Ivóvíz mikrobiológiai körvizsgálatok értékelése Bánfi Renáta, Schuler Eszter, dr. Vargha Márta
2011
Körvizsgálatok - 2011 1) Február 28. Escherichia coli Telepszám (37 C) 2) Május 3. Pseudomonas aeruginosa Coliform 3) Szeptember 12. Enterococcus faecalis Pseudomonas aeruginosa 4) November 15. Szulfitredukáló anaerob spórás (Clostridium) Telepszám (22/37 C)
A kiadott minták előkészítése • Steril csapvíz inokulációja a megfelelő baktériumok 24 órás színtenyészetéből készült szuszpenzióval (0,45 μm membránon átszűrt, 4 C-ra hűtött, 0,01 % Na-tioszulfátos csapvíz)
• Minták homogenizálása keveréssel • Tárolás és szállítás a feldolgozásig a mintaüvegekben és csövekben 2-8 °C-on • Egyidejű feldolgozás egyénileg választott módszerekkel 5 párhuzamos méréssel
Kiértékelés • Módszerenként a laborok 5-5 párhuzamos méréséből átlag számítása • Robusztus statisztika: átlag és szórás számításánál a kiugró értékeket úgy veszi figyelembe, hogy azok torzító hatása minimálisan érvényesülhessen Nemzetközi körvizsgálatokban általánosan használt módszer (Huber-féle módszer)
x
Kiértékelés • Z-érték: a laborok által kapott értékek számított átlagtól való eltérésének mértékét mutatja
z
( x x)
p
Ahol x a laborok által megállapított érték (cfu/vizsgálati térf.), x a robusztus statisztikával számolt átlag (cfu/vizsg. térf.), sp a robusztus statisztikával számolt szórás
|z| < 2 esetén a labor eredménye p>0,05 valószínűséggel, |z| > 2 esetén a labor eredménye p<0,05 valószínűséggel, |z| > 3 esetén a labor eredménye p<0,003 valószínűséggel
Kiértékelés Tiszta illeszkedésvizsgálat: a laboronkénti párhuzamos mintafeldolgozások eredményeit mutatja k
2
i 1
fi nPi
2
nPi
k
( fi f )
i 1
Ahol fi a labor vizsgálat során kapott értékei (cfu/vizsg. térf.), f a labor vizsgálat során kapott értékeiből számított átlag, n ∑fi, Pi elméleti valószínűség (1/k), k események (párhuzamos mérések) száma
f
2
58. ivóvíz mikrobiológiai körvizsgálat Minta átadása: 2011. február 28. Minta feldolgozása: 2011. március 1. Résztvevő laboratóriumok száma: 72 db Vizsgálatok: Escherichia coli Telepszám (37 C)
ESCHERICHIA COLI MSZ EN ISO 9308-1:2001 (membránszűrés 50 ml térfogatban, 5 párhuzamosban, Tergitol TTC alapú táptalajra)
Átlagos telepszám: 59 cfu/100 mL; Szórás: 6 (vizsg. laborok) Átlagos telepszám: 56 cfu/100 mL; Szórás: 5 (kiadó labor)
- Tergitol TTC agar: 68 labor - Chapman TTC: 1 labor - DEV: 1 labor - Chromogén: 1 labor 3 labor IzI > 2 Párhuzamos minták: 5 labor – vártnál nagyobb homogenitás 1 labor – vártnál nagyobb szórás
99 2 31 14 52 46 58 1 38 34 57 65 22 19 91 18 73 105 94 89 81 87 62 30 72 25 84 55 37 36 85 42 60 23 45 33 54_2 96 107 76 40 83 82 44 103 20 78 93 70 7 15 101 64 50 53 56 88 24 9 35 41 26 43 49 5 51 39 32 97 29 27 102 54_1
-4,0
E. coli eredmények z-értékei 4,0
3,0
2,0
1,0
0,0
-1,0
-2,0
-3,0
Telepszám meghatározás (37 C) MSZ EN ISO 6222-2000 (lemezöntés 1 ml-es mintarészletekkel, 5 párhuzamosban) E. coli, Staphylococcus Átlagos telepszám: 41 cfu/ mL; Szórás: 7 (vizsg. laborok) Átlagos telepszám: 43 cfu/ mL; Szórás: 3 (kiadó labor)
3 labor IzI > 2 2 labor IzI > 3 Párhuzamos minták: 5 labor – vártnál nagyobb homogenitás 1 labor – vártnál nagyobb szórás
73 70 89 53 51 26 39 33 101 32 43 83 1 46 78 42 37 7 84 31 44 34 20 58 54_2 96 36 82 60 40 55_2 27 107 91 38 35 30 85 52 94 56 55_1 15 14 25 72 54_1 22 105 24 9 99 81 29 19 5 87 88 102 41 57 18 23 62 45 2 76 97 64 50 65 49 93 103
-6,0
Heterotróf telepszám meghatározás (37 C) z-értékei 3,0
2,0
1,0
0,0
-1,0
-2,0
-3,0
-4,0
-5,0
59. ivóvíz mikrobiológiai körvizsgálat Minta átadása: 2011. május 3. Minta feldolgozása: 2011. május 4. Résztvevő laboratóriumok száma: 71 db Vizsgálatok: Pseudomonas aeruginosa Coliform
Pseudomonas aeruginosa MSZ EN ISO 16266:2006 (membránszűréses módszerrel, 5 párhuzamosban, Cetrimid agarra)
Átlagos telepszám: 53 cfu/100 mL; Szórás: 5 (vizsg. laborok) Átlagos telepszám: 58 cfu/100 mL; Szórás: 3 (kiadó labor)
4 labor IzI > 2 1 labor IzI > 3 Párhuzamos minták: 8 labor – vártnál nagyobb szórás
88 46 36 97 5 38 2 26 25 30 61 45 41 96 56 43 19 82_2 87 31 52 78 60 94 66 14 83 33 91 39 35 93 89 99 58 23 22 62 102 55 7 106 51 54 82_1 1 107 64 44 53 40 72 65 18 111 81 70 20 76 24 112 37 85 57 103 15 9 34 29 27 105 4
-3,0
Pseudomonas aeruginosa eredmények z-értékei 4,0
3,0
2,0
1,0
0,0
-1,0
-2,0
Coliform telepszám meghatározása MSZ EN ISO 9308-1:2001 (membránszűrés 100 ml térfogatban, 5 párhuzamosban, Tergitol TTC tartalmú táptalajra) E. coli
Átlagos telepszám: 71 cfu/100 mL; Szórás: 17 (vizsgáló lab.) Átlagos telepszám: 57 cfu/100 mL; Szórás: 7 (kiadó labor)
- Tergitol TTC agar: 69 labor - TSA-TEA: 1 labor - Chromocult Coliform: 1 labor 2 labor IzI > 2 Párhuzamos minták: 1 labor – vártnál nagyobb homogenitás 7 labor – vártnál nagyobb szórás
2,0
Coliform eredmények z-értékei 1,5
1,0
0,5
0,0
-0,5
-1,0
-1,5
-2,0
-2,5
36 24 70 31 99 103 91 78 66 22 25 18 76 112 81 62 20 23/1 7 87 33 64 1 51 88 57 39 41 85 58 55 72 105 37 46 56 40 26 93 96 52 65 44 30 19 35 107 14 94 97 45 54/1 89 34 61 43 15 60 82/2 9 2 4 27 5 29 111 38 53 102 82/1
-3,0
60. ivóvíz mikrobiológiai körvizsgálat Minta átadása: 2011. szeptember 12. Minta feldolgozása: 2011. szeptember 13. Résztvevő laboratóriumok száma: 74 db Vizsgálatok: Enterococcus faecalis Pseudomonas aeruginosa
Enterococcus faecalis MSZ EN ISO 7899:2 (membránszűrés 50 ml mintarészletekben, 5 párhuzamosban, SlanetzBartley táptalajra)
Átlagos telepszám: 34 cfu/50 mL; Szórás: 4 (vizsgáló lab.) Átlagos telepszám: 31 cfu/50 mL; Szórás: 2 (kiadó labor) - Slanetz-Bartley táptalaj: 73 labor - CATC agar: 1 labor
5 labor IzI > 2 4 labor IzI > 3 (1 labor nem tudta kimutatni) Párhuzamos minták: 4 labor – vártnál nagyobb homogenitás
101 102 60 73 54 b 78 97 38 15 57 24 53 33 20 51 1 88 32 103 43 42 7 41 66 62 39 18 23 52 107 99 65 94 87 56 54 a 36 91 83 84 89 46 2 55 35 70 85 64 45 26 29 47 37 31 72 34 96 30 22 58 76 40 112 25 113 111 5 27 4 105 44 82 93 14 81
-8,0
Enterococcus eredmények z-értékei 8,0
7,0
6,0
5,0
4,0
3,0
2,0
1,0
0,0
-1,0
-2,0
-3,0
-4,0
-5,0
-6,0
-7,0
Pseudomonas aeruginosa MSZ EN ISO 16266:2006 (membránszűréses módszerrel, 5 párhuzamosban, Cetrimid agarra)
Átlagos telepszám: 24 cfu/50 mL; Szórás: 5 (vizsg. laborok) Átlagos telepszám: 28 cfu/50 mL; Szórás: 2 (kiadó labor)
4 labor IzI > 2 1 labor IzI > 3 Párhuzamos minták: 3 labor – vártnál nagyobb homogenitás
97 29 107 36 113 33 56 103 82 52 105 102 26 31 25 81 87 54a 34 43 57 65 4 54b 35 1 38 78 66 60 111 64 99 24 18 83 62 88 53 23 84 15 73 37 7 94 32 96 89 72 39 45 2 91 22 112 44 42 40 46 76 58 5 93 41 101 85 20 47 14 51 27 55 70 30
-4,0
Pseudomonas eredmények z-értékei 10,0
9,0
8,0
7,0
6,0
5,0
4,0
3,0
2,0
1,0
0,0
-1,0
-2,0
-3,0
61. ivóvíz mikrobiológiai körvizsgálat Minta átadása: 2011. november 15. Minta feldolgozása: 2011. november 16. Résztvevő laboratóriumok száma: 67 db Vizsgálatok: Csíraszám (22 C, 37 C) Clostridium perfringens
Telepszám meghatározás (22 C, 37 C) MSZ EN ISO 6222-2000 (lemezöntés 1 ml-es mintarészletekkel, 5 párhuzamosban) 22 C: Átlagos telepszám: 14 cfu/ mL; Szórás: 3 (vizsg. laborok) Átlagos telepszám: 13 cfu/ mL; Szórás: 1 (kiadó labor) 7 labor IzI > 3 37 C: Átlagos telepszám: 15 cfu/ mL; Szórás: 3 (vizsg. laborok) Átlagos telepszám: 15 cfu/ mL; Szórás: 1 (kiadó labor)
6,0
Heterotróf telepszám meghatározás (22 C) z-értékei
4,0
2,0
0,0
-2,0
-4,0
106 20 114 45 31 112 88 38 4 89 76 65 7 62 93 115 83 41 39 54_2 43 27 23 94 37 15 26 32 18 70 35 33 54_1 51 14 99 96 24 87 53 25 1 66 58 52 47 107 91 72 56 57 5 55 29 22 60 44 40 82 64 30 46 102 109 34 36 2 78
-6,0
106 94 32 112 76 62 20 4 18 83 46 115 87 38 72 78 24 1 114 88 45 43 64 44 58 23 96 82 60 31 25 107 89 26 93 53 41 27 99 56 7 65 55 66 57 35 30 29 47 40 37 54_1 39 22 70 33 15 91 54_2 52 51 5 102 34 14 109 36 2
-6,0
Heterotróf telepszám meghatározás (37 C) z-értékei 6,0
4,0
2,0
0,0
-2,0
-4,0
Clostridium perfringens • MSZ EN ISO 26461-2:1994 hatályos (membránszűrés hőkezeléssel szulfit-vas vagy TSC agarra)
• MSZ 448-44:1990 nem hatályos (lemezöntés Wilson agarral)
• 201/2001. (X.25.) Kormányrendelet (membránszűrés m-CP agarra)
Memránszűréssel: 65 labor (hőkezeléssel 38 labor, hőkezelés nélkül 27 labor)
Lemezöntéssel: 24 labor (hőkezeléssel 5 labor, hőkezelés nélkül 19 labor)
A Clostridium kimutatáshoz használt táptalajok megoszlása 40 35 30
m-CP
25
SPS DRCM
20
Wilson
15
TSC Szulfit-vas
10 5 0
membránszűrés, hőkezelés
membránszűrés, hőkezelés nélkül
lemezöntés, hőkezelés
lemezöntés, hőkezelés néllkül
A Clostridium kimutatáshoz használt módszerek megoszlása 20
18
16
14
12
nem értékelhető 10
nem megfelelő kétes
8
megfelelő 6
4
2
0
Hk/szulfit-vas
Hk/TSC
Hk/Wilson
Hkn/szulfit-vas
Hkn/TSC
Hkn/m-CP
Hkn/Wilson
Összehasonlító értékelés • 2011-ben a laboratóriumok 45 %-a az általa választott körvizsgálatokban jól szerepelt (egész évben)! 78 %-a a laboratóriumoknak IzI < 3 alatt volt! • 2010-ben a laboratóriumok 68 %-a az általa választott körvizsgálatokban jól szerepelt (egész évben)! 77 %-a a laboratóriumoknak IzI < 3 alatt volt! • 2009-ben 37 % volt a minden körvizsgálatban jól szereplők aránya; 47,5 % IzI < 3 alatt volt!
A 2011. év ivóvíz körvizsgálatok eredményeinek összehasonlítása 10
9
8
7
114 113 112 111 109 107 106 105 103 102 101 99 97 96 94 93 91 89 88 87 85 84 83 82 81 78 76 73 72 70 66 65 64 62 61 60 58 57 56 55 54 53 52 51 50 49 47 46 45 44 43 42 41 40 39 38 37 36 35 34 33 32 31 30 29 27 26 25 24 23 22 20 19 18 15 14 9 7 5 4 2 1
0
né 6
|z|>3 5
|z|>2 |z|≤2 4
3
2
1
Összehasonlító értékelés 80 70
Pseudomonas aeruginosa
60 50 |z|>3
40
|z|>2
30
|z|≤2
20 10 0 2005
2006
2007
2008
2009/I. 2009/II. 2010
2011/I. 2011/II.
80 70 60 50 |z|>3
40
|z|>2 30
|z|≤2
20 10 0 2005
2006
2007
2008
2009
2010/I. 2010/II.
2011
Enterococcus faecalis
Összehasonlító értékelés 80 70 60 50 |z|>3
40
Escherichia coli
|z|>2
30
|z|≤2
20 10 0 2005
2006/I.
2006/II.
2007
2008
2009
2010
2011
80 70
60 50 |z|>3
40
|z|>2 30 |z|≤2 20 10 0 2006/I.
2006/II.
2007
2008
2009
2010
2011
Coliform
Összehasonlító értékelés 80
70
60
50
|z|>3 40
|z|>2 30
|z|≤2 20
10
Telepszám 22 °C
0
0
2011
10
2010
|z|≤2 20
2009
30
2008
|z|>2
Telepszám 37 °C |z|>3 40
2007
2006/V. 2006/IV. 2006/III. 2006/II. 2006/I.
80
70
60
50
2011/II. 2011/I. 2010/II. 2010/I.
2009/II. 2009/I. 2008/III. 2008/II. 2008/I.
2007/III. 2007/II. 2007/I. 2006/V. 2006/IV.
2006/III. 2006/II. 2006/I.
Köszönöm a megtisztelő figyelmet!
