METHAMPHETAMINE 008Z112 Jednostupňový test pro kvalitativní záchyt Methamphetaminu (Pervitinu) v lidské moči In Vitro diagnostikum pro profesionální použití. ÚČEL POUŽITÍ Screeningový test DrugControl METHAMPHETAMINE je rychlý imunochromatografický test pro kvalitativní záchyt d-Metamfetaminu a příbuzných sloučenin v lidské moči při koncentracích cut-off, uvedených níže : TEST
Methamphetamine
Sloučenina D-Methamphetamine 3,4-Methylenedioxymethamphetamine L-Methamphetamine p-Hydroxymethamphetamine Mephentermine
Ident.č. [-] [-] [537-46-2] [-] [100-92-5]
Cut Off [ng / mL] 1000 2000 8000 30000 50000
Tento test poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. Pro potvrzení nálezu je jako konfirmační metoda doporučena plynová chromatografie/ hmotová spektrometrie (GC/MS). Každý nález je třeba hodnotit s klinickou zkušeností a profesionálním nadhledem.
REAGENCIE DrugControl METHAMPHETAMINE TEST obsahuje částice s navázanou zlatem značenou protilátkou proti d-metamfetaminu a imobilizovaný konjugát metamfetamin-protein. V kontrolním systému je použita kozí protilátka. BEZPEČNOSTNÍ POKYNY Test je určen pouze pro In Vitro Diagnostiku Nepoužívejte testy po datu expirace, uvedeném na obalu. Testovací kazeta má být vyňata z obálky až těsně před použitím. Zabraňte potřísnění chromatografické membrány močí. Aplikujte cca 3-4 kapky (min 180 µl ) do jamky, určené pro vzorek, označené S. .
Zabraňte vzájemné kontaminaci vzorků močí, pro každou moč použijte vlastní odběrovou nádobku. Se vzorky moče je třeba zacházet jako s potencionálně infekčním biologickým materiálem. Materiál použitý k testu má být znehodnocen podle předpisů o likvidaci odpadu, platných v každém daném státě.
SKLADOVÁNÍ a STABILITA TESTU DrugControl METHAMPHETAMINE TEST může být uložen za pokojové teploty nebo i v chladničce (2 – 30 °C). Test je funkční do data expirace, uvedeného na obalu. Až do použití musí být test uchován v uzavřené originální obálce. Nemrazit ! Nepoužívat po datu expirace. ODBĚR A PŘÍPRAVA VZORKU Vzorky močí musí být odebrány do suchých a čistých nádobek. Moč pro toxikologické vyšetření může být odebrána kdykoliv během dne. Vzorky močí s viditelnou precipitací se doporučuje zcentrifugovat, zfiltrovat nebo nechat odstát a pro test použít čirý vzorek. Vzorky močí mohou být použity čerstvé nebo skladované v chladničce při 2 - 8°C nejdéle 48 hodin. Pro dlouhodobější uložení je třeba vzorek moči zmrazit při -20 °C. Před provedením testu je nutno vzorky rozmrazit, promíchat a vytemperovat na pokojovou teplotu. DODANÝ MATERIAL (součást balení) Testovací kazeta Kapátko (pipetka)
MATERIAL DOPORUČENÝ ale NEDODANÝ Nádobka na odběr moči Časoměřič (minutky)
1
METHAMPHETAMINE 008Z112
Vzorek moči napipetujte do jamky označené S na kazetě DrugControl METHAMPHETAMINE TEST
NÁVOD K POUŽITÍ 1 2 3 4 5 6 7 8
Před použitím vytemperujte vzorek moči (kontrolní roztok ) na pokojovou teplotu (15 – 30 °C) Vytemperujte na pokojovou teplotu test v uzavřené obálce . Vyjměte kazetu z obálky a test použijte okamžitě. Umístěte test na čistou vodorovnou podložku Aplikujte 3-4 kapky vzorku ( cca 180 ul) do jamky označené S. Vyvarujte se vzniku vzduchových bublin v jamce při pipetování vzorku Umístěte test na rovnou plochu, nastartujte minutky a vyčkejte vzniku barevné linie. Výsledek testu má být odečten mezi 5. a 10. minutou, ne později.
INTERPRETACE VÝSLEDKU
Negativní
Pozitivní
Neplatné (nehodnotitelné) nálezy
Negativní Dvě zřetelné narůžovělé linie v testovacím poli, jedna v oblasti T, jedna kontrolní v oblasti C. Pozitivní: Neplatný: •
Negativní nález znamená, že hladina metamfetaminu je nižší, než mez detekce testu ( 1000 ng/ml), Pouze jedna linie v kontrolní oblast C. V oblasti testu T není zřetelná barevná linie.Tento pozitivní nález znamená, že ve vzorku je přítomen metamfetamin v koncentraci vyšší než 1000 ng/ml. Nevytvořila se barevná linie v kontrolní oblasti C. Buď byl zvolen špatný postup, nebo aplikováno malé množství vzorku. Test je třeba opakovat s novou kazetou. Pokud přetrvává problém, kontaktujte dovozce, nebo výrobce.
Poznámka: Odstín barevné linie T může být odlišný od kontrolní linie C.
2
METHAMPHETAMINE 008Z112 Jednostupňový test pro kvalitativní záchyt Methamphetaminu (Pervitinu) v lidské moči In Vitro diagnostikum pro profesionální použití. ZAMÝŠLENÉ POUŽITÍ DrugControl METHAMPHETAMINE Test je kvalitativní imunochromatografický test, určený pro detekci d-metamfetaminu v lidské moči s udanou koncentrací cut-off 1000 ng/ml. Tento test dává pouze orientační analytický výsledek, pro ověření je nutno použít specifičtější analytickou metodu. Doporučenou konfirmační metodou je GC/MS ( plynová chromatografie s hmotovou spektrometrií) . Výsledek předběžného testu je třeba interpretovat s profesionální klinickou zkušeností a ohledem na podmínky testu .
SHRNUTÍ Metamfetamin je stimulační droga která silně aktivuje určitý systém v mozku. Metamfetaminy jsou úzce chemicky příbuzné s amfetaminy, ale působení metamfetaminů na centrální nervový systém je mnohem silnější. Metamfetamin je často připravován v ilegálních laboratořích pod názvem Pervitin. Má velký předpoklad pro zneužívání a vznik závislosti. Droga může být podávána per os, injekčně nebo inhalačně (šňupáním) Akutní vysoká dávka vede k zvýšené stimulaci CNS a vyvolává euforii, čilost,snížení chuti k jídlu a pocit zvýšené energie a síly. Je popsáno zvýšení krevního tlaku a srdeční arytmie. Následně přichází úzkost, paranoia, halucinace, psychotické chování, deprese až vyčerpání. Efekt metamfetaminu obvykle vymizí během 2-4 hodin, poločas v krvi je 9-24 hodin. Metamfetamin je vylučován močí většinou jako amfetamin a oxidované nebo deaminované derivaty. Přibližně 20% -methamphetaminu je vyloučeno beze změny. Proto tedy přítomnost původní drogy v moči dokazuje užití metamfetaminu(pervitinu). Metamfetamin je běžně v moči prokazatelný 3-5 dní ( závisí na pH moče) DrugControl METHAMPHETAMINE-Test je rychlý screeningový test z moče, který lze vyhodnotit i bez použití přístroje pouze vizuálně. Test využívá monoklonální protilátku k selektivní detekci zvýšené hladiny d-metamfetaminu v moči. DrugControl METHAMPHETAMINE- Test dává pozitivní výsledek při koncentraci d-metamfetaminu v moči vyšší než cut-off 1000 ng/ml.
PRINCIP DrugControl METHAMPHETAMINE TEST je rychlá imunochromatografická metoda, založená na principu kompetitivní vazby. Droga přítomná ve vzorku moče soutěží (kompetice) o vazebná místa na zlatem značené protilátce s konjugátem droga-protein, imobilizovaným v oblasti T testu. V průběhu testu vzorek moči migruje kapilárními silami vzhůru chromatografickou membránou. Pokud je ve v množství menším než cut-off (1000 ng/ml), vzorku přítomen d-metamfetamin nezaplní všechna vazebná místa na protilátce, která se pak naváže na imobilizovaný konjugát a vytvoří zde barevnou linii.Barevná linie se nevytvoří, pokud je drogy ve vzorku více než cut-off. Zaplní totiž všechna vazebná místa na protilátce a ta projde chromatograficou membránou beze změny. Proto pozitivní nález znamená nepřítomnost linie v oblasti T. Pro kontrolu správného provedení testu a dostatečného množství vzorku se vždy musí objevit barevná linie v oblasti označené C.
INTERPRETACE VÝSLEDKU
negativní
Negativní Pozitivní:
positivní
neplatný
neplatný
Dvě zřetelné narůžovělé linie v testovacím poli, jedna v oblasti T, jedna v kontrolní v oblasti C . Negativní nález znamená, že hladina metamfetaminu je nižší, než mez detekce testu ( 1000 ng/ml), Pouze jedna linie v kontrolní oblasti C. V oblasti testu T není zřetelná barevná linie.Tento pozitivní nález znamená, že ve vzorku je přítomen metamfetamin v koncentraci vyšší než cut-off 1000 ng/ml.
Neplatný:
Nevytvořila se barevná linie v kontrolní oblasti C. Buď byl zvolen špatný postup, nebo aplikováno malé množství vzorku. Test je třeba opakovat s novou kazetou. Pokud přetrvává problém, kontaktujte dovozce, nebo výrobce. Poznámka: Odstín barevné linie T může být odlišný od kontrolní linie C.
KONTROLA KVALITY Kontrola postupu a funkce je součástí testu. Vytvoření barevné kontrolní linie a oblasti C testovacího pole znamená že funkce testu je v pořádku. Potvrzuje že bylo aplikováno dostatečné množství vzorku, chromatografická membrána má adekvátní nasákavost a postup práce byl správně proveden podle návodu. Kontrolní vzorek – standard metamfetaminu není součástí testu, ale doporučuje se použít jako kontrolu pozitivní a negativní vzorek moči, otestovaný v laboratoři konfirmační metodou podle správné laboratorní praxe a tím si ověřit vizuální odečtení.
OMEZENÍ 1 DrugControl METHAMPHETAMINE-Test dává pouze kvalitativní orientační výsledek. Pro potvrzení nálezu je třeba použít 2 3 4 5 6
specifičtější analytickou metodu. Jako konfirmační metoda je doporučena GC/MS. Výsledek testu může být ovlivněn jak chybou postupu, tak interferencí některých látek, přítomných v moči. Falšování vzorku, např. přidáním bělících prostředků nebo kamence mohou způsobit chybnou interpretaci nezávisle na použité analytické metodě. Jestliže je podezření na falšování vzorku, je třeba zopakovat test s novým vzorkem moči. Pozitivní výsledek udává, že je v moči přítomna hledaná droga nebo její metabolit v koncentraci vyšší než cut-off, ale nedává informaci o jejím množství ani způsobu aplikace. Negativní nález nemusí znamenat absolutní nepřítomnost drogy v moči, Negativmí výsledek dostaneme i když je droga v moči přítomna, ovšem v koncentraci nižší, než udává cut-off (1000ng/ml) Test nerozpozná zda droga byla užita v rámci léčení nebo zneužita drogově závislým.
3
METHAMPHETAMINE 008Z112 VLASTNOSTI TESTU Správnost Po s it iv e
Bylo testováno 300 klinických vzorků močí paralelně DrugControl METAMPHETAMINE testem a RAPID testem, komerčně nejužívanějším. 10% vzorků mělo koncentraci pod cutoff a 10% nad cut-off hodnotou testu 1000ng/ml d-metamfetaminu (75%,resp. 125% cut-off) a výsledky porovnány. Pozitivní vzorky byly ověřeny GC/MS. Shoda DrugControl-testu s Rapid testem byla nalezena 99% Shoda s výsleky referenční metody GC/MS byla 96%.
N e ga t iv e
200 150 100 50 0 MET Te s t
R A PID
G C / MS
Analytická sensitivita Negativ e
P ositiv e
Ve směsném vzorku moči bez přítomnosti drogy byl rozpuštěn d-metamfetamin v následujících koncentracích:
30
0 0
20
500 50
750 75
1000 100
1250 125
1500 150
[ng/mL] [% Cut Off]
10
Nalezené výsledky potvrzují >99% správnost koncentrace cut-off.
0 0
500
750
1000
1250
1500
50% pod
a 50% nad hodnotou
Methamphetamine [ng/mL]
Analytická specificita V tabulce jsou uvedeny sloučeniny, které dávají v moči pozitivní výsledek testem DrugControl METHAMPHETAMINE TEST po 5 minutách . D-Methamphetamine (± ±) 3,4-Methylenedioxymethamphetamine L-Methamphetamine 1,000 ng / mL
8,000 ng / mL
2,000 ng / mL
CH3
O
CH3
O
HN
HN
Mephentermine
30,000 ng / mL
50,000 ng / mL
H3C
HN CH3
CH3
p-Hydroxymethamphetamine
CH3
CH3
CH3
NH CH3
HN CH3
HO
CH3
Reprodukovatelnost Site A
Site A
Site B
Site B
Site C
Site C
Byla provedena studie paralelně ve třech lékařských ordinacích předem netrénovanými pracovníky s použitím tří různých šarží testů. Cílem bylo prokázat reprodukovatelnot v sérii, mezi sériemi a mezi pracovišti. Byl zpracováván identický panel vzorků, ověřených GC/MS, bez přítomnosti d-Metamfetaminu, s koncentrací 25%pod cut-off, 25% nad cut-off a 50% pod a nad cut-off metody. (1000 ng/ml ). Výsledky jsou znázorněny na grafu.
15 10
5 0 0
500
750
1250
1500
Methamphetamine [ng/mL]
Vliv specifické hmotnosti moče Patnáct vzorků močí(bez obsahu drogy) se specifickou hmotností v rozmezí 1.001 do 1.032 bylo upraveno rozpuštěním metamfetaminu na koncentrace 500ng/ml and 1500ng/ml. Vzorky byly testovány DrugControl METAMPHETAMINE-TESTem v duplikátu (současně s 15 neupravenými vzorky) . Výsledky prokazují, že kolísání specifické hmotnosti moče v uvedeném rozmezí nemá vliv na výsledek testu.
Vliv pH moče Alikvotní podíly drog-negativní směsné moči byly upraveny na pH v rozmezí 5 až 9 ( po 1 pH) a rozpuštěn d-Metamfetamin v koncentracích 500ng/ml a 1500ng/ml. Všechny vzorky byly testovány DrugControl METAMPHETAMINE-TESTem v duplikátu. Výsledky prokazují, že různé hodnoty pH v uvedeném rozmezí neovlivňují výsledek testu.
4
METHAMPHETAMINE 008Z112 Zkřížená reaktivita Byla studována možnost zkřížených reakcí níže uvedených sloučenin přidáním do moči bez drogy i do moči s obsahem 500ng/ml a 1500 ng/ml d-Metamfetaminu. Níže uvedené sloučeniny nevykazují zkřížené reakce (falešně pozitivní nález) ani v koncentraci 100ug/ml . 4-Acetamidophenol [103-90-2] Acetophenetidin [62-44-2] N-Acetylprocainamide [150-13-0] Acetylsalicylic acid [50-78-2] Alphenal [115-43-5] Alprazolam [28981-97-7] Aminopyrine [58-15-1] Amitryptyline [50-48-6] Amobarbital [57-43-2] Amoxicillin [61336-70-7] Ampicillin [69-53-4] Aprobarbital [77-02-1] Ascorbic acid [50-81-7] D-Amphetamine [51-64-9] D,L-Amphetamine [300-62-9] L-Amphetamine [156-34-3] Apomorphine [103-90-2] Aspartame [22839-47-0] Atropine [51-55-8] Benzilic acid [76-93-7] Benzoic acid [65-85-0] Benzoylecgonine [-] Benzphetamine [156-08-1] Bilirubin [635-65-4] Bromazepam [1812-30-2] Brompheniramine [86-22-6] Butabarbital [125-40-6] Cyclopentobarbital [76-68-6] Butalbital [77-26-9] Butethal [77-28-1] Caffeine [58-08-2] Cannabidiol [13956-29-1] Cannabinol [521-35-7] Chloralhydrate [302-17-0] Chloramphenicol [56-75-7] Chorazepate Dipotassium [57109-90-7] Chlordiazepoxide [58-25-3] Chlordiazepoxide HCl [438-41-5] Chlorothiazide [58-94-6] (±) Chlorpheniramine [132-22-9] Chlorpromazine [50-53-3] Chloroquine [54-05-7] Cholesterol [57-88-5] Clobazam [22316-47-8] Clomipramine [303-49-1] Clonazepam [1622-61-3] Clonidine [4205-90-7] Codeine [76-57-3] Cocaethylene [-] Cocaine [50-36-2] Cocaine hydrochloride [53-21-4]
Codeine [76-57-3] Cortisone [53-06-5] (-) Cotinine [486-56-6] Creatinine [60-21-4] Cyclopentobarbital [76-68-6] Delorazepam [2894-67-9] Deoxycorticosterone [64-85-7] Desalkylflurazepam [2886-65-9] Desipramine [50-47-5] Dextromethorphan [125-71-3] Diazepam [439-14-5] Diclofenac [15307-86-5] Diflunisal [22494-42-4] Digoxin [20830-75-5] Diphenhydramine [58-73-1] Doxepine [1668-19-5] Doxylamine [469-21-6] Ecgonine [-] Ecgonine hydrochloride [53-21-4] Ecgonine methylester [-] (1R,2S)-(-)-Ephedrine [299-42-3] L-Epinephrine [51-43-4] (-) Ψ Ephedrine [90-82-4] Erythromycin [114-07-8] Estazolam [29975-16-4] β-Estradiol [517-04-4] Estrone-3-sulfate [481-97-0] Ethylmorphine [-] Ethyl-p-aminobenzoate [94-09-7] Fenfluramine [458-24-2] Fenoprofen [31879-05-7] Flunitrazepam [1622-62-4] Furosemide [54-31-9] Gentisic acid [490-79-9] Hemoglobin [9008-02-0] Hydralazine [86-54-4] Hydrochlorothiazide [58-93-5] Hydrocodone [125-29-1] Hydrocortisone [50-23-7] Hydromorphone [466-99-9] α-Hydroxyalprazolam [-] p-Hydroxyamphetamine [-] O-Hydroxyhippuric acid [-] 4-Hydroxyphencyclidine [-] 3-Hydroxytyramine [51-61-6] Ibuprofen [15687-27-1] Imipramine [50-49-7] Iproniazid [54-92-2] (-) Isoproterenol [7683-59-2] Isoxsuprine [395-28-8] Ketamine [6740-88-1]
Ketoprofen [22071-15-4] Labetalol [36894-69-6] Levorphanol [77-07-6] Loperamide [53179-11-6] Lorazepam [846-49-1] Lorazepam Glucuronide[-] Maprotiline [10262-69-8] Mepacrine [83-89-6] Meperidine [57-42-1] Meprobamate [57-53-4] Methadone [76-99-3] Methoxyphenamine [93-30-1] Methylenedioxyamphetamine [4764-17-4 Methylenedioxyethylamphetamine [457-87-4] Methylphenidate [113-46-1] Methprylon [125-64-4] Midazolam [59467-70-8] 6-Monoacetylmorphine [-] Morphine [57-27-2] Morphine-3-β-D-glucuronide [20290-09-9] Nalidixic acid [389-08-2] Nalorphine [62-67-9] Naloxone [465-65-6] Naltrexone [16590-41-3] Naproxen [22204-53-1] Niacinamide [98-92-0] Nifedipine [21829-25-4] Nimesulide [51803-78-2] Nitrazepam [146-22-5] Norchlordiazepoxide [-] Norcodeine [467-15-2] Nordiazepam [-] Nordoxepine [-] Norethindrone [68-22-4] D-Norpropoxyphene [-] Nortriptylene [894-71-3] Noscapine [128-62-1] D,L-Octopamine [104-14-3] Oxalic acid [144-62-7] Oxazepam [604-75-1] Oxolinic acid [14698-29-4] Oxycodone [76-42-6] Oxymetazoline [1491-59-4] Oxymorphone [76-41-5] Papaverine [58-74-2] Penicillin-G [61-33-6] Pentazocine [359-83-1] Pentobarbital [76-74-4] Perphenazine [58-39-9] Phencyclidine [60124-79-0] Phenelzine [51-71-8]
Phenobarbital [50-06-6] Phentermine [122-09-8] L-Phenylephrine [59-42-7] β-Phenylethylamine [64-04-0] Phenylpropanolamine [14838-15-4] Phenytoin [90-82-4] Prednisolone [50-24-8] Prednisone [53-03-2] Procaine [59-46-1] Promazine [58-40-2] Promethazine [60-87-7] D,L-Propanolol [525-66-6] D-Propoxyphene [469-62-5] D-Pseudoephedrine [90-82-4] Quinacrine [83-89-6] Quinidine [56-54-2] Quinine [130-95-0] Ranitidine [66357-35-5] Salicylic acid [69-72-7] Secobarbital [76-73-3] Serotonin (5-Hydroxytyramine) [50-67-9] Sulfamethazine [57-68-1] Sulindac [38194-50-2 Sustiva [-]] Temazepam [846-50-4] Tetracycline [60-54-8] Tetrahydrocortisone [68-42-8] Tetrahydrozoline [84-22-0] 11-nor-∆8-THC-9-COOH [-] 11-nor-∆9-THC-9-COOH [-] ∆8-THC [5957-75-5] ∆9-THC [1972-08-3] Thebaine [115-37-7] Thiamine [59-43-8] Thioridazine [50-52-2] Thyroxine [300-30-1] Tolbutamide [64-77-7] Trans-2- phenylcyclopropylamine [95-62-5] Trazodone [19794-93-5] Triamterene [396-01-0] Triazolam [28911-01-5] Trifluoperazine [117-89-5] Trimethoprim [738-70-5] Trimipramine [739-71-9-53-4] Tryptamine [61-54-1] D, L-Tryptophan [73-22-3] Tyramine [51-67-2] Tyrosine [60-18-4] Uric acid [69-93-2] Verapamil [52-53-9] Zomepirac [33369-31-2]
LITERATURA -M.A.Hayat:Colloidal Gold:Principles,Methods and Applications InM.A.Hayat,Ed.;Vol.1and2(1989) andVol.3 (1991), Academic Press,SanDiego,CA -Scott E. Lukas & Solomon H. Snyder The Encyclopedia of Psychoactive Drugs Amphetamines: Danger in the Fast Lane Chelsea House Publishers (1985) ISBN : 0877547556 -NIDA-National Institute OnDrug Abuse Research Report Series Methamphetamine–Abuse and AddictionNIH PublicationNumber 98-Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 2nd Ed. Biomedical Publ., Davis, CA. (1982) 488 -Hawks RL, CN Chiang. Urine Testing for Drugs of Abuse. National Institute for Drug Abuse (NIDA), Research Monograph 73, (1986) -Hales G, Roth N, Smith D Possible fatal interaction between protease inhibitors and methamphetamine Antivir Ther, Vol 5 (No 1) Mar -O'Dell SJ, Marshall JF Repeated administration of methamphetamine damages cells in the somatosensory cortex: overlap with cytochrome Synapse, Vol 37 (No 1) Jul 2000;32-7 -Puthaviriyakorn V, Siriviriyasomboon N, Phorachata J, Pan-ox W, Sasaki T, Tanaka K Identification of impurities and statistical classification of methamphetamine tablets (Ya-Ba) seized in Thailand Forensic Sci Int, 2002; 126(2):105-113 -VorheesCV, Inman-WoodSL,MorfordLL,BroeningW,FukumuraM,MoranMS Adult learning deficits after neonatal exposure toD-methamphetamine: selective effects on spatial navigation and memory Journal of Neuroscience, Vol 20 (No 12) Jun 15, 2000;4732-9
April 2005/D Revize českého textu 02/2014Rj
5
METHAMPHETAMINE 008Z112
6
