2014.11.04.
Membránpotenciál
Vig Andrea 2014.10.29.
Nyugalmi membránpotenciál
http://quizlet.com/8062024/ap-11-nervous-system-part-5-electrical-flash-cards/
Akciós potenciál http://cognitiveconsonance.info/2013/03/21/neuroscience-the-action-potential/
1
2014.11.04.
Nyugalomban valamennyi sejt belseje negatív a külső felszínhez képest: negatív nyugalmi potenciál (Em: -30 es -90 mV között) Mikroelektróddal történő vizsgálat. (KCl oldattal töltött – azonos mobilitás. Nincs zavaró diffúziós pot.) Az élő sejt belseje és külső felszíne között mérhető potenciálkülönbség.
V
Tintahal óriás axon Preparált izomsejtek
Extracelluláris (0 mV)
+
Intracelluláris ( -70 mV)
Nyugalmi membránpotenciál 0V Unyugalmi: -30mV _ -100 mV
Mikroelektróda
A sejtmembrán két oldala között kialakuló elektromos potenciálkülönbség (V).
Intracelluláris tér
Extracelluláris tér
2
2014.11.04.
Miért alakul ki a membránpotenciál? • egyenlőtlen ioneloszlás a membrán két oldalán: a sejt belsejében magas K+ és alacsony Na+ koncentráció. • folyamatosan működő K-Na ionpumpa: Na+ ionokat kifelé, K+ ionokat befelé szállítja • szelektív membrán permeabilitás: a sejtmembrán K+ ionokra nézve sokkal átjárhatóbb, mint Na+ ionokra • a sejt belsejében negatív töltésű, nem diffundáló ionok (fehérjék, nukleinsavak) vannak Intracelluláris tér
[Na+] [K+] [Ca2+] [Cl-] [A-]
Extracelluláris tér
10 mM 140 <10-3 3-4 140
[Na+] [K+] [Ca2+] [Cl-]
120 mM 2,5 2 120
http://physiology.elte.hu/eloadas/kiegtanar_elettan/potencial_neuro_2009.pdf
A töltött részecskék mozgását befolyásoló erők „Hajtóerők”: 1) Az adott ionok koncentráció különbsége - Kémiai koncentráció grádiens: Kémiai potenciál (Willard Gibbs - 1876) 2) A membrán két oldala között kialakuló töltéskülönbség Elektromos grádiens: Elektromos potenciál
Elektrokémiai potenciál
Egyensúlyi állapotban az elektromos és kémiai koncentráció grádiens szabadenergia-változása egyenlő és ellentétes irányú. Az egyensúlyi potenciál számolható a koncentráció viszonyokból (bármely ionra nézve)
3
2014.11.04.
A nyugalmi membrán-potenciál eredete Bernstein kálium hipotézise Nernst-féle egyensúlyi potenciál (elektromos potenciál - kémiai potenciál) Donnan egyensúly: a membrán egyes ionos összetevők számára átjárhatatlan (pl. intracelluláris fehérjék). Goldman egyenlet: az egyensúlyi potenciálok és a membránpermeabilitások súlyozott értékeit valamint az abszolút ionkoncentrációk értékeit egyaránt figyelembe kell venni.
http://www.st-andrews.ac.uk/~wjh/neurotut/mempot.html
Nernst - egyenlet Kémiai potenciál Wchem NRT ln
[ X1] [X2] N = a koncentrációgrádiens kialakításában résztvevő „mólok” száma R = egyetemes gázállandó T = abszolút hőmérséklet X1 / X2 = koncentráció grádiens
Elektromos potenciál Welektr NzFE N = az elektromos potenciálkülönbség kialakításában résztvevő töltött részecskék móljainak száma z = valencia (vegyérték) F = Faraday szám E= elektromos térerő (V)
4
2014.11.04.
Egyensúlyi potenciál Nernst-egyenlet: Mekkora elektromos potenciál (E) képes egyensúlyban tartani a kialakult koncentráció grádienst (X1/X2). A befelé és kifelé történő ionáramok dinamikus egyensúlyban vannak.
E
RT X 1 ln zF X 2
http://www.st-andrews.ac.uk/~wjh/neurotut/mempot.html
Egyensúlyi potenciál [K+] EmV = -58/1 log (139/2.5) = - 101.2 mV
-
K+=2.5 mM
K+=139
mM
+
- 101.2 mV
EmV = - 101.2 mV töltések nettó mozgás zéró (egyensúly) EmV > - 101.2 mV K+ áramlik ki EmV < - 101.2 mV K+ áramlik be
Egy ionra nézve az a feszültség érték, mely egyensúlyt tart a koncentráció különbséggel. http://www.st-andrews.ac.uk/~wjh/neurotut/mempot.html
5
2014.11.04.
Ionkoncentrációk béka izomsejt esetén
Na+ : 120 mM
Na+ : 20 mM
K+ : 2.5 mM Cl- : 120
K+ : 139 mM
mM
Cl- : 3.8 mM
[K+] EmV = -58/1 log (139/2.5) = - 101.2 mV [Na+] EmV = -58/1 log (20/120) = + 45.1 mV [Cl-] EmV = -58/1 log (3.8/120) = + 86.9 mV
Nyugalmi potenciál (mért)
= 30.8 mV
EmV=-92mV
A Nernst-egyenlet önmagában nem alkalmas a membránpotenciál meghatározására. Más értékeket kapunk, ha külön-külön számoljuk a potenciál értékeket és mást, ha mérjük a nyugalmi potenciált. Nem zárt rendszer Az ionok viselkedése nem független egymástól.
6
2014.11.04.
A nyugalmi membrán-potenciál eredete Bernstein kálium hipotézise Nernst-féle egyensúlyi potenciál (elektromos potenciál - kémiai potenciál) Donnan egyensúly: a membrán egyes ionos összetevők számára átjárhatatlan (pl. intracelluláris fehérjék). Goldman egyenlet: az egyensúlyi potenciálok és a membránpermeabilitások súlyozott értékeit valamint az abszolút ionkoncentrációk értékeit egyaránt figyelembe kell venni.
http://www.st-andrews.ac.uk/~wjh/neurotut/mempot.html
Frederick George Donnan (1870-1956; Ír kémikus)
Donnan egyensúly v. Donnan megoszlás: Eltérő mozgékonyságú ionok szemipermeábilis hártyán való átdiffundálása diffúziós potenciál Az egyik ion nem tud átlépni a membránon (pl. intracelluláris fehérjék) egyensúlyi koncentráció különbség
7
2014.11.04.
Donnan egyensúlyi szabálya • Diffuzibilis ionok: K+,Cl-
RT K in RT Clout ln E ln zF K out zF Clin
K in Clout K out Clin
Kin Clin Kout Clout A Donnan egyensúly csak akkor érvényes ha az ionok passzív módon jutnak át a sejtmembránon!
A nyugalmi membrán-potenciál eredete Bernstein kálium hipotézise Nernst-féle egyensúlyi potenciál (elektromos potenciál - kémiai potenciál) Donnan egyensúly: a membrán egyes ionos összetevők számára átjárhatatlan (pl. intracelluláris fehérjék). Goldman egyenlet: az egyensúlyi potenciálok és a membránpermeabilitások súlyozott értékeit valamint az abszolút ionkoncentrációk értékeit egyaránt figyelembe kell venni.
http://www.st-andrews.ac.uk/~wjh/neurotut/mempot.html
8
2014.11.04.
Mi történik ha a Donnan szabály nem érvényesül?
Goldman-Hodgkin-Katz egyenlet (Goldman egyenlet) David E. Goldman (USA)
Alan Lloyd Hodgkin (England) Bernard Katz (England).
A sejtmembránon keresztüli potenciál meghatározásához figyelembe kell venni, hogy a sejtek milyen mértékben képesek átereszteni egyes ionokat (PERMEABILITÁS!).
Egy ‘átlagos’ nyugvó állati sejtben: - kifelé K+ áramot befolyásolja: nagy koncentrációkülönbség nagy K+ permeabilitás negatív membránpotenciál - befelé Na+ áramot befolyásolja: nagy koncentrációkülönbség kis Na+ permeabilitás negatív membránpotenciál Így a két áram egyenlő stabil nyugalmi Vm
9
2014.11.04.
Goldman egyenlet A Goldman egyenlet N számú pozitív és M számú negatív ion figyelembe vételével:
P A P A
N i PM i M i Em ln N F i PM M i i RT
- Minden ion szerepét figyelembe veszi. - Jól egyezik a valósággal.
j in
M
out
j
A j
M
in
j
A j
j out
•Em = membrán potenciál •Pion = az egyes ionokra vonatkozó permeabilitás •[ion]out = extracelluláris koncentráció •[ion]in = intracelluláris koncentráció •R = egyetemes gázállandó •T = abszolút hőmérséklet •F = Faraday állandó
Goldman egyenlet A
membránpotenciál
egy
kompromisszum
eredménye, melynek során az egyensúlyi potenciálokat, a membránpermeabilitások súlyozott értékeit és az
abszolút ionkoncentrációkat egyaránt figyelembe vesszük.
10
2014.11.04.
Szivárgás → a membrán-potenciál egyetlen ionra nézve sem egyenlő az adott ion egyensúlyi potenciáljának az értékével ◦ EmV_K+ = -101.2 mV ◦ EmV_Na+ = +45.1 mV ◦ EmV_Cl- = +86.9 mV
EmV= - 92mV
→ az ionok megpróbálnak átjutni a membránon K+ próbál kijutni + oNa próbál bent maradni oCl próbál bent maradni o
„Szivárgás”
Ioncsatornák Nyugalmi v. “független” ioncsatornák Működésüket nem befolyásolja a membrán-potenciál értéke (pl. nyugalmi K+ csatornák; K+-Na+ “szivárgó” csatornák)
“Függő” ioncsatornák Kinyílnak speciális ligandok vagy membrán-potenciál változás esetén (pl. feszültségfüggő K+ és Na+ csatornák)
11
2014.11.04.
Na-K ATPáz • A nyugalmi membránpotenciál kialakulásának főszereplői a K+ és Na+ ionok (eltérő eloszlás és membrán permeabilitás). • A Na-K ATPáz képes ellensúlyozni a Na+ és K+ passzív áramlását, aktív munka kifejtése árán → hozzájárul a membránpotenciál kialakulásához.
• 3 Na+ kifelé és 2 K+ befelé történő mozgatását végzi. • Működéséhez ATP szükséges.
Akciós Potenciál
12
2014.11.04.
Ingerlékeny sejtek membránján: ideg-,izomsejtek, egyes receptorok vagy szekréciós sejtek Sejttípusra jellemző, állandó alak és időbeli lefutás Küszöb feletti inger
Akciós potenciál: a nyugalmi membránpotenciál időleges megváltozása ~ 70mV-ról + 40 mV-ra, melyet a nyugalmi potenciál visszatérése követ
Ionok membránon keresztüli mozgásának eredménye
Stimulus → a membrán potenciál megváltozása (küszöb-potenciál) → akciós potenciál
Kialakulása a „minden vagy semmi” törvényét követi ◦ Ingerküszöb (küszöb-potenciál) alatti ingerlés esetén nincs AP. ◦ Ingerküszöb (küszöb-potenciál) feletti inger mindig egyforma és teljes depolarizációt okoz.
Az akciós potenciálnak különböző fázisai különíthetőek el.
13
2014.11.04.
1. Nyugalmi fázis (potenciál), inger érkezése
Depolarizációs küszöb feletti inger hatására a feszültségfüggő Na+ csatornák megnyílnak. http://termtud.akg.hu/okt/10/embertan/12idr.htm
2. Emelkedő fázis K+ csatornák megnyílnak.
14
2014.11.04.
3. Csúcs fázis
• Na+ beáramlás lelassul EmV_Na+ = +45.1 mV (Nernst egyenlettel számolható egyensúlyi potenciál)
• Na+ csatornák nagy részének inaktiválódása • K+ csatornákon K + áramlik ki
2
3
4. Csökkenő fázis
•
• •
2
3
Feszültségfüggő K+ csatornák teljesen megnyílnak Nagyfokú K+ kiáramlás a sejtből Na + csatornák bezárulnak
4
15
2014.11.04.
5. Utódpotenciál • A K+ ionok beáramlása lassul EmV_K+ = -101.2 mV (Nernst egyenlettel számolható egyensúlyi potenciál)
• A K+ csatornák teljes bezáródása • A nagyszámú és lassan inaktiválódó K+ csatorna hiperpolarizációt eredményez
•
A nagyszámú és lassan inaktiválódó K+ csatorna hiperpolarizációt eredményez
16
2014.11.04.
Refrakter periódus Abszolút RF Az abszolút refrakter fázis alatt a Na+csatornák inaktivált állapotban vannak. Új akciós potenciál kialakulása teljesen gátolt.
Relatív RF A relatív refrakter fázis alatt a Na+- csatornák egy része már megnyitható (aktiválható) állapotban van. Az ingerküszöbnél nagyobb depolarizáció elindíthatja az AP létrejöttét.
Akciós potenciál típusai
http://www.getbodysmart.com/ap/nervoussystem/neurophysiology/actionpotentials/actionpotential/tutorial.html
17
2014.11.04.
Az akciós potenciál terjedése Mielin nélküli axonban
Velőshüvelyű axonban
Lassú ingerületvezetés
Ugráló (szaltatórikus) ingerületvezetés - gyors
A vezetési sebesség a rost keresztmetszetével is nő.
http://www.youtube.com/watch?v=7EyhsOewnH4
18