MEIKE LIEMOWA
STUD1 HUBUNGAN ANTARA KOMBINASI ASAM KLAVULANAT DAN AMOKSISILIN DENGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI (DHP) TERHADAP STAPHYLOCOCCUS AUREUS PENGHASIL BETA-LAKTAMASE
I
I
I YCP, K f
FAKULTAS FARMASI UNWERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA
199 5
Lie
II
STUD1 NUBUNGAN ANTARA KOMBINASI ASAM KLAVULANAT
D A N A M O K S I S T L I N DENGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI (DHP) TERIIADAP STAPHYLOCOCCUS AUREUS PENGHAS I L
BETA-LAKTAMASE
SKRIPSI
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi Pada Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya 1995
Oleh Meike Liemowa No. P o k o k : 2 4 4 3 0 8 9 0 0 2
Disetujui Oleh
D r . B a m h a n g S o e k a r d j o , SU; Pembimbing I
Dra. Dien Ariani Pembimbing I 1
KATA PENGANTAR
Puji segaln
syukur kchadirat Tuhan Yang Maha
karunia
dan rnhmatNya
sehingga
esa
atas
penulis
dapat
skripsi ini clibuat guna mclengkapi syarat
untuk
menyelesaikan skripsi ini. Adapun
rnemperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas
Farmasi
I'niversitas Ratolik Widya Mandala Surabaya. P a d a kesempatan ini, p e ~ k e n a k a n l a h penulis
meng-
ucapkan rasa terima kasihnya yang tak terhingga kepada : 1 . Dr.
Bamhang
selaku
Soekardjo, S.U. dan
peml~inibing yang
(1 i t engah
membantu in i
telah
Dien
Ariani
nleluangkan
waktu
member i kan
kesibukannpa.
bin~bingan, saran-saran
Dra.
d a n pengarahan
dan berarti bagi
bimbinganyang
terselesaikonnya
sangat skripsi
.
2. Ibu
Pimpinan
Fakultas Farmasi
Universitas
Katolik
Widya Mandala beserta staf dan seluruh karyawan telah
banyak niemberikan kemudahan
dalarn
yang
penyediaan
fasilitas dan pelayanannya selama pengerjaan
skripsi
ini. 3. Kepala Laboratoriurn K.F. Kualitatif. K . F . Kuantitatif
dan F.T. Steril Fakultas Farrnasi Universitas R i d y a Mandala.
ii
Ratolik
4 . K r p a l a L a b o r a t o r i u m M i k r o b i o l o g i R.S.U.D.
dr.
Sutomo
rela
telah
Surabaya. 5 , Segenap
staf
rnemberikan dapat
pengajar
yang
dengan
ilmu y a n g rnereka r n i l i k i s e h i n g g a
melengkapi
bahan
studi
untuk
penulis
rnenyelesaikan
skripsi ini. 6 . Bapak P i r n p i n a n PT. Beecham P h a r m a c e u t i c a l s y a n g t e l a h
rnemberikan
bahan
dan
amoksisilin trihidrat
Kaliurn
klavulanat untuk p e n e l i t i a n s k r i p s i i n i . 7 . Orang
tua
s a y a yang t e l a h bersusah
payah
sehingga
p e n u l i s d a p a t r n e n y e l e s a i k a n studi d i F a k u l t a s F a r m a s i U n i v e r s i t a s K a t o l i k Widya M a n d a l a . 8 . Semua
pihak
yang
telah
rnernberikan
dukungan
baik
s e c a r a l a n g s u n g maupun t i d a k l a n g s u n g dalarn p e m b u a t a n skripsi ini. Akhirnya masih
jauh
penulis
menyadari
bahwa
d a r i sempurna, o l e h karena
skripsi
ini
saran
dan
itu
k r i t i k yang p o s i t i f s a n g a t p e n u l i s harapkan dalam rangka p e n y e m p u r n a a n n y a . Semoga h a s i l p e n e l i t i a n i n i b ' e r m a n f a a t bagi dunia farmasi khususnya.
Surabaya,
Penyusun
Mei 1 9 9 5
DAFTAR I S I
Ha l aman
................................... IS1 ....................................... LAMPIRAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . TABEL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . GAMBAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
KATA PENGANTAR DAFTAR DAFTAR DAFTAR DAFTAR
.
ii iv viii
ix x
BAR
I
I1
................................. 1 . 1 . Latar Relakang Masalah . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 . 2 . Perrnasalahan . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 . 3 . Tujuan Penelitian . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 . 4 . Hipotesa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . TINJAUAN PUSTARA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . I I . I . S t a p h ~ l o c o c c u sa u r e u s . . . . . . . . . . . . . . . . .
6
11.1.4.
........................... F i s i o l o g i clan S i f a t B i o k i m i a . . . . . . . . Struktur Antigen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
S
11.1.5.
Metabolit
11.1.6.
Patogenitas
11.1.7.
Resistensi
PENDAHULUAN
11.1.2. 11.1.3.
1 1
Morfologi
I I . l . t i 3 Pengobatan
...........................
......................... .......................... ..........................
14
11.1.10. Identifikasi
.......................
11.2. Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika 11.2.1. Macam-macam Resistensi
..............
........ 11.3. Penisilin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11.3.1. Aktivitas dan Spektrum Antimikroba . . . 1 1 . 3 . 2 . Mekanisme Aksi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11.2.2. Mekanisme Resistensi Bakteri
11.3.3. Resistensi Bakteri Terhadap Penisilin 11.3.4.1'. Amoksisilin
.......................
11.3.4.2. Sifat Fisika-Kimia Amoksisilin Trihidrat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.................. Beta-Laktamase . . . . . . .
1 1 . 4 . Enzim Beta-Laktamase
11.4.1. Sintesis Enzim
11.4.2. Lokasi Enzim Beta-Laktamase
.........
11.4.3. Interaksi Enzim Beta-Laktarnase dengan Molekul Beta-Laktam . . . . . . . . . . . . . . . . .
....... 11.5. Senyawa Pengikat Beta-laktamase . . . . . . . 11.5.1. Asam Klavulanat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11.5.2. Struktur Asarn Klavulanat . . . . . . . . . . . . 11.4.4. Deteksi Enzirn Beta-Laktamase
11.5.3. Mekanisme Kerja Asam Rlavulanat 1I.G. Kombinasi Antibiotika
.....
.................
11.6.1. Teori-teori yang Mendasari Penggunaan Kombinasi Antibiotika . . . . . . . . . . . . 11.6.2. Kerugian - kerugian pada penggunaan Kombinasi Antibiotika . . . . . . . . . . . . . . . 11.6.3, Mekanisme Kerja dari Kombinasi A n t i biotika yang Menghasilkan Efek S i n e r gis
................................. zr
11.6.4.
Kombinasi Asam Klavulanat dan Turunan Penisilin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
11.6.5.
Studi Laboratorium Kombinasi Penisilin dan Pengikat Beta-Laktarnase . . . . . .
.
.............
1 1 . 7 . Evaluasi Daya Antibakteri
1 1 . 7 . 1 . Metode Pengenceran Bertingkat
.......
.................. 1 1 . 7 . 3 . Metode Vible Plate Count . . . . . . . . . . . . METODOLOGI PENE.LITIAN . . . . . . . . 1 1 . 7 . 2 . Metode Difusi Agar
III
1 1 1 . 1 . Bahan Penelitian
Penelitian 111.1.1.
dan
Bahan Penunjang
...........................
Bahan Penelitian
...................
......... Alat-alat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Bakteri U j i . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Metode Kerja . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1 1 1 . 1 . 2 . Bahan Penunjang Penelitian 111.2. 111.3. 111.4.
111.4.1.
Rancangan Penelitian
111.4.2.
Analisa Data
1 1 1 . 4 . 3 . Tahapan
...............
....................... Penelitian . . . . . . . . . . . . . . . . .
1 1 1 . 4 . 3 . 1 . Pembuatan Media Perbenihan 111.4.3.2.
Identifikasi
Kualitatif
S t a p h y l o c o c c u s aureus
....... Rakteri
............
1 1 1 . 4 . 3 . 3 . Uji
Adanya Enzim Beta-laktzmase Dengan Metode Indometri T e r h a d a p Kuman Percobaan . . . . . . . . . . . . . . . . . . Farland I . . . .
111.4.3.4.
Pernbuatan Larutan
111.4.3.5.
Pembuatan Suspensi Kuman . . . . . . . . .
31C
111.4.3.7.
Penyediaan Cakram Yang Mengandung Kornbinasi Amoksisilin dan Asam Klavulanat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
111.4.3.8. Pengukuran Aktivitas Antihakteri (DHP) Dari Kombinasi Asam Klavulanat dan Amoksisilin Pada Staphy~ O C O C C U S aureus . . . . . . . . . . . . . . . . . . IV
HASIL PERCOBAAN
.............
i . . . . . . . . . . . . . . .
IV.l. Perneriksaan S t a p h y l o c o c c u s aureus
.....
IV.l.l. Perneriksaan Makroskopis Koloni S t a p h y l o c o c c u s aureus Pada Media Selektif MSA dan BPA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . IV. 1 . 2 . Perneriksaan Mikroskopis Staphylococcus a u r e u s Dengan Pengecat an Gram. IV.1.3.
Uji Katalase, U j i Koagulase dan U j i Fermentasi Manitol Dar i StaphyloC O C C U S aureu.5 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
IV.2. Uji Beta-laktamase Pada S t a p h y l o c o c c u s aureus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
IV.3. Pengukuran Daerah Hamhatan Pertumbuhan S t a p h y l o c o c c u s aureus Karena Kombinasi Asam Klavulanat dan Amoksisilin . . . . . . .
.................................. VI KESIMPULAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . VII SARAN-SARAN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ABSTRAK . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . DAFTAR PUSTAKA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . \I
PEMBAHASAN
DAFTAR LAMPIRAN
Lampi ran I. 11.
111. IV.
T a h a p Pemeriksaan StaphyIococcus aureus Penyediaan Cakram Mengandung Kombinasi Antibiotika . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Tahapan Uji Aktivitas antibiotika
......
P e n e n t u a n Regresi T e r b a i k Secara " Stepwise Regresion " . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Profil dari Hubungan/Persaman yang Terbaik . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
VI. VII. VIII.
IX. X.
XI.
............ ........................
P e n e n t u a n Kornbinasi O p t i m a l Daftar Tabel F
Foto Hasil Percobaan
...................
Sertifikat Analisis Amoksisilin Trihidrat . . , . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Sertifikat Analisis Kalium Klavulanat Surat Keterangan
...
.......................
viii
DAFTAR TABEL
Ha 1aman
Tabe 1 I. Perbedaan Staphylococcus aureus Dengan S t a lococcus Lain . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
...................... Metode Langkah Mundur . . . . .
11. Rancangan Penelitian 111. Analisis Varian
IV. Hasil Pemeriksaan Makroskopis Koloni S t a phylococcus aureus Pada Media Selektif MSA dan BPA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Perneriksaan Mikroskopis Staphylococcus aureus Dengan Pengecatan Gram . . . . . .
V. Hasil
VI. Hasil Uji Katalase, Uji Koagulase dan Uji Fermentasi Mani to1 Dari Staphylococcus aureus
....................................
VII. HasiI G j i Beta-laktamase Pada S t a p h y l o c o c c u s aureus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . VIII. Hasil Pengukuran Daerah Harnbatan Perturnbuhan S t a p h y f o c o c c u s aureus Karena Kornbinasi Asam Klavulanat dan Amoksisilin . . . . . . . . . . .
17 56
61
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.
Model Stereonletrik Dari Dreiding P e n i s i l i n a dan D-alanil-D-alanin
Antara
2.
L o k a s i Enzirn B e t a - l a k t a r n a s e P a d a B a k t e r i Gram Positif .....................................
3.
L o k a s i Enzirn B e t a - l a k t a r n a s e P a d a B a k t e r i Gram Negatif . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.
H a s i l P e r u r a i a n Enzim B e t a - l a k t a m a s e dan Enzirn A m i d a s e Pada Penisilin . . . . . . . . . . . . . . . .
5.
F r a g r n e n t a s i J n t r a r n o l e k u l a r Asam K l a v u l a n a t
6.
Pengukuran Diameter Daerah Hamba t a n Perturnbuhan B a k t e r i . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
............
..
