[B.57] Peningkatan Kapasitas dan Pemantapan Prosedur Produksi 177 Lu- DOTA-nimotuzumab Radiofarmaka Diagnosis dan Radioimmunoterapi Kanker
Martalena Ramli, Agus Ariyanto , Puji Widayati, Sulaiman, Cahya Nova Ardiyanto
BADAN TENAGA NUKLIR NASIONAL
LATAR BELAKANG
• Lu-177-DOTA-Nimotuzumab, radioimmnokonjugat potensial untuk radioimunoterapi kanker positif EFGR/ HER-1 telah berhasil dipreparasi. • Uji klinis yang menyeluruh dan beberapa dokumen pendukung diperlukan untuk merealisasikan potensi Lu-177-DOTA-Nimotuzumab. • Uji klinis membutuhkan Lu-177-DOTA-nimotuzumab yang steril, bebas pirogen dengan radioaktifitas antara 10 - 20 mCi untuk setiap pasien. • Diperlukan metoda produksi dengan keboleh ulangan yang tinggi (established) yang mampu menhasilkan Lu-177-DOTA-nimotuzumab yang steril, bebas pirogen dengan radioaktifitas antara 10 - 20 mCi /batch • Diperlukan instruksi kerja produksi Lu-177-DOTA-nimotuzumab dengan keboleh ulangan yang tinggi yang dapat diacu pada saat produksi Lu-177DOTA-nimotuzumab yang steril, bebas pirogen dengan radioaktifitas antara 10 - 20 mCi /batch • Perlu disiapkan form telaah etik untuk persiapan uji klinis • Perlu dilakukan uji toksisitas Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
1
PERMASALAHAN
• Apakah Lu-177-DOTA-nimotuzumab yang steril, bebas pirogen dengan radioaktifitas antara 10 - 20 mCi dapat diproduksi dengan keboleh ulangan yang tinggi? • Apakah pemberian Lu-177-DOTA-nimotuzumab akan mempengaruhi komposisi komponen darah hewan coba, mencit?
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
2
METODOLOGI
• Ruang Lingkup Kegiatan Hampir semua kegiatan penelitian ini dikerjakan di Lab. PRR – BATAN, Iradiasi target di RSG Siwabessy dan uji komponen darah di lab klinik hewan My Veet Penyiapan dokumen instruksi kerja dan dokumen telaah uji untuk komisi etik disiapkan dengan PRR dengan konsultasi dengan nara sumber dar RS. Hasan Sadikin, Bandung (Dok. Telaah Etik) • Fokus Kegiatan Peningkatan kapasitas produksi [Lu-177]-DOTA-trastuzumab dari ~ 2 mCi menjadi 10 – 20 mCi Penyiapan dokumen instruksi kerja dan telaah uji Uji toksisitas [Lu-177]-DOTA-trastuzumab pada mencit normal
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
3
METODOLOGI
• Desain Penelitian Nimotuzumab bertanda 177Lu disiapkan melalui dua tahap reaksi seperti terlihat pada Gambar 1. O O OH O NImotuzumab-NH2
C
C N
N
N
N
HO C O
O
OH C
O CN
N
N
N
N
H
O C OH
HO C O (2)
Nimotuzumab
O N
SO3
O O C OH
O
OH C
(1)
O CN
Nimotuzumab
N H Lu-177 N N O HO C C OH O (3) N
Gambar 1. Skema Reaksi Preparasi 177Lu-DOTA-nimotuzumab Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
4
METODOLOGI
• Desain Penelitian Preparasi 177Lu-DOTA- nimotuzumab Penyiapan dan pemurnian nimotuzumab, Konjugasi NHS-DOTA untuk menghasilkan immunokonjugat DOTAnimotuzumab Penandaan DOTA-nimotuzumab dengan Lu-177 Pemurnian [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab dengan kolom Sephadex-G25M Sterilisasi produk [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab Kendali kualitas [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab Uji toksisitas Sejumlah [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab, 100 mCi, diinjeksikan pada beberapa group mencit normal. Darah mencit kemudian diambil setelah periode tertentu dan kemudian konsentrasi leukosit, trombosit dan haemologbinnya dianalisa. Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
5
METODOLOGI
•
Tahapan – Metode Pelaksanaan Kegiatan Pengadaan bahan kimia dan bahan penunjang lainnya, Sterilisasi alat gelas dan plastik, Peningkatkan kapasitas dan pemantapan prosedur produksi [Lu-177]DOTA- nimotuzumab: Produksi dua batch konjugat DOTA- nimotuzumab kering (freeze dried) yang masing-masingnya terdiri dari 9 vial (5 mg DOTA- nimotuzumab/ vial), Produksi 8 batch 177LuCl3 Penandaan DOTA-nimotuzuma dengan Lu-177 telah berhasil memberikan 9 batch radioimmunokonjugat [Lu-177]-DOTA-nimotuzuma dengan steril, bebas pirogen dengan radioaktifitas dengan rentang antara 5 - 50 mCi. penyiapan Kendali kualitas [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab Kegiatan penyiapan Instruksi Kerja produksi immunokonjugat DOTAnimotuzumab dan dokumen telaah etik, Uji toksisitas produk 177Lu-DOTA-nimotuzumab pada mencit sudah selesai dilakukan.
• Perkembangan dan Hasil Kegiatan Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
6
METODOLOGI
• Perkembangan dan Hasil Kegiatan Telah didapatkan prosedur produksi yang dapat menghasilkan [Lu177]-DOTA-nimotuzumab steril, bebas pirogen dengan radioaktifitas antara 5 - 50 mCi. Telah diselesaikan instruksi kerja proses produksi [Lu-177]-DOTAnimotuzumab dan precursor nya yang sesuai dengan ketentuan Jaminan Mutu - PRR. Telah diselesaikan dokumen telaah etik protokol uji klinik. Hasil uji toksisitas [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab dengan dosis 100 µCi Lu-177-DOTA- nimotuzumab pada mencit normal dengan berat badan ~ 25 gr tidak mempengaruhi komposisi komponen darah mencit selama masa pengamatan (6 hari).
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
7
SINERGI KOORDINASI
• Lingkup dan bentuk koordinasi yang dilakukan Konsultasi dengan dengan nara sumber dari RS Hasan Sadikin, Bandung, dalam rangka penyiapan dokumen telaah etik • Nama lembaga yang diajak koordinasi Instalasi Kedokteran Nuklir, RS Hasan Sadikin, Bandung • Strategi pelaksanaan koordinasi Pertemuan langsung, komunikasi via telepon dan e-mail • Signifikansi capaian koordinasi yang dilakukan Terselesaikannya dokumen telaah etik
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
8
PEMANFAATAN HASIL KEGIATAN
• Kerangka dan strategi pemanfaatan hasil kegiatan Lu-177-DOTA-nimotuzumab pada saat ini masih dalam tahap penelitian preklinis, untuk dapat digunakan secara klinis masih diperlukan beberapa tahapan penelitian/kegiatan uji klinis yang menyeluruh. • Wujud - bentuk pemanfaatan hasil kegiatan Belum ada. Lu-177-DOTA-nimotuzumab yang steril, bebas pirogen dengan radioaktifitas 10 - 20 mCi merupakan produk yang potensial untuk dapat digunakan untuk uji klinis pada pasien penderita kanker positif HER-l. Untuk produk ini dapat dimanfaatkan, beberapa penelitian lanjutan masih harus dilakukann yaitu uji klinis yang menyeluruh yang meliputi uji biodistribusi, uji dosis dan uji toksisitas pada pasien penderita kanker positif HER-1.
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
9
PEMANFAATAN HASIL KEGIATAN
• Data (jumlah dan demografi) pihak yang memanfaatkan hasil kegiatan: N/A • Signifikansi pemanfaatan kegiatan: N/A
yang dirasakan pihak penerima manfaat hasil
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
10
POTENSI PENGEMBANGAN KE DEPAN
• Rancangan Pengembangan ke depan Untuk dapat menmanfaatkan potensi Lu-177-DOTA-nimotuzumab sebagai radioimmunokonjugat pada prosedur penanganan beberapa jenis kanker yang positif HER-1, beberapa kegiatan/ penelitian khususnya uji klinis harus dilaksanakan. Uji klinis yang harus dilakukan adalah; Uji biodistribusi pada pasien penderita kanker positif HER-1., Uji toksisitas pada pasien penderita kanker positif HER-1. Uji dosis/ efek terapi pada pasien penderita kanker positif HER-1.
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
11
POTENSI PENGEMBANGAN KE DEPAN
• Strategi Pengembangan ke depan • Setelah peningkatan kapasitas produksi Lu-177-DOTA-nimotuzumab, pada tahun berikutnya diharapkan dapat dilanjutkan dengan uji klinis untuk melihat biodistribusi produk ini pada pasien penderita kanker yang positif HER-1. • Tahapan Pengembangan ke depan Uji biodistribusi pada pasien penderita kanker positif HER-1., Uji toksisitas pada pasien penderita kanker positif HER-1. Uji dosis/ efek terapi pada pasien penderita kanker positif HER-1.
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
12
FOTO KEGIATAN
•Foto Pelaksanaan dan Hasil kegiatan
Gb. 1. Proses pemurnian Nimotuzumab
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
Gb. 2 Proses Freeze drying Immunokonjugat DOTA-nimotuzumab
13
FOTO KEGIATAN
•Foto Pelaksanaan dan Hasil kegiatan
Gb. 3. Freeze Dried Immunokonjugat DOTA-nimotuzumab Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
Gb. 4. Proses penandaan DOTA-nimotuzumab dengan Lu-177
14
FOTO KEGIATAN
•Foto Pelaksanaan dan Hasil kegiatan
Gb. 5 Proses penandaan DOTA-nimotuzumab dengan Lu-177 Gb. 6 Proses pemurnian [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
15
FOTO KEGIATAN
•Foto Pelaksanaan dan Hasil kegiatan
Gb. 7 Fraksi Hasil Proses pemurnian [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
Gb. 8 Proses uji kekurnian radiokimia fraksi-fraksi [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab 16
FOTO KEGIATAN
•Foto Pelaksanaan dan Hasil kegiatan
Gb. 9 Proses pengukuran aktifitas produk [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
Gb. 10 Proses sterilisasi produk [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab 17
FOTO KEGIATAN
•Foto Pelaksanaan dan Hasil kegiatan
Gb. 11 Proses penyuntikan [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab pada mencit
Tim Pelaksana Insentif Peningkatan Kemampuan Peneliti dan Perekayasa 2012
Gb. 12 Proses pengambilan darah mencit setelah penyuntikan [Lu-177]-DOTA-nimotuzumab 18
logo lembaga
TERIMA KASIH [ Martalena Ramli, Agus Ariyanto , Puji Widayati, Sulaiman, Cahya Nova Ardiyanto]