Synoviális folyadékok laboratóriumi vizsgálata Brózik Márta , Böhm Ute, Háznagy Ágnes, Lelkes Gábor Ferencz Géza † Országos Reumatológiai és Fizioterápiás Intézet Központi Laboratórium
Synoviális folyadékok diagnosztikája
-Hematológia -Patológia -Klinikai kémia -Immunológia, immunkémia
Normál (fiziológiás) synoviális folyadék: térfogata kicsi (< 3 ml) Fehérjék : -szérumból méret specifikus diffúzió által -lokális fehérje szintézis: hyaluronsav, lubricin, -kiáramlás: lymphatikus rendszer
Synovitis: Synoviális folyadék felszaporodás, oka: csökkent lymphatikus folyadék kiáramlás Fehérjék: -szérumból , de fokozott membrán permeabilizáció, emelkedett se fehérje szint, nagy ms-ú fehérjék (Immunogl, fibrin)megjelenése -lokális fhérje szintézis: immunoglobulinok, RF, citokinek
Synoviáis folyadékok eredete kórképek szerint I ( n e m g y u lla d á s o s)
II ( g y u lla d á s o s )
O ste o a rth ritis
R h e u m a to id a rth ritis
T ra u m a
K ristá ly in d u k á lta sy n o v itis
P o rc k á ro so d á s
A rth ritis p so ria tica
O ste o ch o n d ritis d is se ca n s
R e a k tiv a rth ritis (R e ite r S y n d ro m a )
O ste o ch o n d ro m a to sis
W h ip p le k ó r
C h a rco t's a rth ro p a th y
A u to im m u n e re u m a tik u s b e te g sé g e k
S u b sid in g in fla m m a tio n
P o ly m y a lg ia rh e u m a tica
V illo n o d u la r sy n o v itis
P o ly ch o n d ritis
H y p e rtro p h ic o ste o a rth ro p a th y
S a rco id o sis
M yxoedem a
B e h çe t's sy n d ro m e
A cro m e g a ly
S p o n d y litis A n k y lo p a th ia
H a e m o ch ro m a to sis
Ju v e n ile rh e u m a to id a rth ritis
G a u ch e r's d ise a s e
R h e u m á s lá z
O ch ro n o sis
Lym e kór
P a g e t's d ise a se
L e u k a e m ia
Synoviális folyadék mintavétel Diagnosztika
Terápia
Synoviális folyadékminták laboratóriumi vizsgálata Mintavétel
Natív
Heparinos
< 6,000/μl
Mikroszkópos vizsgálat
sejtszám
Vízuális értékelés
Ragocyták, kristályok >6,000/ μl > 50,000/μl
Bakterológia
Qualitatív sejtszám Gram festés
Tenyésztés Virális, bacteriális DNS, RNS (PCR)
Centrifugálás (10 perc 1-3,000 rpm ) üledék Qualitatív sejtszám Gram festés
Felülúszó (+Hyaluronidáz) Klinikai kémiai Immunológiai vizsgálatok
Synoviális folyadékmunták vizuális értékelése
F
A. normál
D: Septikus athritisből
B: nem-gyulládos kórképből
E: Hemorrhagiás SF,
C. gyulladásos kórképből
F. Rizsszem szerű aggregátumokat tartalmazó SF képe
Hematológiai vizsgálatok: -Sejtszám:
manuális számlálás leukocyta/ μL SF norm: 50-100 nem -gyulladásos: 200-1.000 gyulladásos > 60.000 RA, Reiter, Kristály indukált ~350.000
-Sejtösszetétel:
norm:
24% Ly 48% Mo PMN 7%
gyulladásos:
PMN > 70%
septicus:
PMN > 95%
PMN leukocyták, kis lymfocyták, monocyták, eosinofilek, erythrociták macrophagok, synoviális, LE, csontvelő sejtek is előfordulhatnak
Synoviális folyadék kis lymfocitái
Reiter sejtek. PMN sejtet fagocitáló MN sejt
Gram festés
Kémiai és fizikai vizsgálatok I. - Viszkozitás, mucin próba A normál SF viszkózus folyadék, állagát hyaluronsav polimerek biztosítják Gyulladásos állapotokban a mucin polymerek fragmentálódnak Ecetsavas közegben a mucin polymerek és fragmentumok eltérő formában denaturáldnak,
Kivitelezés: 4 rész 2%-os ecetsav + 1 rész SF
Vizuális értékelés
Klinikai kémiai vizsgálatok Synoviális folyadékokban: -Összfehérje -Fehérje frakciók (electroforézis) -Glucose -Lactát
locális gyulladás, Ly-k fokozott glycolízise
-Hugysav -Enzimek:
szérumból és a synovium sejtjeiből erednek LDH
gyulladásos SF (M isoenzym)
ALP, ACP
helyi szintézis is van
SF minták előkezelése: hyaluronidáz enzimmel történő emésztés
Kórképek típusai és Synovialis Folyadékok Térfogat (térd) <1-3 ml
Nem-gyuladásos kórképek >3 ml
Gyulladásos kórképek >3 ml
Septicus állapot >3 ml
Viszkozitás
Magas
Magas
Alacsony
Változó
Szín
Színtelen,
Szalma szín, sárgás Sárga
Változó
Tisztasága
Átlátszó
Átlátszó
Áttetsző
Opálos
WBC (µL/SF)
<200
50–1000
1000–75,000
>100,000+
PMN (µL/SF)
<25%
<25%
>50%
>85%
Tenyésztés
Negativ
Negativ
Negativ
positiv
Mucin próba
+++ norm csapadék
+++ norm csapadék
++ közepes precipitáció
+ finom szemcsés precip
Glucose (éhgyomri)
~ szérum
~ szérum
<50 mg/dl >50 mg/dl (kisebb, mint a szérum) 2.2mmol/L infectiv arthritis: 1.1mmol/L
Vizsgálat
Normal
Immunkémiai vizsgálatok synoviális folyadékokban Eredete -Reumatoid faktor:
synovium plazma sejtjei termelik
-Immunoglobulinok:
synovium plasma sejtjei termelik
-Komplement fehérjék : gyulladásos synovium sejtjei, és serum CH50, C3 , C4 , komplement aktiváció, fragmentek, Se-SF minták paralell vizsgálata infornatívabb. Sy membrán perfúzió korrigálására: Se/SF albumin arány alkalmas
Fehérje Összfehérje (g/L) Elfor frakciók (%) Albumin α1-globulin α2-globulin β-globulin γ-globulin
Normál se 69
SF 9-22 56 8 7 11 18
Nem-gyulladásos Gyulladásos se 71
SF 32 57 6 8 12 16
se 66
SF 44 42 8 11 14 25
Mikroszkópos vizsgálatok -Fénymikroszkóp: ragociták (RA)
PMN sejtek citoplazmájában oliva színű zárványok: (Igl, RF, fibrin)
-Polarizációs mikroszkóp: kristályok elkülönítése (kettőstörés ) monosodium urát (MSU) tű szerű, 10-20 um hosszú , (fagocitált) calcium pirofoszfát (CPPD)
bot, romboid, prizmás formák
Köszvén
Chondrocalcinozis
-Fáziskontraszt mikroszkóp: Hydoxyapatit, PMN sejtekben intracellulárisan, (vagy extracell , korongok) koleszterin, steroid, calcium oxalát, lítium heparin, amyloid ( kongó vörös festés)
Monosodium urát kristály (MSU) kompenzált polarizált fényben
Immunkémiai vizsgálatok synoviális folyadékokban Eredete -Reumatoid faktor:
synovium plazma sejtjei termelik
-Immunoglobulinok:
synovium plasma sejtjei termelik
-Komplement fehérjék : gyulladásos synovium sejtjei, és serum CH50, C3 , C4 , komplement aktiváció, fragmentek, Se-SF minták paralell vizsgálata infornatívabb. Sy membrán perfúzió korrigálására: Se/SF albumin arány alkalmas
Fehérje Összfehérje (g/L) Elfor frakciók (%) Albumin α1-globulin α2-globulin β-globulin γ-globulin
Normál se 69
SF 9-22 56 8 7 11 18
Nem-gyulladásos Gyulladásos se 71
SF 32 57 6 8 12 16
se 66
SF 44 42 8 11 14 25
Mikroszkópos vizsgálatok -Fénymikroszkóp: ragociták (RA)
PMN sejtek citoplazmájában oliva színű zárványok: (Igl, RF, fibrin)
-Polarizációs mikroszkóp: kristályok elkülönítése (kettőstörés ) monosodium urát (MSU) tű szerű, 10-20 um hosszú , (fagocitált) calcium pirofoszfát (CPPD)
bot, romboid, prizmás formák
Köszvén
Chondrocalcinozis
-Fáziskontraszt mikroszkóp: Hydoxyapatit, PMN sejtekben intracellulárisan, (vagy extracell , korongok) koleszterin, steroid, calcium oxalát, lítium heparin, amyloid ( kongó vörös festés)
Monosodium urát kristály (MSU) kompenzált polarizált fényben
Fagocitált MSU kristály
Fagocitált corticosteroid kristályok
Koleszterin kristályok
Koleszterin kristályok
Fagocitált CCPD kristály
Köszönöm a figyelmet
