LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

LABORATOŘ ALERGOLOGIE A KLINICKÉ IMUNOLOGIE KNTB

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Verze č. 5

Vlastník procesu: Plicní oddělení KNTB, a. s.

Účinnost od: 11. 2. 2015

Jméno

Funkce

Datum

Zpracoval:

Mgr. Martina Ščuglíková

JOP VŠ

10. 2. 2015

Přezkoumal:

MUDr. Vladimír Řihák

Primář plicního oddělení

10. 2. 2015

Uvolnil do systému MUDr. Martin Metelka, MBA řízení kvality:

Představitel vedení pro kvalitu

10. 2. 2015

Schválil:

Ing. Pavel Calábek

Předseda představenstva

10. 2. 2015

Schválil:

MUDr Marcel Guřan, Ph.D.

Člen představenstva

10. 2. 2015

Podpis

Krajská nemocnice T. Bati, a. s. LABORATOŘ ALERGOLOGIE A KLINICKÉ IMUNOLOGIE – LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

Obsah: 1. ÚVOD ............................................................................................................................................................................ 3 2. INFORMACE O LABORATOŘI ................................................................................................................................. 3 2.1 Identifikace laboratoře .......................................................................................................................................... 3 2.2 Základní informace o laboratoři .......................................................................................................................... 3 2.3 Základní členění laboratoře ................................................................................................................................. 3 2.4 Provozní doba laboratoře .................................................................................................................................... 4 2.5 Zaměření laboratoře ............................................................................................................................................. 4 2.6 Spektrum služeb laboratoře ................................................................................................................................ 4 2.7 Úroveň a stav akreditace pracoviště .................................................................................................................. 4 3. MANUÁL PRO ODBĚRY PRIMÁRNÍCH VZORKŮ ................................................................................................ 4 3.1 Základní informace ............................................................................................................................................... 4 3.2 Žádanky (požadavkové listy) ............................................................................................................................... 4 3.3 Požadavky na urgentní vyšetření ....................................................................................................................... 5 3.4 Dodatečné požadavky na vyšetření ................................................................................................................... 5 3.5 Používaný odběrový systém ............................................................................................................................... 5 3.6 Vydávání odběrového materiálu laboratoří ....................................................................................................... 6 3.7 Příprava pacienta před odběrem ........................................................................................................................ 6 3.8 Množství vzorku .................................................................................................................................................... 6 3.9 Identifikace pacienta na žádance a na vzorku .................................................................................................. 7 3.10 Stabilita vyšetřovaných vzorků ......................................................................................................................... 7 3.11 Svoz biologického materiálu a rozvoz výsledků ............................................................................................. 7 4. PREANALYTICKÁ FÁZE V LABORATOŘI ............................................................................................................ 8 4.1 Příjem materiálu .................................................................................................................................................... 8 4.2 Důvody pro odmítnutí vzorku laboratoří ............................................................................................................ 8 4.3 Vyšetřování jinými laboratořemi .......................................................................................................................... 8 4.4 Vyšetřování ve smluvních laboratořích .............................................................................................................. 8 4.5 Základní informace k bezpečnosti při práci se vzorky ..................................................................................... 8 5. VYDÁVANÍ VÝSLEDKŮ A KOMUNIKACE S LABORATOŘÍ ............................................................................... 9 5.1 Hlášení výsledků v kritických intervalech .......................................................................................................... 9 5.2 Vydávání výsledků laboratoří .............................................................................................................................. 9 5.3 Intervaly od dodání vzorku k vydání výsledku ................................................................................................ 10 5.4 Konzultační činnost ............................................................................................................................................. 10 5.5 Řešení stížností................................................................................................................................................... 10 5.6 Změny výsledků a nálezů .................................................................................................................................. 10 5.7 Archivace výsledků vyšetření ................................................................................................................................ 11 6. POKYNY PRO PACIENTY A ZDRAVOTNICKÁ ZAŘÍZENÍ ............................................................................... 11 7. PŘÍLOHY .................................................................................................................................................................... 11 8. SEZNAM POUŽITÝCH DOKUMENTŮ .................................................................................................................. 11

Stránka 2 z 30


1. ÚVOD Vážené kolegyně, vážení kolegové, vážení pacienti, dovolujeme si Vám předložit tuto laboratorní příručku, která má za úkol představit a informovat Vás o činnosti a spektru nabízených služeb naší laboratoře, která nabízí svým zákazníkům vyšetření z oblasti klinické imunologie a alergologie. Věříme, že tato laboratorní příručka Vám bude nápomocna v lepší orientaci a naleznete v ní vše, co potřebujete pro naši vzájemnou spolupráci. MUDr. Vladimír Řihák, primář plicního oddělení

2. INFORMACE O LABORATOŘI 2.1 Identifikace laboratoře Laboratoř alergologie a klinické imunologie (LAKI) je součástí zdravotnického zařízení Krajská nemocnice T. Bati, a. s. Zlín (dále jen KNTB). Název organizace:

Krajská nemocnice T. Bati, a. s.

Identifikační údaje:

IČO: 27661989, IČP 82001841, nákladové středisko 9951

Typ organizace:

akciová společnost

Statutární zástupce organizace:

Ing. Pavel Calábek, předseda představenstva MUDr. Marcel Guřan, Ph.D., člen představenstva MUDr. Roman Kučera, člen představenstva

Sídlo společnosti:

Havlíčkovo nábřeží 600, 762 75 Zlín

Umístění:

Plicní oddělení, pavilon č. 20

Vedoucí laboratoře:

MUDr. Vladimír Řihák

2.2 Základní informace o laboratoři Umístění laboratoře: LAKI se nachází v areálu KNTB v plicním oddělení – budova č. 20. Základní kontakty a spojení: Kontakt Jméno Vedoucí laboratoře MUDr. Vladimír Řihák Vedoucí administrativy Eva Sedláčková Laboratoř

Telefon 577 552 620 577 552 628 577 552 633 577 552 649

2.3 Základní členění laboratoře Stránka 3 z 30

E-mail [email protected]


Laboratoř je členěna na tyto úseky: Průtoková cytometrie, diagnostika alergií, vyšetření autoprotilátek, pneumologická cytodiagnostika.

2.4. Provozní doba laboratoře Provozní doba: Příjem biologického materiálu: Quantiferon:

Po – Pá 6.00 h – 15.00 h Po – Pá 6.30 h - 14.30 h Po – Čt 6.30 h – 15.00 h Neodebírat den před státním svátkem nebo volným dnem!

Odběrové místo: Odběry biologického materiálu laboratoř neprovádí, odběrové místo pro pacienty mimo nemocnici se nachází v hematologické ambulanci KNTB – budova číslo 13.

2.5 Zaměření laboratoře Laboratoř pracuje pro všechna oddělení KNTB i jiné nemocnice, pro privátní lékaře i ambulantní specialisty. LAKI je zaměřena zejména na primární diagnostiku v oblasti alergologie, klinické imunologie a primární pneumologické péče. Pokrývá také požadavky na dořešení hematologických diagnóz do rozhodnutí o určení místa léčby. Poskytuje laboratorní vyšetření v oboru 813.

2.6 Spektrum služeb laboratoře Laboratoř alergologie a klinické imunologie poskytuje laboratorní a konzultační služby v oblasti alergologie a klinické imunologie. Komplexní spektrum laboratorních vyšetření viz Abecední seznam vyšetření (příloha č. 2),

2.7 Úroveň a stav akreditace pracoviště Každoročně se laboratoř účastní systému externího hodnocení kvality prováděné firmou SEKK spol. s.r.o. O úspěšném absolvování svědčí udělené certifikáty. Tato externí kontrola je prováděna u všech našich vyšetření, která SEKK nabízí a zprostředkovává. Alternativou pro vyšetření, která nejsou v nabídce SEKK je využití služeb zahraniční společnosti – Referenzinstitut für Bioanalytik. Laboratoř je součástí nemocnice, která splnila požadavky certifikace podle normy ISO 9001. Laboratoř respektuje požadavky normy ISO 15189, v roce 2011 absolvovala audit NASKL I a v roce 2013 uděleno osvědčení audit NASKL II. Dokumentace podléhá směrnici - Směrnice - řízení dokumentů.

3. MANUÁL PRO ODBĚRY PRIMÁRNÍCH VZORKŮ 3.1 Základní informace V této kapitole uvádíme obecné informace o tzv. preanalytické fázi laboratorních vyšetření, která předchází dodání vzorků do laboratoře. Jedná se především o přípravu pacientů před odběrem materiálu v ordinaci ošetřujícího lékaře, o vlastní odběr, možné typy interferencí, o typ odběrového materiálu, o žádanku a její správné vyplnění a další obecně platné záležitosti. Pokud některá vyšetření, včetně funkčních testů, vyžadují speciální přípravu pacienta, speciální odběr, případně splnění dalších požadavků, je to uvedeno u konkrétních vyšetření viz Abecední seznam vyšetření.

3.2 Žádanky (požadavkové listy) Požadovaná vyšetření klinickými odděleními jsou laboratoři předávána ve formě žádanekV současné době je preferována elektronická žádanka, ale laboratoř příjímá i tištěné žádanky laboratoře a i jiné typy žádanek, pokud splňují potřebné požadavky. Stránka 4 z 30


Elektronická žádanka: Elektronické zadávání požadavků na vyšetření se provádí v softwaru AKORD (součást NIS), jde o rychlé zadávání požadavků s minimálním množstvím chyb. Laboratoř žádá oddělení o přednostní používání elektronické žádanky. Písemné žádanky LAKI:  Žádanka pro imunologická vyšetření  Žádost o vyšetření krve testem QuantiRERON® –TB Gold Minimální požadavky žádanky (průvodního listu):  příjmení a jméno pacienta  kód pojišťovny pojištěnce (pacienta)  číslo pojištěnce - pacienta (rodné číslo, číslo pojistky u cizinců)  základní a další diagnózy pacienta  věk v letech a pohlaví pacienta v situacích, kdy nejsou jednoznačně určena číslem pojištěnce  datum a čas odběru, datum a čas přijetí vzorku laboratoří je automaticky evidován laboratorním informačním systémem po přijetí žádanky  identifikace objednavatele (podpis a razítko, které musí obsahovat údaje - ústav, oddělení, jméno lékaře, IČP, IČZ, odbornost, včetně kontaktu na něj), nejsou-li tyto údaje vyplněny v horní části žádanky  urgentnost dodání, pokud je vyšetřování požadováno ve statimovém režimu (požadavek se vyznačí slovem „STATIM“)  požadovaná vyšetření (vázaná k dodanému vzorku nebo k dodaným vzorkům) Poznámky V rubrice Sdělení je možné uvést klinické informace týkající se pacienta a vyžadovaného zaměření vyšetření (pro interpretační účely), tento údaj není povinný. V případě samoplátce nemusí žádanka (průvodní list) obsahovat:  kód pojišťovny  jméno lékaře nebo jiné osoby legálně oprávněné požadovat vyšetření

3.3 Požadavky na urgentní vyšetření Pokud ordinující lékař požaduje některá vyšetření urgentně, vyznačí tento požadavek viditelně na žádance slovem „STATIM“. Laboratoř pak provede tato vyšetření přednostně a výsledek nahlásí ordinujícímu lékaři telefonicky a následně písemně. Tento postup se uplatňuje v případech závažných diagnóz.

3.4 Dodatečné požadavky na vyšetření Na základě dodatečného požadavku (ústní nebo telefonický) ordinujícího lékaře provede laboratoř další vyšetření z již dodaného vzorku materiálu. Tyto požadavky musí být zadány ordinujícím lékařem, který je současně povinen sdělit zaměstnanci laboratoře identifikační údaje o pacientovi (jméno a rodné číslo). Zaměstnanec laboratoře tento dodatečný požadavek zaznamená jako dohlášený požadavek do OpenLIms, dále se zaznamená jméno dohlašující osoby. Provedení dodatečného vyšetření závisí na dostatečném množství vzorku a časovém odstupu od odběru. O nemožnosti provést dodatečné vyšetření je žadatel informován.

3.5 Používaný odběrový systém V laboratoři je akceptován jakýkoli odběrový materiál, který je v souladu s požadavky na odběrový materiál. Rozhodující je použití správného typu aditiva ve zkumavce Stránka 5 z 30


Srážlivá žilní krev (bez aditiv) Nesrážlivá žilní krev (K3EDTA) Nesrážlivá žilní krev (heparin)

Typ odběrového materiálu Příklad použití Plastová zkumavka se Autoprotilátky, celkové separačním gelem IgE, sp. IgE Typ odběrového materiálu Plastová zkumavka + kalium + EDTA Plastová zkumavka + heparin lithný

Příklad použití Průtoková cytometrie Test aktivace bazofilů

Kostní dřeň

Typ odběrového materiálu Plastová zkumavka s médiem RPMI 11640 s heparinem

Příklad použití Průtoková cytometrie

Příklad použití

Výpotek (K3EDTA)

Typ odběrového materiálu Plastová zkumavka + kalium + EDTA

BAL, likvor

Typ odběrového materiálu Plastová zkumavka bez úpravy

Speciální – Qantiferon TB Gold

Typ odběrového materiálu 3 speciální odběrové zkumavky s antigeny v lyofilizované podobě na stěnách zkumavky

Průtoková cytometrie Příklad použití Průtoková cytometrie Příklad použití Quantiferon

3.6 Vydávání odběrového materiálu laboratoří Spolupracujícím pracovištím vydává zkumavky na quantiferon a zkumavky s mediem na kostní dřeň.

3.7 Příprava pacienta před odběrem Při odběru vzorku k vyšetření imunofenotypizace leukocytů, IgE, specifických IgE, autoprotilátek nejsou nutná žádná režimová opatření. Před plánovaným testem aktivace bazofilů je nutná úprava léčebné terapie - pacient musí 48 hod před odběrem vysadit léky typu antagonistů leukotrienů a 2 týdny před odběrem systémové kortikosteroidy.

3.8 Množství vzorku Doporučené minimální množství materiálu při primárním odběru: Základní alergologické a sérologické vyšetření 2-3 ml sražené krve Buněčná imunita - krev

3 ml nesrážlivé krve (EDTA nebo heparin)

Buněčná imunita – kostní dřeň

1 ml kostní dřeně v 4 ml RPMI-11640 médiu

Buněčná imunita - BAL

40 ml laváže Stránka 6 z 30


Quantiferon

1 ml krve do tří speciálních odběrových zkumavek

Při použití vakuových systémů je správný objem zajištěn, při odběru pístovým způsobem je nutné dodržet pokyn výrobce o množství vzorku – na zkumavce je ryska, po kterou má být naplněna.

3.9 Identifikace pacienta na žádance a na vzorku Do laboratoře se příjmají vzorky s jednoznačnou identifikací pacienta, která musí být shodná s údaji na žádance. Po kontrole materiálu a žádanky jsou identifikační znaky pacienta zadány do laboratorního informačního systému (LIS). Každá žádanka o vyšetření musí obsahovat všechny údaje nezbytné pro jednoznačnou identifikaci pacienta, tj. jméno, příjmení a číslo pojištěnce, číslo zdravotní pojišťovny, u níž je pacient pojištěn, razítko ordinujícího lékaře, datum, případně hodinu odběru vzorku, diagnózu základní a nebo sledovanou, případně další informace nezbytné pro spolehlivé provedení vyšetření a nebo interpretaci výsledku. Požadovaná vyšetření se u elektronické žádanky automaticky načtou pomocí čtečky čárového kódu do laboratorního informačního systému – OpenLims. Každému vzorku je automaticky přiřazeno laboratorní číslo. Je vytištěn identifikační štítek pro žádanku a pro primární zkumavku, (popř. štítky pro alikvoty). Tak je zajištěna návaznost identifikovaného jedince na žádance a označení primární zkumavky. Vyšetřované vzorky biologického materiálu musí mít na štítku jednoznačnou identifikaci pacienta, minimálně jméno, příjmení a rok narození nebo číslo pojištěnce pacienta, vše musí souhlasit se žádankou. Pokud žádanka a biologický materiál jsou v rozporu s jednoznačnou identifikací pacienta, jsou vyřazeny z dalšího zpracování. Ordinující lékař je o tomto kroku zaměstnance laboratoře informován telefonicky.

3.10 Stabilita vyšetřovaných vzorků Odebraný materiál by měl být co nejdříve odeslán do laboratoře, pokud nelze, je nutno uchovávat materiál podle doporučení pro jednotlivý biologický materiál.  Srážlivou žilní krev nechat srážet 1-2 hod při pokojové teplotě, vzorek je stabilní 48 hod při 4-8°C  Nesrážlivá krev na imunofenotypizaci – stabilita 24 hod při pokojové teplotě  Nesrážlivá krev na test aktivace basofilů (BAT) – nutno doručit do laboratoře do 2 hod po odběru  Speciální biologický materiál: kostní dřeň, punktát – stabilita 24 hod při laboratorní teplotě, BAL – stabilita 2-4 hod při pokojové teplotě  Odběr na Quantiferon se doručuje do laboratoře co nejdříve, nejdéle však do 16 hod po odběru. Do doby transportu se vzorky skladují při pokojové teplotě ve svislé poloze. Následně se vzorek inkubuje při 37°C 16-24 hod. .

3.11 Transport a svoz biologického materiálu, nezbytné operace se vzorkem Transport vzorků do laboratoře v areálu nemocnice je zajištěn potrubní poštou, donáškovou službou nebo osobním předáním v místě příjmu materiálu. Vzorky pro průtokovou cytometrii se skladují aspoň dva dny při laboratorní teplotě, ostatní vyšetření při teplotě 2-8°C. Vzorky určené k odeslání do spolupracující laboratoře jsou po centrifugaci odděleny od séra a spolu se žádankou uloženy do lednice, odkud jsou vydávány svozové službě smluvní laboratoře. Likvidace probíhá podle směrnice KNTB.

Stránka 7 z 30


4. PREANALYTICKÁ FÁZE V LABORATOŘI 4.1 Příjem materiálu Materiál je doručován do laboratoře pracovníky nemocnice, potrubní poštou nebo dopravou nezávislou na laboratoři. Pracovník přejímající vzorky přezkoumá fyzicky úplnost žádanky, označení vzorku, stav vzorku a elektronicky zapíše do laboratorního informačního systému OpenLims. Po provedení vyšetření je odběrový materiál likvidován dle interní směrnice pro nakládání s odpady. V případě nečitelných nebo chybějících údajů na žádance, se pracovník na příjmu spojí se zadavatelem vyšetření a zajistí chybějící informace, popřípadě požádá o vyplnění nové žádanky. Pokud je dodán materiál bez žádanky a jedná se o nenahraditelný vzorek, laboratoř tento vzorek vyšetří, ale výsledek bude uvolněn, až zadavatel doplní identifikační údaje, tedy žádanku. Pokud je dodán neoznačený vzorek a jedná se o nenahraditelný vzorek (likvor, laváž apod.) se žádankou, tak laboratoř tento vzorek vyšetří, ale výsledky uvolní, až zadavatel převezme odpovědnost za identifikaci a přijetí vzorku nebo za poskytnutí informace, nebo za všechno současně.

4.2 Důvody pro odmítnutí vzorku laboratoří Důvody k odmítnutí:  Nesouhlasí identifikace pacienta na žádance s identifikací na vzorku nebo materiál není označen vůbec  Žádanka nebo zkumavka je znečištěná, je poškozený odběrový materiál  Chybný odběr (zjevné nedodržení postupu při odběru). Jestliže nastane výše uvedený případ, vzorky jsou označené jako neshodné a jsou evidovány v LIS, blok NESHODY. O této situaci je informováno zasílající oddělení (telefonicky, následně i písemně).

4.3 Vyšetřování jinými laboratořemi Laboratorní vyšetření, určená pro jiné laboratoře v rámci nemocnice, která se nedopatřením dostanou na naše pracoviště, automaticky odesíláme do příslušné laboratoře.

4.4 Vyšetřování ve smluvních laboratořích Laboratoř využívá smluvní laboratoř IFCOR´99 pro raritní stanovení, které je vysoce neekonomické provádět v KNTB a nejsou urgentní. Vzorky určené k odeslání do spolupracující laboratoře jsou po centrifugaci odděleny od séra aspolu se žádankou uloženy do lednice, odkud jsou vydávány svozové službě smluvní laboratoře. Stanovení, jeho kvalita a dodání výsledku jsou v gesci smluvní laboratoře.

4.5 Základní informace k bezpečnosti při práci se vzorky Obecné zásady strategie bezpečnosti práce s biologickým materiálem jsou obsaženy ve Vyhlášce Ministerstva zdravotnictví č. 306/2012 Sb., o podmínkách předcházení vzniku a šíření infekčních onemocnění a o hygienických požadavcích na provoz zdravotnických zařízení a ústavů sociální péče. Na základě této vyhlášky byly stanoveny tyto zásady pro bezpečnost práce s biologickým materiálem: · Každý vzorek biologického materiálu je nutné považovat za potenciálně infekční. · Žádanky ani vnější strana zkumavky nesmí být kontaminovány biologickým materiálem – toto je důvodem k odmítnutí vzorku. · Vzorky od pacientů s přenosným virovým onemocněním či multirezistentní nosokomiální nákazou musí být viditelně označeny. · Vzorky jsou přepravovány v uzavřených zkumavkách, které jsou vloženy do stojánku nebo přepravního kontejneru tak, aby během přepravy vzorku do laboratoře nemohlo dojít k rozlití, potřísnění biologickým materiálem nebo jinému znehodnocení vzorku.

Stránka 8 z 30


Detailní problematika bezpečnosti práce je řešena interními směrnicemi nemocnice, směrnice: Nakládání s odpady; Pro stanovení organizace zabezpečení požární ochrany v KNTB , Zajištění školení a výcviku zaměstnanců KNTB v oblasti BOZP ; Pracovní úrazy; Směrnice pro nakládání s nebezpečnými chemickými látkami a přípravky

5. VYDÁVANÍ VÝSLEDKŮ A KOMUNIKACE S LABORATOŘÍ 5.1 Hlášení výsledků v kritických intervalech Výsledky analýz, které se výrazně liší od fyziologických hodnot, jsou telefonicky hlášeny ordinujícímu lékaři a to bez ohledu na to, zda bylo vyšetření provedeno ve statimovém nebo rutinním režimu. Seznam metod a podmínky, kdy je nutno výsledek hlásit telefonicky jsou uvedeny níže v tabulce. Za nálezy v kritických intervalech považujeme podezřelé nálezy krevních malignit či imunodeficity. Informace o hlášení zaznamená pracovník do informačního systému OpenLims (viz. nahlášený výsledek, kde se uvede jméno osoby, které byly výsledky nahlášeny). Tabulka kritických hodnot

Metoda Anti-ANA Anti-dsDNA ANCA Anti-PR3+anti-MPO ANA/ENA CD19+ CD34+ - blasty periferie

Kritická hodnota

Povinné hlášení

> 1:100 titr >1:10 titr >1:20 titr Pozitivita Pozitivita >23% Nález

>1:1280 >1:640 Ano Ano Ne >50% Ano

>2%

>5%

CD34+-blasty kost. dřeně

5.2 Vydávání výsledků laboratoří Výsledkové zprávy, jejich obsah, formát a náležitosti vydávání musí splňovat náležitosti ČSN EN ISO 15 189. Výsledková zpráva laboratoře obsahuje:  Identifikaci a adresu zdravotnického zařízení  název vyšetření, výsledek vyšetření, jednotky vyšetření, biologický referenční interval, kde to připadá v úvahu  jednoznačnou identifikaci pacienta (jméno, příjmení, číslo pojištěnce, pojišťovna), diagnózu pacienta  jméno a další jednoznačné identifikační označení žadatele a jeho adresu pracoviště  datum a čas odběru primárního vzorku, pokud jsou dostupné, a datum a čas přijetí vzorku laboratoří  datum a čas aktuálního vytištění zprávy  typ primárního vzorku  další poznámky (např. nesplněné vstupní parametry např. málo materiálu, chybný odběr)  identifikaci oprávněného pracovníka uvolnit zprávu

Stránka 9 z 30


Laboratoř vydává výsledky vyšetření v tištěné formě a současně jsou výsledky uvolňovány do nemocničního informačního systému. Zadávání výsledků je v kompetenci laboranta, VŠ pracovníka, výsledky uvolňuje VŠ pracovník s atestací v oboru Telefonicky se hlásí výsledky s kritickými hodnotami. Pacientovi a nezdravotnickým pracovníkům se výsledky nesdělují! Telefonicky předané výsledky se vždy vydávají také v písemné podobě.

5.3 Intervaly od dodání vzorku k vydání výsledku Laboratoř má stanoveny doby odezvy laboratoře (turn around times) pro každé vyšetření viz Abecední seznam vyšetření. Tato doba vyhovuje klinickým potřebám.

5.4 Konzultační činnost Konzultační činnost provádí MUDr. Vladimír Řihák.

5.5 Řešení stížností Telefonické a písemné stížnosti může podat kterýkoli z žadatelů a jsou vždy řešeny vedením laboratoře, případně osobami pověřenými vedením. Záznam je veden v knize připomínek a neshod. O výsledku šetření je žadatel vždy informován písemně. Problematika neshod je řešena směrnicí - Řízení neshod; Směrnice o řešení podnětů veřejnosti a vyřizování stížností

5.6 Změny výsledků a nálezů Opravy výsledkových listů pořízených laboratorním informačním systémem se provádí pro: · identifikaci pacienta · výsledkovou část Oprava identifikace pacienta Opravou identifikace pacienta se rozumí oprava rodného čísla a změna nebo významná oprava příjmení a jména pacientů před odesláním protokolu (výsledkového listu). Vzhledem k tomu, že laboratorní informační systém nepořizuje údaj o rodném příjmení, týká se oprava také všech změn příjmení (vdané ženy, osvojené děti, změna příjmení po rozvodu a podobně). Pod pojem oprava identifikace nepatří změna generovaného rodného čísla na korektní, oprava titulu,spojení záznamů korektního rodného čísla a nekorektního rodného čísla po verifikaci, oprava interpunkce. Oprava identifikace (rodného čísla nebo příjmení a jména) se provádí buď při zadávání požadavků, nebo v rámci oprav databáze na základě sdělení klienta. Oprava výsledkové části Byl-li klientovi vydán výsledek, který byl na základě jeho upozornění nebo na základě vnitřního podnětu v laboratoři znovu analyzován a byl-li odhalen rozpor mezi již vydaným výsledkem a novým stanovením, je vždy proveden záznam o neshodě. Postup pro odstranění neshody je následující:K záznamu o neshodě je připojen výtisk s původním výsledkem, záznam o neshodě musí obsahovat zdroj odhalení neshody, původní výsledek, nový výsledek a osobu zodpovídající za opravu výsledku. Výsledek je vydán znovu se správnou hodnotou a do komentáře výsledku je uvedeno, že se jedná o opravu výsledku „číslo/datum/čas“ a jméno osoby, zodpovědné za změnu. Veškeré kroky týkající se opravy výsledku koná pouze jedna osoba, záznam o neshodě pořizuje manažer kvality, kontrolu opatření vždy jiná osoba než ta, která provedla opravu. Při distribuci opraveného výsledku obdrží klient vždy související výtisky výsledků. Je-li nutné zjistit původní hodnotu před opravou, poskytne takovouto informaci laboratoř na základě odpovídajícího záznamu o neshodě. Dojde-li ke změně výsledku, je o ní vždy lékař resp. klient informován. Souběžně s informací, která probíhá ústně, je vždy klientovi doručen opravený výsledek. Stránka 10 z 30


5.7 Archivace výsledků vyšetření Výsledky vyšetření jsou automaticky archivovány na příslušných servrech KNTB. V papírové podobě jsou uchovávány výstupní data zpracovaných vzorků z analyzátoru. Výsledky externích a interních kontrol jsou uchovávány v papírové podobě. Všechna data jsou uchovávána po dobu pěti let.

6. POKYNY PRO PACIENTY A ZDRAVOTNICKÁ ZAŘÍZENÍ Laboratoř nemá pro pacienty ani zdravotnická zařízení žádné zvláštní pokyny.

7. PŘÍLOHY Příloha č. 1 Příloha č. 2 Příloha č. 3

Žádanky Seznam vyšetření Seznam alergenů pro metodu RISA

8. SEZNAM POUŽITÝCH DOKUMENTŮ Směrnice Směrnice Směrnice Směrnice Směrnice Směrnice Směrnice Směrnice

Nakládání s odpady Řízení neshod Pro stanovení organizace zabezpečení požární ochrany v KNTB Zajištění školení a výcviku zaměstnanců KNTB v oblasti BOZP Pracovní úrazy Řízení dokumentů Směrnice pro nakládání s nebezpečnými chemickými látkami a přípravky Směrnice o řešení podnětů veřejnosti a vyřizování stížností

Stránka 11 z 30


Příloha č. 1 – Žádanky Krajská nemocnice T. Bati, a. s., Havlíčkovo nábř. 600, Zlín 762 75 Laboratoř alergologie a klinické imunologie, plicní odd., 20. pav., tel.: 577552633

_________________________________________________________________________________

ŽÁDANKA PRO IMUNOLOGICKÁ VYŠETŘENÍ Pacient:

Oddělení:

Č. pojištěnce:

IČP: Odbornost:

Pojišťovna: Diagnóza:

Datum a čas odběru:

Materiál:  periferní krev,  kostní dřeň,  BAL,  mozkomíšní mok,  výpotek,  uzlina,  jiné Odběr: - periferní krev: nesrážlivá (EDTA, heparin): cytoflow, zároveň odběr na KO srážlivá: autoimunita, CIK, komplement - kostní dřeň, uzlina: zkumavka s EDTA nebo heparinem, výpotek: zkumavka s EDTA



CYTOMETRIE Základní panel



Aktivace buněk



Funkční testy (odběr pouze do zkumavky s heparinem po domluvě)

 CD14  CD45  CD3 T-ly  CD4 T-ly  CD8 T-ly  CD19 B-ly  CD16+56 NK buňky  HLA DR  CD38  CD25  CD71  jiné  fagocytární aktivita a metabolické vzplanutí neutrofilů  aktivace basofilů (CD203c/CD63) s alergeny ………………………………… ……………………………………………………………………………………. ………………………..…………………………………………………………..

……………………………………………………………………… 

Jiné:



Leukoproliferace



AUTOIMUNITA

 exprese HLA DR na monocytech (sepse)  HLA B27  HLA B27/B 7 (konfirmace)  Vyloučení klonálního hematologického onemocnění  ANA  ds DNA  ENA screen  ANCA  konfirmace typu ANCA  ENA blot - pro positivní ENA screen  ANA blot  CIK - PEG IKEM



KOMPLEMENT



SPECIFICKÉ IgE

Informace, důvod vyšetření:

 Komplement screen - funkční test (klasická, alternativní a mananová dráha) Soubory:  Inhalační  Pediatrický inhalační  Potravinový  Jiný Jednotlivé specif. IgE: ………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Razítko, podpis lékaře ……………………………………………………………………………………

Stránka 12 z 30


Žádost o vyšetření krve testem QuantiFERON®-TB Gold In-Tube Pacient:

Jméno a příjmení:

Diagnosa:

Číslo pojištěnce: Důvod provedení testu: kontakt s aktivní TBC:

Pojišťovna: rodinný

jiný: …………………………

pracovní

□ biologická léčba suspektní TBC (podle rtg nálezu):

ANO

NE

suspektní TBC (podle symptomů):

ANO

NE

TBC v osobní anamnéze: ne bakteriologicky ověřená: jen mikroskopicky kultivačně (M. tuberculosis, M. bovis) mykobakterióza (M. kansasii, M. marinum, M. szulgai)

průkaz DNA/RNA komplexu M. tuberculosis bakteriologicky neověřená histologicky ověřená Terapie základními antituberkulotiky:

ANO

NE

Pokud ano, od kdy (datum):…………………………… její trvání:…………………………

Imunodeficience, terapie léky s imunodef. účinkem: ne Přípravek: …………………………………………

BCG vakcinace:

od………………………… do………………………

ANO

NE

Pokud šlo o mimořádnou vakcinaci (mimo pravidelné očkování): Datum: ……………… Důvod:…………………………

Test Mantoux II: V minulosti

ANO

NE

(není myšleno provedení testu v rámci pravidelného očkování podle očkovacího kalendáře)

V posledním roce – datum: ……..…………… hodnota: ……..………………… Další informace důležité pro hodnocení výsledku testu: (např. jiná onemocnění, pracovní anamnéza – riziko TBC, TBC v rodinné anamnéze atp.)

Žadatel:

Lékař:

IČP:

Pracoviště:

Odbornost:

Odběr provedl:

Razítko a podpis:

Datum a čas odběru: NELZE ODEBÍRAT V PÁTEK A DEN PŘED STÁTNÍM SVÁTKEM Výsledek testu:

pozitivní negativní neurčeno

Stránka 13 z 30

– Datum: ………………


Příloha č. 2 – Seznam vyšetření

Autoimunita ANA

IgG protilátky proti jádru buňky Antinukleární protilátky jsou autoprotilátky proti orgánově nespecifickým buněčným antigenům, zahrnují protilátky proti antigenům jádra (DNA, RNA, histony, nukleoproteiny) rozpoznáváme i protilátky proti organelám cytoplasmy (mitochondrie, mikrozomy, lysozomy, peroxizomy, Golgiho aparát). Diagnostika systémových a orgánově specifických autoimunitních onemocnění. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum), plazma Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence Ředění: 1:10 Titrace: 1:80,1:160,1:320, 1:640, 1:280, 1:2560 Substrát: Hep 2 buňky Minimální požadované množství materiálu: 2 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní s popisem fluorescenčního obrazu, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

ANA imunoblot Konfirmační test pro diagnostiku sporných, hraničních a nejasných výsledků ANA (ENA, ds DNA). Testem potvrdíme tyto konkrétní autoprotilátky: Mi-2, Ku, nRNP, Sm, SS-A, Ro-52, SS-B, Scl-70, PM-Scl 100, Jo-1, CENP B, PCNA, ds DNA, nukleozomy, histony, ribozomální P-protein, AMA M2. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum), plazma Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: westernblot Minimální požadované množství materiálu: 2 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

ANA detect Kvalitativní stanovení IgG protilátek proti SS-A-52 (Ro-52), SS-A-60 (Ro-60), SS-B, RNP/sm, RNP70, RNP-A, RNP-C, Sm-BB, Sm-D, Sm-E, Sm-F, , Sm-G, Scl-70, Jo-1, dsDNA, ssDNA, polynukleosomům, mononukleosomům, histonům H1, histonům H2A, histonům H2B, histonům 3, histonům 4, Pm-Scl-100, centromeře B v lidském séru nebo plazmě na principu ELISA metody. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum), plazma Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: EIA Minimální požadované množství materiálu: 2 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: Hodnocení: dle indexu pozitivity : < 1,0 negativní 1,0-1,2 hraniční > 1,2 pozitivní

ENA screen

IgG protilátky proti extrahovatelným antigenům jádra buňky (nRNP, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, Jo-1) Extrahovatelné nukleární antigeny jsou rozpustné jaderné a cytoplazmatické komponenty, které jsou namířeny proti ribonukleoproteinům a enzymům. Vyšetření se provádí při podezření na Stránka 14 z 30


systémové autoimunitní onemocnění (Sharpův syndrom,SLE, Sjögrenův syndrom, progresivní systémová skleróza, polymyositis, dermatomyositis, CREST syndrom). Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum) Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: kU/l Hodnocení: < 20,0 negativní ≥ 20,0 pozitivní

a-ds DNA

IgG protilátky proti dvouvláknové DNA Kvalitativní stanovení anti - dsDNA proti nativní dvouvláknové DNA. Jsou přítomny asi u 60% pacientů se SLE. Silně pozitivní nález je typický pro neléčený SLE. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum), plazma Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:10 titrace: 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320 substrát: Crithidia luciliae Minimální požadované množství materiálu: 5 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

a-ds DNA

IgG protilátky proti dvouvláknové DNA Kvantitativní stanovení anti - dsDNA proti nativní dvouvláknové DNA. Jsou přítomny asi u 60% pacientů se SLE. Silně pozitivní nález je typický pro neléčený SLE. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum), plazma Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: EIA Minimální požadované množství materiálu: 2 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: kU/l Hodnocení: < 20,0 negativní ≥ 20,0 pozitivní

ANCA

IgG protilátky proti antigenům cytoplasmy lidských granulocytů ANCA jsou autoprotilátky namířeny proti antigenům v cytoplasmě neutrofilních granulocytů, fluorescenčně rozlišujeme 3 typy obrazů: tzv. c-ANCA, p-ANCA a atypická ANCA, jejich přítomnost je spojena s autoimunitními onemocněními např. Wegenerova granulomatóza, ChurgStrauss syndrom, vaskulitida malých cév. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum), plazma Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:20 substrát: lidské granulocyty fixované etanolem a formaldehydem, Hep-2 buňky a opičí játra Minimální požadované množství materiálu: 5 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní Stránka 15 z 30


Kritická hodnota: viz. tabulka kritických hodnot

MPO (p-ANCA) IgG protilátky proti myeloperoxidáze Kvalitativní stanovení IgG autoprotilátek proti myeloperoxidáze je konfirmační metoda pro pozitivní fluorescenční obraz typu p-ANCA. Tyto protilátky jsou spojeny s onemocněními jako non-WG vaskulitidam a Goodpasteurovým syndromem a u dalších autoimunit Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

PR3 (c-ANCA)

IgG protilátky proti proteináze 3 Kvalitativní stanovení IgG autoprotilátek proti proteináze3 metodou je onfirmační metoda pro pozitivní fluorescenční obraz typu c-ANCA. Tyto protilátky jsou diagnostické pro Wegenerovu granulomatózu. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

ANCA profil Konfirmační test pro pozitivní fluorescenční obraz tzv. atypická ANCA. Testem lze prokázat 6 typů protilátek – MPO, PR3, laktoferin, neutrofilní elastáza, katepsin G a BPI. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

AMA

protilátky proti mitochondriím Protilátky proti mitochondriím jsou namířeny proti antigenům vnější nebo vnitřní mitochondriální mitochondriální membrány. Rozlišuje se 9 typů (M1-M9). Jejich stanovení lze využít k diferenciální diagnostice různých hepatopatií, protilátky bývají přítomny u 85-98% pacientů s primární biliární cirhózou (PBC), dále u pacientů s chronickou aktivní hepatitidou (CAH) a kryptogenní cirhózou. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:100 substrát: Krysí ledvina, krysí žaludek, opičí játra, krysí játra Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

LKM

protilátky proti mikrozomálnímu antigenu jater s ledvin LKM se vyskytují u pacientů s rúznými typy autoimunitních hepatitid. Existují 3 typy LKM protilátek Stránka 16 z 30


Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:100 substrát: Krysí ledvina, krysí žaludek, opičí játra, krysí játra Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

ASMA

protilátky proti hladkému svalu Proitlátky proti hladkému svalu jsou tvořeny heterogenní skupinou protilátek, které reagují s antigeny cytoskeletu (např. aktinem, vimetinem, desminem nebo tropomyosinem). Vyskytují se u pacientů s chorobami jater různé etiologie, u infekčních nemocí, zánětlivých střevních onemocnění a i u systémových imunopatologických onemocnění. Mohou být přítomny i u pacientů s infekční mononukleózou, PBC a chronickou aktivní hepatitidou. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:100 substrát: Krysí ledvina, krysí žaludek, opičí játra, krysí játra Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

AMA-M2, LKM-1, SLA/LP, LC1

protilátky proti jaterním antigenům Kvalitativní stanovení autoprotilátek, dle přítomnosti určitých protilátek lze usuzovat na konkrétní hepatopatii. AMA-M2: pozitivita konfirmuje pozitivní fluorescenční obraz AMA protilátek, podporují diagnózu PBC. LKM-1: jsou asociovány s AIH 2.typu a jsou považovány za její hlavní imunologický marker SLA/LP: je diagnostický marker pro AIH LC-1 : jsou také specifické pro diagnostiku AIH, mohou se vyskytovat i s jinými autoprotilátkami při AIH. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Metoda: imunoblot Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

EMA IgA

IgA protilátky proti endomziu Stanovení protilátek proti endomysiu (EMA) ve třídě IgA je pro svou vysokou senzitivitu a specifitu vhodný marker pro diagnózu celiakie (gluten-senzitivní enteropatie). Protilátky rychle reagují na dietu a jsou vhodné pro monitorování úspěšnosti a dodržování dietního režimu. Toto vyšetření se indikuje při celiakii, u dif. diagnostiky enteropatií, Duhringovy dermatitis herpetiformis, malnutrice apd. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:10 substrát: opičí játra Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Stránka 17 z 30


Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

a-TTG IgA

protilátky proti tkáňové transglutamináze Tkáňová transglutamináza je enzym, který je hlavním autoantigenem endomysia. Hraje hlavní roli v patogenezi celiakie. Stanovení protilátek proti tkáňové transglutamináze ve třídě IgA je moderní dignostický marker celiakie. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: kU/l Hodnocení: < 20,0 negativní ≥ 20,0 pozitivní

a-TTG IgG

protilátky proti tkáňové transglutamináze Vyšetření protilátek proti tkáňové transglutamináze ve třídě IgG má diagnostický význam u pacientů s celiakií, kteří zároveň trpí selektivním deficitem IgA. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, < 10 U/ml negativní ≥ 10 U/ml pozitivní

a-DGP IgG

protilátky proti deaminovanému gliadinu

Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 14 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: kU/l Hodnocení: < 10 kU/l negativní ≥ 10 kU/l pozitivní

ASCA IgA, IgG

protilátky proti Saccharomyces cerevisiae Protilátky proti fosfopeptidomannanu kvasinek Saccharomyces cerevisiaese se využívají v diferenciální diagnostice nespecifických střevních zánětů (IBD). Přítomnost protilátek je asociována s Crohnovou chorobou. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:100, 1:1000 substrát: kvasinka Saccharomyces cerevisiae Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

APCA

protilátky proti parietálním buňkám Stanovení se využívá se při diagnostice perniciózní anémie, vyznačuje se vysokou citlivostí. V okamžiku stanovení diagnózy má tyto protilátky 80-90% pacientů. Vyšetření je indikováno také Stránka 18 z 30


při karcinomu žaludku, vředové chorobě a chronické atrofické gastritidě, protilátky se rovněž vyskytují u pacientů s autoimunitními endokrinními poruchami. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:10 substrát: Krysí žaludek Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

a-IF

protilátky proti intrinsic faktoru (vnitřnímu faktoru) Intrinsic faktor je glykoprotein, který se podílí na transportu vitaminu B12 přes střevní sliznici, umožňuje absorpci vitaminu B12 do krevního řečiště. A při jeho deficitu se rozvíjí anémie. Stanovení přítomnosti protilátek pomáhá rozlišit mezi autoimunitní perniciózní anémií, nonautoimunitní pern. anémií. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: nepřímá imunofluorescence ředění: 1:10 substrát: intrinsic faktor - biočipy Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bez rozměru Hodnocení: kvalitativní, negativní, hraniční, slabě pozitivní, pozitivní, silně pozitivní

ACLA screen

IgA/G/M protilátky proti kardiolipinu Vyšetření protilátek proti kardiolipinu, v komplexu s kofaktory (beta-2-glykoprotein I) jsou charakteristické pro antifosofolipidový syndrom, systémový lupus, často se vyskytují u pacientů s trombózami, trombocytopeniemi či opakovaných potratech. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 14 dní Druh veličiny: kU/l Hodnocení: < 10 negativní ≥ 10 pozitivní

a-beta2-glykoprotein I IgG, IgM Pro protilátky proti beta-2-glykoproteinu platí totéž co pro ACLA, detekujeme je u antifosfofolipidového syndromu, u trombocytopenií,u opakovaných abortů plodu a u systémových autoimunitních onemocnění, často se vykytují současně s ACLA. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C 7 dní Metoda: ELISA Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: kU/l Hodnocení: < 5 negativní 5-8 hraniční > 8 pozitivní

CIK

cirkulující imunokomplexy Stránka 19 z 30


Stanovuje se hladina cirkulujících imunokomplexů, které se tvoří v přítomnosti nadbytku protilátky. CIK mohou být přítomny u různých infekčních (především bakteriálních ) onemocnění. Vyšší hodnoty jsou u onemocnění doprovázející poškození tkání v důsledku ukládání imunokomplexů (SLE, systémová onemocnění, revmatoidní artritida, glomerulonefritida, vaskulitida). Metoda je nespecifická a kromě cirkulujících imunokomplexů může detekovat také přítomnost dalších patologických proteinů, např. paraproteiny, kryoglobuliny atd.). Stanovení CIK má v klinice podpůrný význam. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum), plazma Stabilita vzorku: 2 – 8°C 24h Metoda: precipitace polyethylenglykolem a turbidimetrie Minimální požadované množství materiálu: 1 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: bezrozměrné Hodnocení: arbitrární jednotky negativní < 50j. pozitivní ≥ 50j.

Alergologie Celkové IgE

IgE U zdravých lidí se v séru vyskytuje v nepatrných koncentracích. Uplatňuje se v patogenezi přecitlivělosti 1. typu a v obraně proti parazitárním infekcím. Zvýšené hladiny jsou nalézány u atopických onemocnění (alergická rýma, astma, urtukárie, ekzém), některých imunodeficiencí a parazitárních infekcích. Hodnoty celkového a specifického IgE nemusí korelovat, normální hodnoty IgE nevylučují alergii. Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: 2 – 8°C Metoda: FEIA Minimální požadované množství materiálu: 1 ml krve Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: kU/l Hodnocení: věk IgE 0 - 1 rok 1 - 30 1 - 5 let 1 - 50 5 -10 let 1 - 100 10 let a více 1 - 150

Specifické IgE proti potravinovým alergenům Semikvantitativní stanovení souboru specifických IgE protilátek proti potravinovým alergenům metodou imunoblot. Kód alergenu f1 f75 f2 f45 f4 f5 f9

Název alergenu Vaječný bílek Vaječný žloutek Kravské mléko Kvasnice Pšeničná mouka Žitná mouka Rýže Stránka 20 z 30


f14 f13 f17 f20 f49 f84 f237 f25 f31 f35 f85 f3 f23

Sojové boby Podzemnice olejná Líska Mandle Jablko Kiwi Meruňka Rajče Mrkev Brambora Celer Treska Krab

Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: při 2-8°C 14 dní Metoda: imunoblot Minimální požadované množství materiálu: 2 ml krve pro panel alergenů Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: třída pozitivity Hodnocení: výsledky se vydávají v RAST třídách Třída pozitivity (RAST) 0 1 2 3 4 5 6

Výsledek vyšetření v kU/l < 0,35 0,5-0,7 0,7-3,5 3,5-17,5 17,5-50 50-100 > 100

Negativní Hraniční Slabě pozitivní Pozitivní Silně pozitivní Velmi silně pozitivní Velmi silně pozitivní

Specifické IgE proti inhalačním alergenům Semikvantitativní stanovení souboru specifických IgE protilátek proti inhalačním alergenům. Alternativou u dětských pacientů je pediatrický inhalační soubor, kterým nelze vyšetřit specifické IgE proti g1, g3, t7 a w1, ty jsou nahrazeny w8, e6, e82 a e84. Inhalační soubor Kód alergenu g1 g3 g6 g12 t2 t3 t4 t7 w1 w6 w9 d1 d2 e1

Název alergenu Tomka vonná Srha Bojínek luční Šlechtěné žito Olše Bříza Líska Dub Ambrosie Pelyněk černobýl Jitrocel Dermatophagoides pteronyssinus Dermatophagoides farinae Kočka Stránka 21 z 30


e2 e3 m1 m2 m3 m6

Pes Kůň Penicillium notatum Cladosporium herbarum Asperillus fumigatus Alternaria alternata

Pediatrický inhalační soubor Kód alergenu Název alergenu g1 Tomka vonná g12 Šlechtěné žito t2 Olše t3 Bříza t4 Líska w6 Pelyněk černobýl w8 Pampeliška w9 Jitrocel d1 Dermatophagoides pteronyssinus d2 Dermatophagoides farinae e1 Kočka e2 Pes e3 Kůň e6 Morče e82 Králík e84 Křeček m1 Penicillium notatum m2 Cladosporium herbarum m3 Asperillus fumigatus m6 Alternaria alternata Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: při 2-8°C 14 dní Metoda: imunoblot Minimální požadované množství materiálu: 2 ml krve pro panel alergenů Doba odezvy: 7 dní Druh veličiny: třída pozitivity Hodnocení: výsledky se vydávají v RAST třídách Třída pozitivity (RAST) 0 1 2 3 4 5 6



Specifické IgE proti konkrétním alergenům Stanovení koncentrace specifických IgE protilátek v periferní krvi je nejpoužívanějším in vitro testem pro diagnostiku alergií zprostředkovaných IgE. Interpretace výsledků je vždy nutno provést společně s posouzením klinického stavu pacienta, případně i s posouzením výsledků kožních testů. Seznam alergenů, které lze vyšetřit je v elektronické žádance, viz Příloha 3. Stránka 22 z 30


Vyšetřovaný materiál: srážlivá krev (sérum). Stabilita vzorku: při 2 – 8°C 7 dní, pro dlouhodobé skladování zamrazit Metoda: RISA, CAP Minimální požadované množství materiálu: 50 µl pro jeden alergen Doba odezvy: 1 měsíc Druh veličiny: třída pozitivity Hodnocení: výsledky se vydávají v RAST třídách Třída pozitivity (RAST) 0 1 2 3 4 5 6



QUANTIFERON Genetickou analýzou byly identifikovány proteiny ESAT 6, CFP 10, a TB7.7., které jsou specifické pro patogenní druhy komplexu Mycobacterium tuberculosis a nevyskytují se ve vakcinačních kmenech BCG a ani v netuberkulózních mykobakteriích (s výjimkou M. kansassi, M. szulgai a M. marinum). V případě infekce M. tuberculosis má pacient v krvi efektorové Th 1 T lymfocyty, které po stimulaci těmito antigeny in vitro produkují interferon γ. Test je založený na vyšetření specifické buněčné odpovědi, kde se imunochemicky měří hladina INFγ. Vyšetřovaný materiál: nesrážlivá krev, odběr do 3 speciálních odběrových zkumavek, které laboratoř zasílá na vyžádání Stabilita vzorku: naplněné zkumavky skladovat při pokojové teplotě, do laboratoře zaslat nejpozději do 6 hod po odběru, následně zkumavky umístit do 37°C inkubátoru na 24 hod, stažená plazma při 2-8°C 3 měsíce Minimální požadované množství materiálu: 3 x 1 ml heparinizované krve ve spec. zkumavkách Doba odezvy: 14 dní Hodnocení: pozitivní, negativní, neurčeno negativní < 0,35 index, negativní, nepravděpodobná infekce M. tuberculosis pozitivní > 0.35 index, pozitivní, pravděpodobná infekce M. tuberculosis

Buněčná imunita HLA B27, HLA-B7 Test je určen pro kvantifikaci buněčných populací exprimující antigen HLA-B27, který je přítomen až u 90% pacientů postižených ankylózující spondylartritidou (AS). Myší monoklonální protilátka HLA-ABC-m3rozpoznává antigen HLA-B27, může však zkříženě reagovat HLA-B7, jeho stanovení se automaticky provádí u všech pozitivních nálezů HLA-B27. Vyšetřovaný materiál: nesrážlivá krev (EDTA). Stabilita vzorku: 20 – 25°C 6 hodin Metoda: průtoková cytometrie Minimální požadované množství materiálu: 2 ml Doba odezvy: 2 týdny Druh veličiny: bezrorměrné Hodnocení: kvalitativní Stránka 23 z 30


IMUNOFENOTYPIZACE buněčných subpopulací lymfocytů Základní fenotypizace periferní krve: metoda slouží ke stanovení relativního zastoupení leukocytárních populací v periferní krvi na základě exprese povrchových markerů metodou průtokové cytometrie s využitím fluorescenčně značených monoklonálních protilátek proti povrchovým znakům leukocytů (CD3, CD4, CD8, CD14, CD16/56, CD19). Imunofenotypizace krevních malignit: lze stanovit přítomnost, liniovou příslušnost a případně i diferenciační stupěň nádorových buněk hematopoetického původu. Fenotypizace bronchoalveolární laváže: metoda doplňuje diagnostiku intersticiálních plicních onemocnění (CD 45, CD14, CD3, CD4, CD8) Vyšetřovaný materiál: nesrážlivá krev (heparin,EDTA), kostní dřeň, punktát, mozkomíšní mok Stabilita vzorku: 20 – 25°C 6 hodin Kritická hodnota: viz. tabulka kritických hodnot Doba odezvy: 5 dení Druh veličiny: relativní počty v % Hodnocení: Normální hodnoty periferní krve: věk % abs. počet (x 103) WBC 0-1 6,5-12,0 1-3 5,0-10,0 3-5 4,5-10,0 7-17 4,0-10,0 dospělí 4,0-10,0 + CD3 0-1 55,0-75,0 1,70-5,00 1-7 57.0-80,0 1,50-4,00 7-17 60,0-80,0 1,20-3,50 dospělí 60,0-80,0 0,90-2,50 CD4+ 0-1 35,0-60,0 1,60-4,00 1-7 35,0-55,0 0,9-2,80 7-17 35,0-55,0 0,65-2,50 dospělí 30,0-55,0 0,40-1,60 + CD8 0-1 12,0-35,0 0,70-3,00 1-7 16,0-38,0 0,55-1,80 7-17 18,0-35,0 0,35-1,30 dospělí 15,0-35,0 0,25-1,00 + CD19 0-1 15,0-39,0 0,60-3,00 1-7 12,0-35,0 0,40-2,20 7-17 10,0-25,0 0,25-0,60 dospělí 7,0-18,0 0,10-0,35 CD56+16+ 0-1 6,0-25,0 0,30-1,00 1-7 6,0-20,0 0,10-0,70 7-17 6,0-20,0 0,10-0,50 dospělí 6,0-20,0 0,10-0,40

Test aktivace basofilů

CD63

Test aktivace basofilů (BAT) je metoda in vitro diagnostiky IgE zprostředkované alergické reakce (reakce I. typu). Detekce basofilů z plné krve pomocí průtokové cytometrie využívá značení CD203c a aktivačního znaku CD63 pomocí monoklonální protilátky. Bylo prokázáno, že lidské bastily aktivované in vitro (alergenem nebo anti IgE protilátkami) prostřednictvím jejich vysokoafinitního receptoru pro IgE exprimují znak CD63 na své membráně. Exprese CD63 na povrchu basofilů dobře koreluje s jejich degranulací. Stránka 24 z 30


Vyšetřovaný materiál: nesrážlivá krev (heparin) Stabilita vzorku: materiál dopraven do laboratoře nejpozději do 2 hod od odběru, pacient by měl 48 hod před odběrem vysadit léky typu antagonistů leukotrienů a 2 týdny před odběrem systémové kortikosteroidy. Doba odezvy: 2 dny Druh veličiny: relativní počty v % Hodnocení: hodnotí se % CD63 pozitivních basofilů Pro různé druhy alegenů stanoveny odlišné meze pozitivity: Inhalační + potravinové alergeny >15% Hmyzí jedy, latex >10% Léky >5% Pro interpretaci výsledků jsou nezbytnou součástí analýzy negativní a pozitivní kontrola. Po stimulaci basofilů anti IgE protilátkou musí být alespoň 15% basofilů CD63+ (pozitivní kontrola). V opačném případě je pacient považován za non-respondera a výsledek testu nelze hodnotit. Negativní kontrola slouží k vyloučení spontánní aktivace basofilů (neměla by překročit 5%).

Stránka 25 z 30


Příloha č. 3 – Seznam vyšetřovaných alergenů B20 B21 B35 B52 B60 B101 B103 B109 B112 B112 B113 B116 B118 B119 B122 C5 C6 C14 D1 D2. E1... E2..... E3... E6 E7 E10 E11 E18 E24 E25 E62 E63. E64 E66 E67 E68 E69 E73 E86 E92 F1 F2 F3.. F4 F5.. F6 F7... F8... F9.. F10 F11 F12. F13.. F14.

IgE/vlna ovčí zprac. IgE/vlna ovčí nezpr. IgE/latex IgE/glutamová kyselina IgE/nikl IgE/kyselina benzoová IgE/kyselina sorbová IgE/chrom IgE/kobalt IgE/stříbro IgE/zlato IgE/zinek IgE/chinolinová žluť IgE/potravinářská žluť IgE/Tartrazin IgE/smrk ztepilý IgE/borovice IgE/jedle bílá IgE/D.pteronyssinus IgE/D.farinae IgE/kočka-srst + epitelie IgE/pes-srst + epitelie IgE/kůň-srst + epitelie IgE/morče-srst IgE/holub - trus IgE/papoušek peří IgE/holub - peří IgE/morče-trus IgE/ krysa - trus IgE/ myš - trus IgE/zlatý křeček-srst IgE/králík-srst IgE/ovce-srst IgE/kuře - peří IgE/husa-peří IgE/andulka-peří IgE/andulka-trus IgE/krysa IgE/kachna-peří IgE/papoušek-trus IgE/bílek z kuřecích vajec IgE/mléko kravské IgE/treska obecná IgE/pšeničná mouka IgE/žitná mouka IgE/ječná mouka IgE/ovesná mouka IgE/kukuřičná mouka IgE/rýže IgE/meruňka IgE/pohanková mouka IgE/hrách setý IgE/podzemnice olejná IgE/sojové boby Stránka 26 z 30

Krajská nemocnice T. Bati, a. s. LABORATOŘ ALERGOLOGIE A KLINICKÉ IMUNOLOGIE – LABORATORNÍ PŘÍRUČKA F15.. IgE/bílé fazole F16. IgE/vlašský ořech F17.. IgE/lískový ořech F18 IgE/para ořech F19 IgE/jedlý kaštan F20.. IgE/mandle F22 IgE/pstruh F23 IgE/krab/garnát F24 IgE/kreveta F25.. IgE/rajské jablko F27. IgE/celer F28. IgE/zelené jablko F29 IgE/banán F30. IgE/hruška F31.. IgE/grapefruit F32. IgE/citron F33.. IgE/pomeranč F34. IgE/mandarinka F35. IgE/brambor F36 IgE/kokosový ořech F37.. IgE/slávka F38 IgE/špenát F40 IgE/tuňák F41 IgE/losos F43. IgE/petržel F44.. IgE/jahoda F45. IgE/droždí F47 IgE/česnek F48 IgE/cibule F49 IgE/broskev F50 IgE/hroznové víno F51 IgE/kasein F52 IgE/laktalbumin F53 IgE/laktoglobulin F54 IgE/lepek F55 IgE/úhoř F60 IgE/hovězí syrové F61 IgE/květák vařený F63. IgE/mrkev F65. IgE/čočka F66 IgE/pór F67 IgE/ovalbumin F71 IgE/langusta F72 IgE/ananas F73 IgE/třešeň ptačí F75.. IgE/vaječný žloutek F77 IgE/kakao F78 IgE/čokoláda F83... IgE/kuřecí maso F84. IgE/kiwi F86 IgE/sezamový šrot F87 IgE/sojový šrot F88 IgE/šrot ze lněných semen F89 IgE/slunečnicová jádra F91 IgE/brokolice F93 IgE/eidam Stránka 27 z 30

Krajská nemocnice T. Bati, a. s. LABORATOŘ ALERGOLOGIE A KLINICKÉ IMUNOLOGIE – LABORATORNÍ PŘÍRUČKA F94.. IgE/okurka F97 IgE/kedlubna F98 IgE/makrela F99 IgE/mango F100 IgE/hlávkový salát F101 IgE/mák F102 IgE/borůvky F103 IgE/pistácie F112 IgE/švestka F113 IgE/vařené vepřové F114 IgE/vařené hovězí F119 IgE/malina F120 IgE/sepie obecná F124 IgE/ústřice F127 IgE/kešu-jádra F128 IgE/rybíz červený F130 IgE/pekanový ořech F134 IgE/datle F135 IgE/červená řepa F138 IgE/kukuřice (zelenina) F144 IgE/Sardinka F154 IgE/kapr F155 IgE/králičí maso (syrové) F157 IgE/treska tmavá F158 IgE/kozí mléko F172 IgE/štika obecná F173 IgE/treska jednoskvrnná F179 IgE/kefír F186 IgE/ředkvička G1. IgE/tomka vonná G3. IgE/srha laločnatá G6. IgE/bojínek luční G12 IgE/žito I1 IgE/včela medonosná I3 IgE/vosa I6 IgE/šváb I7 IgE/americká vosa I16 IgE/sršeň M4 IgE/Aspergil.fumigatus M1 IgE/Alternaria tenuis M15 IgE/Cladosp.herbarum M29 IgE/Penic.notatatum P5 IgE/Penicilloyl V+HSA P6 IgE/Penicilloyl G+HSA P7 IgE/Anoxicillin + HSA P8 IgE/Ampicillin + HSA P9 IgE/Tetracyclin + HSA P10 IgE/Trimethoprim + HSA P11 IgE/Cephalosporin+HSA P12 IgE/Doxycyclin + HSA P13 IgE/Paracetamol + HSA P14. IgE/Acetylsal.k.+HSA P18 IgE/Sulfomethoxazol + HSA P22 IgE/Streptomycin P61 IgE/Erythromycin P78 IgE/Ibuprofen Stránka 28 z 30

Krajská nemocnice T. Bati, a. s. LABORATOŘ ALERGOLOGIE A KLINICKÉ IMUNOLOGIE – LABORATORNÍ PŘÍRUČKA P79 IgE/Diclonfenac P82 IgE/Lidocain P100 IgE/Prilocain P107 IgE/Captopril P300 IgE/Procain S2 IgE/curri S5 IgE/muškátový oříšek S6 IgE/sladká paprika S7 IgE/černý pepř S8 IgE/hořčice S9 IgE/skořice S10 IgE/oregano S11 IgE/bazalka S13 IgE/vanilkový lusk S16 IgE/koriandr S17 IgE/majoránka S19 IgE/tymián S22 IgE/estragon S23 IgE/kardamon S24 IgE/zázvor S27 IgE/chili S29 IgE/zelený pepř T1 IgE/javor mléč T2. IgE/olše T3. IgE/bříza bělokorá T4. IgE/líska obecná T5 IgE/buk lesní T7 IgE/dub T8 IgE/jilm T9 IgE/borovice černá T10 IgE/vlašský ořech T11 IgE/platan T12 IgE/vrba bílá T14 IgE/topol T15 IgE/jasan T16 IgE/lípa T18 IgE/černý bez T23 IgE/oliva T24 IgE/cypriš T37 IgE/smrkový pyl W1 IgE/ambrosie peřenolistá W5 IgE/pelyněk pravý W6. IgE/pelyněk černobýl W7 IgE/sedmikráska W8. IgE/pampeliška W9 IgE/jitrocel kopinatý W10 IgE/merlík bílý W11 IgE/řepka olejná W15 IgE/lebeda W19 IgE/heřmánek pravý FX1 IgE/FX1 (F13,F17,F18,F20,F36) FX2 IgE/FX2 (F3,F24,F37,F40,F41) FX3 IgE/FX3(F4,F7,F8,F11,F86) FX6 IgE/FX6 (F1,F67,F75) FX7 IgE/FX7 (F26,F59,F60) FX8 IgE/FX8(F57,F58,F83,F104) Stránka 29 z 30

Krajská nemocnice T. Bati, a. s. LABORATOŘ ALERGOLOGIE A KLINICKÉ IMUNOLOGIE – LABORATORNÍ PŘÍRUČKA FX9 IgE/FX9 (F12,F15,F35,F63) FX10 IgE/FX10 (F25,F38,F39,F46) FX12 IgE/FX12 (F28, F29, F33, F49) FX18 IgE/FX18 směs ryby IgE/FX20 (F12, F25, F27, F35, F43, F47, F48, FX20 F63) FX21 IgE/FX21 směs ovoce FX22 IgE/FX22 (F13,F16,F17,F20) FX23 IgE/FX23 (F4,F5,F7,F54) FX24 IgE/FX23 (F4,F7,F8,F11)

Komponentová analýza G205 G210 G212 T215 T216 T220 T225 I208 I209 I211

IgE/ rPhl p 1 Bojínek IgE/ rPhl p 7 Bojínek IgE/ rPhl p 12 Bojínek IgE/ rBet v 1 Bříza IgE/ rBet v 2 Bříza IgE/ rBet v 4 Bříza IgE/ rBet v 6 Bříza IgE/rApi m1 včely IgE/rVes v5 vosy IgE/rVes v1 vosy

Stránka 30 z 30

LABORATORNÍ PŘÍRUČKA

Recommend Documents