Rendeltetésszerű használat

TERMÉKINFORMÁCIÓ

Rendeltetésszerű használat Az A1cNow+® teszt a glikált hemoglobin százalékos (%A1C) szintjét határozza meg kapillárisokban (ujjbegy) vagy vénás teljes vérmintákban. A teszt a glikémiás szabályozás professzionális megfigyelésére való cukorbetegség esetén. Összefoglaló és magyarázat A vér magas glükóz szintje a proteinek fokozott glükozilálódásához vezet az egész testben, beleértve a hemoglobinokat is. A hemoglobin glükozilálódása megtörténhet az alfa és béta láncok amino termináljain, valamint más szabad amino csoporttal ellátott helyeken. A hemoglobin A lassú glükozilálódáson esik át, ami függ a vércukorszint átlagos szintjétől a vörös vérsejt kb. 120 napos életciklusa alatt. A leggyakoribb és legjellemzőbb fajtái a glikált hemoglobinnak az A és az A1C, amelyek körülbelül 36%-át teszik ki egy egészséges szervezet teljes hemoglobin tartalmának.1 Az A1c és a vércukorszint kölcsönhatása egy nagyon jó módszer a cukorbetegek szervezetében mért vércukorszint hosszú távú megfigyelésére. 2 Korábbi tanulmányokban - például a Diabetes Control and Complications Trial (DCCT) és a United Kingdom Prospective Diabetes Study (UKPDS) – a glikált hemoglobinokat az átfogó glikémiás szabályozás mérésére használták fel. Ezek és más tanulmányok kimutatták, hogy a szigorú glikémiás szabályozás kapcsolódik más, a diabetesszel kapcsolatos szövődményekhez (pl. látás, szívés érrendszeri problémák és veseelégtelenség).3 A National Glycohemoglobin Standardization Programot(NGSP) azért hozták létre, hogy biztosítsa a hemoglobin A1C (A1C) eredményeinek követhetőségét a DCCT számára. A kutatások közvetlen kapcsolat felfedezéséhez vezettek a %A1C és az átlagos vércukorszint (MBG) között. Minden 1%-os változás az A1C-ben megközelítőleg 30mg/dl-es változás az átlagos vércukorszintben. A formula, amelynek segítségével kiszámolható az átlagos vércukorszint az A1C szint ismeretében a következő: MBG = (31.7 × HbA1c) – 66.1. Átlagos plazma glükózra (MPG) váltáshoz az MPG = MBG × 1.11 képlet használatos. A1C-t különböző módokon lehet mérni és az utóbbi évtized alatt elérhetővé vált az ellátás helyén való vizsgálat. A helyi vizsgálatok jól használhatóak az orvosi rendelőkben és klinikákon, mert könnyen végrehajthatóak, nem szükségeltetnek laboratóriumi felszerelések és nagymértékben lerövidítik a mintavételezéstől az eredmény megjelenéséig tartó időt. Az azonnali eredmény a kezelését hatásfokát növeli. A vizsgálat elve A METRIKA cég kidolgozott egy technológiát MODM™ (Micro-Optical Detection Method) néven, amely egyesíti a mikroelektronika, az optika és a száraz reagens kémiai csíkok technológiáját egy újrafelhasználható, zárt, integrált kézi készülékben és egy egyszer használatos teszt kazettában. A vérminta higított keverékét a kazettára kell cseppenteni és az eredmény 5 perc múlva numerikus formában látható a készülék folyadékkristályos kijelzőjén. Mivel a készüléken nem találhatók gombok vagy kapcsolók, a készülék automatikusan bekapcsol amint a teszt kazettát beillesztették. Az A1cNow+ immunoassay-t és kémiai technológiát használ az A1C és a teljes hemoglobin mérésére. Amint hozzáadta a higított vérmintát, az anti-A1C antitestekhez konjugált kék mikroszemcsék elkezdenek mozogni a reagens csíkon. A csíkon felfogott kék mikroszemcsék száma tükrözi az A1C mennyiségét a mintában.

A teszt teljes hemoglobin (Hb) mérésénél a mintahígító átalakítja a Hb-t met-Hb-ra. A met-Hb reagens csíkon mért színének intenzitása arányos a minta teljes hemoglobin koncentrációjával. Az eredményt %A1C-ben adja meg (A1C ÷ total Hb × 100). Az A1cNow+ kalibrálása vérminta sorozat által történik, melyet a National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) minősített laboratóriuma minősített NGSP referencia alapján. Az ezekhez a mintákhoz használt teljes Hb kalibrációs értékeket laboratóriumi Hb analizátorral állapították meg (HemoCue Hemoglobin Test System, HemoCue, Inc., Lake Forest, CA). Az A1CNow+ teszt kalibrációja így megfelel az NGSP és egy NGSP Certified Network referencia-módszerének. Minta gyűjtése és tárolása Megjegyzés: nincs szükség éheztetésre vagy speciális diétára. Ujjbegy Az A1cNow+ teszthez 5 mikroliternyi (µL) teljes vér (1 csepp) szükséges. Ujjbegyből való vérvételhez bármilyen vérvételi berendezés alkalmazható. Alkoholos fertőtlenítés esetén a szúrás előtt győződjön meg az ujj szárazságáról. Véna punkció / mintavétel a vénás méréshez A legjobb eredmények elérése érdekében a vénás vért herapinozott csőbe kell vételezni. EDTA csövek használatakor a %A1C érték akár 0.5%-al is elcsúszhat negatív irányba. A vérmintákat jól össze kell rázni és szobahőmérsékleten tesztelni. A vénás vérminták 8 órán át használhatóak szobahőmérsékleten tárolva, míg hűtőben akár 14 napig is. Figyelmeztetések és óvintézkedések 1. Csak in vitro diagnosztikai célokra használható. 2. Figyelmesen olvassa el a szakmai eljárási útmutatót (lásd lentebb,) amely biztosítja a megfelelő vizsgálati pontosságot. 3. Ha hűtött mintával dolgozik, tegye lezárt tasakba és várja meg míg felmelegszik szobahőmérsékletre. 4. Amennyiben a kézi készüléken vagy a teszt kazettán repedést, törést talál, ne használja. 5. A teszt kazettát ne használja, ha a tasakján sérülést lát. 6. A vérmintát a kazetta kibontásától számított 2 percen belül csöppentse rá. 7. Az A1cNow+ rendszer minden alkotóeleme biológiailag veszélyes. Kezelje biológiailag veszélyes hulladékként. 8. A mintahígító készlet hígítási puffere ferricianidot tartalmaz egy pufferelt mosószeres oldattal. Ne nyelje le! Ha bőrrel vagy szemmel érintkezik, mossa ki alaposan sok vízzel. 9. Ne használja többször a teszt kazettákat vagy a mintahígító készleteket. Ne használja a készüléket más típusú kazettával vagy mintahígító készlettel! A berendezés tárolása és stabilitása •

A teszt kazetták, a kézi készülék és a mintahígító készletek a használattól számított három hónapig tárolhatók szobahőmérsékleten (18-28°C). Amennyiben nem használta ezeket 3 hónapon belül, dobja ki.

• • •

A teszt kazetták, a kézi készülék és a mintahígító készletek felhasználhatóak a dobozon vagy a csomagoláson jelzett lejárati ideig, abban az esetben, ha hűtve (2-8°C) tárolja. Minden komponenst tároljon a lezárt tasakjában, amíg fel nem használja őket. Ha le vannak hűtve, használat előtt győződjön meg arról, hogy szobahőmérsékletre melegedtek. Ne keverje össze a készüléket más típusú tasakokkal.

Csomag tartalma • •

•

•

A1CNow+ kézi készülék (1db) A1CNow+ teszt kazetta (10 db). Minden teszt kazettában a következő vegyszerek találhatók: HbA1c antitest, antigén konjugátumok amelyek az antitestekhez és membránokhoz kapcsolódnak. Mintahígító készlet (10 db), egyenként: o Mintavételező (1db) 0,37ml ferricianid pufferelt mosószeres oldattal o Vérminta gyüjtő (1db) Kézikönyv (1db)

Szükséges, de nem biztosított tartozékok • • • • •

Ujjbegyből vett minta esetén: vérvételi tű vagy más vérvételező készülék Vénás minta esetén: lehetőség szerint heparinozott cső Géz lap vagy vattapamacs Kötszer 96%-os alkohol, vagy más színtelen bőrfertőtlenítő szer

Eredmény értelmezése A %A1C tükrözi az elmúlt három hónap glükóz szabályozását. Az eredmény 50%-a az elmúlt 30 nap, 25%-a az elmúlt 30-60 nap és a maradék 25%-a az elmúlt 60-120nap alapján alakul ki.1 A vizsgálati módszertől függően laboratóriumi tesztekkel kimutatták, hogy az A1C teszt referenciatartománya 4.0-6.5% A1C, valamint 6-9% a jól vagy mérsékelten kezelt diabetes esetén.1 A rosszul kezelt diabetes esetén ez a szint akár 20% is lehet.8 Az American Diabetes Association (ADA) legutóbbi ajánlása azt a célt határozza meg a kezelés során, hogy a betegekben mért szint átlagosan 7% alatt legyen és egyénenként ez a lehető legközelebb legyen a normális határértékhez (kevesebb mint 6%) anélkül, hogy jelentős hipoglikémia lépne fel. Hibaelhárítás Lásd az alábbi táblázatot az A1CNow+ üzemeltetési és hibakódjainak leírásához. Üzenet

Leírása és megoldása

OR 1

A vérmintában lehet, hogy túl kevés hemoglobin van (kevesebb, mint 20% hematokrit), nem volt elég vér vagy a vér nem volt eléggé összerázva a mintavételezőben.* Érdemes ellenőrizni a hematokrit szintet egy másik módszerrel.

OR 2

A vérmintában lehet, hogy túl sok hemoglobin van (több, mint 60% hematokrit) vagy túl sok vért adott hozzá.* Érdemes ellenőrizni a hematokrit szintet egy másik

módszerrel. OR 3

A vérmintában vagy túl kevés A1C található vagy túl kevés vért adott hozzá.

OR 4

A vérmintában vagy túl sok A1C található vagy túl sok vért adott hozzá.

OR 5

A készülék hőmérséklete 18°C (64°F) alatt van. Ismételje meg a mérést szobahőmérsékleten (18-28°C).

OR 6

A készülék hőmérséklete 28°C (82°F) fölött van. Ismételje meg a mérést szobahőmérsékleten (18-28°C).

<4.0

A %A1C kevesebb, mint 4%.

>13.0

A %A1C több, mint 13%.

QC 2

Akkor jelentkezik, ha a kazettához már adtak vérmintát mielőtt a készülékbe helyezték volna. Miután hozzáadta a mintát már ne távolítsa el és helyezze vissza a kazettát.*

QC 6

A minta az „SMPL” szöveg megjelenése előtt lett hozzáadva. Ez levon egy tesztelési lehetőséget készülék kijelzőjén. Távolítsa el és dobja ki a kazettát. A hiba elkerülése érdekében ne adja hozzá a mintát, amíg látszik a „WAIT” szöveg és meg nem jelenik az „SMPL” szöveg.

QC 7

A kazetta minta nélkül maradt a készülékben hosszabb ideig, mint az „SMPL” szöveg megjelenésétől számított 2 perc. Ez levon egy tesztelési lehetőséget készülék kijelzőjén. Dobja ki a kazettát és illesszen be egy újat amint készen áll, hogy a mintát hozzáadja.

QC 30-33

A készülék nem tudott érvényes adatot leolvasni. A mintavételezőt távolítsa el a minta hozzáadását követően és ne érjen a készülékhez, amíg a teszt fut.*

QC 50 to 51 QC 55 to 56

Nem megfelelő minta volt a kazettára helyezve. A hiba elkerülése érdekében a vér kollektort teljesen helyezze a mintavételezőbe és rázza össze azonnal.*

All other QC codes

A minőség ellenőrzés nem felelt meg. Hívja a forgalmazó vonalát a 06 1 381 0800 számon. A tesztet meg kell ismételni egy másik teszt kazettával és mintahígító készlettel.

E1 to E99

A készülék végzetes hibába ütközött. Hívja a forgalmazó vonalát a 06 1 381 0800 számon.

*Óvatosan ismételje meg a tesztet egy másik teszt kazettával és mintahígító készlettel.

Korlátozások • • •

•

Ez a teszt nem a diabetes szűrésére vagy diagnosztizálására való. Abban az esetben, ha a páciensnek magas a Hemoglobin F, Hemoglobin S, Hemoglobin C vagy más hemoglobin variánsa, akkor az A1CNow rendszer rossz eredmény hozhat. Bármilyen ok, ami csökkenti a vörösvértestek túlélését (pl.: hemolitikus anémia vagy más hemolitikus megbetegedés, terhesség, közelmúltbeli jelentős vérveszteség stb.) csökkenteni fogja a vörösvértestek glükóz felvételét. Ez a %A1C csökkenését eredményezi. A %A1C eredmények nem megbízhatóak krónikus vérszegény valamint ennek következtében változó vörösvértest élettartam esetén. Magas értékű reumás faktor alacsony eredményt okoz. Ilyenkor ajánlott az A1C mérése más alternatív módszerrel.

• • •

Ez a teszt nem helyettesíti a rendszeres orvosi vizsgálatot és a vércukorszint mérést. Mint minden laboratóriumi eljárás esetében, a klinikai kép és a teszt eredménye közötti nagy eltérés további kivizsgálásokat indokol. EDTA csövek használatakor a %A1C akár 0.5 %A1C-vel elcsúszhat negatív irányba.

Vezérlés Minden A1CNow+ készülék több mint 25 kémiai valamint elektronikus minőségellenőrzést végez, beleértve a hardware-es és software-es hibákat (pl.: hibás kazetta behelyezés, programozási hibák) és potenciális reagens csík problémák (pl.: elégtelen minta mennyiség, érvénytelen számítások). A készülék hibakódot ad vissza, ha ezek közül a minőségellenőrzések közül valamelyik nem megy át. Ha külső minőség-ellenőrzést kíván hívja a forgalmazó vonalát a 06 1 381 0800 számon. A következő esetekben ajánlott a külső minőség-ellenőrzés: 1. Amennyiben laboratóriumi vagy szoba körülmények 28°C felett voltak 2. A tesztelési személyzet ki- vagy átképzésénél 3. Mindenesetben, amikor az A1CNow+ eredmények nem egyeznek más klinikai eredményekkel vagy tünetekkel. Teljesítmény Várható értékek (nem diabeteses populációban) A várható normális %A1C tartományt az A1CNow rendszer esetében 118 különböző valószínűsítetten nem diabeteses egyén vérmintájával állapították meg. A populáció 3 férfit és 85 nőt foglalt magában, 19től 76 évesekig vegyesen, az átlagéletkor 43 volt. Az átlagos eredmény 5.2% ±0.71% (1SD) volt. A szélsőértékek 3.9% és 6.5% voltak. Ezek az eredmények megközelítik a szakirodalmakban leírtakat. Linearitás Kutatásokat folytattak annak érdekében, hogy kiértékeljék a linearitást az A1CNow rendszer dinamikatartományában. Magas illetve alacsony %A1C szintű klinikai mintákat 9 különböző sűrűségű készítményre higítottak. Ezeket a mintákat legalább 5-szörös ismétlésben megvizsgálták (n=5). A mért eredményeket összevetették a várt eredményekkel és a százalékos visszanyerés szempontjából elemezték. A teszt lineáris 4 és 13% közötti %A1C szint esetén és megbízható eredményeket mutat 20 és 60% közötti hematokrit esetén. Interferencia vizsgálata/specifikusság Tanulmányokat végeztek, hogy értékeljék számos recept nélkül kapható terápiás szer valamint orális antihiperglikémiás szerek hatását, melyeket gyakran alkalmaznak a kettes típusú diabetes kezelésekor. Két különböző %A1C szintet (egy magas és alacsony; körülbelül 4 és 10%) teszteltek. Lásd a táblázatot lentebb. Interferent

Vizsgált koncentráció

Bilirubin (konjugálatlan)

200 mg/dL

Triglicerid

3000 mg/dL

Hemoglobin

500 mg/dL

Acetaminofen

80 µg/mL

Aszkorbinsav

5 mg/dL

Ibuprofen

120 µg/mL

Acetilszalicil sav

1 mg/dL

Gliburid (glibenklamid)

240 ng/mL

Metformin (1.1-dimenthylbiguanide HCL) 25 µg/mL

A kutatások kimutatták, hogy a módosult hemoglobinok nem hatottak zavaró tényezőként, beleértve a labilis glikált hemoglobint is, a két különböző szintű %A1C teszt eredményére (magas és alacsony; kürölbelül 5 és 11%). A módosult hemoglobinok és a szint melyen értékelték a következők voltak: labilis hemoglobin 1400 mg/dL glükózzal, karbamilált hemoglobin 5 mM végső sűrűségű kálium cianáttal és acetilált hemoglobin 14 mM végső sűrűségű acetilszalicil savval. Vegyes eredmények születtek a magas szintű Hemoglobin F, Hemoglobin S és Hemoglobin C tesztelése után. Az eredmények nem megbízhatóak azoknál a betegeknél, akiknél magas szintű a módosult hemoglobinok száma. Pontosság Precíziós vizsgálatra egy speciális protokoll alatt került sor. Eszerint 2 teljes vérmintát, egy körülbelül 6 %A1C (alacsony) és egy körülbelül 9 %A1C (magas) mintát teszteltek 20 napon keresztül naponta négyszer, összesen 80 vizsgálatot végeztek mintánként. A pontatlanság (mind napi mérések és a napközi mérések esetén) 3.00% CV volt az alacsony mintánál és 4.02% a magas mintánál. Ez a teljesítmény megfelel az NGSP elvárásainak. A pontossági vizsgálatokat 189 diabeteses és nem diabeteses egyénen végezték. Minden egyénen elvégezték az A1CNow+ tesztet ujjbegyből vett vérrel és összehasonlították egy vénás vérrel tesztelt másik, NGSP által hitelesített módszerrel. Az eredményeket összehasonlították egymással. Az A1C eredmények 5.0 %A1C és 12.8 %A1C között mozogtak, átlagosan 7.3 %A1C. A regresszós egyenes értékelését legkisebb négyzetek lineáris regressziójával, torzítás számítással és Bland-Altman határérték számítással végezték. Az eredmények az alábbi táblázatokban találhatók: Összehasonlító vizsgálat ujjbegyből vett mintára (Az NGSP által hitelesített módszer a Tosoh A1c 2.2 Plus) n

189

Eltérés 6% A1Cnél (%-os különbség) 5.89 (-1.83%)

meredekség 1.02

Eltérés 7% A1Cnél (%-os különbség) 6.91 (-1.29%)

y-metszet

-0.23 Eltérés 9% A1Cnél (%-os különbség) 8.95 (-0.56%)

„r”

0.95

Átlagos %-os különbség

-1.23%

Az eredmények 99%-os pontosságot tükröznek az A1CNow+ ujjbegyből vett minta használatakor. Ez általánosan azt jelenti, hogy egy valójában 7 %A1C-s érték 6.9 %A1C-nek felel meg. Az eredmények -1.0 %A1C-től +0.8 %A1C-ig eltérhetnek a valóstól. Ez p<0.05 szignifikancia értéknek felel meg a Bland-Altman egyenesre vonatkoztatva. Összehasonlító vizsgálat vénás mintára (Az NGSP által hitelesített módszer a Tosoh A1c 2.2 Plus)

Egy független tanulmányban 50 vénás mintát gyűjtöttek diabeteses betegekből és mindegyik mintát kétszer teszteltek három különböző típusú teszttel (összesen hatot, két párhuzamos tesztet ugyanazon oldószerrel). A regresszós egyenes értékelését legkisebb négyzetek lineáris regressziójával, torzítás számítással és Bland-Altman határérték számítással végezték. n

2.99

meredekség 1.023

Eltérés 6% A1Cnél (%-os különbség) 5.77 (-3.83%) Eltérés 7% A1Cnél (%-os különbség) 6.80 (-2.86%)

y-metszet

-0.361 Eltérés 9% A1Cnél (%-os különbség) 8.84 (-1.78%)

„r”

0.90

Átlagos %-os különbség

-2.82%

Az eredmények 97%-os pontosságot tükröznek az A1CNow+ vénás minta használatakor. Ez általánosan azt jelenti, hogy egy valójában 7 %A1C-s érték 6.8 %A1C-nek felel meg. Az eredmények -1.3 %A1C-től +0.9 %A1C-ig eltérhetnek a valóstól. Az A1C rendszer mind ujjbegyből vett (kapilláris) mind a vénás vérmintához használható. Várt teljesítmény laboratóriumokban Klinikai teszteket végeztek több mint 180 (többnyire diabeteses) képzetlen emberrel. Az alanyok elolvasták a használati útmutatót majd elvégeztek magukon egy A1CNow+ tesztet. Minden egyéntől vénás mintát vettek majd egy az NGSP által hitelesített laboratóriumi módszerrel megmérték a %A1Ct. Az eredményeket később összehasonlították. Képzetlen felhasználó által működtetett A1CNow+ és egy az NGSP által hitelesített módszer n

1.88 Eltérés 6% A1Cnél (%-os különbség) 6.02 (+0.33%)

meredekség 0.99 Eltérés 7% A1Cnél (%-os különbség) 7.01 (+0.14%) y-metszet

0.08 Eltérés 9% A1Cnél (%-os különbség) 8.99 (-0.11%)

„r”

0.93 Átlagos %-os különbség

+0.12%

Az eredmények azt mutatták, hogy képzetlen felhasználók azonos pontossággal tudják használni az A1CNow+ tesztet, mint a képzettek. Referenciák 1. Buris, C.A., Ashwood, E.R. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd Edition, W.B. Saunders Co., 1999. 2. Nathan, D.M., et al. The clinical information value of the glycosylated hemoglobin assay. N Engl J Med 1984; 310; 341-346. 3. The Diabetes Control and Complications Trial Research Group. The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of longterm complication in insulin-dependent diabetes melllitus. N Engl J Med 1993; 329; 977-986. 4. American Diabetes Association. Standards of medical care for patients with diabetes mellitus. Diabetes Care.1999; 22 (suppl 1): S32–S41. 5. Fogh-Anderson, N., D’Orazio, P. Proposal for standardizing direct-reading biosensors for blood glucose. Clin Chem 1998; 44(3); 655-659. 6. MLO Supplement. Point-of-Care Testing, 1992.

7. Cagliero, E., Levina, E.V., Nathan, D.M. Immediate feedback of A1C levels improves glycemic control in type 1 and insulin-treated type 2 diabetic patients. Diabetes Care 1999; 22(11): 1785-1789. 8. Goldstein, D.E., Little, R.R., Wiedmeyer, H.M., et al. Glycated hemoglobin: Methodologies and clinical applications. Clin Chem 1986; 32: B64-B70. 9. American Diabetes Association: Clinical Practice Recommendations 2006. Diabetes Care, 2006; 29 (Suppl. 1). Nemzetközi szimbólumok Gyártó tesztre elegendőt tartalmaz In vitro diagnosztikai orvosi ellátás

Meghatalmazott képviselője az Európai Közösségben Hűtve tárolja (2-8°C, 36-46°F)