilangkan terlebih dahulu. Luka

mencit (Mus musculus) dibagi ke dalam

bakar dibuat dengan menggunakan solder

dua kelompok.Kelompok satu adalah

listrik.

mencit dengan luka pada kulit yang

Solder

terlebih

dahulu

dihubungkan dengan sumber arus dan

dobati dengan vaselin sebagai kontrol dan

ditunggu sampai panas. Solder yang telah

kelompok dua luka pada kulit yang

panas kemudian ditempelkan selama 5

diobati daun mengkudu. Tiap perlakuan 3



detik pada kulit daerah dorsal sampai

30 menit dipotong dengan mikrotom

mengenai otot (derajat tiga). Luka yang

dengan ketebalan 4 – 5 ?. Sebelum

dihasilkan adalah luka bakar terbuka

dilakukan mounting terlebih

dahulu

dengan diameter 0,5 cm. Sedangkan

dilakukan

dengan

pembuatan luka irisdengan penyayatan

metode Harris-hematoxylin eosin, dengan

pada bagian dorsal menggunakan scalpel

cara : Direndam dalam xylol I, II, III

hingga mencapai daerah hipodermis, dan

masing-masing

sebelumnya bulunya dihilangkan..

Selanjutnya direndam dalam alkohol

pewarnaan

selama

5

menit.

absolut I dan II selama 5 menit. Pengobatan pada luka Sebelum direndam dalam HarrisPengobatan setelah

luka

dilakukan

dibuat

segera

sesuai

haematoxylin / HE (15 menit), dilakukan

dengan

perendaman dalam aquadest selama 1

perlakuan. Masing masing mencit diobati

menit. Sampel kembali direndam dalam

satu kali sehari yaitu pada pagi hari. Pengobatan mengoleskan

dilakukan secara

dengan merata

aquadest (1 menit), kemudian 5-7 menit

cara

dalam acid alkohol 10%,dua kali dalam

vaselin

aquadest selama 1menit dan 15 menit.

sebagai kontrol dan sebagai perlakuan

Setelah

dengan sediaan daun mengkudu 75%

itu

diwarnai

dengan

eosin.

Preparat yang telah diwarnai kemudian

pada permukaan kulit yang mengalami

direndam

luka bakar. Mencit diberikan makan dan

dalam

alkohol

96%

I

danalkohol 96% II masing-masing selama

minum ad libitum.

3 menit. Selanjutnya direndam kembali dalam

Pembuatan Sediaan Histologis

alkohol

absolut

III

yang

dilanjutkan lagi kedalam alkohol absolut histologis

IV masing-masing 3 menit. Selanjutnya

berdasarkan metode Luna (1968) dan

dibersihkandalam xylol I dan xylol II

Culling and Dunn (1974) yaitu sampel

selama 5 menit.

Pembuatan

sediaan

berupa kulit yang telah difiksasi dengan Cara Pengambilan Data

formalin 10%, didehidrasi dan berturutturut dibersihkan dengan satu sesi larutan

Pengamatan sediaan histologis dilakukan

(formalin 10% I, formalin 10% II,

terhadap kulit yang telah diberikan luka

formalin 10% III, alkohol 70%, alkohol

dan

96%, alkohol absolut I, alkohol absolut II,

diobati

vaselin

(kontrol)

dibandingkan dengan luka yang diobati

alkohol absolut III, xylol I, xylol II, xylol

dengan

III, parafin cair I, parafin cair II) dalam

daun

mengkudu.Pemeriksaan

dilakukan setiap minggu menggunakan

waktu 23 jam. Lalu dibloking dengan

mikroskop cahaya binokuler pembesaran

paraffin cair, setelah didinginkan selama

100x dan 450x. Variabel yang diamati 4



adalah perkembangan kesembuhan luka secara histologis, yaitu dengan melakukan pengamatan

mikroskopis

di

daerah

epidermis, dermis dan hipodermis dengan mengidentifikasi radang,

keberadaan

fibroblast,epitel

sel-sel squomus

komplek, folikel rambut, jaringan ikat dengan pembuluh darah arteri dan vena, jaringan

lemak

Selanjutnya

data

dan

otot

skelet.

dianalisis

dengan

Gambar

analisis deskriptif kualitatif. HASIL DAN PEMBAHSAN

2.Struktur histologis lapisan dermis dan hipodermis pengobatan dengan daun mengkudu minggu pertama (H.E. 450X)

Pada minggu kedua gambaran histologis kulit

Hasil.

tikus

masih

tampak

adanya

peradangan dan dapat diamati pada semua Pada minggu pertama ditemukan sel radang. Peradangan terjadi pada semua perlakuan baik kontrol maupun daun mengkudu. Daerah luka bakar tampak sebagai suatu celah yang di dalamnya banyak terdapat akumulasi sel radang.

perlakuan. Pada perlakuan mengkudu

Gambar 1. Struktur Histologik Lapisan Epidermis kulit Pengobatan dengan Daun Mengkudu minggu Pertama (H.E. 450x)

Gambar 3. Lapisan Epidermis kulit Pengobatan dengan Daun Mengkudu Minggu Kedua (H.E. 450x)

selain dapat ditemukan sel radang juga mulai dijumpai adanya fibroblast.

5



Gambar 6. Struktur histologis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu ketiga (H.E. 450X)

Gambar 4.Struktur histologis lapisan dermis dan hipodermis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu kedua (H.E. 450X)

Pada minggu keempat jaringan kulit telah Pada minggu ketiga jaringan dermis telah

sembuh secara klinis baik pada perlakuan

mengalami kesembuhan, terlihat daerah

mengkudu,

luka telah menyatu, serat kolagen telah

histologis jaringan kulit yang mengalami

terbentuk,

ditemukan

kerusakan telah kembali utuh ditandai

fibroblast dan pembuluh darah serta

dengan terbentuknya jaringan ikat berupa

folikel rambut sebagaimana yang dapat

serabut kolagen yang kembali menyatu.

juga

dapat

maupun

kontrol.

Secara

ditemukan pada kulit normal.

Gambar 7. Gambaran histologis kesembuhan luka minggu keempat pada perlakuan mengkudu. (H.E. 450X)

Gambar 5. Struktur histologis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu ketiga daerah epidermis dan dermis (H.E. 450X)

6


Vol. 2 No.1. :1-9 Pebruari 2010 Pada minggu kedua kesembuhan luka pada

pengobatan

daun

memberi

gambaran

berbeda.

Dalam hal

mengkudu

histologi

yang

ini pengobatan

dengan menggunakan daun mengkudu memberikan hasil kesembuhan yang lebih baik dibandingkan dengan kontrol, yang ditandai

dengan

fibroblast.Keadaan

pemunculan

ini

menunjukkan

proses kesembuhan luka telah mencapai

Gambar 8. Struktur histologis kulit pengobatan dengan daun mengkudu minggu ketiga (H.E. 450X)

fase rekonstruksi dimana pada fase ini sel-sel

radang

terutama

makrofag

memiliki peranan yang sangat penting Pembahasan

untuk

Pada

minggu luka

ditemukan

adanya

peradangan

pada

perlakuan

kontrol

Menurut

Dealey

maupun

mengkudu.

akibat iritasi, infeksi, iritasi, bahan asing atau mekanik. Pada kontrol kemungkinan terjadinya infeksi sangat besar karena tidak dilakukan pengobatan yang dapat

reaksi lokal terhadap jaringan yang

mencegah

mengalami luka dan bagian penting dari pertahanan

merupakan

proses

kesembuhan

luka.

tubuh

serta

penting

dari

Myers

menuju

proses peradangan dapat diperpanjang

(1994) respon inflamasi merupakan suatu

mekanisme

fibroblast

lokasi luka. Dealey (1994) menjelaskan

pertama

kesembuhan

merangsang

infeksi,

menyebabkan

hal

proses

tersebut peradangan

diperpanjang.

(2004)

Minggu ketiga kesembuhan luka nyata

menjelaskan pada saat tubuh mengalami

berbeda dibandingkan dengan kontrol.

luka, dari dinding pembuluh darah yang

Dalam waktu kurang lebih tiga minggu

rusak akan dialirkan transudat untuk

luka yang diobati dengan daun mengkudu

membloking daerah luka menyebaban

tampak

terjadinya edema lokal. Platelet akan aktif

memperlihatkan

gambaran

sebagaimana jaringan dermis normal.

melepaskan beberapa faktor pertumbuhan

Lapisan epidermis dan serabut kolagen

yang merangsang sel radang menuju ke

telah ada dan membentuk anyaman yang

lokasi luka. Hal tersebut menjelasakan

menunjukkan fase kesembuhan telah

bagaimana sel radang terditeksi pada

mencapai

daerah luka seperti yang ditunjukkan

tahapan

maturasi

(Dealey

1994). Adanya kolagen pada minggu

Gambar 1 dan 2

ketiga kesembuahan luka disebabkan telah terjadinya sintesis molekul kolagen 7



dimulai dalam reticulum endoplasmik

meregenerasi

sel

yang

rusak

serta

kasar fibroblast (Parker, 1991)

meningkatkan kerja sel. Dengan adanya proxeronin dalam daun mengkudu dapat

Gambaran histologis kesembuhan luka

meregenerasi sel

pada minggu keempat telah ditemukan

yang rusak akibat

terbakar sehingga luka dapat sembuh.

jaringan kulit dengan susunan yang sempurna,

yakni

epidermis

(stratum

ditemukan

lapisan

korneum

sampai

SIMPULAN DAN SARAN Simpulan

dengan basale), lapisan dermis yang ditandai dengan adanya folikel rambut dan

serabut

kolagen,

dan

Berdasarkan hasil deteksi histologik, luka

lapisan

pada kulit mencit dapat diobati dengan

hipodermis ditemukan adanya jaringan

daun

lemak, saraf dan pembuluh darah, serabut

anyaman.

(Dellman

epidermis granulosum,

ditemukan fibroblast dan kolagen juga dideteksi

pada

minggu

staratum

spinosum

dan

basale, stratum

dengan adanya serabut kolagen, fibroblas dan folikel rambut

dapat merekomendasikan daun mengkudu

sedangkan pada

lapisan hipodermis telah dapat dideteksi

dapat digunakan sebagai pengobatan luka

pemunculan jaringan ikat longgar dengan

bakar maupun luka iris pada kulit mencit. daun

dengan

korneum, lapisan epidermis yang ditandai

keempat.Sehingga hasil penelitian ini

Kemampuan

minggu

kulit ditandai dengan pemunculan lapisan

jaringan telah mencapai kesembuhan dan

dapat

pada

histologis kulit normal.Struktur histologi

and

Brown, 1992) Hal tersebut menunjukkan

telah

dan

keempat telah memberikan gambaran

kolagen telah mengalami reorganisasi membentuk

mengkudu,

jaringan lemak, pembuluh darah dan saraf.

mengkudu

untuk menyembuhkan luka disebabkan

Saran

adanya zat anthrakinon, dimana zat tersebut berperan sebagai anti mikroba

Dari hasil penelitian ini dapat disarankan

dan anti jamur. Dengan adanya zat

untuk menggunakan daun mengkudu

tersebut

dalam pengobatan luka iris maupun luka

sebagai

antibakteri

dapat

mencegah terjadinya infeksi pada luka sehingga dipercepat

kesembuhan (Waha,

luka 2002).

bakar pada kulit hewan.

dapat DAFTAR PUSTAKA

Selain

kandungan zat tersebut mengkudu juga

Bangun, A.P. dan B. Sarwono. 2002. Khasiat dan Manfaat Mengkudu. Agro Media Pustaka. Jakarta

mengandung proxeronin, sebagaimana yang dilaporkan oleh Heinicke (2000) zat itu berperan dalam peremajaan sel, 8



Culling, C.F.A and W.L Dunn 1974. Handbook of Histopathological and Histochemical Techniques. 3 rd.Butterworths & Co Publishes, England, New Zealand, Austria, Canada, South Africa, USA.

Ollstein, R.N. 1996. Luka Bakar. Dalam Keterampilan Pokok Ilmu Bedah. Edisi Keempat. T.F. Nealon dan W.H. Nealon. Buku Kedokteran EGC. Jakarta. Parker, F. 1991. Structure and Function of The Skin. In Dermatology. M. Orkin, H.I. Maibach, dan M.V. Dahl. A Lange Medical Book. USA

Dealey, C. 1994. The Care of Wound. Blackwell Science. USA Dellman, H. D., E. M. Brown. 1992. Buku Teks Histologi Veteriner 2. Universitas Indonesia Press. Jakarta.

Pavletic, M.M. 1992. Veterynary Emergency and Critical Care Medicine. Editor Robert J. Murtaugh and Paul M. Kaplan. Mosby Year Book. Toronto. New York

Fossum, T.W. 1997. Small Animal Surgery. Mosby New York. USA Heinicke, R.M. 2000. The Pharmacologically Active Inggridient of Noni .http://www.noni.net.nz/xeronine. htm

Sabiston, D.C. 1987. Buku Ajar Bedah Bagian 1. Editor J. Oswari. Alih bahasa P. Adrianto dan Timan. Buku Kedokteran EGC. Jakarta Tadjudin, H. T., H. Iswanto, 2002. Mengebunkan Mengkudu Secara Intensif. AgroMedia Pustaka. Jakarta.

Luna, L.G. 1968. Manual Histologic Staining Methods of Pathology. 3rd Ed. The Blakiston Division Mc Graw-hill Book Company, New York, Toronto, London, Sydney.

Thomas, S. 1997. The Management of Extravasation Injury In Neonates. World Wide Wound.

Marzoeki, D. 1993. Ilmu Bedah Luka dan Perawatannya. Airlangga University Press. Surabaya

Thomas, S. 2001. An Introduction to The Use of Vacum Assisted Closure. World Wide Wound.

Myers, B.A. 2004. Wound Management Principles and Practice. Prentice Hall. New Jersey

Waha,

9

M.G. 2002. Sehat Dengan Mengkudu. Editor Listiyani Wijayanti. PT. Mitra Sitta Kaleh. Jakarta

Buletin Veteriner Udayana Vol. 2 No.1. :1-9 ISSN : Pebruari 2010

Recommend Documents