KEGIATAN PEMBELAJARAN MINGGUAN

KEGIATAN PEMBELAJARAN MINGGUAN

Pertemuan

:

Minggu ke – 4

Waktu

:

50 menit

Pokok bahasan

:

1. Morfologi Eritrosit

Subpokok bahsan

:

a. Morfologi

eritrosit

normal

berbagai

macam

spesies hewan. b. Morfologi eritrosit abnormal : abnormalitas besar, abnormalitas bentuk dan adanya inclusion bodies. c. Penayangan spesies

gambar

hewan

slide

normal/sehat

darah

berbagai

dan

abnormal

karena penyakit. d. Uji fragilitas eritrosit dan interpretasi data. Tujuan khusus

:

1. Mahasiswa mengetahui dan mampu menjelaskan morfologi dan karakter darah dan berbagai macam spesies hewan normal atau sehat. 2. Mahasiswa mengetahui dan mampu menjelaskan morfologi dan karakter darah dan berbagai macam spesies hewan yang terserang berbagai penyakit. 3. Mahasiswa mengetahui dan mampu menjelaskan uji fragilitas eritrosit serta menginterpretasi data yang diperoleh. 4. Mahasiswa

dapat

melihat,

memahami

dan

menjelaskan gambaran darah hewan normal atau sehat dan darah hewan yang terserang penyakit. Metode

:

Kuliah dan diskusi

Media

:

OHP dan slide projector

Universitas Gadjah Mada

1

Pada sapi

: 300 - 700 mg/dL  normal --- 800 mg/dL inflamasi/lesi jaringan 1.000 atau lebih  inflamasi dan nekrosis

Pada domba : 100 - 500 mg/dL  normal 600 - 900 mg/dL  inflamasi

Disini masih diperlukan Evaluasi pemeriksaan hematologi yang lain : -

Pemeriksaan jumlah leukosit

-

Pemeriksaan diferensial leukosit

MORFOLOGI ERITROSIT

Pemeriksaan preparat apus : -

morfologi eritrosit

-

diferensial leukosit

Morphologi abnormal : 1. abnormalitas besar/size 2. abnormalitas bentuk 3. adanya inclusion bodies

Diameter eritrosit ( sapi

: 4,0 - 9,6

domba

: 3,5 - 6,0

kambing

: 3,2 - 4,2 3,2 ———> batas bawah paling kecil

babi

: 4,0 - 8,0

kuda

: 5,6 - 8,0

anjing

: 6,9 - 7,3 6,9 ———> batas bawah paling besar

kucing

: 5,4 - 6,5

Universitas Gadjah Mada

2

1. Abnormalitas besar/size Eritrosit hewan piaraan  besar eritrosit bervariasi sesuai dengan spesies hewan Kelainan—kelainan itu antara lain : Anisocytoslrs besar eritrosit bervariasi, umumnya dijumpai pada darah sapi normal (3,6 - 9,6

)  terutama pada sapi muda.

Anisocytosis meningkat : pada regenerative anemia, banyak dijumpai macrocyte dalam sirkulasi darah perifer. Perkembangan selanjutnya akan dijumpai poikilocyte.

2. Abnormalitas bentuk Kelainan - kelainan itu antara lain : Poikilocytosis : iregularitas bentuk eritrosit Perubahan - perubahan yang terjadi seperti : -

elliptocyte (a)

-

sickle cell (b)

-

bentuk-bentuk seperti buah pear (c) dan tear/tetes air mata (d)

-

bentuk tidak beraturan (e) bentuk - bentuk tersebut merupakan indikasi adanya abnormalitas eritrogenesis.

Leptocyte

: eritrosit dengan bentuk pipih, dengan luas permukaannya meningkat tetapi volumenya tetap. Konsekuensinya : -

membran sel dapat melipat atau distorsi, lebih resisten terhadap hemolisis dalam larutan hipotonik

-

tidak mudah membentuk rouleaux atau saling melekat (clump) sel yang satu dengan yang lain

-

laju endap darah/kecepatan sedimentasi darah menurun

-

sel - sel ini biasanya menempati daerah buffy coat ----> berwarna pinkish tinge (agak pink)

Universitas Gadjah Mada

3

Target cell (sel target) atau codocyte : karakteristik dengan normal daerah agak gelap dibagian sentral dan dikelilingi daerah yang jernih. Sering terlihat pada darah anjing.

Target cell

Spherocyte

:

-

mempunyai

rigid

membrane

(membran

sel

yang

agak

―keras/kaku‖) sehingga lebih resisten atau tahan terhadap perubahan - perubahan bentuk (deformation). -

sel ini segera akan didestruksi oleh SRE, sebab itu lifespannya

-

sel ini tidak umum terdapat pada domestic animals, terlihat pada darah anjing yang menderita autoimmune hemolytic anaemia

-

pada manusia, spherocytosis merupakan penyakit kongenital (penyakit congenital spherocytosis)

Fragmentasi eritrosit terjadi pada anemia hemolitik atau penyakit - penyakit dimana terjadi perubahan dalam mikrosirkulasi. Ada 2 cara fragmentasi : 1. Fragmentasi secara alami : merupakan metode normal destruksi darah 2. Fragmentasi eritrosit yang lain bisa terjadi pada : -

Kehilangan sifat elastisitas membrane sel sebagai konsekuensi : -

antibody coating

-

immune – mediated anaemia

-

defisiensi Fe, pembentukan Heinz bodies, sickle cells.

-

hypercholesterolemia, lipemia.

membran sel lebih kaku  mudah terjadi fragmentasi Hasil fragmentasi eritrosit bisa terjadi dengan koagulasi intravasculer (tersebar)  pada pemeriksaan apus darah fragmen eritrosit tersebut bisa terlihat sebagal bagian dan eritrosit: -

keratocyte (1 atau lebih incomplete cut)

-

schizocyte (a complete cut)

-

knizocyte (bentuk triconcave)

lebih sering terlihat pada anemia hemolistik

Universitas Gadjah Mada

4

Acanthocyte

:

-

eritrosit dengan rounded projections/tonjolan pada permukaan sel

-

pada anjing dengan liver disease

-

pada manusia, adanya abnormalitas plasma misalnya pada abnormalitas pada metabolism fosfolipida, dimana pada penyakit ini terjadi penurunan kadar fosfolipida dan kholesterol, demikian pula penurunan kadar trigliserida dan free fatty acid.

Crenation

:

Tonjolan-tonjolan pada permukaan eritrosit bukan karena perubahan perubahan kilnik, merupakan kesalahan teknis misalnya : -

pengeringan yang tertunda

-

tercemar lytic agent (detergent)

-

tercemar larutan hypertonic

-

umur sampel terlalu lama

Oleh karena bentuk acanthocyte dan crenation serupa maka harus dibedakan (baca makalah pada kursus Penyegaran Dokter Hewan Mandiri Suatu tinjauan tentang pengaruh EDTA terhadap morfologi darah, 1991).

Anulocyte

:

akibat rendahnya kandungan Hb, maka terjadi daerah pucat yang luas pada bagian sentral eritrosit

anulocyte Schistocyte

:

Merupakan produk fragmentasi eritrosit, dapat berbentuk : -

triangular

-

small elliptical form

-

irregular crenated cells

Pada kasus anemia hemolitik

Universitas Gadjah Mada

5

Siderocyte

:

Eritrosit mengandung 1 atau lebih granula besi (pewarnaan dengan Prussian blue) Pada kasus hambatan sintesis Hb misalnya : -

thalassemia (manusia)

-

Pb poisoning

siderocyte

Sickle cell (sel sabit)

sickle cell Stomatocyte

:

eritrosit dengan area biconcave di bagian sentral. Pada kasus hereditary haemolytic anaemia

stomatocyte

3. Adanya inclusion bodies (benda - benda inklusi) dalam eritrosit. Reticulocyte

:

tidak dijumpai pada pemeriksaan darah perifer atau dalam jumlah yang kecil (normal). -

spesifik (macrocytic, polychromatophilic)

-

sel ini mengalami pemasakan di dalam sumsum tulang

reticulocyte

Universitas Gadjah Mada

6

-

MCV meningkat

-

Berat jenis rendah

-

Lebih resisten terhadap larutan hipertonik

-

Lebih resisten terhadap krenasi

-

Tidak berpartisipasi dalam pembentukan rouleaux

Catatan: Pada anjing dan kucing : 0,5 - 1% dalam darah perifer Pada babi : sampai dengan 2% Pada marmot, tikus, kelinci, mencit : 2- 4%

Pewarnaan reticulocyte

: Sebelumnya preparat apus tidak difiksasi terlebih dulu dengan methanol / metil alcohol.

Reagen

: -

1% larutan brilliant cresyl blue dalam larutan fisiologik 0,5% larutan new methylene blue dalam 1,6% larutan potassium oxalat.

-

Kemudian larutan – larutan tersebut diatas dicampur.

Tipe – tipe reticulocyte : Tipe I



: terlihat titik - titik kromatin yang tercat dengan new methylene blue

Tipe II



: terlihat granula gelap, satu atau dua membentuk reticulum

Tipe III



: terlihat granula lebih gelap dan membentuk retikulum

Kalkulasi reticulocyte secara absolut :

Absolute % retic count =

Misalnya : anjing dengan PCV = 20% (PCV normal = 45%) Retic. = 32%

Universitas Gadjah Mada

7

Maka reticulocyte absolute = 32 x

Reticulocytosis : -

Hemorrhagi akut  eritropoisis naik

-

Anemia hemolitik

Penghitungan reticulocyte

 sebagai metode untuk mengevaluasi therapi terhadap anemia.

Kondisi optimal

 jumlah reticulocyte sangat tinggi (4 - 5 hari setelah terapi) kemudian maximum 9 - 10 hari setelah terapi  kembali normal pada akhir minggu ke 2 atau 3 setelah terapi.

Penurunan reticulocyte persisten pada hewan yang alami anemia  prognosa jelek  dugaan adanya ganggguan sumsum tulang.

Respon reticulocyte : Kucing

:

Tahap awal respon aktif reticulocyte  peningkatan sel eritrosit

dengan

mengandung

banyak

reticulum.

Kemudian tahap akhir terlihat punctate form (bentuk titik/granul dan reticulum. Pendewasaan% reticulocyte lebih lama pada kucing. Reticulocyte naik pada saat ini tidak mesti adanya peningkatan aktifitas sumsum tulang.

Terapi epinephrine

 reticulocyte naik (kucing) seperti pada kucing yang alami exitasi selama sampling darah dilakukan (60—80% reticulocyte).

Respon reticulocyte ringan pada anjing : 1-4% kucing : 0,5 – 2% Respon reticulocyte moderate pada anjing : 5 - 20% kucing : 3 – 4% Respon reticulocyte berat pada anjing : 21 – 50% kucing : > 5% (tipe I + II)

Universitas Gadjah Mada

8

Reticulocytosis – sapi

:

-

blood loss (perdarahan)

-

destruksi eritrosit meningkat

-

stimulasi erythrogenic  bias disertai basophilic stippling dalam sel (stippled cell)  respon terhadap anemia.

Punctate basophilia (basophilic stippling) Adanya punctate aggregate dan basophilic – staining materials  sebagai granul kasar dalam eritrosit. -

Warna biru gelap dengan Wright’s stain.

-

Kadang dijumpal pula eritrosit berinti. Adanya stippling adalah perubahan

degeneratif

dan

sitoplasma

yang

melibatkan

ribonucleid acid (RNA) pada eritrosit muda. Contoh kasus: -

Pb-poisoning (94%) pada anjing dan sapi.

-

Pemakalan EDTA berlebihan + potasium oxalat  mengurangi stippled cells yang terdeteksi.

-

Basophilic stippling kadang-kadang dijumpai pada eritrosit anjing normal, tetapi jumlahnya sedikit.

Polychromasia (reticulocyte) :

adanya warna basophilia pada eritrosit secara difus, karakteristik dengan warna biru - kemerahan yang difus pada eritrosit.

Metarubricyte

 kehilangan inti (proses pendewasaan)

masih adsubstansi basophilic sitoplasma

mengandung RNA + protoporphyrin

warna kebiruan (polychromatopilia)

Anemia

Universitas Gadjah Mada

9

Howell – Jolly bodies :  Merupakan sisa – sisa inti Dengan Wright’stain terlihat : -

benda refractile (single/double)

-

bentuk speris/bulat kebiruan

-

bentuknya bisa bervariasi

-

Harus dibedakan dengan anaplasma marginale, dimana : -

Bentuk uniform

-

Letak dibagian perifer eritrosit

H.J. bodies  meningkat pada anemia Keadaan normal terdapat H.J bodies hanya : -

1% pada kucing

-

kadang - kadang pada anjing

-

sering pada babi muda (3 bulan)

-

kadang - kadang pada kuda, bentuk bervariasi warna hitam dan letak eksentrik.

Heinz bodies : -

Bentuk kecil, bulat, irreguler, refractile, bisa. single, multiple dalam I sel eritrosit. Keracunan phenothiazine, wild onion poisoning. Benda - benda ini merupakan denaturasi protein, agen - agen toksik terhadap eritrosit  anemia (indikasi terhadap erythrocyte injury/anemia hemolitik).

-

Terlihat dalam reticulocyte.

-

Terlihat pada unfixed dan unstained smears/preparat darah.

-

Benda - denda ini hilang setelah fixasi dengan etil dan metil alkohol.

-

Pada manusia (pada keracunan)

-

-

Naphthalene

-

Sodium nitrate

-

Sodium chlorate

-

Sulfanilamide

-

paramino salicylid acid

-

Isoniazid

-

Nitrofurantoin

-

Obat anti malaria tertentu

-

Phenacetin

Heinz bodies kadang dapat dijumpai pada kucing normal, dimana terjadi destruksi aktif eritrosit. Universitas Gadjah Mada

10

-

Heinz bodies tidak terdestruksi dengan reagen yang dipakai dalam pemeriksaan Hb.

-

Heinz bodies dapat ditemui pada kucing (cystitis, urolithiasis) yang biasanya diobati antiseptik methylene blue.

-

Heinz bodies dapat dijumpai pada anjing diberi prednisolone setiap hari.

Kristal Hb. -

Dilaporkan pada anjing dan kucing : -

di dalam eritrosit

-

di luar eritrosit

Dengan Wright’s stain akan nampak gelap dengan bentuk kristal : -

persegi

-

polygonal

-

rectangular

-

Pada anjing : - cylic neutropenia

-

Pada kucing : setelah spelenectomy / operasi pengambilan spleen.

Eritrosit berinti -

Tidak terdapat pada hewan piara normal kecuali babi menyusui (3 bulan), kadang kadang terdapat pada anjing normal.

-

Sebagai respon terhadap kebutuhan akan darah  anemia regenerative : -

reticulocyte naik

-

eritrosit berinti/normoblast sangat tinggi.

-

Adanya eritrosit berinti naik tanpa kenaikan jumlah eritrosit  abnormal eritrogenesis

-

Eritrosit berinti sangat tinggi : -

pada extra medullary erythropoiesis

-

neoplasia erythron  megaloblastoid rubriblast naik

TES FRAGILITAS ERITROSIT -

Tes fragilitas eritrosit bukan pemeriksaan rutin hematologi.

-

Pada penyakit tertentu fragilitas eritrosit meningkat atau menurun.

-

Tes fragilitas eritrosit dilakukan sehubungan dengan gangguan sistema hemopoitik.

Cara : Eritrosit/darah dimasukkan ke dalam larutan NaCl dengan berbagai konsentrasi. Misalnya larutan hipotonik mulai dan 1% NaCl kemudian meningkat dengan interval 0,02%.

Universitas Gadjah Mada

11

Rata-rata nilai fragilitas osmotik pada hewan normal Hewan Sapi

Resistensi min. % larutan NaCl 0,59—0,66

Resistensi max. % larutan NaCl 0,40-0,50

Domba

0,60—0,76

0,40-0,55

Kambing

0,62—0,74

0,48—0,60

Babi

0,70—0,74

0,45

Kuda

0,42—0,59

0,31—0,45

Anjing

0,45—0,50

0,32—0,36

Kucing

0,69—0,72

0,46—0,50

Ayam

0,41—0,42

0,28—0,32

Tes fragilitas osmotik meningkat pada : 

Anaplasmosis (sapi)



Isoimmune hemolytic anaemia pada new born pups (anak anjing baru lahir)



Autoimmumne hemolytic anaemia (anjing)



injeksi intra-vena anti-canine red cell immune serum

Tes fragilitas osmotik menurun (ini berarti pula resistensinya meningkat) pada : -

eritrosit sapi yang mengalami porphyria  dimana terjadi peningkatan jumlah eritrosit muda yang relatif lebih resisten.

Universitas Gadjah Mada

12