KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAAN DIREKTORAT JENDERAL PENDIDIKAN MENENGAH DIREKTORAT PEMBINAAN SEKOLAH MENENGAH ATAS
Test Seleksi Calon Peserta International Biology Olympiad (IBO) 2014 2–8 September 2013 Bandung, Jawa Barat TES PRAKTIKUM 2 BAGIAN 2 FISIOLOGI TUMBUHAN Total Point : 100 Durasi: 45 Menit
www.tobi.or.id
Nama: ......................................................................................................... Asal SMA/Kelas: .......................................................................................
Seleksi Calon Peserta IBO 2014 OSN 2013 Praktikum Fisiologi Tumbuhan
PETUNJUK PENGERJAAN: 1. TULIS NAMA ASAL SEKOLAH PADA SETIAP LEMBAR SOAL. 2. Jawaban ditulis pada bagian yang tersedia pada lembar soal. 3. Pastikan anda telah mendapatkan alat dan bahan yang diperlukan (dapat dilihat pada tabel alat dan bahan) sebelum mengerjakan praktikum. Jika belum anda dapat memintanya ke asisten. 4. Tes ini terdiri atas dua bagian: Analisis pigmen tumbuhan (40 Poin) dan perhitungan kadar klorofil (60 Poin). 5. Total waktu tes praktikum ini adalah 45 menit. 6. Total poin untuk tes ini adalah 100 poin. 7. Gunakan tinta ballpoint dalam menuliskan jawaban Anda. 8. Tulisan harus jelas terbaca, jika tidak maka akan dianggap salah 9. Berhentilah menjawab dan letakkan alat tulis anda segera setelah Anda diperintahkan berhenti. Bila anda masih mengerjakan tugas ini setelah aba-aba berhenti, maka hasil pekerjaan anda akan diberi nilai nol (0). 10. Selamat bekerja dan semoga sukses. PENDAHULUAN Peranan air yang sangat penting pada tumbuhan mengakibatkan tumbuhan sangat tergantung pada ketersediaan air. Akan tetapi, ketersediaan air yang berlebih juga dapat mengakibatkan cekaman atau stres pada tumbuhan. Cekaman ini dapat mempengaruhi proses pertumbuhan seperti pembelahan sel, pembesaran, serta proses diferensiasi. Selain itu, stres air dapat menghambat berbagai proses seperti fotosintesis, respirasi, translokasi serta abosrpsi ion dan nutrisi. Tumbuhan dapat merespon cekaman dalam kisaran toleransi tertentu berdasarkan kondisi faktor lingkungannya tersebut. Oleh karena itu, dikenal istilah tumbuhan yang toleran dan intoleran (tidak toleran) terhadap suatu cekaman. Pada praktikum ini anda akan mengamati pengaruh cekaman air terhadap kandungan klorofil pada tumbuhan. Tugas I – Analisis Pigmen Tumbuhan dengan Kromatografi Kertas [Nilai Total = 40 ] Bahan dan Alat Bahan : Pada praktikum ini disediakan bahan berupa spesimen daun segar yang mengalami cekaman air. Alat : (dalam baki) ! Ruang kromatografi sederhana (simple chromatography chamber) berupa beaker glass. ! 1 lembar kertas kromatografi. ! 1 tabung Falcon berisi etanol (EtOH 90%) ! 1 set mortar dan pestel ! Penggaris ! Pipa kapiler 1
Nama: ......................................................................................................... Asal SMA/Kelas: .......................................................................................
Seleksi Calon Peserta IBO 2014 OSN 2013 Praktikum Fisiologi Tumbuhan
PERHATIAN! – –
Anda diwajibkan melakukan percobaan sesuai dengan langkah kerja yang diberikan. Tidak disediakan ekstra alat ataupun bahan. Apabila anda melakukan kesalahan kerja dan/atau merusak alat ketika anda bekerja sehingga anda tidak memperoleh hasil yang diharapkan, maka nilai anda pada bagian ini adalah 0 (nol).
Langkah Kerja 1. Masukan 5 mL larutan pengelusi (eluen), yaitu etanol 90% ke dalam beaker glass. 2. Buatlah ekstrak daun dari spesimen yang diberikan dengan cara menggerusnya dalam etanol menggunakan mortar dan pestel. Gunakan etanol secukupnya, jangan terlalu banyak (cukup ± 2 mL atau setara dengan 40 tetes menggunakan pipet tetes). Ekstrak yang Anda peroleh tidak perlu disaring, cukup Anda pisahkan antara ekstrak dengan ampas daun di dalam pestel tersebut. 3. Ambil kertas kromatografi secara hati-hati, dengan tidak menyentuh bagian kertas yang berwarna putih. Perhatikan bagian yang telah diberi garis. Garis tersebut adalah garis awal atau start line. Perhatikan pula titik yang terdapat pada bagian tengah garis. 4. Totolkan ekstrak pigmen (larutan yang ada dalam pestel) pada titik tersebut dengan menggunakan pipa kapiler (lakukan secara hati-hati agar tidak merusak kertas dan usahakan untuk tidak membuat spot dengan diameter yang terlalu besar). 5. Kering-anginkan spot yang dibuat dengan meniupnya secara perlahan. 6. Letakkan kertas kromatografi secara vertikal pada chamber kromatografi dengan bagian start line di bawah. 7. Diamkan selama 20-30 menit hingga spot ekstrak terelusi dengan baik. Setelah itu, ambil kertas kromatografi secara perlahan dengan tidak menyentuh bagian kertas yang terelusi. 8. Segera kering-anginkan kertas kromatografi, lalu tandai ujung bagian atas dari laju maksimal eluen atau larutan pengelusi dengan menggunakan pensil. Garis ini dinamakan front line. 9. Gambarkan kromatogram yang anda peroleh pada lembar jawaban secara diagramatis dan beri keterangan pada gambar tersebut. 10. Hitunglah nilai Rf dari pigmen-pigmen yang anda peroleh pada kromatogram. Berikut ini adalah rumus untuk mengitung nilai Rf.
!" =
jarak!!"#$"!!"#$!hingga!pigmen!X jarak!!"#$"!!"#$!hingga!!"#$%!!"#$
2
Nama: ......................................................................................................... Asal SMA/Kelas: .......................................................................................
Seleksi Calon Peserta IBO 2014 OSN 2013 Praktikum Fisiologi Tumbuhan
Jawaban Tugas 1 Gambarkan secara diagramatis, hasil KLT yang anda peroleh dan beri keterangan yang sesuai serta tuliskan jarak masing-masing pigmen dari start line (cm)! [Nilai: 10 ] Batang kayu penyangga
Start line
Hasil perhitungan nilai Rf (Nilai total 30) 1) Pigmen fotosintetik 1 [Nilai: @ 5 ] Nama pigmen: ____________________________________________________________ Nilai Rf: _________________________________________________________________ 2) Pigmen Fotosintetik 2 [Nilai: @ 5 ] Nama pigmen: ____________________________________________________________ Nilai Rf: _________________________________________________________________ 3) Pigmen Fotosintetik 3 [Nilai: @ 5 ] Nama pigmen: ____________________________________________________________ Nilai Rf: _________________________________________________________________
3
Nama: ......................................................................................................... Asal SMA/Kelas: .......................................................................................
Seleksi Calon Peserta IBO 2014 OSN 2013 Praktikum Fisiologi Tumbuhan
Tugas II – Perhitungan Kadar Klorofil [Nilai Total = 60 ] Tugas II.1 Berikut ini Anda diberikan data nilai absorbansi hasil pengukuran ekstrak daun dari dua spesimen tumbuhan berbeda (A dan B) (Tabel 1). Tabel 1. Data Nilai Absorbansi (OD) 1 gram Spesimen dalam 100 mL Pelarut Spesimen A Spesimen B λ 649 nm λ 665 nm λ 649 nm λ 665 nm 1 0,239 0,463 0,206 0,362 2 0,180 0,342 0,225 0,352 Dengan menggunakan rumus yang diberikan, lengkapi tabel 2. dengan hasil perhitungan kadar klorofil yang Anda lakukan.
Klorofil Total (mg/100 mL) =
20.0 OD649 + 6.10 OD665
Klorofil a (mg/100 mL)
=
13.7 OD665 – 5.76 OD649
Klorofil b (mg/100 mL)
=
25.8 OD649 – 7.70 OD665
Rumus di atas diturunkan oleh Wintermans dan de Mots (1965)
Jawaban Tugas II.1 Tabel 2. Perhitungan Kadar Klorofil [Nilai Total 30: @ 2,5] SAMPEL
Klorofil a
Klorofil b
Klorofil total
(mg/100 mL)
(mg/100 mL)
(mg/100 mL)
A1 A2 B1 B2
4
Nama: ......................................................................................................... Asal SMA/Kelas: .......................................................................................
Seleksi Calon Peserta IBO 2014 OSN 2013 Praktikum Fisiologi Tumbuhan
Tugas II.2 [Nilai: @ 5 ] Untuk keperluan uji statistik pengukuran kandungan klorofil pada daun A dan B diulangi sebanyak 5 kali dan didapatkan data klorofil total sebagai berikut. Tabel 3. Kandungan klorofil total Sampel
Kandungan klorofil total (mg/100 mL) Spesimen A
Spesimen B
3
78,32
63,75
4
65,92
59,25
5
71,35
72,33
Rata-rata
..............
.............
1 2
Masukkan nilai perhitungan klorofil total 1 dan 2 pada spesimen A dan B pada tabel di atas dan gunakanlah data tersebut untuk menghitung nilai rata-rata klorofil total spesimen A dan B. Tugas II.3 [Nilai: 15 ] Untuk menentukan apakah terdapat perbedaan kandungan klorofil total pada spesimen A dan B, dilakukan uji statistik dengan menghitung nilai t-hitung menggunakan rumus sebagai berikut:
! =!
!1 − ! !2 !1! !2! +! !1 !2
!1 = nilai rata-rata klorofil total spesimen A !2 = nilai rata-rata klorofil total spesimen B S1 = Standar deviasi klorofil total spesimen A S2 = Standar deviasi klorofil total spesimen B n1 = Jumlah sampel spesimen A n2 = Jumlah sampel spesimen B
5
Nama: ......................................................................................................... Asal SMA/Kelas: .......................................................................................
Seleksi Calon Peserta IBO 2014 OSN 2013 Praktikum Fisiologi Tumbuhan
Standar deviasi dapat dihitung dengan menggunakan formula berikut:
! =!
(! − !)! !−1
! = !!"#$"!!"#ℎ!"#$%&$!!"#$#%&"!!"!#$!!"#$%& − !"#$%&!!"#$%&!! ! = !"#$"!!"#" − !"#"! n = Jumlah sampel Nilai t-hitung: ................
Tugas II.4 [Nilai: 5 ] Menggunakan selang kepercayaan 95%, simpulkan uji analisis statistik anda dengan memberi tanda X pada kotak yang tersedia apakah kandungan klorofil spesimen A dan B berbeda secara signifikan atau tidak. Nilai t-table dapat dilihat pada lampiran. Ya Tidak ***
6
Student's t-test Probabilities α: One Tail:
0.250
0.100
0.050
0.025
0.010
0.005
α: Two Tails:
0.500
0.200
0.100
0.050
0.020
0.010
1
1.000
3.078
6.314
12.706
31.821
63.657
2
0.816
1.886
2.920
4.303
6.965
9.925
3
0.765
1.638
2.353
3.182
4.541
5.841
4
0.741
1.533
2.132
2.776
3.747
4.604
5
0.727
1.476
2.015
2.571
3.365
4.032
6
0.718
1.440
1.943
2.447
3.143
3.707
7
0.711
1.415
1.895
2.365
2.998
3.499
8
0.706
1.397
1.860
2.306
2.896
3.355
9
0.703
1.383
1.833
2.262
2.821
3.250
10
0.700
1.372
1.812
2.228
2.764
3.169
11
0.697
1.363
1.796
2.201
2.718
3.106
12
0.695
1.356
1.782
2.179
2.681
3.055
13
0.694
1.350
1.771
2.160
2.650
3.012
14
0.692
1.345
1.761
2.145
2.624
2.977
15
0.691
1.341
1.753
2.131
2.602
2.947
16
0.690
1.337
1.746
2.120
2.583
2.921
17
0.689
1.333
1.740
2.110
2.567
2.898
18
0.688
1.330
1.734
2.101
2.552
2.878
19
0.688
1.328
1.729
2.093
2.539
2.861
20
0.687
1.325
1.725
2.086
2.528
2.845
21
0.686
1.323
1.721
2.080
2.518
2.831
22
0.686
1.321
1.717
2.074
2.508
2.819
23
0.685
1.319
1.714
2.069
2.500
2.807
24
0.685
1.318
1.711
2.064
2.492
2.797
25
0.684
1.316
1.708
2.060
2.485
2.787
26
0.684
1.315
1.706
2.056
2.479
2.779
27
0.684
1.314
1.703
2.052
2.473
2.771
28
0.683
1.313
1.701
2.048
2.467
2.763
29
0.683
1.311
1.699
2.045
2.462
2.756
30
0.683
1.310
1.697
2.042
2.457
2.750
40
0.681
1.303
1.684
2.021
2.423
2.704
50
0.679
1.299
1.676
2.009
2.403
2.678
60
0.679
1.296
1.671
2.000
2.390
2.660
70
0.678
1.294
1.667
1.994
2.381
2.648
80
0.678
1.292
1.664
1.990
2.374
2.639
90
0.677
1.291
1.662
1.987
2.368
2.632
100
0.677
1.290
1.660
1.984
2.364
2.626
df