110 sz

2011.02.21.

Vázlat Növényi hatóanyagok kimutatása nektárból és mézből Farkas Ágnes Ágnes, Molnár Réka

• Méz – orvosság, élelmiszer – minősítés • Fajtamézek gyógyhatása • Saját kutatási eredmények – medvehagyma nektár és méz – mérgező nektárok és mézek - maszlag fajok nektárvizsgálata

Pécsi Tudományegyetem ÁOK Farmakognóziai Tanszék

Herpai Zoltán, László József Wessling Hungary Kft.

Boros Borbála Pécsi Tudományegyetem TTK Szőlészeti és Borászati Kutatóintézet

Mel – Méz (Ph. Hg. VIII., Ph. Eur. 5.) Mel depuratum (Ph.Hg. VII.) Apis mellifica L. - házi méh (Apidae) Azonosítás: VRK: fruktóz, glükóz, szacharóz törésmutató fajlagos vezetőképesség optikai forgatóképesség HMF (5-hidroximetilfurfurol) klorid-tartalom szulfát-tartalom

A méz szerepe a gyógyászatban • • • •

gyulladt nyálkahártya bevonása (pl. torokgyulladás) köhögési inger csillapítása enyhe köptető ízjavító (Tóth 2010)

Antibakteriális: d’Agustino Barbaro et al., 1961; Dustmann, 1979; Braniki, 1981; Willix et al., 1992; McCarthy, 1995; Cooper et al., 1999; Vardi et al., 1998; Molan és Betts, 2008

Magyar Élelmiszerkönyv 1-3-2001/110 sz. előírása • cukortartalom – fruktóz- és glukóztartalom – szacharóztartalom

• • • • •

nedvességtartalom d é t t l vízben oldhatatlan szilárdanyag-tartalom elektromos vezetőképesség savfok diasztázaktivitás és HMF-tartalom

Fajtamézek gyógyhatása • Méz gyógyhatása kiegészülhet a növény jellemző gyógyhatásával • Méz: növény ö é – hatóanyagok h tó k+ méhek – enzimek, hormonok stb.

Sebgyógyító: Blomfield, 1973; Armon, 1980; Dumronglert, 1983; Wadi et al., 1987; Efem, 1988; Faraouk, 1988; Abuharfeil et al.,1999; Tonks et al., 2001; Subrahmanyam és Ugane, 2004; Miri et al., 2005; Mashhood et al., 2006; Molan és Betts, 2008

1

2011.02.21.

Fajtamézek gyógyhatása

Akácméz: „jó köhögés csillapítására és gyomorsav-túltengésre”

Aranyvessző méz: „kiváló vesetisztító, húgyúti fertőtlenítő”



Galagonyaméz: „szívbetegségek esetén, szívgyengeségnél”

Gesztenyeméz: „visszér-panaszoknál és trombózisok megelőzésére”


Hársméz: légúti hurutoknál, görcsöknél, lázas állapotnál ajánlott

Levendulaméz: „álmatlanságra, vesepanaszokra ajánlott”

Mentaméz: „sok illóolaj; emésztést serkentő, puffadást csökkentő, görcsoldó és fájdalomcsillapító hatású”

Fajtamézek gyógyhatása • Fajtamézek – speciális hatóanyagok (markervegyületek) – kevés vizsgálat

Somkóróméz: „trombózis-megelőző hatású”

Vöröshagymaméz: „légúti megbetegedésekre kiváló”

Fajtamézek gyógyhatása Manuka méz (Leptospermum scoparium) • antibakteriális, sebgyógyító – fenolos vegyületek (Weston et al. 2000, Snow és Manley-Harris 2004, Koichi et al. 2005)

• Célkitű Célkitűzés: é különböző botanikai eredetű nektár- és mézminták – egyedi hatóanyagok

2

2011.02.21.

Fajtamézek gyógyhatása Hársméz (Tilia spp.)

Medvehagyma

Hárs nektár • zsírsavak bomlástermékei • fenil-propanoidok • izoprenoidok • alkaloidok • monoterpének

(Allium ursinum L.)

Mecsek Orfű Mecsek, Tilia platyphyllos Scop.

Hársméz: • 3,9-epoxi-1-p-mentadién Tilia cordata Mill. • transz-8-paramentén-1,2-diol • cisz-rózsaoxid Blank I. et al. (1989) Z. Lebensm. Unters. Forsch., 198: 426-433. • hárséter Radovic B.S. et al. (2001) Food Chemistry 72: 511-520. Naef R. et al. (2004) Chemistry and Biodiversity, 1 (12): 1870-1879. Amtmann M. (2009) Különleges fajtamézek botanikai eredetének és illó komponenseinek összefüggése. PhD dissz. Budapesti Corvinus Egyetem

Medvehagyma • Medvehagyma („vadfokhagyma”): • antibakteriális • vérnyomáscsökkentő • koleszterinszint-csökkentő • érelmeszesedés-gátló • trombocita-aggregáció-gátló gg g g ((Szabó 2005))

Bakony, Bakonybél

Medvehagyma hatóanyagai alliin-liáz

alliin

allicin

(S-allil-L-cisztein szulfoxid)

(diallil diszulfid oxid) (diallil-diszulfid-oxid)

Medvehagyma méz: • „Ajánljuk szív- és érrendszeri betegségekre.” • „Feltételezhető, hogy gyógyító hatású légzőszervi megbetegedésekre.” • „A medvehagyma méz a növény gyógyhatásait hordozza.”

Póréhagyma (Allium porrum) – SDS-PAGE: nektár: póréhagyma lektin és az alliináz méz: mindkét fehérje aktivitása ↓(degradálódik? inaktiválódik?) ! több új protein Peumans W.J. et al. (1997) Planta 201: 298-302.

Medvehagyma nektárvizsgálatok

Medvehagyma hatóanyagainak detektálása a nektárban és a mézben • LC-MS-MS – Készülék: Agilent 1200 HPLC, Agilent 6410 MS, ESI+ ionizációval – YMC Triart C18 HPLC oszlop – Eluens: pH=3 ammónium-formiát puffer

• Alliin standard - mérhetőség alsó határa (LOQ): 20 ng/mL • Medvehagyma nektár és méz: alliin nem detektálható • Ismert mennyiségű alliint hozzáadva – alliin mérhető; vizes oldatban gyorsan bomlik • 5x hígítás – nektár, méz: alliin < 100 ng/mL • Ellenőrzés: friss fokhagyma – allicin, dipeptidek (alliin nem detektálható – bomlékony!) Molnár R., Farkas Á. (2008) Gyógyszerészet 52. Suppl. E-3, 1. o. Molnár R., Farkas Á. (2008) Méhészet 56 (2): 6-7.

Molnár R., Farkas Á. (2009) Third International Symposium on Medicinal and Aromatic Plants (SIPAM), Djerba (Tunisia), March 26-28, 2009, p. 90.

3

2011.02.21.

Mérgező nektárok és mézek

Medvehagyma méz Pollenanalízis Azonosított pollen (%) Minta

Medvehagyma

Akác

Repce

Napraforgó

Hárs

Egyéb

2005

6

11

6

1

2

74

2006

12

3

8

-

-

77

2007

6

5

18

3

-

68

fehér zászpa (Veratrum album)

szellőrózsa (Anemone sp.)

Molnár R., Farkas Á. (2008) Gyógyszerészet 52. Suppl. E-3, 1. o. Molnár R., Farkas Á. (2009) Third International Symposium on Medicinal and Aromatic Plants (SIPAM), Djerba (Tunisia), March 26-28, 2009, p. 90.

kék sisakvirág (Aconitum napellus)

Datura sp. tropánvázas alkaloidjainak detektálása nektárban CH3 Maszlag (Datura) fajok: N • Solanaceae (burgonyafélék) • Amerikában, Ázsiában honosak • Európa: gyomok, dísznövények O OH O • D. metel és D. innoxia: atropin CH3 atropin (D, L-hioszciamin) hioszciamin) és N szkopolamin források: O anticholinerg

• alkaloid tartalom változó – fajok – növényi részek

O

OH

Datura sp. tropánvázas alkaloidjainak detektálása nektárban • Vizsgált Datura fajok: – – – –

D. innoxia

– nektár – kalibrált kapillárisok D. metel

O

• D. innoxia: szkopolamin dominancia (Rätsch 2007) • D. stramonium: hioszciamin dominancia

D. tatula

• atropin és szkopolamin koncentráció: LC-MS

D. meteloides

Datura sp. tropánvázas alkaloidjainak detektálása nektárban

D. innoxia D. metel D. meteloides D. tatula

• Mintavétel:

szkopolamin

(Miraldi et al. 2001)

Bendiák I. (2010) Méhészet 58 (5): 22.

Boros B., Farkas Á., Jakabová S., Bacskay I., Kilár F., Felinger A. (2010) Chromatographia Suppl. 71: 43-49

Datura sp. tropánvázas alkaloidjainak detektálása nektárban

LC-MS vizsgálati módszer: Alkaloid koncentráció (μg mL-1)

Extrakció: eluens A + szűrés (0,45 mm Mini-Uniprep, Whatman) LC-MS analitikai rendszer:

szkopolamin

atropin

D. innoxia

Eluens: A: 2 v/v % hangyasav – metanol:víz = 7:93 B: 2 v/v % hangyasav – metanol Eluens áramlási seb.: 0,2 ml/perc

57,80-400,04

1,79-37,00

D. metel

84,57-131,66

3,25-4,25

Gradiens profil:

D. meteloides

120,06-189,86

0,19-0,42

11,00 ± 2,73

17,60 ± 3,24

LC-10 ADVP (Shimadzu), MS detektor: LCMS-QP 8000 (Shimadzu) Oszlop: Ascentis®Express C18 2,7 µm, 50 × 2,1 mm (Supelco, USA)

t (perc) 0,00 10,00 10,01 15,00

B% 0 90 0 0

Injektált mintatérfogat: 2 μl Ionizáció: ESI Polaritás: pozitív mód Szárítógáz áramlási seb.: 1,5 l/min Szárító gáz: N2 CDL hőmérséklete: 250 °C Mintatér hőmérséklet: 10 °C Oszloptér hőmérséklet: 50 °C


D. tatula


4

2011.02.21.

Következtetések • növények között eltérések: – a fajra jellemző hatóanyagok jelen vannak-e a nektárban illetve a mézben – speciális gyógyhatás / mérgező hatás – analitikai módszerek különbözősége – fajspecifikus jellemző (genetikai háttér) – specifikus gyógyhatás igazolása • hatóanyagok kimutatása • hatástani igazolás

Köszönet • Medvehagyma nektár- és mézvizsgálata: PTE ÁOK Farmakognóziai Tanszék Molnár Réka, Papp Nóra

Wessling Hungary Kft. Herpai Zoltán, László József

• Maszlag fajok nektárvizsgálata:

PTE TTK Analitikai és Környezeti Kémia Tanszék

Boros Borbála, Sylvia Jakabova, Bacskay Ivett, Felinger Attila, Kilár Ferenc

• Fotók: Hatvani Zsolt, Katona László, Katona Lászlóné

Köszönöm megtisztelő figyelmüket

5

110 sz

Recommend Documents