UNIVERSITAS PANCASILA DESEMBER 2009

PENAPISAN FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK n-HEKSANA DAN METANOL DAUN KELADI TIKUS (Typhonium divaricatum (L) Decne)

Oleh: Drs. Ahmad Musir, MS, Apt Dra. Yunahara Farida, M.Si, Apt Dra. Titiek Martati, M.Si, Apt Bernard Edward

UNIVERSITAS PANCASILA DESEMBER 2009

Disampaikan pada Seminar Nasional ISFI XVII di Jakarta, 7-9 Desember 2009

PENAPISAN FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK n-HEKSANA DAN METANOL DAUN KELADI TIKUS (Typhonium divaricatum (L) Decne) Ahmad Musir1, Yunahara Farida1, Titiek Martati1, Bernard Edward1 1 Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, Jagakarsa Jakarta 12640 Email: [email protected]

ABSTRAK Penggunaan obat tradisional oleh masyarakat terus meningkat, meskipun pengobatan modern saat ini sudah sangat maju. Banyak kalangan medis menganjurkan untuk menggunakan pengobatan dari ramuan tradisional. Oleh karena itu saat ini perkembangan penelitian tanaman obat sangat pesat. Salah satu tanaman menarik untuk diteliti adalah keladi tikus (Typhonium divaricatum L. Decne), merupakan tumbuhan liar yang banyak dikonsumsi oleh para penderita kanker. Salah satu penyebab kanker adalah radikal bebas, yaitu atom atau molekul yang mengandung elektron tidak berpasangan pada kulit terluarnya. Sifat antikanker dari keladi tikus diduga karena tanaman ini memiliki aktivitas antioksidan yang dapat menangkal radikal bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak daun keladi mempunyai aktivitas antioksidan menggunakan metode peredaman radikal bebas DPPH. Penelitian yang dilakukan meliputi penapisan fitokimia, dan uji aktivitas antioksidan dari ekstrak daun keladi tikus (Typhonium divaricatum (L.) Decne) menggunakan pelarut n-heksana dan metanol dan Vitamin C sebagai kontrol positif. Hasil penapisan fitokimia terhadap serbuk dan ekstrak daun menunjukkan adanya flavonoid, saponin dan steroid/triterpenoid. Hasil uji aktivitas antioksidan menggunakan metode peredaman bebas radikal bebas DPPH menunjukkan yang paling aktif adalah pada ekstrak metanol dengan IC50 sebesar 56.63 g/mL sedangkan IC50 dari n-heksana sebesar 128,79 g/mL. Apabila dibandingkan dengan Vit.C (IC50 7,89 g/mL) maka aktivitas antioksidan dari vitamin C masih jauh lebih tinggi. Kata kunci: Keladi tikus, Typhonium divaricatum (L) Decne), DPPH

Disampaikan pada Seminar Nasional ISFI XVII di Jakarta, 7-9 Desember 2009

PENDAHULUAN Penggunaan obat tradisional

oleh

asetat anhidrat, H2SO4p, DPPH (2,2-

masyarakat terus meningkat, meskipun

difenil-1-pikrilhidrazil), vit.C.

pengobatan modern saat ini sudah sangat

Peralatan yang digunakan meliputi rotary

maju.

evaporator (Heidolph), Orbital shaker,

Banyak

menganjurkan

kalangan untuk

medis

menggunakan

timbangan

analitik,

spektrofotometer

pengobatan dari ramuan tradisional. Oleh

UV-Vis, alat-alat gelas.

karena

perkembangan

METODE. Penyiapan ektrak. Sebanyak

penelitian tanaman obat sangat pesat.

lebih kurang 1506,46 g daun keladi tikus

Salah satu tanaman menarik untuk diteliti

yang sudah dibuat serbuk dimaserasi

adalah

itu

saat

keladi

ini

tikus

(Typhonium

menggunakan metanol dalam bejana

Decne),

merupakan

tertutup menggunakan orbital shaker

tumbuhan liar yang banyak dikonsumsi

sampai tersari sempurna, selanjutnya

oleh para penderita kanker. Salah satu

disaring. Filtrat diuapkan menggunakan

penyebab kanker adalah radikal bebas,

rotary evaporator pada suhu 40oC hingga

yaitu

diperoleh

divaricatum

atom

L.

atau

molekul

yang

ekstrak

metanol.

Ekstrak

mengandung elektron tidak berpasangan

selanjutnya dipartisi dengan n-heksana

pada kulit terluarnya. Sifat antikanker

dan selanjutnya sisa diuapkan hingga

dari keladi tikus diduga karena tanaman

diperoleh ekstrak kental.

ini memiliki aktivitas antioksidan yang

Penapisan fitokimia dilakukan dengan

dapat menangkal radikal bebas.

cara mengidentifikasi senyawa kimia yang terdapat dalam serbuk dan ekstrak. Uji

BAHAN DAN METODE BAHAN. Daun keladi tikus

aktivitas

peredaman

antioksidan

radikal

bebas

dengan DPPH.

yang

Larutan induk sampel 1000 ppm dibuat

diperoleh dari Balittro Cimangu Bogor

dengan menimbang 10 mg sampel yang

dan

Herbarium

dilarutkan dengan 10 mL metanol atau

Bogoriense, Pusat Penelitian Biologi,

air. Kemudian untuk membuat larutan

LIPI, Bogor. Bahan kimia: n-heksana,

sampel dengan konsentrasi 5, 10, 25, 50

metanol , HCl p, amil alkohol, eter, asam

dan 100 bpj, sebanyak 25 µL, 50 µL, 125

dideterminasi

di

µL, 250 µL dan 500 µL larutan induk

Disampaikan pada Seminar Nasional ISFI XVII di Jakarta, 7-9 Desember 2009

dimasukkan ke dalam lima labu tentukur 5 mL. Ke dalam masing-masing tabung ditambahkan 1,0 mL larutan DPPH 1

Tabel 1. Uji kandungan kimia serbuk dan ekstrak daun keladi tikus (Typhonium divaricatum (L) Decne) Hasil serbuk dan ekstrak

mM dan diencerkan dengan metanol sampai 5,0 mL. Setelah homogen, tabung

No.

terbentuk Nama

Keterangan

Senyawa

Metanol

n-heksana

1

Flavonoid

+

-

2

Saponin

+

-

+

+

yang berisi larutan tersebut diinkubasi dalam penangas air 37°C selama 30 menit.

Serapan

diukur

dengan

(+) berwarna merah, kuning atau jingga (+) terbentuk busa stabil

spektrofotometer Hitachi U-2000 pada panjang gelombang maksimun yaitu λ

2

SSteroid/triterpenoid

Steroid (+) biru atau hijau, triterpenoid (+)merah / violet

515 nm.

HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Daun Keladi Tikus. Ekstraksi daun keladi tikus dengan pelarut metanol dan n-heksana menghasilkan ekstrak dengan rendemen 19,29% (metanol hasil maserasi); 8,74% (nheksana hasil partisi) dan 9,46% (metanol sisa partisi) terhadap bobot kering. Kandungan Senyawa Kimia Ekstrak Daun Keladi Tikus.

Uji Antioksidan dengan Metode DPPH. Uji aktivitas antioksidan dari masing-masing ekstrak dengan metode peredaman radikal bebas DPPH memberikan hasil seperti terlihat pada Tabel 2 dan Gambar 1, Gambar 2. Dalam uji digunakan vitamin C sebagai kontrol positif. Tabel 2. Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH ekstrak daun keladi tikus metanol

Hasil penelitian terhadap kandungan kimia ekstrak daun keladi tikus (Typhonium divaricatum (L) Decne) menunjukkan bahwa baik serbuk maupun ekstrak metanol mengandung golongan senyawa flavonoid, saponin dan steroid/triterpenoid dan ekstrak nheksana mengandung golongan senyawa steroid/triterpenoid. Hasil uji kandungan kimia dapat dilihat pada Tabel 1.

Konsentrasi

% inhibisi

IC50

n-heksana

5

26,35

% inhibisi 16,09

10

30,86

17,80

25

41,88

50

52,21

33,17

100

63,45

40,57

( g/mL)

56,63

25,75

Disampaikan pada Seminar Nasional ISFI XVII di Jakarta, 7-9 Desember 2009

IC50 ( g/mL)

128,79

Hambatan (%)

45 40 35 30 25 20 15 10 5 0

y = 0.2569x + 16.913 2

R = 0.9324

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90 100 110

Konse ntrasi (ug/mL)

Ucapan Terima kasih Terima kasih kepada DP2M, Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Depdiknas, yang telah mendanai penelitian ini.

DAFTAR PUSTAKA

Ekstrak n-heksana Linear (Ekstrak n-heksana)

Gambar 1. Grafik hubungan antara konsentrasi ( g/mL) dan hambatan (%) dari ekstrak n-heksana 70

Hambatan (%)

60 50 40 y = 0.3785x + 28.567

30

2

R = 0.93

1. Hutapea RJ, dkk. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid V. Jakarta: Departemen Kesehatan. Badan penelitian dan pengembangan kesehatan; 1999 hal 153-4. 2. Loliger J. Natural antioxidant. Dalam: Allen JC, Hamilton RJ, editor. Rancidity in foods. London: Apllied science published:1990. hal. 65-98.

20 10 0 0

10

20

30

40

50

60

70

80

90 100 110

Konse ntrasi (ug/mL) Ekstrak metanol 2 Linear (Ekstrak metanol 2)

Gambar 2. Grafik hubungan antara konsentrasi ( g/mL) dan hambatan (%) dari ekstrak metanol

KESIMPULAN Dari

hasil penelitian diketahui bahwa

ekstrak metanol

mengandung golongan

senyawa kimia flavonoid, saponin dan steroid/triterpenoid,

ekstrak

n-heksana

mengandung senyawa steroid/triterpenoid. Pada uji peredaman radikal bebas DPPH

3. Molyneux Philip. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazil (DPPH) for estimating antioksidant activity. Journal of science and technology. Songklanakrin; 2004. Vol. 26. no.2. hal. 211 - 19. 4. Xing Zao, Song KB, Kim MR. Antioxidant Activity of Salad vegetables grown in Korea. Journal of food Science and Nutrition. Korea : 2004. Vol.9. hal.289-94. 5. Farnsworth NR, Biological and phytochemical screening of Plants, J.Pharm Sci; 1996.55(3); hal.225 – 265. 6. Harborne

JB. Metode Fitokimia. Penuntun cara modern menganalisis tumbuhan. Terbitan kedua. Terjemahan Padmawinata K, Soediro I. Bandung: ITB; 1987. hal. 47-61

didapatkan bahwa ekstrak metanol lebih aktif dibanding ekstrak n-heksana.

Disampaikan pada Seminar Nasional ISFI XVII di Jakarta, 7-9 Desember 2009