Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
OZMÓZIS, MEMBRÁNTRANSZPORT Vig Andrea PTE ÁOK Biofizikai Intézet 2014.10.28.
ÁTTEKINTÉS – DIFFÚZIÓ BROWN-MOZGÁS a részecskék rendezetlen hőmozgása
DIFFÚZIÓ a részecskék egyenletlen (inhomogén) eloszlásának következtében a részecskék transzportja (Brown mozgás) valósul meg a magasabb koncentrációjú régiók felől az alacsonyabb koncentrációjú régiók felé amíg a részecskék egyenletes eloszlást (homogén) nem mutatnak (anyagi rendszerek önként elmozdulnak a rendezettebb állapotok felől a kevésbé rendezettek irányába (ez az entrópia növekedés tétele))
FICK I. TÖRVÉNYE (térbeli leírás) (-> Onsager-féle lineáris összefüggés) Onsager-egyenlet: J=XL ∆𝒄 Transzportfolyamatok általános leírása Az extenzív fizikai mennyiség áramsűrűsége (J) 𝑱 = −𝑫 egyenesen arányos az intenzív fizikai mennyiség (X) ∆𝒙 gradiensével. DIFFÚZIÓS EGYÜTTHATÓ: Stokes-Einstein összefüggés 𝒌𝑻 𝑫= 𝟔𝝅𝜼𝒓 FICK II. TÖRVÉNYE (térbeli & időbeli leírás)
∆𝑐 ∆( ) ∆𝑐 = 𝐷 ∆𝑥 ∆𝑡 ∆𝑥
1
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE A KONYHÁBAN Kísérlet: tegyünk egy száraz salátalevelet vízbe
előtte
Osmosis in the k itchen.mp4
utána (3-4 óra)
Megfigyelés: a salátalevél nagyobb és újra friss lesz
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE Kísérlet: tegyünk egy tojást kukorica szirupba, majd vízbe
VÍZ
KUKORICA SZIRUP
Megfigyelés: a tojás zsugorodni kezd előtte
Megfigyelés: az összezsugorodott tojás visszanyeri eredeti méretét, sőt egyre nagyobb lesz
utána
előtte
utána
Kísérlet: kisméretű, féligáteresztő zsákot töltsünk meg cukoroldattal, majd helyezzük vízzel teli tartályba cukor oldat víz
előtte
utána
Megfigyelés: a zsák megduzzad, a benne lévő cukoroldat felhígul
2
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
Mi a különbség a „tinta” és a „saláta/tojás/cukor” kísérlet között?
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE 1. HATÁROLÓ FAL (ld. Fick-kísérlet) x (távolság)
folyadék→gáz
NINCS TRANSZPORT
3
04/11/2014
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE
t (idő)
Biofizika I. - OZMÓZIS
2. NINCS HATÁROLÓ FAL x (távolság)
szabad DIFFÚZIÓ részecskék egyenletes eloszlása
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE 3. SPECIÁLIS HATÁROLÓ FAL
korlátozott DIFFÚZIÓ: OZMÓZIS kisebb molekulák: egyenletes eloszlás diffúzió révén nagyobb molekulák: az „eredeti” térrészben maradnak
4
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE 3. SPECIÁLIS HATÁROLÓ FAL SZEMIPERMEÁBILIS=FÉLIGÁTERESZTŐ – „szűrő” az oldószer kis molekuláit átengedi, de az oldott anyag nagy molekuláit nem PÓRUSMÉRET → SZELEKTIVITÁS pl: állati eredetű hártyák, sejtmembrán, lyukacsos agyaglemez, celofán
szemipermeábilis membrán
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE - fal típusa összefoglalás határolófal típusa
anyag transzport
van: átjárhatatlan nincs
nincs szabad diffúzió korlátozott diffúzió: van: FÉLIGÁTERESZTŐ OZMÓZIS OZMÓZIS: diffúzió útján történő egyirányú anyagáramlás féligáteresztő hártya + koncentrációkülönbség (az oldott anyag minősége az ozmózis szempontjából közömbös)
5
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
AZ OZMÓZIS JELENSÉGE cukoroldat
𝑱𝑲𝑰 ≫ 𝑱𝑩𝑬
𝑱𝑲𝑰 = 𝑱𝑩𝑬
J KI
J KI
J BE
J BE
szemipermeábilis membrán
víz
oldószer
h
𝒑𝒉 = 𝝆𝒈𝒉 oldott anyag
- koncentráció különbség az oldott anyagra nézve - féligáteresztő hártya: oldószer számára átjárható az oldott anyag számára nem
oldószer áramlik a féligáteresztő hártyán keresztül - az oldószer + oldott anyag térfogata növekszik HIDROSZTATIKUS NYOMÁS (ph) - az oldószer áramlása lassul
r: sűrűség h: folyadékoszlop magassága g = 10 m/s2
- dinamikus egyensúly OZMOTIKUS EGYENSÚLY
AZ OZMÓZIS-NYOMÁS
J KI
J KI
J BE
J BE
OZMÓZIS-NYOMÁS az a nyomás, amelyet a tiszta oldószerrel féligáteresztő hártyán át kapcsolatban lévő oldatra kell kifejteni ahhoz, hogy dinamikus egyensúly jöjjön létre, azaz leálljon az ozmózis az a nyomás, ami az oldószernek a nettó áramlását megakadályozza 𝒑𝒉 = 𝒑ozmózis
𝒑ozmózis = 𝝆𝒈𝒉
6
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
AZ OZMÓZIS-NYOMÁS VAN’T HOFF-TÖRVÉNY 2.
1.
𝒑ozmózis ∗ 𝑽 = 𝒏𝑹𝑻 𝒏 𝒑ozmózis = 𝑹𝑻 → 𝑽
𝒑ozmózis = 𝒄𝑹𝑻 cpiros
p1-p2=pozmózis=
pV=nRT
𝑛𝑝𝑖𝑟𝑜𝑠 𝑅𝑇 𝑉
p1=
nkék1=nkék2
𝑛𝑝𝑖𝑟𝑜𝑠+𝑛𝑘é𝑘1 𝑅𝑇 𝑉
p 2=
𝑛𝑘é𝑘2 𝑅𝑇 𝑉
𝒑ozmózis ~𝒄 az ozmózis-nyomás egyenesen arányos az oldat koncentrációjával
AZ OZMÓZIS-NYOMÁS OZMÓZIS során a részecskék transzportja az alacsonyabb koncentrációjú régiók (oldott anyagra nézve!!!!!) (alacsony ozmózis-nyomás) felől a magasabb koncentrációjú régiók (magas ozmózis-nyomás) felé valósul meg alacsony ozmózis nyomás felől→magas ozmózis nyomás felé mindig a töményebb oldat hígul fel OZMÓZIS
1
oldószer
2
OLDOTT ANYAG 𝒄𝟏 < 𝒄𝟐 𝒑𝟏o𝐳𝐦ó𝐳𝐢𝐬 < 𝒑𝟐ozmózis oldószer + oldott anyag
7
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
AZ OZMÓZIS-NYOMÁS
AZ OLDATOK OSZTÁLYOZÁSA AZ OZMÓZIS-NYOMÁS ALAPJÁN
HYPERTÓNIÁS nagyobb koncentráció
c > cx
nagyobb az ozmózisnyomás
p > px
IZOTÓNIÁS
HYPOTÓNIÁS
azonos koncentráció
kisebb koncentráció
c = cx
c < cx
azonos ozmózis-nyomás
kisebb az ozmózis-nyomás
p = px
p < px
emberi szervezet sejtjeinek belseje, vér: 0.87 % (0.15 M) NaCl fiziológiás sóoldat 3.8 % Na-citrát 5.5 % (0.3 M) glükóz
x: referencia
VÖRÖSVÉRTESTEK KÜLÖNBÖZŐ KÖRNYEZETBEN HYPERTÓNIÁS (töményebb: 10% NaCl)
IZOTÓNIÁS (0.87 % NaCl)
pkivül > pbelül
pkivül = pbelül
nettó vízKIáramlás
NINCS nettó vízáramlás
HYPOTÓNIÁS (hígabb: 0.01% NaCl)
pkivül < pbelül
nettó vízBEáramlás
8
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
VÖRÖSVÉRTESTEK KÜLÖNBÖZŐ KÖRNYEZETBEN
HYPOTÓNIÁS
IZOTÓNIÁS
HYPERTÓNIÁS
Az ozmózis szerepe a növényi sejtek esetében NÖVÉNYI SEJTEK KÜLÖNBÖZŐ KÖRNYEZETBEN
HYPERTÓNIÁS
nettó víz KIáramlás PLAZMOLÍZIS a sejtplazma vizet veszít, a sejthártya elválik a sejtfaltól
IZOTÓNIÁS
NINCS nettó vízáramlás
HYPOTÓNIÁS
nettó víz BEáramlás TURGOR NYOMÁS a sejtplazma vizet vesz fel, a sejthártya nekipréselődik a sejtfalnak
9
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
AZ OZMÓZIS ORVOSI ALKALMAZÁSAI 1. INJEKCIÓ, INFÚZIÓ a hatóanyag, gyógyszerek fiziológiás sóoldatban vannak feloldva (izotóniás környezet /a szervezet sejtjeinek/)
2. ÖDÉMA, DUZZANATOK KEZELÉSE
vízkiáramlás
fokozott folyadék felhalmozódás a szövetekben dextránoldat / keserűsó (MgSO4-oldat)-alapú kezelés (hypertóniás környezetet hoz létre az ödémás területhez képest→vízkiáramlás az ödémás területről→csökken a duzzanat) hypertóniás
3. HASHAJTÓ SÓK (SZÉKREKEDÉS KEZELÉSE)
víz beáramlás nehezen szívódnak fel a vastagbélben (hypertóniás környezetet hoznak létre a vastagbélben →vízbeáramlás a vastagbélbe →béltartalom hígulása
hypertóniás
AZ OZMÓZIS ORVOSI ALKALMAZÁSAI 4. DIALÍZIS különböző részecskéket egymástól elválaszthatunk féligáteresztő hártyákon keresztül megvalósuló ozmózissal a féligáteresztő hártya pórusméretével szabályozható milyen molekulaméret-határig engedjen át
dialízis zsák szemipermeábilis hártya
koncentrált oldat
t=0s
t
10
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
AZ OZMÓZIS ORVOSI ALKALMAZÁSAI 4.1. HEMODIALÍZIS
súlyos vesebetegek kezelésére alkalmazott eljárás a vérben felhalmozódott oldható, a vese számára toxikus salakanyagok eltávolítása (pl. vízben oldható fehérjelebontási termékek, sejtmérgek, egyéb salakanyagok eltávoznak a vízzel együtt, plazmafehérjék, vérsejtek a vérben maradnak) Művese-berendezés működési elvének sematikus ábrája hosszú cső alakú hártya (membrán): celofán kezelés időtartama: 4-8h
fehérjebontási termékek sejtmérgek salakanyagok
dializálóoldat folyamatos cseréje ionkoncentráció, fémionszennyeződések ellenőrzése
ÖSSZEFOGLALÁS
• az ozmózis jelensége • van’t Hoff törvénye • az ozmózis-nyomás és gyakorlati jelentősége (vvt, orvosi alkalmazások)
11
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
MEMBRÁNSZERKEZET, MEMBRÁNTRANSZPORT
MEMBRÁNSZERKEZET Biológiai membránok (citoplazma, sejten belüli membránféleségek) közös jellemzője: Nem kovalens kötésekkel összetartott lipidekből és fehérjékből állnak. Fő komponens: foszfolipid, amfipatikus molekulák Foszfolipid: diglicerid + foszfát csoport + szerves molekula
12
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
Membrán-modellek Amerikai fizikai kémikus Lipid-oldékony anyagok gyorsan bejutnak a sejtbe. 1932 – Nobel díj Zsírok egyrétegű elrendeződése a víz felszínén. Benzin-lipid keverék, a benzin elpárolgása után molekuláris lipid film keletkezik Benzin-oldékony lipidek két rétegből álló filmet alkotnak víz felszínén. 1925 Kettős lipidréteg A fehérjék integráns részei a sejt membránnak. A lipid bilayert kívül-belül proteinek rétege fedi. Részben magyarázza a proteinek, cukrok, ionok és más hidrofil anyagok gyors átjutását. Elektronmikroszkóp felfedezése. plazmamembránnal burkoltak. „Unit-membrane”modell.
A
sejtek
1972 „Folyékony mozaik” Proteinek mozaikos modell elrendeződése a membránban. Egyes proteinek átérik a membránt, transzmembrán proteinek. Dr. habil. Kőhidai László
FLUID MOZAIK MEMBRÁN MODELL
Singer – Nicolson 1972
vvt. membrán
http://www.youtube.com/watch?v=ZP3i5Q9XfTk http://www.youtube.com/watch?v=oq4Um1oV4ag
13
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
SEJTMEMBRÁN SZERKEZETE Fluiditás: 1/ η
MEMBRÁNFEHÉRJÉK Meghatározzák a membránok funkcióit. Csoportosítás: Integrális membránfehérjék (transzmembrán) – hidrofób maghoz kapcsolódnak, vagy átívelik a membránt. Perifériális membránfehérjék – nem közvetlenül, hanem az integrális fehérjéken keresztül kapcsolódnak a membránhoz. Glikoproteinek – ezek az oligoszacharidok az extracelluláris oldalon kapcsolódnak a membránfehérjékhez. Glikozil–foszfatidil–inozitol (GPI) – kovalensen kötődnek a membránlipidekhez.
Szerep: Ioncsatornák Receptorok Jelátvitel
14
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
DIFFÚZIÓ A SEJTMEMBRÁNON KERESZTÜL EXTRACELLULÁRIS TÉR
ANYAG TRANSZPORT LIPID KETTŐSRÉTEG MEMBRÁNFEHÉRJÉK
víz apoláros molekulák ionok monoszaharidok aminosavak metabolitok
INTRACELLULÁRIS TÉR citoplazma
Szelektív anyagcsere
más mechanizmus: exocitózis és endocitózis
DIFFÚZIÓ A SEJTMEMBRÁNON KERSZTÜL
A TRANSZPORTFOLYAMATOK CSOPORTOSÍTÁSA
I. SZÁLLÍTÁSI MECHANIZMUS SZERINT KÖZVETÍTŐ NÉLKÜL
KÖZVETÍTŐ SEGÍTSÉGÉVEL
PASSZÍV DIFFÚZIÓ
FACILITÁLT DIFFÚZIÓ karrier fehérjék karrier fehérjék
ioncsatorna
1.
2.
3.
PASSZÍV TRANSZPORT
4.
AKTÍV TRANSZPORT
II. ENERGIAIGÉNY SZERINT
15
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
DIFFÚZIÓ A SEJTMEMBRÁNON KERESZTÜL
1. PASSZÍV DIFFÚZIÓ Passzív transzport Közvetítő nélkül iránya: ELEKTROKÉMIAI POTENCIÁL GRADIENS irányába kémia potenciál gradiens (koncentráció) elektromos potenciál gradiens (töltés) diffúzió sebessége: Fick törvények közvetítő: nincs
Dm: nagyságrenddekkel kisebb lehet, mint a vizes fázisra jellemző!
energiaigény: nincs például: hidrofób molekulák: O2, N2 kis méretű, poláris molekulák: CO2, víz, alkohol, urea, glicerin glükóz, szacharóz
DIFFÚZIÓ A SEJTMEMBRÁNON KERESZTÜL
2. FACILITÁLT DIFFÚZIÓ Passzív transzport Közvetítő segítségével: IONCSATORNÁN KERESZTÜL iránya: kémiai vagy elektrokémiai potenciál gradiens irányába diffúzió sebessége: gyorsabb, mint a Fick törvények által meghatározott, de telíthető (közvetítő számától függ) közvetítő: IONCSATORNA-FEHÉRJE transzmembrán fehérjék (pórusos térszerkezet) zárt / nyitott állapot: nincs transzport / transzport nyitott/zárt állapot szabályozása: mechanoszenzitív (mechanikai hatás: nyújtás, nyomás) feszültségfüggő (a membrán két oldala közötti feszültségkülönbség ld: akciós potenciál) receptor-, vagy ligandvezérelt szelektivitás: az ionok töltése és mérete szerint energiaigény: nincs
16
Biofizika I. - OZMÓZIS
04/11/2014
DIFFÚZIÓ A SEJTMEMBRÁNON KERESZTÜL
3. FACILITÁLT DIFFÚZIÓ Passzív transzport Közvetítő segítségével: KARRIER FEHÉRJÉK iránya kémiai vagy elektrokémiai potenciál gradiens irányába diffúzió sebessége: gyorsabb, mint a Fick törvények által meghatározott közvetítő: KARRIER-FEHÉRJE (szállító, transzporter) az ionokat, molekulákat specifikusan kötik elősegítik annak a membránon való átjutását energiaigény: nincs
DIFFÚZIÓ A SEJTMEMBRÁNON KERESZTÜL
4. FACILITÁLT DIFFÚZIÓ Aktív transzport Közvetítő segítségével: KARRIER FEHÉRJÉK iránya: kémiai, vagy elektrokémiai potenciál gradienssel ELLENKEZŐ irány ! ENERGIABEFEKTETÉS közvetítő: TRANSZPORTER uniporter szimporter/antiporter
uniporter
szimporter
antiporter
energiaigény: van ATPáz transzporter (ATP hidrolízise) foto transzporter (fény energiája) csatolt transzporter (másik transzport energiája) például: Na+-K+ pumpa
17