Výskyt fusarióz v kukuřici – významné riziko pro hospodářská zvířata a lidskou populaci Nedělník, J. Výzkumný ústav pícninářský, spol. s r.o. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
SWOT Food and feed safety Krize, ekonomika produkce, efektivita vstupů, koncepce – nekoncepce
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
PŘEDNOSTI KUKUŘICE - SILÁŽÍ Kukuřice se používá v ČR přibližně z více než 85% na výrobu siláže a asi ze 14 % na zrno Silážní kukuřice se v porovnání s jinými krmnými plodinami vyznačuje až o 50 % nižšími náklady na produkci energie, vyznačuje se vysokou potenciální produkcí a plně mechanizovanou sklizní. Díky příznivému obsahu rozpustných sacharidů (NFC) patří silážní kukuřice k nejsnadněji silážovaným pícninám - krmivo, bioplyn Kukuřičné siláže tvoří hlavní složku směsných krmných dávek přežvýkavců a tím mohou ovlivňovat ekonomiku výroby mléka a masa Dojnice mohou přeměnit 30 % výjimečně až 50 % přijatých živin na mléčné složky (vyjádřeno jako energie) na energetickou hodnotu mléka ─► opodstatněný požadavek na vyrovnanost, stabilitu a kvalitu siláží a celé krmné dávky z hlediska zdraví a průběhu bachorového trávení Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
RIZIKA SILÁŽÍ KUKUŘICE Stále větší negativní dopad na kvalitu mléka a zdraví zvířat a tím i ekonomiku chovu představuje riziko nedostatečné a nízké hygienické jakosti siláží, kukuřičných zejména (obsah plísní a jejich toxinů, koncentrace kvasinek, hnilobných bakterií, kukuřičné sněti aj.). krmiva jsou součástí potravinového řetězce Kukuřice jako teplomilná rostlina citlivě reaguje na změny klimatických podmínek oslabením řady fyziologických procesů =►mohou způsobit odlišnou odezvu rostlin na výskyt a působení řady nežádoucích patogenních činitelů a chorob.
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Mikromycety Neoddělitelná součást životního a pracovního prostředí Vícebuněčná nebo jednobuněčná (kvasinky) eukaryota, heterotrofové Saprofyté Parazité Patogeni Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Pozitivní význam mikromycetů Antibiotika – Penicillium spp. Kyselina citronová – Aspergillus niger Fermentované potraviny – Penicillium, Aspergillus Plísňové sýry – Penicillium camemberti, P.roqueforti Trvanlivé tepelně neopracované masné výrobky – P. nalgiovense Víno pozdního sběru – Botrytis cinerea Biologická ochrana rostlin – Trichoderma, Verticillium Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Negativní význam mikromycetů Mykozy – dermatomykozy, podkožní mykozy, aspergiloza, mukormykoza, kandidoza Alergie
Produkce mykotoxinů
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Fytopatologie kukuřice HNILOBY VZCHÁZEJÍCÍCH ROSTLIN, STÉBEL A TROUCHNIVĚNÍ PALIC - Fusarium spp. OBECNÁ SNĚTIVOST KUKUŘICE - Ustilago maydis RZIVOST KUKUŘICE – Uromyces maydis Absence fungicidů pro foliární aplikace, registrace mořidel
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Je kontaminace rostlin a rostlinných produktů mykotoxiny skutečností?!
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Výsledky 2009 Ozimá pšenice Ječmen Kukuřičná řezanka
až 2500 ppb až 1850 ppb až 1000 ppb
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Rye 2009
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Pieter Breughel : Žebráci – ergotismus – oheň sv.Antonína
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Odpověď je ANO historie současnost Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Když se řekne mykotoxiny……? Co je na začátku, jaká je role a osud mykotoxinů v potravním řetězci…..? Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Co jsou mykotoxiny? •Produkty sekundárního metabolismu (tvorba nebo sekrece různorodých látek) mnohých houbových organismů nebílkovinné povahy •Jsou fytotoxické a zootoxické •Poškozují zdraví, způsobují ekonomické ztráty v rostlinné produkci, v chovech hospodářských zvířat i v potravinářství •Nízkomolekulární (méně než 700 g/mol) •Rezistentní vůči fyzikální a chemické inaktivaci •Široká toxická valence •Různá polarita molekul
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Mykotoxiny jsou prostředkem vláknitých mikromycetů v boji o potravu a v boji o přežití Nejsou nezbytné při rozvoji ve srovnání s aminokyselinami, mastnými či nukleovými kyselinami nebo proteiny
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Spektrum mykotoxinů
ergotoxin aflatoxins ochratoxin A roquefortin C penicilium toxins alternaria toxins fusariotoxins deoxynivalenol (vomitoxin) T-2 toxin zearalenone fumonisins Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Skladové plísně
Polní plísně
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Deoxynivalenon (DON) Kukuřice, obiloviny zvracení, odmítání krmiv, průjem Ohrožená zvířata skot,
prasnice, drůbež ...ohrožuje i člověka
Klimatické podmínky vlhko,
chladno Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Zearalenon Estrogenní účinky ...vyvolává
problémy při reprodukci
Ohrožené plodiny kukuřice,
pšenice, ječmen
Ohrožená zvířata prasata,
drůbež ...ohrožuje i člověka
Klimatické podmínky chladno,
vlhko Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Fumonisiny Kukuřice Ohrožená zvířata koně,
prasnice ...ohrožuje i člověka
...rakovina jícnu u člověka, plicní edémy, hmotnostní redukce
Klimatické podmínky teplo,
vlhko Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Akutní a chronické toxické účinky mykotoxinů Mykotoxikozy
mykotoxin
Akutní DON toxikoza
DON
aflatoxikoza
AFL
Alimentární toxická aleukie
TRICH
Balkánská endemická nefropatie
OTA
ergotism
Námelové mykotoxiny
Rakovina jícnu
FUM
Primární jaterrní karcinom
AFL
Otrava červenou plísní
DON
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Členění mykotoxinů podle toxických účinků k cílovým orgánů Malíř, Ostrý 2003 Toxický účinek
Mykotoxiny
Dermatotoxiny
TRCH
Estrogeny
ZEA
Genotoxiny
AFL,OTA,ZEA,TRCH, FUM
Hematotoxiny
AFL,OTA,ZEA,TRCH
Hepatotoxiny
AFL
Imunotoxiny
AFL,OTA,TRCH,PAT
Nefrotoxiny
CIT, OTA
Neurotoxiny
FUM
Toxiny gastrointestinálního traktu
TRCH
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Kategorizace mykotoxinů z hlediska karcinogenity (IARCWHO) Aflatoxiny Ochratoxin A Fumonisiny Fusarin C Zearalenon Deoxynivalenol T-2 toxin
1 2B 2B 2B 3 3 3 Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Legislativa – ČR, EU Zákon 110/1997 Sb. s limity mykotoxinů Vyhláška 294/97 Sb. Nová vyhláška: 305/2004 Sb. !!! Zákon 281/2002 Sb. o některých opatřeních souvisejících se zákazem biologických zbraní + prováděcí vyhláška 474/2002 Sb. (evidence) Nařízení komise 401/2006/ES – vzorkování Nařízení EU 1881/2006 ES – limity Nařízení Komise 1126/2007 ES – limity fusariotoxinů v kukuřici Doporučení Komise 583/2006 – fusariotoxiny a Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko prevence
Novela Nařízení Rady EU 466/2001 Nařízení Komise (ES) č. 1881/2006
DON Obiloviny s vyjímkou tvrdé pšenice, kukuřice 1250 ug/kg Kukuřice 1750 ug/kg Mouka 750 ug/kg Chléb 500 ug/kg Dětská výživa 200 ug/kg
ZEA Obiloviny 100 ug/kg Mouka 75 ug/kg Dětská výživa 20 ug/kg
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Limity u krmiv Zearalenon 0,5 mg/kg (USA) Zdravotní stav skotu může být ovlivněn při množství 0,5 – 1,0 mg/kg (Malíř et al., 2003) Nedoporučuje se zkrmovat krmivo s více než 0,5 mg/kg (Betina, 1990) T-2 toxin 0,5 mg/kg (USA) Fumonisin max. 5 mg/kg (USA) DON 10 mg/kg v méně než 50% krmiva (USA)
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Limity - krmiva (USA) Zearalenon - 0,5 mg/kg T-2 toxin - 0,5 mg/kg Fumonisin - max. 5 mg/kg DON - např. pro skot hranice 10 mg/kg v méně než 50% krmiva
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
l
•
Efekt mykotoxinů na zvířata
Obecně
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Odhad ekonomických ztrát v krmivech 2,5 bil. USD in USA EU : produkce krmiv - okolo 160 mil. t /rok mycotoxinová kontaminace: 25% ztráty: 5 bilions € Zvýšené výdaje na preventivní a terapeutická opatření Nové analytické metody
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
• různý
vliv v závislosti na typu toxinu, druhu zvířete, pohlaví, věku, aktuálním zdravotním stavu, dávce… • alergie, poruchy reprodukce,nervový systém, respirační poruchy, neuropatie, vyšší mortalita
• redukovaný příjem a konverse živin, nižší užitkovost, redukce kvality Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Vliv toxinů na organismus snížení imunity, alergické reakce, poruchy reprodukce, poruchy nervové soustavy, poruchy dýchacího ústrojí, poruchy trávení snížení konverze a využití krmiv zvýšená mortalita v chovu Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Mykotoxiny jsou velmi stabilní sloučeniny ! Ne pouze plesnivý materiál může být kontaminován mykotoxiny ! Chronické efekty a sub-klinické symptomy jsou častější než akutní intoxikace Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Co je na začátku, jaká je role a osud mykotoxinů v potravním řetězci…..? Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Primární kontaminace – patologické efekty po interakci hostitel-patogen Sekundární kontaminace – skladování (sklady, sila, silaže, domácnost)
Mykotoxiny v živočišných produktech (maso, mléko, vejce)
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
PRIMÁRNÍ KONTAMINACE -
-
phyto-pathogenic proces během vegetace Náchylný hostitel – virulentná patogen – příznivé podmínky prostředí stresory kontaminace rostlinných produktů – potraviny , krmivad
- Fusarium spp. - Alternaria spp. Claviceps purpurea - alkaloids Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Agrotechnické faktory výskyt plísní Použitý ovlivňující hybrid Hustota porostu Výživa a hnojení Ošetření proti zavíječi kukuřičnému Vyšší napadení zavíječem = vyšší poškození rostlin ....tj. vyšší výskyt Fusárií Výška strniště >30 cm = nižší kontaminace plísněmi Konzervace zmrzlé biomasy
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Ostrinia nubilalis Environmental factor
Mycotoxins Maize
Fusarium
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Rozšiřování zavíječe kukuřičného v ČR od roku 1980 - 1995
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
GMO
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Strategie ochrany kukuřice proti ECB Insecticid Biologická kontrola GMO
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Počet chodbiček (50 rostlin) silage
corn
DON
100 % (43)
100% (60)
insecticide
4%
8%
100 % (540 ppb) 0%
biological control
50 %
50 %
60 %
BT hybrid
0%
0%
10 %
control
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Srovnávací studie
(Ostrý et al., Mycotoxin Workshop 2009)
34 studies BT-maize cont. non Bt-maize FUM, DON, ZEA content Europe, USA, South America, Asia
Results Lower content (no zero!) of mycotoxins in 30 from 34 studies on BT maize (MON 810 hybrid) Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Ekonomické údaje Hybrid cena/ha non GMO osivo 2750 CZK Insecticide+ 1000 CZK
GMO
cena/ha
seeds
3750
application
Celkem
3750 CZK
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
3750 CZK
Španělsko 70.000 ha Česká republika 8.380 ha Výměra BT hybrid 2008
Česká republika 7.800 ha/ 2009
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Agrotechnické opatření k redukci zavíječe kukuřičného Rychlé rozbití (rozdrobení) posklizňových zbytků kukuřice Ničení a likvidace plevelů Důležitá je včasná podzimní orba a jarní diskování Omezení pěstování kukuřice po sobě
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Životní cyklus zavíječe kukuřičného Přezimují dorostlé housenky ukryté ve spodních částech stébel na jaře, při teplotě půdy 15 – 16 °C, se začínají kuklit průměrně za 14 dní (10 – 25) v závislosti na podmínkách prostředí se líhnou motýli samice po oplodnění kladou vajíčka převážně na spodní stranu listů kukuřice Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Siláže a zrno – po sklizni
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Změna růstu hub v průběhu fermentace striktně aerobní houby (Fusarium, Alternaria) nepřežívají oxygen deficit tolerant fungus (Aspergillus fumigatus, some Penicillium) Penicillium roqueforti jako vysoce tolerantní - roquefortin C pH tolerance Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Změny v obsahu mykotoxinů během fermentace Vysoká stabilita v silně kyselém prostředí
Žádný efekt fermentace na obsah mykotoxinů např. DON Maskované mykotoxiny (glycosil forms) Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Mycotoxins and mycoflora of finished silages 70 fungal species Penicillium requeforti, Aspergillus fumigatus, Monascus ruber More diverse mycoflora in grass silages than in corn silages mycotoxins from field contamination + roquertin C (corn silages – carbon sources, sugar) Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Základem pro produkci vysoce kvalitních a mykotoxinů prostých surovin je integrovaný systém pěstování rostlin včetně prvků ochrany rostlin respektujících GAP. GMO je jedna z variant. Ekonomická krize.
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Doporučení Výběr vhodných hybridů s odpovídajícím FAO Vyvážená výživa a odpovídající ochrana i u silážní kukuřice Sklizeň v optimální sušině ( 30 – 33 % dry matter content) Bezprostředně po sklizni silážovat, precizní utužení, zakrytí Dobře organizovaný odběr hotové siláže, face management Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Protiplísňové přípravky – organické kyseliny Vyvazovače mykotoxinů * preparáty na bázi jílů – polarní molekuly (aflatoxins, ochratoxin) *inaktivované biomasa Sacharomyces cerevisiae – zachována enzymatická aktivita esteráz and epoxidáz – nonpolarní molekuly (trichothecenes, zearalenone) Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Result
good face management
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
France 2009
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Také výsledek?!
2003
High dry matter content, bad air removal, imperfect cover……… Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Kritické body analýzy mykotoxinů Vzorkování Skladování vzorků ELISA, jiné analytické metody
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Příklady 1 mg/kg = 1 ppm (parts per milion) 1 kg pšenice = 30000 zrn, 1 zrno ve 60 kg = 1 ppm
1 ug/kg = 1 ppb (parts per bilion) 1 zrno kukuřice ve 3,5 vagonech Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Objemná krmiva Kukuřičná siláž Tři horizontální úrovně Z každé tři vzorky 1,5 kg Homogenizace Souhrnný vzorek 1 kg Zamražení !!! Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Proč zamrazit?!
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Stanovení obsahu mykotoxinů Finančně nákladné Chromatografické analýzy TLC,
GC, HPLC, LC - MS
Imunoenzymatické metody ELISA
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Ustilago maydis
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
SNĚŤ KUKUŘIČNÁ A MOŽNÉ DOPADY VE VÝŽIVĚ V infikovaných silážích kukuřice však byla prokázána snížená výživná hodnota ▲výskyt
mikroorganismů – kvasinek, bakterií a plísní aj. ). Vliv sekundární kontaminace a bakteriální a houbové infekce na výslednou závadnost siláž Kukuřičné siláže obsahující spory U.m. nedoporučují ke zkrmování zvířatům (Schrader et al. 1970), zatímco Burgstaller et al. (1977) neprokázali žádné negativní dopady. Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Infikovaná silážní hmota - v průběhu fermentačního procesu celková vyšší produkce kvasných kyselin v 1 kg sušiny siláže ((12,150 %) ve srovnání s kontrolní variantou (9,370 %). Nižší obsah sušiny (249,63 g.kg-1) - nižší obsah kyseliny mléčné (2,195 %) a vyšší obsah kyseliny octové (0,838 %) ve srovnání s kontrolní siláží (2,388 %, resp. 0,692) Infikovaná siláž - vyšší koncentrace kvasných kyselin v 1 kg sušiny (12,15 %) oproti 9,37 % a tomu odpovídala i vyšší hodnota KVV (1744,3 mg KOH) oproti 1498,3 mg KOH na 100 g siláže. Vyšší hodnotě titrační kyselosti odpovídala také nižší průměrná hodnota pH siláže. V pokusné infikované siláži s ohledem k nižšímu obsahu sušiny došlo navíc také k odtoku silážních tekutin v přepočtu 36,93 l/t silážní hmoty, rozdíly byly zjištěny i ve ztrátách hmoty mezi oběma skupinami siláží.
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
DON (ppb)
ZEA (ppb)
K 08
44,5
Sněť 08
48,6
K 09
68
26,2
Sněť 09
79
27,5
K 10 Sněť 10
358,5 375,5
239,1 392,4
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Závěry - doporučení
Kontaminace rostlinných komodit mykotoxiny je realitou. Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Řešení
Integrovaný systém pěstování rostlin Integrovaná ochrana rostlin Základ ochrany proti kontaminaci mykotoxiny Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Dobrá zemědělská praxe (intuice, vyhlášky, EU, GAEC) Kvalitní odrůda Odpovídající příprava půdy, rotace plodin, výživa - systémy hospodaření, minimalizace, ekologické
zem. Prevence stresu – sucho apod. Sklizeň při odpovídající vlhkosti – zrno, siláž
Post-harvest opatření Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Co může udělat fytopatologie a ochrana rostlin? Rezistentní odrůdy - typ rezistence - znalost druhového a patotypového spektra - GMO? Odpovídající přímá ochrana proti škodlivých činitelům - LD 50 Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
ZÁVĚR Kukuřičná siláž patří k významným konzervovaným krmivům s nejvyšší koncentrací energie. Kukuřice jako plodina má bezkonkurenčně nejvyšší pěstitelský potenciál ha výnosu energie. Existuje vztah mezi výší stravitelnosti OH a koncentrací vlákniny a škrobu. Konzervace silážováním musí zajistit vysoké kvalitativní parametry krmiva. Velkou pozornost je nezbytné věnovat k minimalizaci rozvoje nežádoucích a patogenních mikroorganismů, které způsobují nejen snížení nutriční hodnoty, ale mohou být příčinou alimentárních, reprodukčních a jiných onemocnění.
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Zvláště DŮLEŽITÉ je v zemědělských podnicích organizovat a provádět správnou výrobní praxi, při které dochází k minimalizaci těchto mikroorganismů a také rizika tvorby jejich metabolitů.
Kukuřičné siláže s neúspěšným fermentačním procesem, siláže mikrobiálně změněné (činností kvasinek, plísní, bakterií), resp. tepelně poškozené, plesnivé jsou vždy hůře přijímány zvířaty, mají vždy horší nutriční zhodnocení, a jsou zdrojem velkých mikrobiálních rizik i pro samotná zvířata.
Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko
Děkuji za pozornost
Výsledky projektu MZe ČR 1B53043 a MŠMT ČR MSM 2629608001 Research Institute for Fodder Crops, LtD. Troubsko