Lékařská technika a speciální zdravotní materiál
Společnost je zapsána v obchodním rejstříku Městského soudu v Praze, odd. C vložka 1299 Obchodní 110, 251 70 Praha Čestlice Tel. +420 296 328 300 Fax. +420 296 328 320
HbA1c
Axis - Shield
NycoCard – HbA1c
pro kontrolu glykovaného hemoglobinu
Popis testu Klinické použití NycoCard HbA1c je rychlý in vitro test pro stanovení glykovaného hemoglobinu. Princip testu NycoCard HbA1c je test založený na principu afinity kyseliny borité na cis-diol konfiguraci glukózy, která je vázaná na hemoglobin. Součástí kitu jsou testovací kazety s porézní membránou, zkumavky naplněné ředícím roztokem a promývacím roztokem. Ředící roztok obsahuje látky způsobující lýzu erytrocytů, precipitaci hemoglobinu a barvivo konjugované na kys. boritou. Jakmile je krev smíchána s reagencií, dojde k rychlé lýze erytrocytů a k precipitaci hemoglobinu. Konjugát kys. borité se naváže na cis- diol konfiguraci glukózy, která je součástí glykovaného hemoglobinu. Do testovací kazety je aplikováno přesné množství naředěného vzorku, ze kterého je veškerý precipitovaný hemoglobin volný i vázaný zachycen na membráně. Posléze je přebytek konjugátu vymyt promývacím roztokem. Precipitace je hodnocena podle intenzity modré barvy- glykovaný hemoglobin a červené barvy – celkový hemoglobin. Měření je prováděno přístrojem NycoCard Reader II. Hodnoty naměřené intenzity jsou proporcionální k procentu obsahu HbA1c ve vzorku. Obsah kitu TD/ Test Device Plastikové kazety s filtrační membránou 1 x 24 kusů R1/ Ředící roztok 24 x 0,2 ml glycinamidový pufr obsahující ionty Zn a barvivo vázané na kys. boritou, detergent R2/ Promývací roztok morfolínový pufr s NaCl a detergent 1 x 2,0 ml Příslušenství Materiál nutný k provedení testu • kapilára nebo pipeta 5μl k odběru vzorku krve • pipeta 25μl a špičky k aplikaci naředěného vzorku a promývacího roztoku R2 • NycoCard Reader II
Upozornění – bezpečnostní opatření Použití pouze pro IVD • reagencie R1 a R2 obsahují 0,05% azid sodný, který je toxický • R1 obsahuje formamid 6,2%, který je toxický a dráždí sliznice i pokožku • R2 obsahuje morfolín 50mmol/l, který je toxický
Specifita NycoCard HbA1c měří celkový glyk. hemoglobin, ale standardně zaznamenává hladinu HbA1c. Standardizace Axis Shield AS spolupracuje s Evropskou referenční laboratoří pro glyk. hemoglobin. Standardizace je prováděna na základě doporučení ERL. Měřitelné rozhraní měřitelní rozhraní 3 – 18 % interval 0,1% Referenční hranice pro NycoCard – HbA1c 4,5 – 6,3 % Přesnost Přesnost NycoCard HbA1c je vyjadřována koeficientem variability (C. V.), který je v plném měřeném rozsahu < 5 %. Upozornění – interference •
Zvýšené hladiny bilirubinu, lipidů, fruktózy a pre-glykovaného hemoglobinu v krevní vzorcích s normální 5,1% nebo zvýšenou hladinou na 9,7% glykovaného hemoglobinu neinterferují s výsledkem testu
•
Hemolyzované vzorky s hladinou Hb v plazmě vyšší než 3g/100ml mohou ovlivnit výsledek testu
•
Pre-glykovaný hemoglobin neinterferuje s výsledkem testu
•
NycoCard Reader II je přesný v rozmezí koncentrace hemoglobinu od 6 – 18 g/100ml
Skladování a stabilita Neotevřený kit – exspirační doba do konce použitelnosti při skladování 2° - 8° C v originálním balení. Otevřený kit – R1 ředicí roztok uchovávat v tmavé lahvičce při 2°- 8° C. Mimo použití chraňte před světlem. R1 ředicí roztok může být použit přímo z chladničky bez nutnosti kalibrace na pokojovou teplotu. Testovací kazety mohou být uskladněny při pokojové teplotě. R2 promývací roztok může být skladován při pokojové teplotě. Vzorek krve může být skladován 10 dní při 2°- 8° C. Neprovádějte test v případě hemolýzy.
Provedení testu Důležité upozornění k provedení testu • Reagencie v kitu nesmí být zaměňovány s reagenciemi odlišné šarže. • Nedotýkejte se špičkou pipety membrány • Použijte novou špičku pro každou reagencii Vzorek K vyšetření se používá kapilární nebo venózní krev bez nebo s antikoagulačním činidlem ( EDTA, Heparin, NaF ). Vnitřní kontrola Je doporučeno provádět kontrolu kvality kontrolními vzorky k ověření spolehlivosti reagencií. Není možné používat jiný kontrolní materiál než dodávaný NycoCard od firmy Axis Shield Poc AS.
Postup •
Precipitace hemoglobinu Přidejte 5μl plné krve do zkumavky s R1 ředicím roztokem. Dobře promíchejte, poté ponechte zkumavku alespoň 2 min., maximálně však 3 min. inkubujte. POZOR dbejte na to, aby kapilára po vložení do roztoku R1 a promíchání zůstala čirá. •
Aplikace vzorku Ještě jednou dobře promíchejte roztok R1 ve kterém je vložena kapilára se vzorkem krve na homogenní suspenzi. Odeberte 25μl této suspenze a aplikujte ve vzdálenosti asi 0,5 cm nad středem testovací kazety vzorek do jamky ve středu kazety. Vzorek nechte zcela vsáknout. Vyčkejte 15-20 vteřin. POZOR dbejte na to, aby se netvořily vzduchové bubliny. Aplikace promývacího roztoku R2 25 μl R2 promývacího roztoku aplikujte do středu testovací kazety. Až se roztok vsákne, vyčkejte 10 sec. •
Výsledek testu Výsledek testu je hodnocen do 5 min. od aplikace roztoku R2. Potom vyhodnoťte vzorek na přístroji NycoCard Reader II.
Další informace naleznete v návodu pro použití NycoCard Readeru II.
Případné odstranění chyb
PŘÍČINA A) precipitát nepokrývá celý povrch testovací jamky, či se vsakuje velmi pomalu
B) Precipitát se nevsakuje
C) Hodnoty HbA1c jsou příliš nízké
D) Hodnoty HbA1c jsou příliš vysoké
suspenze byla aplikována pomalu a zůstává na stranách testovací kazety
ŘEŠENÍ
proveďte test ještě jednou a reakční suspenzi přidejte znovu do středu testovací kazety během míchání se vytvořily proveďte test ještě jednou, při bubliny promíchávání roztoky netřepejte nedostatečná promíchání před proveďte test ještě jednou inkubací, kapilára není čírádůkladně promíchejte tak, aby vyprázdněná byla kapilára čirá nedostatečné promíchání proveďte test ještě jednou reagencií před aplikací do důkladně promíchejte před testovací karty aplikací do testovací karty roztok R1 byl skladován při proveďte test ještě jednou pokojové teplotě a byl s roztokem skladovaným při vystaven slunečnímu záření 2°C – 8°C a chraňte jej před slunečním zářením koncentrace Hb leží pod proveďte test ještě jednou s měřitelnou hodnotou 10μl krve. Odběr proveďte do dvou kapilár a vložte do jedné zkumavky s roztokem R1. Přístroj NycoCard Reader II provede korekci koncentrace Hb ve vzorku je smíchejte roztok R1 ze dvou vyšší než měřitelná hladina zkumavek t.j. 400μl a přidejte 5μl vzorku odebrané do kapiláry. Test opakujte příliš malé množství přidaného proveďte test ještě jednou a promývacího roztoku R2 přidejte přesný objem roztoku R2 t.j. 25μl
