LAPORAN AKHIR PENELITIAN RISBINKES. UJI AKTIVITAS DAN TOKSISITAS AKUT RAMUAN JAMU ANTI HIPERTENSI RINGAN PADA TIKUS PUTIH Rattus norvegicus L

LAPORAN AKHIR PENELITIAN RISBINKES UJI AKTIVITAS DAN TOKSISITAS AKUT RAMUAN JAMU ANTI HIPERTENSI RINGAN PADA TIKUS PUTIH Rattus norvegicus L

Ulfatun Nisa dkk

BALAI BESAR PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KESEHATAN KEMENTERIAN KESEHATAN RI 2015

i

SUSUNAN TIM PENELITI

Berdasarkan Surat Keputusan Kepala Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan No. HK.02.03/I.2/2498/2015

Tentang UJI AKTIVITAS DAN TOKSISITAS AKUT RAMUAN JAMU ANTI HIPERTENSI RINGAN PADA TIKUS PUTIH Rattus norvegicus L

No

1.

Nama

Dr. Ulfatun nisa

Keahlian/

Kedudukan

Kesarjanaan

dalam tim

Dokter Umum

Ketua Pelaksana & Peneliti Utama

Uraian tugas

Bertanggungjawab

dalam

penyusunan pelaksanaan

protokol, semua

kegiatan,

analisa data dan laporan akhir

2.

Saryanto, S Farm.,Apt.

Farmasi

Peneliti

Melaksanakan penelitian dalam hal

mempersiapkan

ramuan

antihipertensi

3.

Sigit S

D3

Pembantu

Melaksanakan

pengambilan

Peneliti

darah

pemeriksaan

dan

histopatologi hewan coba

5.

Suparno

SLTA

Pembantu

Membantu

peneliti

pemeliharaan dan penanganan hewan coba

ii

dalam

SURAT KEPUTUSAN PENELITIAN

iii

iv

v

vi

vii

KATA PENGANTAR

Assalamualaikum Wr Wb Puji syukur kita panjatkan kehadirat Allah SWT atas limpahan rahmat dan hidayah Nya sehingga penyusunan laporan penelitian Risbinkes dengan judul “Uji Aktivitas dan Toksisitas Akut Ramuan Jamu Anti Hipertensi Ringan pada Tikus Putih Rattus norvegicus L” dapat diselesaikan sesuai dengan yang diharapkan. Penelitian ini merupakan salah satu kegiatan untuk mendukung program Saintifikasi Jamu. Penelitian ini diharapkan dapat sebagai acuan dasar untuk penelitian uji klinik jamu pada masa yang akan datang dan dapat menjadi evidence base bagi dokter dalam melayani kesehatan tradisional dengan jamu sebagai obat di masyarakat. Kami menyadari bahwa hasil penelitian ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena itu segala bentuk kritik dan saran terhadap laporan penelitian ini sangat kami harapkan sebagai masukan untuk perbaikan serta sebagai bahan penelitian lebih lanjut. Akhir kata kami mengucapkan terima kasih kepada Ketua dan Pembimbing Risbinkes (Riset Binaan Kesehatan), Kepala Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional (B2P2TOOT), PPI B2P2TOOT serta semua anggota peneliti yang telah membantu jalannya penelitian ini dari awal sampai dengan selesai. Semoga Allah SWT memberi pahala yang setimpal. Aamiin. Wassalamualaikum Wr Wb

Tawangmangu,

Desember 2015

Ketua Pelaksana Peneliti

dr. Ulfatun Nisa

viii

RINGKASAN EKSEKUTIF

Judul : Uji Aktifitas dan Toksisitas Akut Ramuan Jamu Anti Hipertensi Ringan pada Tikus Putih Rattus norvegicus L Peneliti : dr. Ulfatun Nisa Latar belakang : Berdasarkan Riset Kesehatan Dasar tahun 2013 prevalensi hipertensi di Indonesia sebanyak 25,8 %. Terdapat 50% penderita tidak menyadari sebagai penderita, sehingga penyakitnya lebih berat karena tidak merubah dan menghindari faktor risiko. Sebanyak 70% penderita hipertensi adalah hipertensi ringan, maka banyak diabaikan/terabaikan sehingga menjadi berat (hipertensi maligna) dan 90% hipertensi esensial dan hanya 10% penyebabnya diketahui seperti penyakit ginjal, kelainan hormonal dan kelainan pembuluh darah. Atas dasar hal tersebut mendorong peneliti untuk melakukan penelitian mengenai ramuan jamu untuk hipertensi ringan. Telah dilakukan uji aktivitas dan toksisitas akut ramuan jamu untuk hipertensi ringan pada hewan coba. Ramuan tersebut terdiri dari daun salam, pegagan, alang – alang dan biji pala. Tujuan penelitian ini adalah menentukan khasiat dan tingkat keamanan ramuan jamu yang terdiri atas daun salam, pegagan, alang – alang dan biji pala sebagai penurun tekanan darah. Uji aktivitas menggunakan hewan coba tikus putih (Rattus norvegicus) jantan umur 2-3 bulan, bobot 150200 gram. Ramuan jamu diberikan pada tikus yang telah dibagi menjadi lima kelompok tikus (satu kelompok kontrol dan empat kelompok uji), tiap kelompok terdiri atas 6 ekor tikus jantan. Induksi dengan menggunakan prednison 1,5 mg/kgbb dan Nacl 2,5% selama 3 minggu. Randomisasi dilakukan sehingga didapatkan tikus yang sudah dibuat hipertensi tidak berbeda bermakna pada tiap kelompok pada awal penelitian. Kontrol positif menggunakan obat standar captopril 0,25 mg dan kelompok ramuan jamu dengan berbagai dosis 0,08 gr, 0.16 dan 0.32 gram. Uji toksisitas akut dilakukan pada tikus putih (Rattus norvegicus) galur SD (Spraque Dawley) umur 2-3 bulan, berat + 200 gram. Untuk toksisitas akut dibagi menjadi 5 kelompok (satu kelompok kontrol dan empat kelompok dosis), tiap kelompok terdiri atas 6 ekor tikus jantan, diberikan ramuan jamu secara per oral pada hari pertama, kemudian diobservasi selama 7-14 hari gejala klinik toksik/keracunan dan kisaran dosis letal tengah (LD50). Dari hasil penelitian uji aktivitas ini didiperoleh ramuan jamu yang terdiri atas daun salam, pegagan, alang – alang dan biji pala dapat menurunkan tekanan darah sehingga mencapai tekanan darah sistolik dan diastolik normal. Ramuan yang diuji tidak memberikan pengaruh terhadap frekuensi jantung secara bermakna. Dosis ramuan yang memberikan hasil berbeda bermakna paling tinggi adalah dosis ramuan jamu 0,16 g/200 g bb tikus. Pada uji toksisitas akut didapatkan LD50 semu dengan nilai > 5000 mg/kg bb tikus. Tidak ditemukan tanda-tanda ketoksikan selama penelitian. Ramuan jamu untuk hipertensi dapat termasuk dalam kategori praktis tidak toksik. Berdasarkan data praklinik yang dihasilkan, ramuan jamu yang digunakan cukup potensial dikembangkan sebagai obat antihipertensi ringan dan perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan mengikutsertakan manusia sebagai subyek penelitian.

ix

ABSTRAK

Hipertensi biasa disebut sebagai the silent killer karena penderita tidak mengetahui dirinya mengidap hipertensi sebelum memeriksakan tekanan darah. Menurut WHO dan the International Society of Hyperten- sion (ISH), saat ini terdapat 600 juta penderita hipertensi di seluruh dunia, dan 3 juta di antaranya meninggal setiap tahunnya. Berdasarkan Riset Kesehatan Dasar tahun 2013

terjadi penurunan prevalensi hipertensi dari 31,7 % menjadi 25,8 %. Sebanyak 70% penderita hipertensi adalah hipertensi ringan, maka banyak diabaikan/terabaikan sehingga menjadi berat. Tujuan penelitian ini adalah menentukan khasiat dan tingkat keamanan ramuan jamu yang terdiri atas daun salam, pegagan, alang – alang dan biji pala sebagai penurun tekanan darah. Uji aktivitas dan Toksisitas akut akut dilakukan pada tikus putih (Rattus norvegicus) galur SD (Spraque Dawley) umur + 2 bln, berat + 150-200 gram. Uji aktivitas dibagi lima kelompok dengan 6 ekor tikus jantan tiap kelompok. Induksi dengan menggunakan prednison 1,5 mg/kgbb dan Nacl 2,5% selama 21 hari. Kelompok kontrol negatif diberikan prednison dan Nacl 2,5% dan kontrol positif menggunakan captopril sebagai obat standar. Kelompok dosis I 0,08 gr, Dosis II 0,16 gr, dosis III 0,32 gr. Sesuai pedoman WHO, untuk toksisitas aku tiap kelompok tanaman, masing masing 6 kelompok (satu kelompok kontrol dan lima kelompok dosis), tiap kelompok 6 tikus, 3 ekor jantan dan 3 ekor betina, diberikan sari infusa secara per oral pada hari pertama, kemudian diobservasi selama 7-14 hari gejala klinik toksik/keracunan dan kisaran dosis letal tengah (LD50). Dari hasil penelitian uji aktivitas ini didiperoleh ramuan jamu yang terdiri atas daun salam, pegagan, alang – alang dan biji pala dapat menurunkan tekanan darah sampai pada tekanan darah sistolik dan diastolik normal. Tidak memberikan pengaruh terhadap frekuensi jantung secara bermakna. Dosis ramuan yang memberikan hasil berbeda bermakna paling tinggi adalah dosis ramuan jamu 0,16 g/200 g bb tikus dengan nilai p=0,002 untuk penurunan tekanan sistolik dan p=0,017 penurunan tekanan diastolik. Pada uji toksisitas akut didapatkan LD50 semu dengan nilai > 5000 mg/kg bb tikus. Tidak ditemukan tanda-tanda ketoksikan selama penelitian. Ramuan jamu untuk hipertensi masuk dalam kategori praktis tidak toksik. Kata kunci : Hipertensi, daun salam, pegagan, alang – alang dan biji pala

x

DAFTAR ISI

Halaman Judul

.................................. i

Susunan Tim Peneliti

.................................. ii

Surat Keputusan Penelitian

................................. iii

Kata Pengantar

.................................. viii

Ringkasan Eksekutif

.................................. ix

Abstrak

.................................. x

Daftar Isi

.................................. xi

Daftar Tabel/Grafik/Gambar

.................................. xii

Daftar Lampiran

.................................. xiii

Isi laporan penelitian I.

Pendahuluan

.................................. 1

Tujuan dan Manfaat

.................................. 5

III.

Hipotesis

.................................. 6

IV.

Metode

.................................. 7

Hasil

.................................. 13

Pembahasan

.................................. 25

Kesimpulan dan Saran

.................................. 30

Ucapan Terimakasih

.................................. 31

Daftar Kepustakaan

.................................. 32

Lampiran

................................. 35

II.

V. VI. VII. VIII. IX. X.

xi

DAFTAR TABEL

TABEL 1. KELOMPOK PERLAKUAN ..................................... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 2. PERHITUNGAN DOSIS YANG DIGUNAKAN BERDASARKAN HASIL PENELITIAN EKSTRAK TUNGGAL DISETARAKAN DENGAN BENTUK SEDIAAN REBUSAN .. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 3. RERATA TEKANAN SISTOLIK PADA MASING – MASING KELOMPOK SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% .................... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 4. RERATA PERUBAHAN TEKANAN SISTOLIK PADA MASING – MASING KELOMPOK SEBELUM DAN SETELAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU .................. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 5. RERATA TEKANAN DIASTOLIK PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% ........................................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 6. RERATA TEKANAN DIASTOLIK PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN ..................................................................................... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 7. RERATA DENYUT JANTUNG TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON NACL 2,5% ................................................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 8. RERATA DENYUT JANTUNG PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU. ............................................................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 9. RERATA SELISIH TEKANAN SISTOLIK, DIASTOLIK DAN DENYUT JANTUNG SESUDAH DAN SEBELUM PERLAKUAN RAMUAN JAMU SELAMA 2 MINGGUERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 10. RERATA TEKANAN ARTERI RATA-RATA PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% ........................................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 11. RERATA TEKANAN ARTERI RATA-RATA PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN JAMU ........................................................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 12. PENGAMATAN UJI TOKSISITAS AKUT SETELAH PEMBERIAN FORMULA JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DOSIS TUNGGAL.......................... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 13. HASIL UJI TOKSISITAS ........................................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 14. TABEL PEMERIKSAAN HISTOPATOLOGI JARINGAN HEPAR SETELAH PERLAKUAN DOSIS TUNGGAL RAMUAN JAMU HIPERTENSI RINGAN ........... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. TABEL 15. TABEL PEMERIKSAAN HISTOPATOLOGI JARINGAN GNJAL SETELAH PERLAKUAN DOSIS TUNGGAL RAMUNAN JAMU HIPERTENSI RINGAN ......... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

xii

DAFTAR GAMBAR GAMBAR 1. RERATA TEKANAN SISTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% ............................................................................. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 2. RERATA TEKANAN DIASTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% ................................................................... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 3. GAMBARAN BERAT BADAN SEBELUM DAN SETELAH PERLAKUAN PADA TIAP – TIAP KELOMPOK ................................................................... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 4. RERATA TEKANAN SISTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN JAMUERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 5. RERATA TEKANAN DIASTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN..... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 6. RERATA PERUBAHAN DENYUT JANTUNG SEBELUM DAN SETELAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU ............................................................................. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 7. RERATA PERUBAHAN TEKANAN ARTERI RATA – RATA PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU ................. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 8. PERUBAHAN BOBOT BADAN RATA-RATA (GRAM) TIKUS YANG DIAMATI SELAMA 14 HARI SETELAH PEMBERIAN DOSIS TUNGGAL RAMUAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. ............................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 9. RERATA KADAR UREUM SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. .............. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 10. RERATA KADAR CREATININ SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL.ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 11. RERATA KADAR SGOT SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. ............................ ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED. GAMBAR 12. RERATA KADAR SGPT SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. .............. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Data pengamatan kematian hewan uji selama 14 hari pada pemberian ramuan jamu antihipertensi ringan............................................................................................................. Error! Bookmark not defined. Lampiran 2. Hasil pengamatan tanda-tanda ketoksisan terhadap hewan uji selama 14 hari pada uji toksisitas akut ramuan jamu antihipertensi ringan........................................................

Error!

Bookmark not defined. Lampiran 3. Data rerata penimbangan bobot badan hewan coba pada toksisitas akut........ Error! Bookmark not defined. Lampiran 4. Data rerata pengukuran kadar ureum, creatinin, SGOT, dan SGPT darah hewan uji pada toksisitas akut......................................................................................................

Error!

Bookmark not defined. Lampiran 5. Hasil Uji statistik............................................................................................. Error! Bookmark not defined. Lampiran 6. Gambaran Histopatologi.................................................................................. Error! Bookmark not defined. Lampiran 7. Data Tekanan Sistolik dan Diastolik..........................................................

Error!

Bookmark not defined. Lampiran 8. Foto Kegiatan selama penelitian................................................................. Bookmark not defined.

xiv

Error!

xv

I.PENDAHULUAN

Hipertensi masih menjadi masalah utama di dunia, baik di Negara maju maupun Negara berkembang, termasuk Indonesia. Hipertensi biasa disebut sebagai the silent killer

karena penderita tidak mengetahui dirinya mengidap hipertensi sebelum

memeriksakan tekanan darah.1 Menurut WHO dan the International Society of Hyperten- sion (ISH), saat ini terdapat 600 juta penderita hipertensi di seluruh dunia, dan 3 juta di antaranya meninggal setiap tahunnya. Tujuh dari setiap 10 penderita tersebut tidak mendapatkan pengobatan secara adekuat. Di Amerika, diperkirakan 1 dari 4 orang dewasa menderita hipertensi.2-3 Prevalensi hipertensi di Indonesia pada penduduk umur >18 tahun sebesar 31,7% (berdasarkan pengukuran) yang berarti 1 dari 3 orang dewasa di Indonesia menderita hipertensi. Prevalensi lebih tinggi dari Singapura 27,3%, Thailand 22,7%, dan Malaysia 20%, meski lebih baik dibandingkan Jepang 36,7 dan Cina 17%-40%.1 Berdasarkan Riset Kesehatan Dasar tahun 2013 terjadi penurunan prevalensi hipertensi dari 31,7 % menjadi 25,8 %.4 Terdapat 50% penderita tidak menyadari sebagai penderita, sehingga penyakitnya lebih berat karena tidak merubah dan menghindari faktor risiko. Sebanyak 70% penderita hipertensi adalah hipertensi ringan, maka banyak diabaikan/terabaikan sehingga menjadi berat (hipertensi maligna) dan 90% hipertensi esensial dan hanya 10% penyebabnya diketahui seperti penyakit ginjal, kelainan hormonal dan kelainan pembuluh darah.5 Hipertensi merupakan suatu keadaan terjadinya peningkatan tekanan darah yang memberi gejala berlanjut pada suatu target organ tubuh. Peneltian epidemiologi membuktikan bahwa hipertensi berhubungan secara linier dengan morbiditas dan mortalitas penyakit kardiovaskuler.6-8 Selain penyakit kardiovaskuler, hipertensi dapat pula menyebabkan gagal ginjal, penyakit pembuluh lain, diabetes mellitus.5 Klasifikasi hipertensi menurut JNC 7 ( Joint National Commitee on the prevention, detection, evaluation and treatment of high blood pressure) yakni normal (TDS<120 mmHg, TDD <80 mmHg), pre-hipertensi (TDS 120-139 mmHg, TDD 80-89 mmHg), hipertensi stage 1 (TDS 140-159 mmHg, TDD 90-99 mmHg), dan hipertensi stage 2 (TDS >160 mmHg, TDD > 100 mmHg).3 Jamu adalah obat tradisional berbahan alami warisan budaya yang telah diwariskan secara turun temurun dari generasi ke generasi untuk kesehatan. Sesuai

1

Permenkes No.003/Menkes/Per/I/2010 jamu adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa tumbuhan, bahan hewan, bahan mineral, sediaan sarian (galenik), atau campuran dari bahan tersebut yang secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan, dan dapat diterapkan sesuai dengan norma yang berlaku di masyarakat. Dalam farmokologi Herbal ramuan jamu lebih berkhasiat dibandingkan dengan sediaan tunggal. Pada Riset Kesehatan Dasar 2010 (RISKESDAS 2010), diperoleh gambaran bahwa secara nasional, sebanyak 59,12% penduduk Indonesia pernah mengkonsumsi jamu, yang merupakan gabungan dari data kebiasaan mengkonsumsi jamu setiap hari (4,36%) yang merupakan gabungan dari kadangkadang (45,03%) dan tidak mengkonsumsi jamu, tapi sebelumnya pernah (9,73%), serta 94% masyarakat yang pernah minum jamu menyatakan bahwa minum jamu memberikan manfaat bagi tubuh.9 Daun salam dalam bentuk ekstrak etanol sudah pernah diteliti untuk melihat efek antihipertensi pada tikus. Pada percobaan tersebut tikus yang tidak diberi ekstrak daun salam menunjukkan peningkatan tekanan sistol dan diastole yang lebih tinggi daripada tikus yang diberi ekstrak daun salam setelah diinduksi epinefrin (Sukrasno,dkk., 2009).

Kandungan kimia dalam daun salam yang berpengaruh

terhadap tekanan darah adalah flavonoid. Flavonoid dapat menurunkan Tahanan pembuluh darah perifer sehingga menyebabkan vasodilatasi (Duarte, et al., 2009) dan juga mempengaruhi kerja Angiotensin Concerting Enzim (ACE) yang dapat menghambat perubahan angiotensin I menjadi angiotensin II (Balasuriya & Rupasinghe, 2011). Ekstrak etanol daun Salam dosis 225 mg/Kg menunjukkan daya anti hipertensi 55 menit setelah pemberiannya yaitu sebesar 8±3 mmHg dari kenaikan diastol 18 mmHg dan 11±3 mmHg dari kenaikan sistol 27 mmHg, dimana aktivitasnya berbeda tidak bermakna terhadap aktivitas nifedipin dalam menurunkan MAP.10 Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) mengandung ion kalium dan flavonoid yang dapat mempengaruhi tekanan darah. Ion kalium menghambat sekresi renin sehingga menghambat pembentukan angiotensinogen akibatnya terjadi vasodilatasi dan menurunkan resistensi perifer sehingga tekanan darah menurun (Oates & Brown, 2001). Flavonoid bekerja sebagai ACE inhibitor yang menghambat perubahan angiotensin I menjadi angiotensin II sehingga terjadi vasodilatasi , total peripheral resistence menurun dan penurunan sekresi aldosteron yang menyebabkan terjadinya ekskresi natrium dan air, serta retensi kalium,

akibatnya terjadi penurunan tekanan darah

(Robinson, 1991).11 Menurut Wahyu Eka Sari 2011 Isolat AEP-1 asal daun pegagan menunjukkan aktivitas penghambatan ACE tertinggi, Aktivitas inhibisi tersebut 2

melebihi aktivitas inhibisi captopril (0,01 mg/mL) dan captopril (0,02 mg/mL).12 Pada penelitian lain menunjukkan bahwa tanaman tersebut mengandung senyawa bioaktif Triterpenoid (Wijayakusuma & Dalimartha 2005). Triterpenoid merupakan senyawa bioaktif yang dapat berfungsi sebagai antioksidan, sehingga dapat menangkap radikal bebas sebagai salah satu penyebab timbulnya penyakit hipertensi. Efek hipotensif jus segar pegagan telah diteliti pada tikus hipertensi model DOCA-salt. Jus segar pegagan dosis 16, 24, dan 32 g/kg bb diberikan per oral, dengan kontrol positif kaptopril 25 mg/kg bb. Jus segar pegagan 24 dan 32 g/kg bb dapat menurunkan tekanan darah, menurunkan detak jantung, dan melancarkan aliran darah pada tikus hipertensi.13 Air rebusan rimpang alang-alang ( Imperata cylindrical (L.) Raeuschel ) dapat digunakan untuk obat anti hipertensi melalui efek diuretiknya (Wijayakusuma dan Dalimarta.,1997).14 Adanya manitol, glukosa, dan sukrosa dapat menyebabkan diuresis. Obat diuretik adalah obat yang dapat meningkatkan produksi urin dan garam natrium, dan natrium dikeluarkan bersama klorida dalam bentuk NaCl (Katzung.,1995).15 Rustam Erlina, Apt, MS, dosen dari FK UNAND melakukan penelitian untuk mengetahui perbandingan efek diuretik (peluruh air seni) serta kadar natrium dan kalium darah dan urin antara pemberian ekstrak etanol akar alang-alang dan furosemide. Hasil penelitian menunjukkan bahwa penggunaan ekstrak etanol akar alang-alang 25 mg/kgBB, 50 mg/kgBB, dan 100 mg/kgBB memiliki efek diuretik yang hampir sama dengan furosemid dosis 0,72 mg/kgBB.11 Biji pala memiliki efek sedative yang dapat memberikan istirahat yang cukup bagi penderita hipertensi. Weiss E.A. menyebutkan bahwa senyawa aromatik myristicin dan elimicin sebesar 2 - 18% yang terdapat pada biji pala bersifat merangsang tidur Efek sedasi biji pala (Myristica fragrans Houtt) berhubungan dengan reseptor GABAA. Reseptor GABAA merupakan target penting untuk komponen hipnotik-sedatif, anestesi umum, benzodiazepin dan barbiturat. Reseptor GABA diekspresikan di regio anatomi yang melibatkan proses tidur.16 Dalam penelitian penggunaan dosis ekstrak biji pala yang berefek hipnotik 5,5 mg/kgbb, 11 mg/kgbb dan 16,5 mg/kgbb.11 Penggunaan secara bersama-sama keempat tanaman obat tersebut diharapkan terjadi interaksi komplementer dan sinergisme yang menimbulkan efek terapi yang lebih besar daripada bahan tunggal sebagai pencegahan dan pengobatan penyakit hipertensi. Interaksi komplementer saling mendukung menuju satu indikasi dengan mekanisme berbeda untuk menurunkan tekanan darah.

3

Sesuai standar mutu dari WHO, obat tradisional harus memenuhi beberapa persyaratan meliputi kualitas, keamanan, dan khasiat.17,18 Untuk memenuhi persyaratan tersebut diperlukan upaya penegasan keamanan melalui uji praklinik yang meliputi uji ketoksikan dan khasiat kerja, yang jika syarat terpenuhi, maka dapat berlanjut ke uji klinik.18

4

II. TUJUAN DAN MANFAAT PENELITIAN

1. TUJUAN PENELITIAN 1.1 Tujuan Umum : mendapatkan ramuan jamu yang aman dan berkhasiat sebagai penurun tekanan darah (antihipertensi) 1.2 Tujuan Khusus a. Membuktikan aktivitas penurun tekanan darah ramuan jamu dengan komponen tanaman daun salam, alang-alang, pegagan dan biji pala b. Membuktikan toksisitas akut ramuan jamu yang mempunyai aktivitas penurun darah 2. MANFAAT PENELITIAN a. Manfaat bagi ilmu pengetahuan Memberikan pengetahuan dan bukti ilmiah yang lebih lengkap terhadap khasiat ramuan jamu yang terdiri daun salam, pegagan, alang–alang dan biji pala sebagai antihipertensi. Penelitian ini diharapkan bermanfaat menambah khasanah ilmu pengetahuan dibidang pengembangan obat tradisional antihipertensi. b. Memberikan bukti kepada masyarakat pada umumnya dan pasien di klinik hortus medicus pada khususnya bahwa ramuan jamu dapat digunakan untuk menurunkan tekanan darah. c. Manfaat bagi program kesehatan Memberikan

masukan

kepada

pengelola

program

kesehatan

dalam

pengembangan obat tradisional asli Indonesia dan pengendalian penyakit hipertensi. d. Manfaat bagi industri obat tradisional Bagi industri obat tradisional diharapkan dapat dijadikan sebagai masukan untuk pengembangan sediaan obat tradisional terstandar.

5

III. HIPOTESIS Ramuan Jamu anti hipertensi dengan komponen daun salam, alang-alang, pegagan dan biji pala berkhasiat dan aman digunakan sebagai antihipertensi setara dengan obat standar.

6

IV. METODE 1.1 Kerangka teori Angiotensinogen

Daun salam dan pegagan

Resistensi vaskuler (SVR) turun

Angiotensin I Menghambat ACE Angiotensin II

Cardiac output (CO) turun

Aldosteron

Restensi Na dan H2O turun Alang-alang

Penurunan Tekanan Darah

1.2 Bahan, Alat dan Cara kerja 1.2.1 Bahan Penelitian Bahan tanaman berupa daun salam, pegagan, rimpang alang – alang dan biji pala. Bahan tanaman diperoleh di daerah tawangmangu. Spesimen masingmasing tanaman dideterminasi di laboratorium Farmakognosi B2P2TO2T Tawangmangu. Hewan coba yang digunakan adalah tikus putih jantan galur Sprague dawley. Tikus diperoleh dari Badan Pengawasan Obat dan Makanan Jakarta. 1.2.2 Alat Penelitian Alat – alat yang diperlukan dalam penelitian ini adalah: a. Kandang tikus b. Sonde c. Timbangan digital kepekaan 0,1 g d. Spuit e. Alat sentrifus f. Tabung sentrifus g. Blood pressure analyzer untuk mengukur tekanan darah tikus 7

h. Kwali rebusan 1.2.3 Cara kerja Secara rinci prosedur pelakasaan penelitian adalah sebagai berikut : 1. Ramuan antihipertensi telah tersedia di Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional Tawangmangu. 2. Pembuatan rebusan Ramuan jamu dibuat rebusan dalam kwali dari tanah liat, hasil rebusan digunakan untuk pemberian oral pada hewan uji. Rebusan disini menggunakan kwali karena panasnya hanya sampai suhu 900C dan dipanaskan selama 15 menit seperti cara yang ada di masyarakat. Cara Merebus Jamu : 1. Didihkan air 324 ml air 2. Masukkan 1 kemasan ramuan jamu 3. Tunggu selama kurang lebih 15 menit – 20 menit ( sampai air tersisa 270 ml dengan nyala api kecil dan sesekali diaduk ) 4. Diamkan hingga hangat / dingin 5. Kemudian disaring 6. Alat rebus yang digunakan terbuat dari tanah liat 7. Penelitian ini menggunakan stok sari rebusan 50%, maka rumus volume pemberian adalah: (Dosis/50) x vol stok. A. Cara Kerja uji khasiat 1. Hewan coba yang digunakan adalah tikus putih jantan galur SD dengan berat 150-250 gr berumur 2-3 bulan kemudian dilakukan aklimatisasi selama 1 minggu di tempat penelitian untuk penyesuaian dengan lingkungan. Hewan coba diperoleh dari Badan Pengawasan Obat dan Makanan (BPOM) Jakarta. 2. Dilakukan induksi hipertensi dengan metode buatan pada tikus putih jantan galur SD dengan Sebelum perlakuan (hari ke-0) tikus dilakukan pengukuran tekanan darah, kemudian diberikan prednison 1,5 mg/kgbb dalam Nacl 2,5 % setiap hari selama 3 minggu sehingga terjadi peningkatan tekanan darah sistolik dan diastolik tikus putih jantan dari tekanan fisiologis (100/80mmHg) menjadi > 145-200 mmHg. Pemberian ini berlanjut sampai perlakuan selesai. 8

3. Setelah itu tikus putih jantan galur SD dibagi secara random menjadi 5 kelompok P0 (kontrol negatif ), P1 (kontrol positif), P2 (pemberian formula I), P3 (pemberian formula II) dan P4 (pemberian formula III). 4. Setelah itu dilakukan pengukuran tekanan darah tikus dan kemudian dikelompokkan secara acak menjadi lima kelompok (@ 6 ekor) yaitu : Kelompok I

: Kelompok Kontrol negatif

Kelompok II

: Kelompok Kontrol Positif captopril 0,25 mg

Kelompok III

: Kelompok Uji Formula I dengan dosis 0,08 gr

Kelompok IV

: Kelompok Uji Formula II dengan dosis 0,16 gr

Kelompok V

: Kelompok Uji Formula III dengan dosis 0,32 gr

Pada setiap kelompok perlakuan dilakukan pengamatan terhadap berat badan tikus putih jantan galur SD dan kondisi kesehatannya selama penelitian berlangsung. Tabel 1. Kelompok Perlakuan

Kelompok

Perlakuan

Jumlah pemberian

Kontrol (-)

diberi prednison 1,5 mg/kgbb dalam nacl

-

2,5 % Kontrol (+)

Diberi prednison 1,5 mg/kgbb dalam nacl

Captopril 0.25 mg

2,5 % + obat captopril 0,25 mg Formula I

Diberi prednison 1,5 mg/kgbb dalam nacl

2,5 ml

2,5 % + Rebusan I Formula II

Diberi prednison 1,5 mg/kgbb dalam nacl

5 ml

2,5 % + Rebusan II Formula III

Diberi prednison 1,5 mg/kgbb dalam nacl

10 ml

2,5 % + Rebusan III

5. Pemberian formula I, II dan III dilakukan setiap hari secara oral dicekok dengan menggunakan sonde selama 2 minggu. Langkah pertama dimulai dengan penyedotan rebusan menggunakan sonde yang ujungnya terbuat dari karet. Tikus dipegang pada kulit bagian kepala sehingga mulut menghadap ke atas. Selanjutnya sonde dimasukkan melalui mulut secara perlahan sampai mencapai lambung. Kemudian

9

rebusan disemprotkan. Pemberian rebusan ini dilakukan sebanyak 2x sehari. 6. Pada minggu ke-2 dilakukan pengukuran tekanan darah tikus putih jantan galur SD pada masing-masing kelompok.

4. Pembuatan Bahan Uji Bahan segar setelah dipanen dicuci dengan air mengalir hingga bersih; bahan dilakukan pengubahan bentuk, sedangkan rimpang diiris dengan ketebalan sekitar 0.3 cm. Setelah itu diangin-anginkan dilanjutkan pengeringan di dalam oven suhu 30-400C, hingga kadar air kurang dari 10%. Setelah kering, simplisia dibuat ramuan dengan komposisi sebagai berikut daun salam, pegagan, rimpang alang – alang dan biji pala. Dosis per oral diberikan pada tikus berdasarkan hasil penelitian tunggal pada tikus. Tabel 2. Perhitungan dosis yang digunakan berdasarkan hasil penelitian ekstrak tunggal disetarakan dengan bentuk sediaan rebusan Simplisia

Dosis ekstrak

≈ simplisia

Daun salam

200 mg ekstrak etanol (Kusnandar, et al., 2010)

2 gram

Pegagan

3000 mg sesuai Jamu Saintifik (Agus T et al. 2011)

3 gram

Alang – alang

25 mg/kgbb ekstrak etanol (Rustam et al., 2011)

5:0.018=277 ≈ 2770 mg = 3 gram

Biji pala

11 mg/kgbb ekstrak etanol (Rahadian et al., 2009)

2,2:0.018=122 mg ≈ 1 gram

Perbandingan dosis ( daun salam 2 g : herba pegagan 3 g : alang-alang 3 g : biji pala 1 gr = 2 : 3 : 3 : 1) bahan simplisia/

bahan yang telah

dikeringkan. Ini adalah dosis perhari ( tiga kali minum ) pemakaian dalam klinik saintifikasi jamu, jadi jumlah bahan 9 g/ 70 kg BB manusia perhari.Konversi dosis untuk tikus 200 g dari manusia BB 70 kg menurut Laurance dan Hasbach dengan faktor 0,018 Perhitungan : 9 x 0,018 = 0,162 g Dosis untuk tikus 0,162 g/ 200 g BB. Dosis lainnya untuk perlakuan diambil dari setengah dosis dibawah dan dua kali dosis diatasnya.

10

5. Cara Pengukuran Tekanan Darah Hewan Coba Pengukuran hewan coba dilakukan di Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi UGM Yogyakarta. Tikus sebelumnya dipelihara di laboratorium hewan coba Fakultas Farmasi UGM. Pengukuran tekanan darah dengan cara Tail Cuff method menggunakan alat blood pressure analyzer yang dinamakan CODA. Alat ini dapat mengetahui tekanan darah sistolik, diastolik dan Herat Rate ( Laju Jantung).

Prinsip

kerja

pengukuran

tekanan

darah

adalah

Cuff

digelembungkan sampai mencapai tekanan darah diatas tekanan darah sistolik, sehingga nadi menghilang kemudian tekanan cuff dikurangi perlahan-lahan. Pada saat tekanan darah mencapai di bawah tekanan sistolik nadi akan muncul kembali. Cara pengukuran ini sesuai dengan cara pengukuran tekanan darah menggunakan sphigmomanometer pada manusia. Pengukuran tekanan darah pada metode Tail Cuff selain digunakan pada tikus juga dapat digunakan pada mencit, anjing, dan primata kecil (Ngatijan, 2006).19

B. Cara kerja Uji toksisitas Akut Prinsip toksisitas akut adalah pemberian dosis tunggal suatu bahan uji secara oral dengan berbagai dosis pada hewan coba kemudian diobservasi adanya gejala toksik/keracunan dan kematian hewan coba. Uji toksisitas akut bertujuan untuk menetapkan nilai LD50 dan menentukan organ sasaran yang mungkin rusak, efek toksik spesifik dan petunjuk dosis terapi. Tikus dibagi menjadi 6 kelompok, masing-masing terdiri dari 6 ekor tikus jantan dan 3 ekor tikus betina dan 3 ekor jantan galur Spraque Dawley, umur 2 bulan berat badan 150-250 gram. Tiap kelompok diberikan ramuan secara oral untuk sekali pemberian dengan dosis: a. Kelompok Kontrol b. Kelompok perlakuan I rebusan ramuan sebanyak 1080 mg/kgbb c. Kelompok perlakuan II rebusan ramuan sebanyak 2160 mg/kgbb d. Kelompok perlakuan III rebusan ramuan sebanyak 3240 mg/kgbb e. Kelompok perlakuan IV rebusan ramuan sebanyak 4320 mg/kgbb f. Kelompok perlakuan V rebusan ramuan sebanyak 5400 mg/kgbb Ramuan direbus dengan membuat volume stok terlebih dahulu. 11

Sebelum dan sesudah perlakuan bobot badan tikus ditimbang, dicatat terjadinya gejala klinik/toksik. Pengamatan meliputi kesehatan hewan/gejala klinis, berat badan, jumlah kematian dan gross pathology (patologi makro) untuk hewan coba yang mati pada waktu pengamatan. Pengamatan dilakukan selama 14 hari. Pengamatan yang dilakukan meliputi perubahan kulit dan bulu, mata dan membran mukosa, gerakan tubuh, tremor, konvulsi, salivasi, diare, dan pernafasan. Jika terdapat hewan coba yang mati dilakukan otopsi/pembedahan. Jika tidak ada hewan coba yang mati tetap dilakuakn pembedahan untuk melihat histopatologi organ ginjal, liver, lambung, paru, jantung dan limpa hewan coba. Masing – masing kelompok perlakuan diambil 2 hewan coba secara acak. Cara pembedahan adalah sebagai berikut: tikus dimasukkan ke dalam bejana bertutup rapat berisi kapas yang dibasahi eter. Setelah tikus menunjukkan kematian, tikus ditelentangkan pada papan bedah. Pembedahan diawali dengan insisi di bagian perut bawah menggunakan gunting dan pinset bedah. Setelah rongga perut terbuka dilakukan pengambilan organ hepar, limpa, ginjal dan lambung dilanjutkan pembukaan rongga dada untuk mengambil paru-paru dan jantung. Organ dibersihkan dan dicuci dengan larutan dapar. Organ ditimbang dan diamati kemudian dimasukkan dalam larutan formalin 10% untuk dilakukan pemeriksaan histopatologi. Penentuan LD50 (dosis yang menyebabkan kematian 50% hewan uji) menggunakan analisa probit. Apabila tidak terjadi kematian maka hasil toksisitas akut dapat ditentukan dosis terbesar yang masih dapat diterima hewan coba dan dinyatakan sebagai LD50 semu. C. Analisis Data Uji komparabilitas dengan one way Annova baik pada pemilihan sampel untuk melihat tidak adanya perbedaan yang bermkna pada tiap-tiap kelompok maupun hasil yang didapatkan setelah perlakuan untuk melihat ada tidaknyanya perbedaan yang bermakna tiap-tiap kelompok.

12

VI. HASIL

A. Hasil Uji Khasiat Penelitian uji khasiat yang telah dilakukan di Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada pada bulan Agustus sampai dengan Oktober 2015. Sedangkan uji toksisitas akut dilakukan di B2P2TOOT Tawangmangu. Penelitian uji khasiat dengan mengamati perubahan tekanan darah pada tiap kelompok. Alat pengukur tekanan darah yang dinamakan CODA dapat mengukur tekanan darah sistolik, diastolik dan Laju darah pada tikus. Penelitian dimulai dengan induksi prednison dan Nacl 2,5% untuk membuat kenaikan tekanan darah pada tikus. Hasil perubahan tekanan darah sistolik pada tikus setelah pemberian prednison dan Nacl 2,5% dapat dilihat pada gambar 1.

tek. sistolik

Perubahan Tekanan Sistolik Setelah diberi Prednison dan Nacl 2,5 % 163

157,4

155,5 130,7

127,8

127

KONTROL -

KONTROL +

DOSIS 0,08

156

117,3

DOSIS 0.16 H0 Kelompok Perlakuan

148 126

DOSIS 0.32 H21

Gambar 1. Rerata tekanan sistolik sebelum dan sesudah pemberian prednison dan Nacl 2,5%

Tekanan sistolik sebelum dilakukan induksi merupakan tekanan darah normal dan setelah pemberian tersebut tekanan darah menjadi hipertensi ringan ( > 145 dan < 200 mmHg ).

13

Tekanan Diastolik

124,5

110,32 88,17

94,17

Kontrol -

H0

119

85

108 77,17

106 84

Kontrol + Dosis 0.08 gr Dosis 0.16 gr Dosis 0.32 gr Kelompok Perlakuan H21

gambar 2. Rerata tekanan diastolik sebelum dan sesudah pemberian prednison dan Nacl 2,5%

Data yang dihasilkan dilakukan uji Kolmogorov-Smirnov

dengan hasil dan

distribusi data normal. Nilai p dari uji Kolmogorov-Smirnov tekanan darah sistolik sebesar 0,725, tekanan darah diastolik 0,982, tekanan darah sistolik setelah induksi yaitu 0,943, tekanan darah diastolik sesudah pemberian prednison sebesar 0,487, berat badan awal 0,505, berat badan sesudah induksi 0,812 dan HR setelah induksi 0,839. 1. Berat badan Sebelum dan setelah perlakuan dilakukan penimbangan berat badan.

Gambar 3. Gambaran berat badan sebelum dan setelah perlakuan pada tiap – tiap kelompok 14

2. Tekanan Sistolik Tabel 3. Rerata tekanan sistolik pada masing – masing kelompok sebelum dan setelah pemberian prednison dan Nacl 2,5% Pemberian prednison Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3

F

Sebelum Sesudah

0,8 0,50* 1,6 0,20*

130,7 + 14,4 155,5 + 11,9

127,0 + 12,8 157,4 + 7,6

127,0 + 5,1 162,7 + 10,1

117,3 + 17,5 155,4 + 9,2

126,0 + 13,1 148 + 11,7

Sig

*) tidak berbeda bermakna pada p >0,05

Rerata tekanan sistolik setelah pemberian prednison 1,5 mg/kgbb dan Nacl 2,5% ditemukan hasil yang tidak berbeda bermakna pada tiap-tiap kelompok (p>0,05). Hasil tersebut menunjukkan tikus yang dibuat hipertensi memiliki tekanan darah sistolik yang sama. Tabel 4. Rerata perubahan tekanan sistolik pada masing – masing kelompok sebelum dan setelah perlakuan ramuan jamu Perlakuan Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 Sebelum Sesudah

155,5 + 11,9 161,0 + 16,0

157,4 + 7,6 134,0 + 7,0

162,7 + 10,1 136,7 + 10,6

155,4 + 9,2 123,8 + 18,1

148,0 + 11,7 130,1 + 7,8

*) beda bermakna pada p<0,05

Perubahan Tekanan Sistolik setelah perlakuan Ramuan Jamu 2 minggu Tekanan Sistolik

200 150 100

163 155,5161 157,42 137 134,67

156

148 124

130

50 0 H21

Kontrol H35

Kontrol + Dosis 0.08 g Dosis 0.16 Dosis 0.32

Kelompok Perlakuan

gambar 4. Rerata tekanan sistolik sebelum dan sesudah perlakuan ramuan jamu

Uji Variansi menggunakan Levene Test dengan nilai Confident Interval 95% dijumpai nilai p sebesar 0,833. Hasil tersebut menunjukkan tekanan sistolik kelompok kontrol negatif, kontrol positif, perlakuan 1, perlakuan 2 dan perlakuan 3 memiliki variansi yang sama. Kesimpulan bahwa tidak ada perbedaan tekanan sistolik yang menjadi hipertensi. Tekanan sistolik setelah perlakuan 2 minggu pada masing – masing kelompok dilakukan uji beda dengan menggunakan One Way Annova didapatkan nilai p < 0,05 ( Confidence Interval 95 % ) antara kelompok kontrol dengan perlakuan yaitu sebesar 0,001. Setelah

15

F

Sig

1,6 0,20 6,7 0,001*

dilakukan perlakuan jamu dijumpai hasil yang berbeda bermakna antara kelompok kontrol dan perlakuan. 3. Tekanan diastolik Tabel 5. Rerata tekanan diastolik pada tiap kelompok sebelum dan sesudah pemberian prednison dan Nacl 2,5% Pemberian prednison Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 Sebelum 94,2 + 15,9 88,2 +10,9 84,8 4,9 77,2 13,2 83,5 6,7 Sesudah 124,5 + 19,4 110,3 + 5,5 119,3 + 7 108,1 + 9,2 106,2 + 15,4

F 1,9 2,4

Sig 0,14* 0,79*

*)tidak berbeda bermakna pada p > 0,05

Rerata tekanan diastolik setelah dilakukan induksi untuk membuat tikus hipertensi menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna dengan nilai p>0,05. Hasil tersebut menunjukkan terjadi peningkatan namun tidak berbeda bermakna. Tabel 6. Rerata tekanan diastolik pada tiap kelompok sebelum dan sesudah perlakuan Perlakuan Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 Sebelum Sesudah

124,5 + 19,4 124,5 + 14,3

110,3 + 5,5 97,3 + 8,9

119,3 + 7 99,7 + 9,1

108,1 + 9,2 83,3 + 12,6

106,2 + 15,4 95,6 + 5,3

F *) 2,4 12,2

*) berbeda bermakna pada p < 0,05

Tekanan Diastolik

Perubahan Tekanan Diastolik Setelah Perlakuan Ramuan Jamu Selama 2 Minggu 140 120 100 80 60 40 20 0

124,5124,5

Kontrol H21

H35

110,32 97,33

Kontrol +

119 100

108

106 83

Dosis 0.08 g

Dosis 0.16

96

Dosis 0.32

Kelompok Perlakuan

gambar 5. Rerata tekanan diastolik sebelum dan sesudah perlakuan ramuan jamu

Uji Variansi menggunakan Levene Test. Data memiliki variansi yang sama jika nilai signifikan > 0,05 (α = 5%). Karena nilai signifikansi sebesar 0,160 dan 0,111 maka data tekanan sistolik kelompok kontrol negatif, kontrol positif, perlakuan 1, perlakuan 2 dan perlakuan 3 memiliki variansi yang sama. Tekanan diastolik setelah perlakuan 2 minggu pada masing – masing kelompok dilakukan uji beda dengan menggunakan One Way Annova didapatkan nilai p <

16

Sig 0,79 0,001*

0,05 ( Confidence Interval 95 % ) antara kelompok kontrol dengan perlakuan yaitu 0,001. 4. Heart Rate ( Denyut Jantung ) Alat pengukur tekanan darah pada tikus juga bisa mengukur laju jantung per menit. Gambaran nilai laju jantung dapat dilihat pada tabel 7. Tabel 7. Rerata denyut jantung tiap kelompok sebelum dan sesudah pemberian prednison Nacl 2,5% Pemberian prednison Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 F Sebelum Sesudah

420,0 + 80,6 404,7 + 60,2

359,5 + 22,7 354,1 + 45,5

432,5 + 74,7 396,0 + 48,5

474,8 + 54,5 372,8 + 35,8

432,5 + 56,8 358,7 + 42,0

1,9 2,4

Sig 0,10* 0,07*

*) tidak berbeda bermakna pada p > 0,05

Rerata denyut jantung setelah pemberian prednison dan Nacl 2,5% pada tikus yang dibuat hipertensi menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna pada masing – masing kelompok. Denyut jantung pada masing – masing kelompok menunjukkan perubahan yang berbeda. Ada beberapa kelompok yang mengalami kenaikan tetapi ada juga yang turun. Perubahan tersebut setelah dilakukan uji signifikansi didapatkan hasil tidak berbeda pada tiap – tiap kelompok. Tabel 8. Rerata denyut jantung pada tiap kelompok sebelum dan sesudah perlakuan ramuan jamu. Perlakuan Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 Sebelum 404,7 + 60,2 354,1 + 22,7 396,0 + 48,5 372,8 + 35,8 358,7 + 42,0 Sesudah 341,8 + 47,3 340,2 + 33,5 387,5 + 80,8 417,2 + 43,5 375,5 + 56,9 *) berbeda bermakna pada p<0,05

Perubahan Denyut Jantung 500

Axis Title

400

300

404,67 388 341,83 354,15 396 340,17

373

417

359 376

200 100

0 Kontrol -

Kontrol +

Kelompok Perlakuan

Dosis 0.08 Dosis 0.16 Dosis 0.32 gr gr gr

gambar 6. Rerata perubahan denyut jantung sebelum dan setelah perlakuan ramuan jamu

17

F Sig 2,4 0,07 12,2 0,001*

Rerata denyut jantung setelah perlakuan jamu selama 2 minggu dijumpai hasil yang berbeda pada tiap kelompok. Pada kelompok dosis ramuan kedua dan ketiga menunjukkan kenaikan. Kelompok kontrol positif dan ramuan satu mengalami penurunan. 5. Selisih Tekanan Sistolik, Diastolik dan Denyut Jantung Gambaran perbedaan tekanan sistolik, diastolik dan denyut jantung diperlihatkan secara jelas melalui selisih antara sesudah dengan sebelum perlakuan. Perbandingan selisih pengukuran tersebut pada tiap kelompok dapat dilihat melalui tabel 9. Tabel 9. Rerata Selisih Tekanan Sistolik, Diastolik dan Denyut Jantung Sesudah dan Sebelum Perlakuan Ramuan Jamu Selama 2 minggu selisih kontrol + Sig Dosis 1 Sig Dosis 2 Sig Dosis 3 Sistolik Diastolik HR

22,7 + 17,1 12,9 + 12,8 14,0 + 62,2

0,010* 0,190 0,160

26,0 + 10,1 19,7 + 11,1 8,5 + 86,7

0,070 0,053 0,124

31,6 + 25,9 24,8 + 17,4 44,4 + 26,8

Sig

0,002* 17,9 + 7,3 0,017* 10,5+ 13,8 0,004* 16,8 + 46,9

0,038* 0,287 0,280

*) berbeda bermakna pada p<0,05

Selisih rata – rata tekanan sistolik dan diastolik sesudah dan sebelum perlakuan paling optimal pada dosis ramuan jamu kedua. Uji beda One way Annova Multiple comparison dijumpai nilai p<0,05 pada kelompok dosis kedua. Hal tersebut dapat disimpulkan bahwa selisih tekanan darah sistolik sesudah dan sebelum perlakuan menunjukkan adanya perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol. Penurunan denyut jantung pada kelompok kontrol + dan dosis 1 tidak signifikan sedangkan kenaikan denyut jantung pada dosis 2 meski menunjukkan perbedaan bermakna tapi masih dalam rentang normal. 6.

Tekanan Arteri Rata-rata (MAP)

Tabel 10. Rerata Tekanan Arteri Rata-rata pada tiap kelompok sebelum dan pemberian prednison dan Nacl 2,5% Pemberin prednison Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 Sebelum Sesudah

106,3 + 14,3 134,8 + 16,6

101,4 + 10,1 126,0 + 6,1

98,9 + 4,6 133,8 + 7,0

90,5 + 14,4 123,9 + 9,0

97,7 + 7,4 120,1+ 12,7

*) tidak berbeda bermakna pada p > 0,05

Rerata dari tekanan arteri rata – rata pada sesudah pemberian prednison dan Nacl 2,5% mengalami kenaikan dari nilai awal. Tidak ada perbedaan yang bermakna pada tekanan arteri rata – rata yang dijumpai.

18

F 1,7 2,02

Sig 0,18* 0,12*

Tabel 11. Rerata Tekanan Arteri Rata-rata pada tiap kelompok sebelum dan sesudah perlakuan jamu Perlakuan Kontrol kontrol + Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 F Sebelum 134,8 + 16,6 126 + 6,1 133,8 + 7,0 123,9 + 9,0 120,1+ 12,7 2,02 Sesudah 136,7 + 14,5 109,8 + 9,8 112 + 9,1 96,8 + 14,3 107,1 + 5,9 10,3 *) berbeda bermakna pada p<0,05

gambar 7. Rerata perubahan tekanan arteri rata – rata pada tiap kelompok sebelum dan sesudah perlakuan ramuan jamu

Tekanan darah arteri rata – rata bisa didapatkan dengan sebuah rumus yaitu : MAP = (Sistolik + 2 Diastolik)/3. Distribusi data dari tekanan arteri rata-rata normal dan uji homogenitas menggunakan Lavene test menunjukkan data tekanan arteri ratarata memiliki variasi yang sama. Tekanan arteri rata-rata mengalami penurunan secara signifikan pada semua kelompok perlakuan dibanding kelompok kontrol (Sig. < 0,05).

B. Hasil Uji Toksisitas Akut Pada toksisitas akut hasil pengamatan meliputi parameter ketoksikan dan tanda-tanda yang ditimbulkan meliputi : gejala dan tanda-tanda ketoksikan, kematian hewan uji, kimia darah, dan organ terpapar. Organ yang dilihat terutama ginjal dan liver. Gejala dan tanda – tanda ketoksikan dapat dilihat pada tabel 12.

19

Sig 0,12 0,001*

Tabel 12. Pengamatan uji toksisitas akut setelah pemberian formula jamu untuk Hipertensi Ringan dosis tunggal

Dosis ramuan Cara

1

Kontrol

Jumlah

Gejala dan tanda-tanda

pemberian kematian

ketoksisan

Peroral

Tidak ada

Tidak ditemukan tanda-

kematian

tanda ketoksisan pada

normal

hewan uji 2

1080 mg/kgbb

Peroral

Tidak ada

Tidak ditemukan tanda-

kematian

tanda ketoksisan pada hewan uji

3

2160 mg/kgbb

Peroral

Tidak ada

Tidak ditemukan tanda-

kematian

tanda ketosisan pada hewan uji

4

3240 mg/kgbb

Peroral

Tidak ada

Tidak ditemukan tanda -

kematian

tanda ketoksisan pada hewan uji

5

4320 mg/kgbb

Peroral

Tidak ada

Tidak ditemuka tanda -

kematian

tanda ketoksikan pada hewan uji

6

5400 mg/kgbb

Peroral

Tidak ada

Tidak ditemuka tanda -

kematian

tanda ketoksikan pada hewan uji

1. Pengamatan berat badan hewan uji

Hasil pengamatan uji toksisitas akut ramuan formula jamu untuk Hipertensi ringan

terhadap kenaikan berat badan hewan uji setelah

pemberian dosis tunggal dalam pengamatan selama 14 hari terlihat dalam bagan 1. Pemberian dosis ekstrak tanaman dengan variasi lima dosis yaitu 1080 mg/Kgbb (dosis 1), 2160 mg/Kgb(dosis 2), 3240 mg/Kgbb (dosis 3), 4320 mg/kgbb (dosis 4) dan 5400 mg/kgbb (dosis 5) yang dibandingkan dengan kontrol.

20

Gambar 8. Perubahan bobot badan rata-rata (gram) tikus yang diamati selama 14 hari setelah pemberian dosis tunggal ramuan jamu untuk Hipertensi ringan dibandingkan dengan kontrol.

Dari bagan satu tersebut dapat dilihat bahwa bobot badan tikus mengalami kenaikan setelah pemberian dosis tunggal ramuan jamu hipetensi ringan. Penimbangan berat badan dilakukan tiap dua hari mulai hari pertama sebelum diberi ramuan jamu sampai dengan hari ke 14. Pada rentang waktu tersebut tidak ditemukan penurunan berat badan. Hampir seluruh hewan coba mengalami kenaikan berat badan selama penelitian. 2. Penentuan LD50 Tabel 13. Hasil Uji Toksisitas 3.Nama N tanaman

Bagian yg diuji

Hasil LD50

Golongan

Ramuan jamu untuk

Rebusan

>5000 mg/Kg

PNT

Hipertensi ringan

simplisia

BB tikus

o 1

Keterangan : PNT (Practitial Non Toxic) Sumber data : Hasil percobaan laboratorium 3. Pengamatan terhadap kadar ureum darah hewan uji

Pemberian ramuan jamu untuk hipertensi ringan pada hewan uji pada dosis 1080 mg/kgbb, 4320 mg/kgbb dan 5400 mg/ kg bb menaikan, dan pada kadar 2160 mg/kg bb dan 3420 mg/kgbb menurunkan, sedangkan pada kontrol 21

yang tanpa perlakuan kadar ureum juga naik. Gambaran perubahan kadar ureum tiap kelompok ramuan jamu hipertensi ringan dapat dilihat pada gambar 9.

Gambar 9. Rerata kadar ureum sebelum dan setelah pemberian jamu untuk Hipertensi ringan dibandingkan dengan kontrol.

4. Kadar Kreatinin

Pemberian ramuan jamu untuk Hipertensi ringan pada hewan uji pada dosis 1080 mg/kgbb, 3240 mg/kgbb, dan pada kadar 2160 mg/kg bb menurunkan. Pada dosis 4320 mg/kgbb dan 5400 mg/kg bb memiliki kadar kreatinin darah yang sama dengan sebelum perlakuan. Sedangkan pada kelompok kontrol yang tanpa perlakuan kadar kreatinin juga turun.

Gambar 10. Rerata kadar kreatinin sebelum dan setelah pemberian jamu untuk Hipertensi ringan dibandingkan dengan kontrol.

5. Gambaran kadar SGOT

Pemberian ramuan jamu untuk Hipertensi ringan pada hewan uji menunjukkan gambaran terhadap kadar SGOT dengan dosis 1080 mg/kgbb, 22

2160 kg/bb, 3240 mg/kgbb, 4320 mg/kgbb dan 5400 mg/kg bb menurunkan kadar SGOT, sedangkan pada kontrol yang tanpa perlakuan kadar SGOT juga turun. Gambaran perubahan kadar SGOT dapat dilihat pada bagan 4. Menunjukkan ramuan tersebut aman terhadap organ hati.

Gambar 11. Rerata kadar SGOT sebelum dan setelah pemberian jamu hipertensi ringan dibandingkan dengan kontrol.

6. Gambaran kadar SGPT

Pemberian ramuan jamu untuk hipertensi ringan pada hewan uji pada dosis 1080 mg/kgbb, 2160 mg/kgbb dan 5400 mg/kg bb menaikkan kadar SGPT namun kenaikan masih dalam batas normal tidak melebihi dari kontrol normal, sedangkan pada dosis 3240 mg/kg bb dan 4320 mg/kgbb dan kelompok kontrol menurunkan kadar SGPT.

Kadar SGPT IU/L

70 60

50 40

Kadar SGPT sebelum dan setelah perlakuan 64,5

55,5 53,8

46

54,7

58,8 59,7

54,2 57,5

63

61,8

48,5

30

20 10 0 kontrol dosis 1080 dosis 2160 dosis 3240 dosis 4320 dosis mg mg 5400mg Perlakuan SGPT sebelum perlakuan SGPT setelah perlakuan

Gambar 12. Rerata kadar SGPT sebelum dan setelah pemberian jamu untuk Hipertensi ringan dibandingkan dengan kontrol.

23

7. Gambaran Histopatologi hepar Tabel 14. Tabel pemeriksaan histopatologi jaringan hepar setelah perlakuan dosis tunggal ramuan jamu Hipertensi ringan RUSAK KELOMPOK NORMAL PIKNOTIK KARIOREKSIS KARIOLISIS TOTAL KONTROL 96 4 0 0 4 DOSIS I 94 4 1 1 6 DOSIS II 96 2 1 3 6 DOSIS III 94 3 0 0 3 DOSIS IV 97 3 0 0 3 DOSIS V 99 1 0 0 1

Pada tabel dapat dilihat antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan berbagai dosis menunjukkan tidak adanya perbedaan dalam jumlah sel normal. 8. Gambaran Histopatologi Organ Ginjal Tabel 15. Tabel Pemeriksaan histopatologi jaringan gnjal setelah perlakuan dosis tunggal ramunan jamu hipertensi ringan RUSAK KELOMPOK NORMAL PIKNOTIK KARIOREKSIS KARIOLISIS TOTAL KONTROL 72 26 2 0 28 DOSIS I 63 35 1 1 37 DOSIS II 56 40 2 2 44 DOSIS III 54 39 3 4 46 DOSIS IV 52 41 0 7 48 DOSIS V 59 34 1 6 41

Pada tabel dapat dilihat antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan. Peningkatan dosis cenderung tidak diikuti dengan peningkatan jumlah sel yang mengalami kerusakan. Hal ini dapat dilihat pada kelompok dosis paling besar tetapi jumlah sel yang rusak lebih sedikit dbanding kelompok dosis 2,3 dan 4.

24

VI. PEMBAHASAN

A. Uji Khasiat Ramuan Jamu Antihipertensi Ringan Hipertensi merupakan suatu keadaan dimana terjadi peningkatan tekanan darah sistolik dan Diastolik. Tekanan Darah sistolik pada manusia dikatakan normal jika kurang dari 140 mmHg dan tekanan diastolic kurang dari 90 mmHg. Pada penelitian ini menggunakan hewan coba tikus putih jantan galur Rattus novergicus dimana nilai normal tekanan darah sistolik tikus antara 116-145 mmHg dan diastolik antara 76-97 mmHg.20 Sumber lain menyebutkan bahwa hipertensi dicapai setelah tikus mengalami peningkatan tekanan darah >10 mmHg dari tekanan darah pada kelompok normal.21 Penelitian ini menggunakan tikus dengan jenis kelamin jantan karena memiliki sistem hormonal yang lebih stabil dibanding tikus betina sehingga dapat meminimalkan variasi biologi yang berkaitan dengan pengaruh hormonal yang berubah-ubah yang dapat mempengaruhi hasil penelitian. Dalam penelitian kali ini tikus diinduksi dengan menggunakan prednison 1,5 mg/kgbb dalam Nacl 2,5 % setiap hari selama 3 minggu dan tetap diberikan sampai perlakuan masing-masing kelompok selesai. Prednison merupakan obat golongan glukokortikoid sintetik dimana juga mempunyai

efek

mineralokortikoid yang berfungsi mengatur kadar elektrolit dan air, dengan cara penahanan garam di ginjal sehingga terjadi retensi garam yang dapat menarik cairan ke dalam pembuluh darah. Sedangkan Nacl 2,5 % merupakan jenis cairan hipertonik yaitu cairan infus yang osmolaritasnya lebih tinggi dibandingkan serum, sehingga menarik cairan dan elektrolit dari jaringan dan sel ke dalam pembuluh darah. Dalam penelitian ini, pemberian kombinasi prednison dengan Nacl 2,5 % selama 21 hari menyebabkan peningkatan tekanan darah rata-rata menjadi 156 mmHg. Berdasarkan handbook laboratory of animal dikatakan hipertensi ringan bila tekanan darah sistolik > 145 dan < 200 dan tekanan diastolik > 97 mmHg.20 Proses induksi hipertensi dengan metode yang sama selama 14 hari telah dilakukan penelitian terdahulu dapat menyebabkan peningkatan tekanan darah rata-rata menjadi 148 mmHg (Yuliandra et al., 2007); 170 (Gusmelia et al., 2011); 191 mmHg (Charissa et al., 2012) dan 178 mmHg (Yuliandra et.al.,2013).22 Pada penelitian ini mekanisme induksi disesuaikan dengan mekanisme kerja dari ramuan – ramuan tersebut. Sehingga dapat disimpulkan pemberian prednison1,5 mg/KgBB dan NaCl 2,5 % dapat meningkatkan tekanan darah pada tikus 25

normal melalui mekanisme sistem renin-angiotensin-aldosteron dan retensi cairan dapat membuktikan aktivitas ramuan jamu antihipertensi. Menurut Thompson, suatu zat uji dikatakan mempunyai efek antihipertensi jika mampu menurunkan tekanan darah sistolik ≥ 20 mmHg.23 Jadi, dalam penelitian ini apabila terjadi penurunan tekanan darah sistolik ≥ 20 mmHg, maka sudah dapat dikatakan mempunyai efek antihipertensi. Pada kelompok kontrol (-) yang dibuat hipertensi tapi tidak diberikan perlakuan setelah diinduksi terjadi perubahan tekanan sistolik dari 130 mmHg menjadi 155 mmHg yang berarti tidak terdapat perubahan yang menunjukkan bahwa tidak terjadi kompensasi pada tikus yang dibuat hipertensi. Berat badan pada kelompok kontrol positif mengalami penurunan meski tidak signifikan sedangkan pada kelompok perlakuan jamu semua dosis mengalami peningkatan berat badan terutama dosis 2 dan 3 mengalami peningkatan berat badan yang bermakna dibanding kontrol negatif. Setelah dianalisis, tekanan darah pada kelompok kontrol (+) berbeda signifikan dengan kelompok kontrol (-) dengan nilai p 0.01. Kelompok kontrol (+) berhasil menurunkan tekanan darah sistolik. Pada kelompok kontrol (+) diberikan kaptopril yang sudah diketahui merupakan golongan ACE-inhibitor yang sesuai dengan aktivitas yang dimiliki oleh pegagan dan daun salam, sehingga dapat digunakan sebagai pembanding dalam aktivitas ACEinhibitor. Kerja kaptopril ini sesuai digunakan untuk menurunkan tekanan darah tikus hipertensi yang diinduksi dengan prednison 1,5 mg/KgBB dan NaCl 2,5 % yang aktivitas renin-angiotensinya meningkat.24 Dosis kaptopril 2,5 mg/KgBB yang digunakan pada penelitian ini adalah dosis hasil konversi dari dosis efektif pada manusia ke tikus.25 Terdapat perbedaan yang signifikan tekanan sistolik dan diastolik antara kelompok kontrol (-) dengan kelompok ramuan I ( dosis 0.08 gr ), ramuan II ( dosis 0.16 gr ) dan ramuan III ( dosis 0.32 gr ). Data tersebut menunjukkan bahwa ramuan jamu hipertensi dengan dari berbagai dosis mampu menurunkan tekanan darah secara signifikan dan menurunkan tekanan darah sistolik sampai ke nilai normal. Penurunan paling besar pada kelompok dosis 0.16 gr. Penurunannya mampu melebihi penurunan captopril (obat standar). Tekanan darah diastolik yang mengalami penurunan sampai nilai normal pada semua kelompok kecuali kelompok ramuan I (dosis 0.08). Penurunan tekanan diastolik paling besar terjadi pada kelompok ramuan II (0.16 gr) dan signifikan setelah dilakukan uji statistik.

26

ACE memegang peranan fisiologis penting dalam mengatur tekanan darah dan dapat ditemui di pembuluh paru. Darah mengandung angiotensinogen yang diproduksi di hati, oleh hormon renin (diproduksi di ginjal) akan diubah menjadi angiotensin I (dekapeptida yang tidak aktif). ACE yang terdapat pada paru-paru akan mengubah angiotensin I menjadi angiotensin II (oktapeptida yang sangat aktif). Angiotensin II memiliki potensi besar meningkatkan tekanan darah karena memiliki sifat vasoconstrictor (senyawa yang menyebabkan penyempitan pembuluh darah).

26

Daun

salam mengandung senyawa flavonoid yang mempuyai efek hipotensi dengan mekanisme menghambat aktivitas ACE, serta sebagai diuretik.27 Pegagan juga mengandung senyawa kimia yang berperan menghambat enzim ACE. Pada penelitian sebelumnya didaptkan jus segar pegagan 24 dan 32 g/kg bb dapat menurunkan tekanan darah, menurunkan detak jantung, dan melancarkan aliran darah pada tikus hipertensi. Pemberian jus pegagan tidak berpengaruh terhadap tikus normal, berbeda dengan kaptopril yang memberikan efek nyata baik pada tikus hipertensi maupun tikus normal.13 Sedangkan pada penelitian ini kaptopril menunjukkan penurunan denyut jantung tapi tidak bermakna. Pada perlakuan dosis 2 terdapat kenaikan denyut jantung meski signifikan tapi masih dalam rentang normal sehingga ramuan jamu pada penelitian ini tidak mempengaruhi laju jantung secara signifikan karena rentang laju jantung normal pada tikus yaitu 330 – 480 kali/menit. Hal ini berbeda dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Sari eka Wahyu,2011 yang menunjukkan efek jus pegagan dalam menurunkan denyut jantung. Pada peneltitian ini juga terdapat perbedaan yang bermakna tekanan arteri ratarata (MAP) antara kelompok kontrol dan perlakuan. Hal ini sesuai dengan penelitian sebelumnya yang menyebutkan daun salam dapat menurunkan tekanan arteri rata-rata secara signifikan yang setara dengan nifedipin. Tekanan darah arteri menggambarkan kondisi tekanan darah yang ada pada darah saat keluar dari jantung. Tekanan yang rendah mengakibatkan suplai darah kurang ke jaringan. Sehingga oksigen dan sari – sari makanan tidak tersampaikan, dan akhirnya dapat terjadi penurunan metabolisme tubuh. Kondisi ini yang dinamakan denga hipoksia. Rimpang alang-alang memiliki aktivitas sebagai diuretik yang efektif sehingga dapat ikut berperan dalam menurunkan tekanan darah. Biji pala dapat membantu menurunkan tekanan darah dengan merangsang tidur. Keempat ramuan ini bekerja secara sinergis dalam menurunkan tekanan darah. Efek penurunan tekanan darah sama dengan obat standar bahkan untuk tekanan diastolik lebih baik dari obat standar. 27

Penurunan tekanan darah sebanyak 5-6 mmHg dapat mengurangi risiko terkena serangan stroke sampai 40%, penyakit jantung koroner 15-20% dan mengurangi kegagalan jantung.28 Hasil penelitian Bovet et al.29 terhadap volunter menunjukkan bahwa penurunan tekanan darah 7 mmHg terjadi setelah meminum obat antihipertensi 0-3 hari perminggu, dengan tekanan darah awal 158 mmHg. Bila mengkonsumsi obat 6-7 hari perminggu maka tekanan darah akan turun sampai 16 mmHg. Dari penggunaan obat antihipertensi terhadap pasien dapat mengurangi risiko terkena stroke sampai 18%, penyakit jantung koroner 16% dan kematian pecah pembuluh darah 21%. Penurunan tekanan darah rata rata 5-6 mmHg untuk diastolik dan 10-12 mmHg untuk sistolik.30 Penurunan tekanan darah sebaiknya tidak terlalu cepat tetapi secara perlahan. Dalam pengobatan hipertensi kronik, penurunan tekanan darah harus bertahap dan memerlukan pendekatan individual. Durasi penurunan tekanan darah untuk obat antihipertensi yang terbaik adalah yang tidak terlalu cepat dalam menurunkan tekanan darah setelah pemberiannya.31

B. Uji toksisitas akut formula jamu untuk Hipertensi ringan Uji toksisitas akut dilakukan untuk mengetahui dosis terbesar yang besar tunggal yang diperkirakan memberikan efek toksik, pengamatan meliputi : 1.

Gejala ketoksikan Pada pengamatan kesehatan hewan coba selama penelitian (14 hari) seluruh kelompok hewan coba tidak ditemukan gejala klinis keracunan seperti diare, poliuria, muntah-muntah, kejang, tremor, dan penurunan kesadaran. Pemberian dosis terbesar 5400 mg/Kgbb pada dosis tunggal oral tidak ditemukan adanya kematian sampai 14 hari pengamatan. Juga tidak ditemukan tanda – tanda ketoksisan pada hewan uji. Sehingga nilai LD50 ditetapkan sebagai nilai LD50 semu dari rebusan ramuan jamu untuk Hipertensi ringan adalah >5000 mg/Kgbb. Pada akhir penelitian, seluruh hewan coba yang masih hidup, tidak dicurigai adanya perubahan makroskopis terhadap organ hepar, ginjal, usus dan jantung.

2. Pengamatan berat badan hewan uji Hasil pengamatan uji toksisitas akut ramuan formula jamu untuk Hipertensi ringan terhadap kenaikan berat badan hewan uji setelah pemberian 28

dosis tunggal dalam pengamatan selama 14 hari. Terlihat peningkatan berat badan pada setiap kelompok baik kelompok perlakuan dan kelompok kontrol. Dari bagan tersebut terlihat peningkatan paling besar pada dosis 5400 mg/kgbb Hal ini menunjukkan ramuan jamu hipertensi ringan kemungkinan memiliki efek meningkatkan nafsu makan hewan coba. 3. Pengamatan pada ginjal dan liver

Ramuan jamu tidak mempengaruhi fungsi ginjal. Hasil pengukuran kadar ureum dalam darah menjelaskan bahwa ramuan jamu berbagai dosis menunjukkan kenaikkan dari nilai normal tetapi kreatinin dalam darah masih dalam batas normal. Hasil tersebut menjelaskan ramuan jamu meski memiliki sifat diuretik tetapi hal tersebut tidak memberatkan fungsi ginjal. Hal ini juga didukung dengan data pemeriksaan histopatologi organ ginjal yang menunjukkan gambaran yang sama dengan kelompok kontrol. Ramuan jamu berbagai dosis tersebut juga tidak mempengaruhi fungsi liver. Hal tersebut berdasarkan dari hasil SGOT masih dalam batas normal meski hasil SGPT menunjukkan kenaikan sedikit dari nilai normal tetapi kelompok tanpa diberi perlakuan juga mengalami hal sama yaitu kenaikan sedikit dari normal. Hasil tersebut jika melihat pemeriksaan histopatologi organ hepar maka tidak ada perbedaan antara gambaran kelompok kontrol dengan perlakuan. Gambaran tersebut 95% didominasi oleh gambaran sel normal dari hepar.

29

VII. KESIMPULAN DAN SARAN

A. KESIMPULAN Ramuan jamu yang terdiri dari daun salam, pegagan, akar alang – alang dan biji pala dapat digunakan untuk menurunkan tekanan darah tinggi ringan. Kenaikan dosis ramuan tidak diikuti kenaikan aktivitas hipertensi. Dosis efektif dalam menurunkan tekanan darah sampai nilai normal pada dosis 0,16 gr meski berpengaruh tidak signifikan pada frekuensi jantung. Tidak adanya pengaruh pada fungsi ginjal dan liver dengan rentang dosis toksik yang lebar sehingga ramuan tersebut aman digunakan.

B. SARAN Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan mengikutsertakan manusia sebagai subyek penelitian. Arah dari penelitian tersebut untuk mendapat ramuan jamu saintifik untuk antihipertensi.

30

VIII. UCAPAN TERIMA KASIH

Alhamdulillah, segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah menganugerahkan limpahan rahmat dan karunia yang tiada akhirnya, serta shalawat kepada Rasulullah Muhammad SAW sehingga Laporan Penelitian berjudul “Uji Aktivitas dan Toksisitas Akut Ramuan Jamu Antihipertensi Ringan Pada Tikus Putih Rattus norvegicus L” dapat diselesaikan. Selesainya laporan ini tidak terlepas dari dukungan serta bimbingan berbagai pihak dalam proses penelitian dan penyusunan laporannya , untuk itu penulis menyampaikan terima kasih kepada: 1. Indah Yuning Prapti, SKM., M.Kes. selaku Kepala Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional (B2P2TO-OT) 2. Ketua PPI dan pejabat struktural B2P2TO-OT 3. Seluruh anggota tim penelitian 4. Seluruh rekan kerja di B2P2TO-OT atas segala bantuan dan dukungan yang telah diberikan kepada penulis.

31

IX. DAFTAR PUSTAKA

1.

Faisal E. Faktor Resiko Hipertensi pada Wanita Pekerja dengan Peran Ganda Kabupaten Bantul Tahun 2011. Berita Kedokteran Masyarakat Vol. 28 No.2. 2012

2.

WHO-ISH Hypertension Guideline Committee. Guidelines of the management of hypertension. J Hypertension. 2003;21(11): 1983-92.

3.

Joint National Committee on Prevention, Detection, Evalua- tion, and Treatment of High Blood Pressure (JNC). The Seventh Report of the JNC (JNC-7). JAMA. 2003;289(19):2560-72.

4.

Departemen Kesehatan RI. Riset Kesehatan Dasar, Laporan Nasional 2013. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. 2013

5.

Sugiharto A. Faktor – faktor Resiko Hipertensi Grade II pada Masyarakat Studi Kasus di Kabupaten Karanganyar [Tesis]. Semarang : Program Studi Magister Epidemiologi Program Pasca Sarjana UNDIP ; 2007

6.

Basuki B, Setianto B. Age, body posture, daily working load - past antihypertensive drugs and risk of hypertension: a rural Indone- sia study. Med J Indon. 2001;10(1):29-33

7.

Darmojo B. Mengamati penelitian epidemiologi hipertensi di Indonesia. Disampaikan pada seminar hipertensi PERKI. 2000.

8.

Setiawan, Zamhir. Karakteristik sosiodemografi sebagai faktor resiko hipertensi studi ekologi di pulau Jawa tahun 2004 [Tesis]. Jakarta: Program Studi Epidemiologi Program Pasca Sarjana FKM-UI; 2006.

9.

Pudjiastuti. Hasil Penelitian Tanaman Obat Pusat Penelitian dan Pengembangan

Biomedis

dan

Farmasi

1997-2002,

Balitbangkes,

Departemen Kesehatan RI, Jakarta.1999 10. Ismiyati. Aktivitas Antihipertensi Ekstrak Etanol Daun Salam ( Syzygium polianthum W ) Pada Tikus Wistar, Profil Kromatografi Lapis Tipis Serta Penetapan Kandungan Fenolik Total Dan Flavonoid Totalnya. Program Pasca Sarjana Fakultas Farmasi UGM. 2013 11. Vademikum Tanaman Obat Untuk Saintifikasi Jamu Jilid 1. 2012, Jakarta: Kementerian Kesehatan RI

32

12. Sari Eka Wahyu. Aktivitas Antihipertensi Aktinomiset Endofit Asal Tanaman Pegagan dan Belimbing Wuluh, FMIPA IPB, Bogor;2011 13. Muangnongwa S. Effect of Expressed Juice of Fresh Centella asiatica (L.) Urban Leaves on Cardiovascular Function in DOCA-Salt Hypertensive Rats, Thesis, Mahidol University, Thailand;2004 14. Nugroho, E., I. Whendratno, Suhartanto, Modyland dan E. Kusuma. Tumbuh-Tumbuhan Berkhasiat Obat. Semarang: Eka Offset;1997 15. Wijayakusuma, H. dan S. Dalimarta. Ramuan II Tradisional untuk Pengobatan Darah Tinggi. Jakarta: Penebar Swadaya;1997 16. Rahadian D Dhimas. Pengaruh ekstrak biji pala (myristica fragrans houtt) dosis 7,5 mg/25grbb terhadap waktu induksi tidur dan lama waktu tidur mencit balb/c yang diinduksi thiopental. FK UNDIP Semarang; 2009 17. Iswantini Pradono Dyah et.al. Pengembangan Obat Herbal Terstandar Antihipertensi. Pusat Teknologi Farmasi dan Medika. Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Aromatik. Departemen Pertanian, Jakarta. 2010 18. Depkes RI. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta : Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan; 2000 19. Ngatijan.

Metode

Laboratorium

dalam

Toksikologi,

Pusat

Antar

Universitas Bioteknologi Universitas Gajah Mada Yogyakarta. Petunjuk Laboratorium. 2006 20. Krinke, G. J. The Hand Book of Laboratory Animal. The Laboratory Rat. Midas Printing Ltd., Scotland. 2000. 349-353. 21. Ciptaningsih E. 2012. Uji Aktivitas Antioksidan dan Karakteristik Fitokimia pada Kopi Luwak Arabika dan Pengaruhnya terhadap Tekanan Darah Tikus Normal dan Tikus Hipertensi. Program Studi Magister Ilmu Kefarmasian. Fakultas MIPA. Universitas Indonesia. 22. Yuliandra Y., Armenia., H. Arifin. 2013. Studi Efek Antihipertensi Tumbuhan Tali Putri (Cassyta filiformis L.) Pada Tikus Hipertensi Yang diinduksi Prednison dan Garam. Prosiding Seminar Nasional Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik III. 264 – 270. 23. Fidrianny I, Padmawinata K, Soetarno S, YulinahE. 2003. Efek Antihipertensi dan Hipotensi Beberapa Fraksi dari Ekstrak Etanol Umbi Lapis Kucai (Allium schoenoprasum L., Lliliaceae).Jurnal Mat Si Volume (8): 147-150 33

24. Badyal DK, Dadhich AP. 2003. Animal Models of Hypertension and Effect of Drugs. Indian J of Pharmacology Volume (35): 349-362. 25. Laurence DR, Bennet PN. 2000. Clinical Pharmacology. Edisi ke-7. New York: Churcill Livingstone. 26. Sridevi P., Prashanth K.S., and Bhagavan Raju M., 2011. Angiotensin Converting Enzyme: A Target for Anti-Hypertensive Drugs. Department of Pharmaceutical Chemistry, CM College of Pharmacy, Dhulapally, Maisammaguda, Secunderabad, A. P., India 27. Ismarani, Pradono DI, Darusman LK. Mikroenkapsulasi Ekstrak Formula Pegagan-Kumis

Kucing-Sambiloto

Sebagai

inhibitor

angiotensin

I

converting enzyme Secara In Vitro. CEFARS: Jurnal Agribisnis dan Pengembangan Wilayah. 2011;3(1):11-24. 28. Alleyne T, Roche S, Thomas C, Shirley A. 2005. The Control of Hypertension by Use of Coconut Water and Mauby, Two Tropical Food Drink. West Indian Med Journal 54(1): 3-8. 29. Bovet P, Burnier M, Madeleine G, Waeber B, Pascaud F. 2002. Monitoring One Year Compliance to Antihypertension Medication in The Seychelles. Jurnal Bull World Health Org Volume 8(1). 30. Lindhlom LH. 2003. The Problem of Uncontrolled Hypertension. Journal of Human Hypertension Volume 16: S3-S8. 31. Pikir BS. 1997. Penatalaksanaan Komplikasi Kardiovaskular pada Hipertensi. Cermin Dunia Kedokteran Volume 116: 16-21.

34

Lampiran 1. Data pengamatan kematian hewan uji selama 14 hari pada pemberian ramuan jamu antihipertensi ringan

Kelp. Pengamatan kematian pada hari ke.. 1 2 3 4 5 6 7 ♀ K1 ♀ K2 ♀ K3 ♀ K4 ♀ K5 ♀ K6 ♀ A1 ♀ A2 ♀ A3 ♀ A4 ♀ A5 ♀ A6 ♀ B1 ♀ B2 ♀ B3 ♀ B4 ♀ B5 ♀ B6 ♂ C1 ♂ C2 ♂ C3 ♂ C1 ♂ C2 ♂ C3 ♂ D1 ♂ D2 ♂ D3 ♂ D4 ♂ D5 ♂ D6 ♂ E1 ♂ E2 ♂ E3 ♂ E4 ♂ E5 ♂ E6 Ket : + K A B C D E

: : : : : : : :

8 -

ditemukan tanda-tanda ketoksisan tidak ditemukan tanda-tanda ketoksisan Kontrol Dosis 1080 mg / kg BB Dosis 2160 mg / kg BB Dosis 3240 mg / kg BB Dosis 4320 mg / kg BB Dosis 5400 mg / kg BB 35

9 -

10

11

12

13

14

-

-

-

-

-

Jml 0

0

0

0

0

0

Lampiran 2. Hasil pengamatan tanda-tanda ketoksisan terhadap hewan uji selama 14 hari pada uji toksisitas akut ramuan jamu antihipertensi ringan

Kel

Pengamatan tanda-tanda ketoksisan pada hewan uji Kejang

Muntah

Diare

tremor

mata

konvulsi

merah

♀ K1 ♀ K2 ♀ K3 ♀ K4 ♀ K5 ♀ K6 ♀ A1 ♀ A2 ♀ A3 ♀ A4 ♀ A5 ♀ A6 ♀ B1 ♀ B2 ♀ B3 ♀ B4 ♀ B5 ♀ B6 ♂ C1 ♂ C2 ♂ C3 ♂ C1 ♂ C2 ♂ C3 ♂ D1 ♂ D2 ♂ D3 ♂ D4 ♂ D5 ♂ D6 ♂ E1 ♂ E2 ♂ E3 ♂ E4 ♂ E5 ♂ E6

-

-

-

-

-

Ket :

+ -

: :

ditemukan tanda-tanda ketoksisan tidak ditemukan tanda-tanda ketoksisan 36

Bulu

Pendarahan

kekakuan

-

-

-

K A B C D E

: : : : : :

Kontrol Dosis 1080 mg / kg BB Dosis 2160 mg / kg BB Dosis 3240 mg / kg BB Dosis 4320 mg / kg BB Dosis 5400 mg / kg BB

Lampiran 3. Data rerata penimbangan bobot badan hewan coba pada toksisitas akut Hari ke

kontrol

Dosis 1080

Dosis 2160

Dosis 3240

Dosis 4320

Dosis 5400

mg/Kg bb

mg/Kg bb

mg/Kg bb

mg/Kg bb

mg/Kg bb

1

142,5

154,7

150,2

220,5

196,2

231,3

3

165,2

177,2

169

258,3

236

258

5

170,8

180,2

174,3

265,2

247,2

271,5

7

173,7

181,2

178,5

267,3

259,7

281,7

9

179

185,2

184,3

283,5

269,7

288,8

11

183,2

190,5

188,3

289,7

272,8

295

13

184

193,3

192,3

276

281,3

284,7

15

187,8

202,7

195,3

268,3

286

301

Lampiran 4. Data rerata pengukuran kadar ureum, kreatinin, SGOT, dan SGPT darah hewan uji pada toksisitas akut. Perlakuan

ureum sebelum (H0)

ureum setelah (H14)

Kontrol

34,8

37,2

Dosis 1080 mg/kg bb

40,3

47,2

Dosis 2160 mg /kg bb

46,5

37,2

Dosis 3240 mg/ kg bb

55,5

43,7

Dosis 4320 mg/ kg bb

35,2

42,5

Dosis 5400 mg/ kg bb

38,3

43,7

Perlakuan

Kreatinin sebelum (H0)

Kreatinin setelah (H14)

Kontrol

0,5

0,4

Dosis 1080 mg/kg bb

0,5

0,4

Dosis 2160 mg /kg bb

0,5

0,4

Dosis 3240 mg/kg bb

0,5

0,4

37

Dosis 4320 mg/kg bb

0,5

0,5

Dosis 5400 mg/kg bb

0,5

0,5

SGOT sebelum

SGOT setelah perlakuan

perlakuan (H0)

(H14)

Kontrol

133,7

102,5

Dosis 1080 mg/kg bb

141,5

116,2

Dosis 2160 mg /kg bb

108

102,7

Dosis 3240 mg/kg bb

125,2

116,5

Dosis 4320 mg/kg bb

134

126,7

Dosis 5400 mg/kg bb

130,3

91,2

SGPT sebelum perlakuan

SGPT setelah perlakuan

(H0)

(H14)

Kontrol

64,5

46

Dosis 1080 mg/kg bb

53,8

55,5

Dosis 2160 mg/kg bb

48,5

54,7

Dosis 3420 mg/kg bb

59,7

58,8

Dosis 4320 mg/kg bb

57,5

54,2

Dosis 5400 mg/kg bb

61,8

63

Perlakuan

Perlakuan

Lampiran 5. Hasil Uji statistik One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test tek.diast tek.sistole

N Normal

Parametersa,b

Asymp. Sig. (2-tailed)

tek.sistole

intervensi

tek.diast

interven

HR

awal

awal

ole awal

si awal

awal

30

125.7667

155.7963

85.5667

13.14294

10.63193

Absolute

.126

.097

.085

.153

Positive

.085

.097

.085

.091

Negative

-.126

-.096

-.075

.126

.097

.085

.153

.200c,d

.200c,d

.200c,d

.073c

Deviation

Test Statistic

HR

30

Std.

Most Extreme Differences

ole

30 Mean

mean

a. Test distribution is Normal.

38

11.7610 8

arterial

interven pressure interven si awal

30

30

30

113.699

423.

377.250

3 8667

3

13.6168

MAP

awal

si awal

30 98.9667

30 127.726 1

68.3

48.2642

11.3500

11.7267

6 1809

0

0

8

.172

.113

.073

.140

.172

.113

.073

.084

-.153 -.148

-.067

-.066

-.140

.172

.113

.073

.140

.024c

.200c,d

.200c,d

.137c

b. Calculated from data. c. Lilliefors Significance Correction. d. This is a lower bound of the true significance.

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test mean tek.sistole intervensi

tek.diastole

intervensi

HR

awal

awal

awal

awal

awal

30

30

30

30

125.7667

155.7963

85.5667

113.6993

13.14294

10.63193

11.76108

13.61686

Absolute

.126

.097

.085

Positive

.085

.097

.085

Negative

-.126

-.096

-.075

.126

.097

.085

.200c,d

.200c,d

.200c,d

Mean

Std. Deviation Most Extreme Differences

Test Statistic Asymp. Sig. (2-tailed)

3

68.3

48.2642

11.3500

1809

0

0

.153

.172

.113

.073

.140

.091

.172

.113

.073

.084

-.153 -.148

-.067

-.066

-.140

.172

.113

.073

.140

.073c .024c

.200c,d

.200c,d

.137c

.153

Sig.

.363

4

25

.833

1.803

4

25

.160

HR intervensi awal

.499

4

25

.736

berat badan intervensi awal

.633

4

25

.644

39

awal

8667

Test of Homogeneity of Variances

tek.diastole intervensi awal

awal

377.250

d. This is a lower bound of the true significance.

df2

si awal

intervensi

423.

c. Lilliefors Significance Correction.

df1

interven pressure

MAP

30

b. Calculated from data.

Levene Statistic

arterial

30

a. Test distribution is Normal.

tek.sistole intervensi awal

HR

tek.sistole

N Normal Parametersa,b

tek.diastole

30

30

98.9667

127.7261

11.72678

ANOVA Sum of Squares tek.sistole intervensi awal

Between Groups

tek.diastole intervensi awal

HR intervensi awal

Df

Mean Square

F

665.015

4

166.254

Within Groups

2613.086

25

104.523

Total

3278.101

29

Between Groups

1480.965

4

370.241

Within Groups

3896.184

25

155.847

Total

5377.149

29

Between Groups

12012.514

4

3003.128

Within Groups

55541.057

25

2221.642

Total

67553.570

29

26714.917

4

6678.729

Within Groups

31432.750

25

1257.310

Total

58147.667

29

berat badan intervensi awal Between Groups

Sig.

1.591

.208

2.376

.079

1.352

.279

5.312

.003

Test of Homogeneity of Variances tek.sistole intervensi awal

Levene Statistic .363

df1 4

df2 25

Sig. .833

tek.sistole intervensi akhir

1.332

4

25

.286

ANOVA Sum of Squares tek.sistole awal

Between Groups

df

Mean Square

605.867

4

Within Groups

4403.500

25

Total

5009.367

29

F

151.467 .860 176.140

ANOVA selisih sistole sebelum dan sesudah Sum of Squares

Df

Mean Square

Between Groups

4928.977

4

1232.244

Within Groups

8575.045

25

343.002

13504.022

29

Total

40

F 3.593

Sig. .019

Sig. .501

LSD Dependent (I) kelompok perlakuan

(J) kelompok perlakuan

95% Confidence

Variable

Interval Mean

kontrol -

tek.sistole intervensi akhir

dimension2

Upper

Bound

Bound

Difference (I-J)

Std. Error

kontrol positif

26.33333*

7.74467

.002*

10.3829

42.2838

perlakuan 1

24.33333*

7.74467

.004*

8.3829

40.2838

perlakuan 2

37.16667*

7.74467

.000*

21.2162

53.1171

perlakuan 3

30.86167*

7.74467

.001*

14.9112

46.8121

F

Sig.

dimension3

Sig.

Lower

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic

df1

df2

Sig.

tek.diastole intervensi awal

1.803

4

25

.160

tek.diastole intervensi akhir

2.096

4

25

.111

ANOVA Sum of Squares tek.diastole intervensi akhir

Df

Mean Square

Between Groups

5425.022

4

1356.255

Within Groups

2766.266

25

110.651

Total

8191.287

29

12.257

.000

Multiple Comparisons LSD Dependent (I) kelompok Variable

(J) kelompok perlakuan

perlakuan

tek.diastole

kontrol -

intervensi akhir

dimension2

4

Sig.

Lower Bound

Bound 39.6746

perlakuan 1

24.83333* 6.07318

.000*

12.3254

37.3413

perlakuan 2

41.16667* 6.07318

.000*

28.6587

53.6746

perlakuan 3

28.85500* 6.07318

.000*

16.3470

41.3630

Sig. 25

Error

14.6587

selisih diastole sebelum & sesudah

1.421

(I-J)

Upper

.000*

Test of Homogeneity of Variances

df2

Std.

27.16667* 6.07318

dimension3

df1

Difference

kontrol positif

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Levene Statistic

95% Confidence Interval

Mean

.256

41

Multiple Comparisons selisih diastole sebelum & sesudah LSD (I) kelompok perlakuan (J) kelompok perlakuan

kontrol -

dimension2

95% Confidence Interval

Mean Difference (I-

Std.

J)

Error

Upper Sig.

Lower Bound

Bound

kontrol positif

-12.98333

9.69169

.192

-32.9437

6.9771

perlakuan 1

-19.66667

9.69169

.053

-39.6271

.2937

perlakuan 2

-24.79167*

9.69169

.017*

-44.7521

-4.8313

perlakuan 3

-10.53500

9.69169

.287

-30.4954

9.4254

dimension3

*. The mean difference is significant at the 0.05 level. Test of Homogeneity of Variances MAP intervensi akhir Levene Statistic 1.891

df1

df2 4

Sig. 25

.143

ANOVA MAP intervensi akhir Sum of Squares

df

Mean Square

F

Between Groups

5194.988

4

1298.747

Within Groups

3146.243

25

125.850

Total

8341.231

29

Sig.

10.320

.000

Multiple Comparisons MAP intervensi akhir LSD (I) kelompok

(J) kelompok perlakuan

perlakuan

95% Confidence Interval

Mean Difference

Upper

(I-J) kontrol -

dimension2

Std. Error

Sig.

Lower Bound

Bound

kontrol positif

26.88889*

6.47688

.000

13.5495

40.2283

perlakuan 1

24.66667*

6.47688

.001

11.3273

38.0060

perlakuan 2

39.83333*

6.47688

.000

26.4940

53.1727

perlakuan 3

29.52389*

6.47688

.000

16.1845

42.8633

dimension3

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic HR intervensi awal

df1

df2

Sig.

.499

4

25

.736

HR awal

2.699

4

25

.054

HR intervensi akhir

1.646

4

25

.194

42

ANOVA Sum of Squares HR intervensi awal

HR awal

Mean Square

Between Groups

12012.514

4

3003.128

Within Groups

55541.057

25

2221.642

Total

67553.570

29

Between Groups

41428.133

4

10357.033

Within Groups

93925.333

25

3757.013

135353.467

29

Between Groups

25290.481

4

6322.620

Within Groups

75123.083

25

3004.923

100413.565

29

Total HR intervensi akhir

df

Total

F

Sig.

1.352

.279

2.757

.050

2.104

.110

F

Sig.

ANOVA Sum of Squares tek.sistole intervensi awal

Mean Square

665,015

4

166,254

Within Groups

2613,086

25

104,523

Total

3278,101

29

Between Groups

4809,951

4

1202,488

Within Groups

4498,499

25

179,940

Total

9308,450

29

Between Groups

1480,965

4

370,241

Within Groups

3896,184

25

155,847

Total

5377,149

29

Between Groups

5425,022

4

1356,255

Within Groups

2766,266

25

110,651

Total

8191,287

29

selisih sistole sebelum dan

Between Groups

4928,977

4

1232,244

sesudah

Within Groups

8575,045

25

343,002

13504,022

29

tek.sistole intervensi akhir

tek.diastole intervensi awal

tek.diastole intervensi akhir

Between Groups

Df

Total selisih diastole sebelum &

Between Groups

2140,753

4

535,188

sesudah

Within Groups

7044,665

25

281,787

Total

9185,418

29

Between Groups

41428,133

4

10357,033

Within Groups

93925,333

25

3757,013

135353,467

29

Between Groups

12012,514

4

3003,128

Within Groups

55541,057

25

2221,642

Total

67553,570

29

HR awal

Total HR intervensi awal

43

1,591

,208

6,683

,001

2,376

,079

12,257

,000

3,593

,019

1,899

,142

2,757

,050

1,352

,279

HR intervensi akhir

Between Groups

25290,481

4

6322,620

Within Groups

75123,083

25

3004,923

100413,565

29

795,467

4

198,867

Within Groups

2940,389

25

117,616

Total

3735,856

29

976,047

4

244,012

Within Groups

3011,959

25

120,478

Total

3988,006

29

Between Groups

5194,988

4

1298,747

Within Groups

3146,243

25

125,850

Total

8341,231

29

Total mean arterial pressure awal

MAP intervensi awal

MAP intervensi akhir

Between Groups

Between Groups

2,104

,110

1,691

,184

2,025

,122

10,320

,000

Descriptives 95% Confidence Interval for Mean Std. N tek.sistole awal

Mean

Deviation

Std. Error

Lower

Upper

Minimu

Bound

Bound

m

Maximum

kontrol -

6

130,6667 14,43145

5,89161

115,5218

145,8115

115,00

157,00

kontrol positif

6

127,8333 12,84394

5,24351

114,3545

141,3122

111,00

144,00

perlakuan 1

6

127,0000

5,13809

2,09762

121,6079

132,3921

121,00

134,00

perlakuan 2

6

117,3333 17,54613

7,16318

98,9198

135,7469

92,00

144,00

perlakuan 3

6

126,0000 13,16055

5,37277

112,1889

139,8111

109,00

139,00

30

125,7667 13,14294

2,39956

120,8590

130,6743

92,00

157,00

Total tek.sistole intervensi

kontrol -

6

155,5000 11,87855

4,84940

143,0342

167,9658

141,00

172,00

awal

kontrol positif

6

157,4117

7,57565

3,09274

149,4615

165,3618

149,80

167,00

perlakuan 1

6

162,6667 10,09290

4,12041

152,0748

173,2585

153,00

179,00

perlakuan 2

6

155,4033

9,24446

3,77404

145,7019

165,1048

141,00

168,25

perlakuan 3

6

148,0000 11,69615

4,77493

135,7256

160,2744

130,00

163,00

30

155,7963 10,63193

1,94112

151,8263

159,7664

130,00

179,00

Total tek.sistole intervensi

kontrol -

6

161,0000 15,96246

6,51665

144,2484

177,7516

135,00

181,00

akhir

kontrol positif

6

134,6667 11,99444

4,89671

122,0793

147,2541

122,00

154,00

perlakuan 1

6

136,6667 10,57670

4,31792

125,5671

147,7662

116,00

145,00

perlakuan 2

6

123,8333 18,12641

7,40008

104,8108

142,8558

95,00

143,00

perlakuan 3

6

130,1383

7,78459

3,17804

121,9689

138,3078

118,00

139,00

137,2610 17,91594

3,27099

130,5711

143,9509

95,00

181,00

Total

30

44

tek.diastole awal

kontrol -

6

94,1667 15,87976

6,48288

77,5019

110,8314

72,00

109,00

kontrol positif

6

88,1667 10,94380

4,46779

76,6819

99,6515

74,00

105,00

perlakuan 1

6

84,8333

4,95648

2,02347

79,6318

90,0348

76,00

91,00

perlakuan 2

6

77,1667 13,16688

5,37536

63,3489

90,9845

59,00

96,00

perlakuan 3

6

83,5000

6,71565

2,74165

76,4524

90,5476

74,00

93,00

30

85,5667 11,76108

2,14727

81,1750

89,9583

59,00

109,00

Total tek.diastole intervensi

kontrol -

6

124,5000 19,39845

7,91939

104,1426

144,8574

97,00

154,00

awal

kontrol positif

6

110,3167

5,53188

2,25838

104,5113

116,1220

106,00

119,40

perlakuan 1

6

119,3333

7,00476

2,85968

111,9823

126,6844

107,00

127,00

perlakuan 2

6

108,1250

9,24087

3,77257

98,4273

117,8227

91,00

118,00

perlakuan 3

6

106,2217 15,42319

6,29649

90,0360

122,4073

79,00

122,33

30

113,6993 13,61686

2,48609

108,6147

118,7840

79,00

154,00

124,5000 14,33527

5,85235

109,4561

139,5439

107,00

143,00

Total tek.diastole intervensi

kontrol -

6

akhir

kontrol positif

6

97,3333

8,89194

3,63012

88,0018

106,6649

85,00

111,00

perlakuan 1

6

99,6667

9,11409

3,72081

90,1020

109,2313

87,00

113,00

perlakuan 2

6

83,3333 12,56450

5,12944

70,1477

96,5190

63,00

96,00

perlakuan 3

6

95,6450

5,26813

2,15070

90,1164

101,1736

87,00

102,83

30

100,0957 16,80649

3,06843

93,8200

106,3713

63,00

143,00

selisih sistole sebelum kontrol -

6

-5,5000 24,40287

9,96243

-31,1092

20,1092

-26,00

37,00

dan sesudah

kontrol positif

6

22,7450 17,13172

6,99399

4,7664

40,7236

-1,00

43,00

perlakuan 1

6

26,0000 10,07968

4,11501

15,4220

36,5780

13,00

37,00

perlakuan 2

6

31,5700 25,89196

10,57035

4,3981

58,7419

7,00

73,25

perlakuan 3

6

17,8617

7,34982

3,00055

10,1485

25,5748

9,00

27,17

30

18,5353 21,57906

3,93978

10,4776

26,5931

-26,00

73,25

Total

Total selisih diastole

kontrol -

6

,0000 25,06791

10,23393

-26,3072

26,3072

-18,00

47,00

sebelum & sesudah

kontrol positif

6

12,9833 12,76878

5,21283

-,4167

26,3833

-4,00

30,00

perlakuan 1

6

19,6667 11,07550

4,52155

8,0436

31,2897

6,00

34,00

perlakuan 2

6

24,7917 17,44593

7,12227

6,4833

43,1000

6,00

49,00

perlakuan 3

6

10,5350 13,80088

5,63418

-3,9481

25,0181

-14,50

24,83

30

13,5953 17,79715

3,24930

6,9498

20,2409

-18,00

49,00

kontrol -

6

420,0000 80,62010

32,91302

335,3944

504,6056

338,00

521,00

kontrol positif

6

359,5000 22,67818

9,25833

335,7007

383,2993

335,00

387,00

perlakuan 1

6

432,5000 74,68534

30,49016

354,1225

510,8775

305,00

500,00

perlakuan 2

6

474,8333 54,46620

22,23573

417,6746

531,9921

385,00

545,00

perlakuan 3

6

432,5000 56,80405

23,19016

372,8878

492,1122

367,00

495,00

30

423,8667 68,31809

12,47312

398,3563

449,3771

305,00

545,00

kontrol -

6

404,6667 60,24837

24,59630

341,4399

467,8935

307,00

482,00

kontrol positif

6

354,1550 45,54878

18,59521

306,3545

401,9555

305,00

409,83

perlakuan 1

6

396,0000 48,55100

19,82086

345,0488

446,9512

328,00

455,00

perlakuan 2

6

372,7633 35,77411

14,60472

335,2207

410,3060

310,00

407,00

perlakuan 3

6

358,6667 42,03173

17,15938

314,5571

402,7763

312,00

431,00

Total HR awal

Total HR intervensi awal

45

Total

30

377,2503 48,26420

8,81180

359,2282

395,2725

305,00

482,00

kontrol -

6

341,8333 47,33040

19,32255

292,1631

391,5035

301,00

428,00

kontrol positif

6

340,1667 33,50473

13,67825

305,0056

375,3277

299,00

401,00

perlakuan 1

6

387,5000 80,83254

32,99975

302,6714

472,3286

302,00

510,00

perlakuan 2

6

417,1667 43,49444

17,75653

371,5220

462,8113

352,00

480,00

perlakuan 3

6

375,5167 56,88775

23,22433

315,8166

435,2167

299,00

475,00

30

372,4367 58,84332

10,74327

350,4642

394,4091

299,00

510,00

mean arterial pressure kontrol -

6

106,3333 14,28441

5,83159

91,3428

121,3239

88,67

125,00

awal

kontrol positif

6

101,3889 10,04527

4,10096

90,8470

111,9308

90,67

118,00

perlakuan 1

6

98,8889

4,55908

1,86124

94,1044

103,6733

91,00

104,00

perlakuan 2

6

90,5556 14,41707

5,88574

75,4258

105,6853

70,00

112,00

perlakuan 3

6

97,6667

7,38166

3,01355

89,9201

105,4132

86,00

105,33

30

98,9667 11,35000

2,07222

94,7285

103,2048

70,00

125,00

kontrol -

6

134,8333 16,63297

6,79038

117,3781

152,2886

112,67

160,00

kontrol positif

6

126,0150

6,05816

2,47323

119,6574

132,3726

120,67

135,27

perlakuan 1

6

133,7778

6,98146

2,85017

126,4512

141,1044

122,33

140,67

perlakuan 2

6

123,8844

8,93290

3,64684

114,5099

133,2590

107,67

132,58

perlakuan 3

6

120,1200 12,66876

5,17200

106,8250

133,4150

100,33

133,22

30

127,7261 11,72678

2,14101

123,3473

132,1050

100,33

160,00

kontrol -

6

136,6667 14,46528

5,90543

121,4863

151,8471

116,33

153,00

kontrol positif

6

109,7778

9,84246

4,01817

99,4487

120,1068

97,33

125,33

perlakuan 1

6

112,0000

9,14816

3,73472

102,3996

121,6004

96,67

123,33

perlakuan 2

6

96,8333 14,31821

5,84538

81,8073

111,8594

73,67

111,67

perlakuan 3

6

5,86772

2,39549

100,9850

113,3006

97,33

113,83

112,4841 16,95962

3,09639

106,1513

118,8169

73,67

153,00

HR intervensi akhir

Total

Total MAP intervensi awal

Total MAP intervensi akhir

Total

30

107,1428

46

Lampiran 6. Gambaran Histopatologi A. ORGAN GINJAL 1.perlakuan 1

2. perlakuan 2

3. perlakuan 3

47

4.perlakuan 4

5. perlakuan 5

6. kontrol

48

B. ORGAN LIVER 1. perlakuan 1

2. perlakuan 2

3. Perlakuan 3

49

4. Perlakuan 4

5. Perlakuan 5

6. Kontrol

50

Lampiran 7. Data Tekanan Sistolik dan Diastolik

Kelompok

Sistole awal

Sistole sebelum

Sistole sesudah

Diastole awal

Diastole sebelum

Diastole sesudah

Kontrol -

122.00

156.00

173.00

72.00

131.00

143.00

Kontrol -

131.00

172.00

135.00

104.00

154.00

107.00

Kontrol -

133.00

144.00

158.00

94.00

97.00

111.00

Kontrol -

126.00

141.00

164.00

108.00

111.00

129.00

Kontrol -

115.00

155.00

181.00

78.00

124.00

137.00

Kontrol -

157.00

165.00

155.00

109.00

130.00

120.00

Kontrol +

114.00

167.00

132.00

79.00

119.40

95.00

Kontrol +

111.00

153.00

154.00

92.00

107.00

111.00

Kontrol +

136.00

165.00

122.00

92.00

115.00

85.00

Kontrol +

144.00

150.00

144.00

105.00

106.00

103.00

Kontrol +

132.00

149.80

127.00

87.00

107.00

93.00

Kontrol +

130.00

159.67

129.00

74.00

107.50

97.00

Dosis 1

134.00

168.00

138.00

87.00

127.00

93.00

Dosis 1

125.00

179.00

144.00

85.00

119.00

113.00

Dosis 1

130.00

153.00

116.00

91.00

117.00

87.00

Dosis 1

122.00

165.00

139.00

86.00

124.00

104.00

Dosis 1

121.00

153.00

138.00

76.00

107.00

98.00

Dosis 1

130.00

158.00

145.00

84.00

122.00

103.00

Dosis 2

109.00

141.00

134.00

77.00

91.00

85.00

Dosis 2

112.00

155.00

143.00

66.00

110.00

96.00

Dosis 2

121.00

154.75

134.00

83.00

111.75

93.00

Dosis 2

92.00

168.25

95.00

59.00

112.00

63.00

Dosis 2

144.00

151.67

128.00

96.00

106.00

89.00

Dosis 2

126.00

161.75

109.00

82.00

118.00

74.00

Dosis 3

109.00

154.00

139.00

83.00

116.00

97.71

Dosis 3

130.00

143.00

124.75

93.00

79.00

93.50

51

Dosis 3

110.00

143.00

134.00

74.00

112.00

95.33

Dosis 3

139.00

155.00

129.25

80.00

122.33

97.50

Dosis 3

136.00

163.00

135.83

82.00

109.00

102.83

Dosis 3

132.00

130.00

118.00

89.00

99.00

87.00

Lampiran 8. Foto Kegiatan selama penelitian

52

53

54

55

DAFTAR GAMBAR

GAMBAR 1. RERATA TEKANAN SISTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% .................................................................................................................................................. 13 GAMBAR 2. RERATA TEKANAN DIASTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% .................................................................................................................................................. 14 GAMBAR 3. GAMBARAN BERAT BADAN SEBELUM DAN SETELAH PERLAKUAN PADA TIAP – TIAP KELOMPOK ........................................................................................................................................ 14 GAMBAR 4. RERATA TEKANAN SISTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU ........... 15 GAMBAR 5. RERATA TEKANAN DIASTOLIK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU ........ 16 GAMBAR 6. RERATA PERUBAHAN DENYUT JANTUNG SEBELUM DAN SETELAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU ................................................................................................................................................. 17 GAMBAR 7. RERATA PERUBAHAN TEKANAN ARTERI RATA – RATA PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU ............................................................................................ 19 GAMBAR 8. PERUBAHAN BOBOT BADAN RATA-RATA (GRAM) TIKUS YANG DIAMATI SELAMA 14 HARI SETELAH PEMBERIAN DOSIS TUNGGAL RAMUAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. ................................................................................................ 21 GAMBAR 9. RERATA KADAR UREUM SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. .................................................................................. 22 GAMBAR 10. RERATA KADAR KREATININ SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. .................................................................................. 22 GAMBAR 11. RERATA KADAR SGOT SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. ................................................................................................ 23 GAMBAR 12. RERATA KADAR SGPT SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DIBANDINGKAN DENGAN KONTROL. .................................................................................. 23

xii

DAFTAR TABEL

TABEL 1. KELOMPOK PERLAKUAN .............................................................................................................. 9 TABEL 2. PERHITUNGAN DOSIS YANG DIGUNAKAN BERDASARKAN HASIL PENELITIAN EKSTRAK TUNGGAL DISETARAKAN DENGAN BENTUK SEDIAAN REBUSAN....................................................................... 10 TABEL 3. RERATA TEKANAN SISTOLIK PADA MASING – MASING KELOMPOK SEBELUM DAN SETELAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% ........................................................................................ 15 TABEL 4. RERATA PERUBAHAN TEKANAN SISTOLIK PADA MASING – MASING KELOMPOK SEBELUM DAN SETELAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU ............................................................................................. 15 TABEL 5. RERATA TEKANAN DIASTOLIK PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% ............................................................................................................. 16 TABEL 6. RERATA TEKANAN DIASTOLIK PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN .. 16 TABEL 7. RERATA DENYUT JANTUNG TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PEMBERIAN PREDNISON NACL 2,5% ......................................................................................................................................... 17 TABEL 8. RERATA DENYUT JANTUNG PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN RAMUAN JAMU................................................................................................................................. 17 TABEL 9. RERATA SELISIH TEKANAN SISTOLIK, DIASTOLIK DAN DENYUT JANTUNG SESUDAH DAN SEBELUM PERLAKUAN RAMUAN JAMU SELAMA 2 MINGGU ........................................................... 18 TABEL 10. RERATA TEKANAN ARTERI RATA-RATA PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN PEMBERIAN PREDNISON DAN NACL 2,5% ............................................................................................................. 18 TABEL 11. RERATA TEKANAN ARTERI RATA-RATA PADA TIAP KELOMPOK SEBELUM DAN SESUDAH PERLAKUAN JAMU ............................................................................................................................ 19 TABEL 12. PENGAMATAN UJI TOKSISITAS AKUT SETELAH PEMBERIAN FORMULA JAMU UNTUK HIPERTENSI RINGAN DOSIS TUNGGAL .............................................................................................. 20 TABEL 13. HASIL UJI TOKSISITAS ................................................................................................................ 21 TABEL 14. TABEL PEMERIKSAAN HISTOPATOLOGI JARINGAN HEPAR SETELAH PERLAKUAN DOSIS TUNGGAL RAMUAN JAMU HIPERTENSI RINGAN .............................................................................. 24 TABEL 15. TABEL PEMERIKSAAN HISTOPATOLOGI JARINGAN GNJAL SETELAH PERLAKUAN DOSIS TUNGGAL RAMUNAN JAMU HIPERTENSI RINGAN ........................................................................... 24

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

LAMPIRAN 1. DATA PENGAMATAN KEMATIAN HEWAN UJI SELAMA 14 HARI PADA PEMBERIAN RAMUAN JAMU ANTIHIPERTENSI RINGAN ....................................................................................................... 35 LAMPIRAN 2. HASIL PENGAMATAN TANDA-TANDA KETOKSISAN TERHADAP HEWAN UJI SELAMA 14 HARI PADA UJI TOKSISITAS AKUT RAMUAN JAMU ANTIHIPERTENSI RINGAN .................................. 36 LAMPIRAN 3. DATA RERATA PENIMBANGAN BOBOT BADAN HEWAN COBA PADA TOKSISITAS AKUT .. 37 LAMPIRAN 4. DATA RERATA PENGUKURAN KADAR UREUM, KREATININ, SGOT, DAN SGPT DARAH HEWAN UJI PADA TOKSISITAS AKUT. ............................................................................................... 37 LAMPIRAN 5. HASIL UJI STATISTIK ............................................................................................................. 38 LAMPIRAN 6. GAMBARAN HISTOPATOLOGI ............................................................................................. 47 LAMPIRAN 7. DATA TEKANAN SISTOLIK DAN DIASTOLIK .......................................................................... 51 LAMPIRAN 8. FOTO KEGIATAN SELAMA PENELITIAN ................................................................................ 52

xiv